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柔嫩艾美耳球虫河北株SOSO7基因克隆与序列分析 被引量:1
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作者 闫艳娟 庞洪泽 +5 位作者 李蕴玉 张东林 李佩国 张香斋 张召兴 唐梦虎 《中国家禽》 北大核心 2018年第17期22-25,共4页
为分析柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)河北株SO7基因序列遗传变异性,试验根据GenBank发表的SO7序列设计引物,利用RT-PCR技术克隆出柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因,将SO7基因克隆入pMD18-T载体中,进行测序、序列分析及表达蛋白结构的预... 为分析柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)河北株SO7基因序列遗传变异性,试验根据GenBank发表的SO7序列设计引物,利用RT-PCR技术克隆出柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因,将SO7基因克隆入pMD18-T载体中,进行测序、序列分析及表达蛋白结构的预测。结果显示:柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因编码215个氨基酸,具有一个开放阅读框,大小为645 bp;与GenBank中发表的美国分离株(LS18)、扬州分离株(YZ)、海南分离株(HN)、广东分离株(GD)、北京分离株(BJ)SO7核苷酸序列的同源性分别为99.4%、99.5%、99.7%、99.5%、99.4%,所推导的氨基酸序列的同源性分别为98.6%、99.1%、99.1%、98.6%、98.1%。从进化关系来看,同种间SO7基因相比,柔嫩艾美耳球虫河北株与HN株同属一个分支,遗传关系较近;与GD株、BJ株的遗传关系相对较远。蛋白结构预测显示蛋白的相对分子质量为52.20 ku,理论等电点(PI)为5.08,不稳定系数为52.73,为不稳定蛋白;在1~20个氨基酸具有信号肽;有5个疏水位点;没有跨膜结构。综上所述,柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因序列遗传变异性不明显,可以作为构建核酸疫苗候选基因。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫河北株 SO7基因 序列分析 蛋白结构预测
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柔嫩艾美耳球虫河北株致病性检测及ITS-1基因序列分析
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作者 张召兴 闫艳娟 +3 位作者 李佩国 李蕴玉 张香斋 贾青辉 《中国家禽》 北大核心 2018年第23期48-50,共3页
为分析鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)河北株的致病性及其ITS-1基因序列遗传变异特点,对临床分离的柔嫩艾美耳球虫河北株通过人工感染雏鸡试验验证其致病性,并计算其半数致死量(LD_(50)),采用RT-PCR对柔嫩艾美耳球虫河北株的ITS-1... 为分析鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)河北株的致病性及其ITS-1基因序列遗传变异特点,对临床分离的柔嫩艾美耳球虫河北株通过人工感染雏鸡试验验证其致病性,并计算其半数致死量(LD_(50)),采用RT-PCR对柔嫩艾美耳球虫河北株的ITS-1基因进行扩增、克隆,测序后进行生物信息学分析其基因序列变异情况。结果显示:柔嫩艾美耳球虫河北株对雏鸡有较强的致病性,其LD_(50)为3.16×10~4个/只;柔嫩艾美耳球虫河北株的ITS-1基因与GenBank登录的柔嫩艾美耳球虫ETSH4PF3-17株和柔嫩艾美耳球虫上海株的相似性在97.7%~99.0%之间,系统发育进化树分析显示柔嫩艾美耳球虫河北株与GenBank发表的柔嫩艾美耳球虫ETSH4PF3-17株和柔嫩艾美耳球虫上海株聚为一支,亲缘性最近,与其它虫株亲缘性较远;与GenBank发表的柔嫩艾美耳球虫ETSH4PF3-17株序列相比,柔嫩艾美耳球虫河北株的ITS-1基因序列中在第4、13、16、425位4个碱基发生缺失;第258、348位2个碱基发生变异,由C变为T,由G变为T。研究结果为进一步研究柔嫩艾美耳球虫河北株遗传变异情况提供参考依据。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 致病性 ITS-1基因 序列分析
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柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药株诱导及单核苷酸多态性杂合度分析
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作者 方素芳 顾小龙 +2 位作者 郝成宇 关琛 崔平 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期53-59,共7页
为诱导柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对莫能菌素的耐药虫株,并分析其基因组单核苷酸多态性(SNP)的杂合度(Hp),采用常规药物浓度递增方法,在实验室条件下,以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导... 为诱导柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对莫能菌素的耐药虫株,并分析其基因组单核苷酸多态性(SNP)的杂合度(Hp),采用常规药物浓度递增方法,在实验室条件下,以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导,以最适抗球虫活性百分率(POAA)、相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)和抗球虫指数(ACI)指标综合判定柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素的耐药性。将诱导出的耐药株和敏感株(豪顿株)基因组重测序,并进行基因组Hp分析。经过12次传代,获得了柔嫩艾美耳球虫1倍、2倍、4倍和10倍耐药虫株,其中10倍耐药株的POAA为14.3%,ROP为68%,RLS为27%,ACI为107。与参考基因组进行比对,共检测到132691个突变,其中豪顿株共计11085个突变,耐药株共计121606个突变。从SNPindex分布图中可见,豪顿株、1倍和2倍耐药株绝大多数位点基因频率接近0,而在4倍及10倍耐药株中SNP频率显著增加,其中部分位点的基因频率达到1。耐药群体在第6、第12、第14和第15号染色体上检测到低水平Hp,推测其与柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素耐药性的产生有关。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 莫能菌素 耐药性 单核苷酸多态性 杂合度
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柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56 蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定
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作者 姜明慧 宋勇乐 +9 位作者 苏观志 陈庆彪 李娟 戚南山 廖申权 吕敏娜 林栩慧 蔡海明 张旭 孙铭飞 《广东畜牧兽医科技》 2025年第3期1-7,共7页
为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能,以柔嫩艾美耳球虫广东株配子体cDNA为模板,克隆该分离虫株的gam56基因编码序列。构建pET⁃B2M⁃GAM56截短表达载体,利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备G... 为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能,以柔嫩艾美耳球虫广东株配子体cDNA为模板,克隆该分离虫株的gam56基因编码序列。构建pET⁃B2M⁃GAM56截短表达载体,利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备GAM56多克隆抗体。通过间接ELISA和Western blot分析抗体的效价和特异性;收集E.tenella(GD)配子体阶段样品,利用GAM56多克隆抗体进行免疫荧光检测以评价其应用效果。结果显示:相比E.tenella(Houghton)参考虫株,E.tenella(GD)的gam56基因存在末端部分片段的缺失,CDS序列1077 bp,可编码358个氨基酸;预测蛋白大小41.3 kDa。GAM56保守区域截短原核表达蛋白主要以包涵体形式存在。间接免疫荧光分析显示该抗体能够特异性识别配子体阶段的GAM56蛋白。该研究为进一步解析柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56生物学功能提供了材料,为艾美耳球虫有性发育相关蛋白的功能研究与机制解析奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 GAM56 原核表达 多克隆抗体
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芦荟提取物治疗鸡柔嫩艾美耳球虫感染的效果研究 被引量:3
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作者 丁咚 吴楠 +1 位作者 宋臣锋 刘勇 《中国家禽》 北大核心 2025年第2期60-65,共6页
为评价芦荟提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫的治疗效果,试验将14日龄180只雏鸡随机分为6组,即阴性对照组(不感染球虫不给药)、阳性对照组(感染球虫不给药)、地克珠利治疗组(0.2 mL/L地克珠利)、芦荟提取物低(0.5 g/L)、中(1 g/L)、高(2 g/L)... 为评价芦荟提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫的治疗效果,试验将14日龄180只雏鸡随机分为6组,即阴性对照组(不感染球虫不给药)、阳性对照组(感染球虫不给药)、地克珠利治疗组(0.2 mL/L地克珠利)、芦荟提取物低(0.5 g/L)、中(1 g/L)、高(2 g/L)剂量治疗组,每组3个重复,每个重复10只鸡。除阴性对照组外,其余试验组鸡只经口人工感染7.5×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,并在感染球虫当天所有治疗组开始饮水给药,直至试验结束。所有试验鸡在21日龄统计相对增重率、存活率、盲肠病变值、卵囊值,计算抗球虫指数(ACI),综合评价芦荟提取物的抗球虫效果。结果显示:与阳性对照组相比,芦荟提取物组试验鸡相对增重率和存活率均有所提高,盲肠病变记分和每克粪便卵囊数(OPG)显著降低(P<0.05);芦荟提取物高、中、低剂量组均达到低效抗球虫效果,ACI分别为154.23、145.94、122.93;地克珠利治疗组达到高效抗球虫效果,ACI为181.55。研究表明,在饮水中添加2 g/L芦荟提取物对鸡球虫病的治疗有一定效果。 展开更多
关键词 芦荟提取物 柔嫩艾美球虫 治疗效果
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柔嫩艾美耳球虫感染对黄羽肉鸡生产性能、免疫器官和肠道形态的影响
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作者 董理月 范作堃 +7 位作者 唐美慧 汤建强 于海亮 张涛 张跟喜 谢恺舟 赵振华 戴国俊 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1263-1271,共9页
【目的】探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对黄羽肉鸡生产性能、免疫器官及盲肠肠道形态结构的影响。【方法】7个半同胞家系黄羽肉鸡在感染柔嫩艾美耳球虫后,根据球虫敏感性指标筛选出抗性和易感家系,组成抗性组和易感组,分别... 【目的】探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对黄羽肉鸡生产性能、免疫器官及盲肠肠道形态结构的影响。【方法】7个半同胞家系黄羽肉鸡在感染柔嫩艾美耳球虫后,根据球虫敏感性指标筛选出抗性和易感家系,组成抗性组和易感组,分别在感染期和恢复期比较分析不同抗性组间的生产性能、免疫器官和肠道形态结构的差异。【结果】无论是感染期还是恢复期,抗性与易感鸡平均体重和平均日增重均极显著低于对照组(P<0.01),料重比均极显著高于对照组(P<0.01)。在感染的不同时期,抗性组、易感组和对照组鸡胸腺、脾脏等7种免疫器官指数均差异不显著(P>0.05),但恢复期免疫器官指数高于感染期。此外,感染期抗性组与易感组鸡均出现盲肠黏膜坏死,肌层不完整、断裂等病理变化,易感组鸡盲肠上皮可见球虫配子;而恢复期抗性组鸡盲肠组织结构逐渐恢复至正常,易感组鸡盲肠组织各层结构仍呈现明显变性或坏死。【结论】无论处于感染期还是恢复期,感染柔嫩艾美耳球虫后抗性或易感鸡的生产性能均降低且肠道形态发生改变,但处于恢复期时,抗性鸡能逐渐恢复至健康状态,而易感鸡盲肠则出现不可逆的损伤。本研究结果为深入探究柔嫩艾美耳球虫感染恢复后对鸡的生产性能和肠道的影响提供了参考。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 黄羽肉鸡 抗性 生产性能 肠道形态
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柔嫩艾美耳球虫感染对不同球虫抗性鸡群体炎性相关因子的影响
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作者 唐美慧 Areej Arif +8 位作者 董理月 于海亮 汤建强 范作堃 张涛 张跟喜 谢恺舟 赵振华 戴国俊 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期39-46,共8页
为了探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响,本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组,根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠病变... 为了探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响,本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组,根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠病变值和抗球虫指数等抗性评价指标,筛选出抗性组和易感组鸡群体,测定柔嫩艾美耳球虫感染后不同球虫抗性鸡群体血液炎性因子和抗氧化指标以及不同组织中炎性相关基因的表达量。结果显示,抗性组和易感组血液中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及活性氧(ROS)浓度与对照组相比差异极显著(P<0.01),但不同球虫抗性组间血液中SOD和CAT活性及ROS和一氧化氮(NO)浓度无显著差异(P>0.05);抗性组和易感组血液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度极显著高于对照组(P<0.01),且易感组IL-1β和TNF-α浓度极显著高于抗性组(P<0.01);抗性组和易感组盲肠和胸腺中IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α基因表达量极显著高于对照组(P<0.01),且易感组盲肠和胸腺中IL-1β、TNF-α基因表达量极显著高于抗性组(P<0.01)。抗性组与易感组之间进行比较发现,2个组血液中IL-1β和TNF-α浓度与盲肠和胸腺组织中IL-1β和TNF-α基因表达量的变化规律高度一致。结果表明,柔嫩艾美耳球虫感染促进了不同球虫抗性鸡群体免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 京海黄鸡 抗氧化指标 炎性因子
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饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌对柔嫩艾美耳球虫感染肉鸡生长性能、炎症反应及肠道屏障功能的影响
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作者 李建梅 沈海玉 +1 位作者 许明 窦新红 《动物营养学报》 北大核心 2025年第7期4384-4396,共13页
本试验旨在研究饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌对柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)感染肉鸡生长性能、炎症反应及肠道屏障功能的影响。选取体重相近的3日龄爱拔益加(AA)雄性肉鸡360羽,随机分成8个组,每组3个重复,每个重... 本试验旨在研究饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌对柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)感染肉鸡生长性能、炎症反应及肠道屏障功能的影响。选取体重相近的3日龄爱拔益加(AA)雄性肉鸡360羽,随机分成8个组,每组3个重复,每个重复15羽。正对照组(NC组)和负对照组(PC组)饲喂基础饲粮,磺胺类药物组(YW组)饲喂基础饲粮+4.00 g/kg磺胺类药物,枯草芽孢杆菌组(BS组)饲喂基础饲粮+0.50 g/kg枯草芽孢杆菌(1×10~8CFU/kg),屎肠球菌组(EF组)饲喂基础饲粮+0.04 g/kg屎肠球菌(4×10^(9)CFU/kg),酵母菌组(Yeast组)饲喂基础饲粮+2.00 g/kg酵母菌(1×10^(9)CFU/kg),混合1组(Mix1组)饲喂基础饲粮+0.25 g/kg枯草芽孢杆菌(0.5×10~8CFU/kg)+0.02 g/kg屎肠球菌(2×10^(9)CFU/kg)+1.00 g/kg酵母菌(0.5×10^(9)CFU/kg),混合2组(Mix2组)饲喂基础饲粮+0.50 g/kg枯草芽孢杆菌(1×10~8CFU/kg)+0.04 g/kg屎肠球菌(4×10^(9)CFU/kg)+2.00 g/kg酵母菌(1×10^(9)CFU/kg)。14日龄时,PC组、YW组、BS组、EF组、Yeast组、Mix1组和Mix2组肉鸡每只灌服1 mL E.tenella孢子化卵囊,NC组肉鸡每只灌服1 mL灭菌磷酸盐缓冲液。试验鸡21日龄时结束试验。结果表明:1)与PC组相比,Mix1组和Mix2组21日龄体重、平均日增重和平均日采食量显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05)。2)与PC组相比,EF组、Yeast组和Mix2组盲肠病变记分显著降低(P<0.05);BS组、EF组、Yeast组、Mix1组和Mix2组盲肠病变记分显著高于NC组和YW组(P<0.05)。3)与PC组相比,BS组、EF组、Yeast组、Mix1组和Mix2组盲肠白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),盲肠白细胞介素-10(IL-10)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05);Yeast组盲肠干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。4)与NC组、PC组和YW组相比,BS组和Mix2组盲肠紧密连接蛋白2(TJP2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),Mix2组盲肠连接黏附分子2(JAM2)和闭合蛋白(OCLN)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),BS组、EF组和Mix1组盲肠闭锁小带蛋白-2(ZO-2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),BS组、EF组和Mix2组盲肠黏蛋白2(MUC2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌可通过增强肠道屏障功能和调节炎症反应,一定程度上缓解E. tenella感染对肉鸡肠道造成的损伤,且Mix2组的作用效果较好。 展开更多
关键词 肉鸡 柔嫩艾美球虫 益生菌 炎症反应 肠道屏障
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苦参水提物抗柔嫩艾美耳球虫病的效果研究
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作者 郑哲 王燕春 +5 位作者 张嫱 杨墨寒 张柏慧 兰应娟 于婷婷 蔡亚南 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第3期296-302,共7页
为明确苦参水提物对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果及其作用机制,本实验将100只白羽肉鸡均分为4组,分别为阴性对照组(NC组)、虫体感染组(PC组)、虫体感染后苦参水提物治疗组(PC+SF组)及虫体感染后地克珠利治疗组(PC+DC组)。除NC组外其余... 为明确苦参水提物对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果及其作用机制,本实验将100只白羽肉鸡均分为4组,分别为阴性对照组(NC组)、虫体感染组(PC组)、虫体感染后苦参水提物治疗组(PC+SF组)及虫体感染后地克珠利治疗组(PC+DC组)。除NC组外其余3组雏鸡在14日龄时均以4×10^(4)个/只口服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,PC+SF组和PC+DC组鸡感染后10 d内每日口服相应药剂。在感染虫体第10 d观察各组鸡临床症状,称量体重,记录死亡数,并计算抗球虫指数;对每组鸡剖检后取盲肠观察其剖检病变及组织病理变化。结果显示,除对照组外,其他3组鸡均出现体重增长缓慢,但两个治疗组后期体重得到恢复,且未出现死亡;PC+SF组鸡的抗球虫指数(ACI)为161.8,达到中效抗球虫病效果;PC组鸡盲肠出血、炎性细胞浸润、肠绒毛脱落,PC+SF与PC组相比盲肠组织炎性细胞浸润明显减少。收集各组鸡血清,利用ELISA检测各组鸡血清中促炎细胞因子白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素6(IL-6)的分泌水平;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组鸡盲肠组织中促炎细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素22(IL-22)及抑炎细胞因子白细胞介素10(IL-10)的转录水平;采用western blot检测各组鸡盲肠组织中NF-κB通路关键分子p65、p-p65、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白的表达水平。结果显示,与PC组相比,PC+SF组和PC+DC组鸡血清中促炎细胞因子IL-6的分泌水平均极显著降低(P<0.0001);qPCR结果显示,与PC组相比,PC+SF组和PC+DC组鸡盲肠组织中IFN-γ、IL-17及IL-22 mRNA的转录水平均极显著降低(P<0.0001),IL-10 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.0001);Western blot结果显示,与NC组相比,PC组鸡盲肠组织中NF-κB通路关键分子p65、p-p65、IκBα及p-IκBα蛋白表达水平均极显著升高(P<0.0001),而PC+SF组与PC组相比上述各蛋白的表达水平均极显著下降(P<0.0001),PC+DC组与NC组则无显著差异(P>0.05)。综上所述,本研究结果首次证实苦参水提物通过抑制NF-κB通路炎症因子表达治疗鸡球虫病,为苦参应用于鸡球虫病的防治提供科学依据。 展开更多
关键词 苦参 柔嫩艾美球虫 NF-ΚB通路 炎症
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柔嫩艾美耳球虫AMA1的原核表达及其免疫保护效果评价
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作者 刘永宁 单乙戈 +5 位作者 潘晨帆 刘倩琳 李翌琳 段思彰 安健 张建军 《华北农学报》 北大核心 2025年第1期232-238,共7页
为探究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(AMA1)对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡的免疫保护效果,将AMA1基因扩增产物连接到表达载体pET-32a(+)上构建重组质粒pET-32a(+)-AMA1,并转入大肠杆菌BL21(DE3)来表达重组蛋白。将108只雏鸡随机分为6组,每组3个... 为探究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(AMA1)对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡的免疫保护效果,将AMA1基因扩增产物连接到表达载体pET-32a(+)上构建重组质粒pET-32a(+)-AMA1,并转入大肠杆菌BL21(DE3)来表达重组蛋白。将108只雏鸡随机分为6组,每组3个重复,每个重复6羽,包括不免疫不攻虫组(阴性组)、不免疫攻虫组(阳性组)、弗氏佐剂对照组及12.5,25.0,50.0μg rEtAMA1免疫组,分别于14,21日龄肌肉注射不同浓度的重组蛋白,28日龄口服感染5×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,35日龄处死试验鸡,以体增质量、盲肠病变评分、卵囊产量、免疫器官指数、细胞因子及抗体水平来评价重组AMA1蛋白的免疫保护效果。结果显示,各组间的平均增质量差异不显著;25.0μg及50.0μg rEtAMA1组的盲肠病变计分较阳性组分别显著降低了53%和41%;12.5,25.0,50.0μg rEtAMA1组的克粪便卵囊数量(OPG)分别较阳性组显著减少16%,27%,54%;50.0μg rEtAMA1组的法氏囊指数较阳性组显著提高27%;25.0,50.0μg rEtAMA1组的胸腺指数均显著高于阳性组,分别增加了25%,22%;各组的脾脏指数无显著差异;在二免后7 d, 12.5μg和25.0μg rEtAMA1组的细胞因子IL-2和IFN-γ含量均显著高于阴性组,50.0μg rEtAMA1组血清总IgG含量较阴性组显著增加47%,且二免后含量明显高于首免后。综上,重组AMA1蛋白能够减轻盲肠病变,减少球虫卵囊产量和促进免疫器官发育,提高血清细胞因子和抗体水平,对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡具有一定的免疫保护效果。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 AMA1 原核表达 免疫效果
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石榴皮乙醇提取工艺优化及提取物抗柔嫩艾美耳球虫的效果 被引量:1
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作者 刘婧 王京龙 +3 位作者 高丽丽 张肖 卢永慧 张立华 《贵州农业科学》 2025年第3期126-132,共7页
【目的】探明石榴皮乙醇提取物抗柔嫩艾美耳球虫的最优提取工艺,以及石榴皮不同溶剂提取物抗柔嫩艾美耳球虫的效果,为石榴皮提取物的应用及鸡球虫病的有效防治提供参考。【方法】以球虫孢子化率为指标,采取L9(34)正交试验设计法,考察提... 【目的】探明石榴皮乙醇提取物抗柔嫩艾美耳球虫的最优提取工艺,以及石榴皮不同溶剂提取物抗柔嫩艾美耳球虫的效果,为石榴皮提取物的应用及鸡球虫病的有效防治提供参考。【方法】以球虫孢子化率为指标,采取L9(34)正交试验设计法,考察提取溶剂乙醇浓度(30%、50%、70%)、提取时间(30 min、60 min、90 min)、提取温度(40℃、50℃、60℃)和物料比(g︰mL,1︰10、1︰15、1︰20)对提取工艺的影响,优选石榴皮抗柔嫩艾美耳球虫的乙醇最佳提取工艺;比较石榴皮不同溶剂提取物(水提取物、氯仿提取物、70%甲醇提取物、50%乙醇提取物)及市售抗球虫药物10%磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫的孢子化率,明确石榴皮各溶剂提取物的抗球虫效果。【结果】乙醇提取4个因素中,影响石榴皮提取物抗柔嫩艾美耳球虫效果的因素依次为乙醇浓度>物料比>提取时间>提取温度,乙醇最佳提取工艺参数为浓度50%、物料比1︰10、提取时间30 min、提取温度40℃,此工艺石榴皮提取物对柔嫩艾美耳球虫的孢子化率为70.12%。石榴皮4种溶剂提取物中,作用6 d内50%乙醇提取物抗柔嫩艾美耳球虫的平均孢子化率为51.35%,显著(P<0.05)优于其他溶剂提取物。【结论】石榴皮50%乙醇最佳提取工艺提取物对柔嫩艾美耳球虫的孢子化率为70.12%,作用6 d内抗球虫效果(平均孢子化率为51.35%)优于其他溶剂提取物(水提取物、氯仿提取物、70%甲醇提取物)及10%磺胺氯吡嗪钠(常用抗球虫药物)。 展开更多
关键词 石榴皮 柔嫩艾美球虫 提取工艺 正交试验 孢子化率
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常山提取物联合牛至油抗鸡柔嫩艾美耳球虫作用研究
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作者 齐珍珍 苏杰 +6 位作者 郝成宇 徐海城 王鹏 褚耀诚 马利芹 方素芳 付旭东 《中兽医医药杂志》 2025年第2期8-15,共8页
研究常山提取物联合牛至油抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果。选取14日龄无球虫罗斯308肉鸡80只,随机分为常山提取物联合牛至油组、常山提取物组、阳性对照组和空白对照组,15~24日龄时各给药组的雏鸡给予相应药物,16日龄时给药组和阳性对照组... 研究常山提取物联合牛至油抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果。选取14日龄无球虫罗斯308肉鸡80只,随机分为常山提取物联合牛至油组、常山提取物组、阳性对照组和空白对照组,15~24日龄时各给药组的雏鸡给予相应药物,16日龄时给药组和阳性对照组所有雏鸡均经口接种1×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊,饲养至24日龄时试验结束。结果显示,感染后第5~7天,常山提取物联合牛至油组雏鸡的血便计分显著低于阳性对照组(P<0.05),相对增重率显著高于阳性对照组(P<0.05);两给药组雏鸡的盲肠病变值和卵囊值均显著低于阳性对照组(P<0.05),两给药组ACI均达166以上,具有良好的抗球虫效果。与阳性对照组相比,在感染后第4天与第8天,给药组雏鸡血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等促炎因子的含量显著下调(P<0.05),抑炎因子白细胞介素-10(IL-10)的含量显著上调(P<0.05);与阳性对照组相比,给药组雏鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著上调(P<0.05),丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平显著下调(P<0.05)。在感染后第8天,常山提取物联合牛至油组雏鸡血清中肌酐(CRE)、尿酸(UA)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)等指标与空白对照组无显著性差异(P>0.05),而常山提取物组雏鸡相应指标均显著高于空白对照组(P<0.05)。上述研究表明,常山提取物联合牛至油抗球虫效果良好,且可以减轻常山对雏鸡产生的副作用。 展开更多
关键词 常山提取物 牛至油 柔嫩艾美球虫
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氢溴酸常山酮对鸡柔嫩艾美耳球虫的防治试验研究
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作者 张勇 庄皓翔 +1 位作者 何成华 孙卫东 《现代畜牧科技》 2025年第1期22-26,共5页
鸡球虫病是寄生在鸡肠道的一种常见疾病,对全世界的养鸡业造成重大的危害。艾美耳虫球虫通过感染肠道上皮并引起病变而破坏肠道完整性,最终使受感染鸡表现出营养吸收和利用不良,造成生长性能降低,免疫功能下降引发继发性疾病增加。该研... 鸡球虫病是寄生在鸡肠道的一种常见疾病,对全世界的养鸡业造成重大的危害。艾美耳虫球虫通过感染肠道上皮并引起病变而破坏肠道完整性,最终使受感染鸡表现出营养吸收和利用不良,造成生长性能降低,免疫功能下降引发继发性疾病增加。该研究以致病力强、危害严重的柔嫩艾美耳球虫为研究对象,观察鸡攻虫后氢溴酸常山酮防治效果。试验结果表明,与阳性对照组的相对增重率57.67%相比,药物防治组相对增重率高达84.92%,有显著提高。同时,药物防治组较阳性对照组的盲肠病变计分、盲肠内容物触片中卵囊数量明显降低,盲肠组织的病变程度明显减轻。这表明氢溴酸常山酮有较好的防治柔嫩艾美耳球虫的效果。这些试验结果为临床上鸡球虫病的防控提供了新的思路和方案。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 防治效果 研究
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栗蓬单宁酸抗鸡柔嫩艾美耳球虫感染效果研究
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作者 赵娜 常丽云 +3 位作者 王立中 李华伟 朱莲英 李成会 《北方牧业》 2025年第6期16-16,共1页
鸡球虫病是严重危害家禽业的疾病之一。柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作为鸡球虫病致病力最强病原,可导致鸡采食减少,生长速度下降,腹泻,排白色或血样粪便及精神沉郁。据报道,栗蓬富含多酚、单宁和黄酮等生物活性化合物,具有抗氧化、抗菌... 鸡球虫病是严重危害家禽业的疾病之一。柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作为鸡球虫病致病力最强病原,可导致鸡采食减少,生长速度下降,腹泻,排白色或血样粪便及精神沉郁。据报道,栗蓬富含多酚、单宁和黄酮等生物活性化合物,具有抗氧化、抗菌和抗炎的作用,单宁还具有抗球虫作用。目前,尚未有栗蓬单宁酸防治鸡球虫病的相关研究。因此,本研究建立E.tenella感染雏鸡模型,通过检测雏鸡存活率、增重情况、盲肠病变、每克盲肠内容物卵囊数(OPG)等指标计算抗球虫指数(ACI),探讨栗蓬单宁酸(CTA)对鸡球虫病的防治作用,为养禽业的健康发展提供策略。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 球虫作用 栗蓬单宁酸
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1种保留柔嫩艾美耳球虫完整形态的新型破壁技术
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作者 邢涛 沈辉 +1 位作者 李静敏 姜逸 《现代畜牧科技》 2025年第5期18-20,共3页
该试验旨在研究保留未成熟柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊壁完整形态的破壁技术和球虫原生质体的染色方法。采用冻融循环技术和浓盐酸—乙醇预处理未成熟E.tenella卵囊,后加入Hoechst 33258染料,进行E.tenella原生质体的荧光染色。结果... 该试验旨在研究保留未成熟柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊壁完整形态的破壁技术和球虫原生质体的染色方法。采用冻融循环技术和浓盐酸—乙醇预处理未成熟E.tenella卵囊,后加入Hoechst 33258染料,进行E.tenella原生质体的荧光染色。结果显示,冻融循环和盐酸—乙醇处理组可以明显看到卵囊壁完好的整体形态结构、细胞核被浓染,而对照组和仅冻融循环处理组并未看到核浓染,这说明卵囊壁的组织结构被破坏,使得Hoechst 33258染料渗入卵囊壁、穿透细胞膜,可以荧光染色球虫原生质体。结果表明,该研究成功建立了一种保存未成熟E.tenella卵囊壁完整形态的新型破壁技术,首次报道了球虫原生质体的染色方法。对球虫卵囊进行标记和示踪,可以直观地观察到卵囊的形态变化和数量变化,有助于更好地理解球虫病的发病机理,为进一步开发抗球虫药提供新思路。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 卵囊 原生质体 荧光染色
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柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药株筛选及其与敏感株基因组SNP密度分布差异分析
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作者 顾小龙 薛毅 +6 位作者 方素芳 班成怿 施宇博 杨舰航 杜芳辰 齐珍珍 崔平 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5108-5116,共9页
【目的】明确莫能菌素耐药虫株与敏感虫株在基因水平的差异,进而解析莫能菌素耐药性产生的分子机制。【方法】通过模拟田间感染的方式诱导柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素的耐药性。第1次诱导试验,将400只14日龄无球虫鸡平均分为2组,分别为Ⅰ... 【目的】明确莫能菌素耐药虫株与敏感虫株在基因水平的差异,进而解析莫能菌素耐药性产生的分子机制。【方法】通过模拟田间感染的方式诱导柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素的耐药性。第1次诱导试验,将400只14日龄无球虫鸡平均分为2组,分别为Ⅰ组(接种不加药组)和Ⅱ组(莫能菌素推荐剂量组),按照100 mg/kg在基础饲粮中添加莫能菌素。从Ⅰ组中随机选择10只鸡,接种对莫能菌素敏感的柔嫩艾美耳球虫豪顿株,剂量为5000卵囊/鸡。自接种后8 d开始,将Ⅰ组新鲜粪便抛洒到Ⅱ组垫料上模拟球虫田间感染,连续抛洒17 d。接种后33 d,随机剖检Ⅱ组10只鸡,收集盲肠内卵囊。第2次诱导试验,将100只14日龄无球虫鸡作为Ⅲ组(莫能菌素高剂量组),按照133 mg/kg在饲料中添加莫能菌素,随机选择10只鸡接种收集的卵囊,剂量为5000卵囊/鸡。接种后17 d,莫能菌素添加量提高至400 mg/kg。接种后27 d,收集盲肠卵囊。以抗球虫指数(ACI)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和最适抗球虫活性百分率(POAA)四项指标综合判定诱导株的耐药性。提取耐药株或敏感株孢子化卵囊基因组并进行基因组重测序,通过单核苷酸多态性(SNP)密度分布解析耐药株与敏感株之间的差异。【结果】第1次诱导试验,接种后33 d获得耐100 mg/kg莫能菌素的卵囊(1×莫能菌素诱导株)。第2次诱导试验,接种后27 d获得耐400 mg/kg莫能菌素的卵囊(4×莫能菌素诱导株)。4×莫能菌素诱导株的ACI为121,POAA为25.4%,RLS为33%,POP为64%。与参考基因组相比,敏感株基因组SNP共12191个,耐药株基因组SNP共74931个,耐药株在第11号染色体3.3~4.2 Mb区间内SNP富集分布,该区间内3个基因ETH2_1113700、ETH2_1113500和ETH2_1113600的SNP位于编码区。【结论】本研究获得了对莫能菌素完全耐药的柔嫩艾美耳球虫耐药株。在第11号染色体,耐药株与敏感株的SNP分布具有显著差异,筛选到3个耐药候选基因。 展开更多
关键词 球虫 柔嫩艾美球虫 莫能菌素 耐药性 SNP密度
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柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG12对鸡的免疫保护效果评价
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作者 王磊 游怡宁 +4 位作者 吴天乐 孙雪 王冰楠 毕师诚 周荣琼 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2025年第2期17-25,共9页
为评估柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella)表面抗原(Surface antigen,SAG)SAG12对鸡的免疫保护效果,首先构建EtSAT12/pET-32a原核表达载体,对EtSAG12重组蛋白进行纯化并制备多克隆抗体;然后进行动物试验,将100只1日龄海兰灰雏... 为评估柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella)表面抗原(Surface antigen,SAG)SAG12对鸡的免疫保护效果,首先构建EtSAT12/pET-32a原核表达载体,对EtSAG12重组蛋白进行纯化并制备多克隆抗体;然后进行动物试验,将100只1日龄海兰灰雏公鸡分成5个组,分别是感染对照组(PC)、空白对照组(NC)、EtSAG12重组蛋白50μg、100μg和150μg组。通过统计相对增质量率、卵囊减少率、抗球虫指数(ACI)和血清中特异性IgG抗体等指标评价EtSAG12重组蛋白的免疫保护效果。结果显示:成功表达出EtSAG12重组蛋白,大小约为43 Ku,主要以可溶性形式表达;Western Blot结果显示所制备的多克隆抗体有较强的特异性。免疫保护试验结果显示:与PC组相比,3个重组蛋白组的平均增质量显著增加(p<0.05)、病变计分显著降低(p<0.05),且均能有效降低卵囊产量,其中重组蛋白150μg组相对增质量率(97.34%)和卵囊减少率(52.54%)均为最高,ACI值达到165.34,具有中效抗球虫效果;3个重组蛋白组血清中特异性IgG抗体水平与PC组和NC组相比,在p<0.05水平差异均有统计学意义,且二免7 d后血清中特异性IgG抗体水平达到最高,其中重组蛋白150μg组特异性IgG抗体水平最高,且显著高于另外两个重组蛋白组(p<0.05)。综上所述,EtSAG12重组蛋白能减轻因球虫感染导致的增质量损失和肠道病变,减少卵囊排出,刺激宿主产生体液免疫,具有一定的免疫保护作用。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 EtSAG12重组蛋白 原核表达 免疫保护效果 表面抗原
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鸡柔嫩艾美耳球虫EtIMP1基因的克隆与表达载体的构建
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作者 廖加磊 《福建畜牧兽医》 2025年第2期54-56,共3页
本研究对鸡柔嫩艾美耳球虫RNA进行提取及反转录,克隆鸡柔嫩艾美耳球虫IMP1基因,并将PCR产物连接于pEasy-Blunt-Simple载体中,PCR鉴定正确后送公司测序,进行序列分析。结果:成功克隆鸡柔嫩艾美耳球虫EtIMP1基因,其ORF长度为1 194 bp,并... 本研究对鸡柔嫩艾美耳球虫RNA进行提取及反转录,克隆鸡柔嫩艾美耳球虫IMP1基因,并将PCR产物连接于pEasy-Blunt-Simple载体中,PCR鉴定正确后送公司测序,进行序列分析。结果:成功克隆鸡柔嫩艾美耳球虫EtIMP1基因,其ORF长度为1 194 bp,并验证了其正确性;构建鸡柔嫩艾美耳球虫EtIMP1基因表达载体pEasy-Blunt-Simple-IMP1,并得到重组质粒,可为体外表达IMP1基因提供技术方法,也为疫苗候选基因的筛选奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 IMP1基因 克隆 表达载体 PCR
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芦荟提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫的治疗
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作者 于秋银 《中国畜牧业》 2025年第8期50-51,共2页
随着科技的进步和养殖技术的不断革新,鸡养殖企业在饲料营养以及环境管控等方面取得显著的进步,但高速发展阶段所带来各类疫病逐渐增多,直接威胁到鸡养殖业的可持续发展。鸡球虫病的发生率较高,成为畜牧养殖的高危疾病之一,以柔嫩艾美... 随着科技的进步和养殖技术的不断革新,鸡养殖企业在饲料营养以及环境管控等方面取得显著的进步,但高速发展阶段所带来各类疫病逐渐增多,直接威胁到鸡养殖业的可持续发展。鸡球虫病的发生率较高,成为畜牧养殖的高危疾病之一,以柔嫩艾美耳球虫致病性最强,主要危害3月龄以内的雏鸡,15~50日龄更为严重。因此,如何对鸡柔嫩艾美耳球虫感染及时进行治疗一直是摆在畜牧兽医面前的重要问题。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 芦荟提取物 鸡养殖业
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河北省部分地区柔嫩艾美耳球虫野外分离株耐药性检测 被引量:10
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作者 蒋禄峰 常丽云 +4 位作者 张晶 张梦茜 秦建华 赵月兰 包永占 《中国动物保健》 2015年第6期78-81,共4页
将柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)石家庄、沧州、保定、唐山分离株感染14日龄罗曼蛋公雏,每个地区设立5个用药组、1个感染不用药对照组和1个不感染不用药对照组,以POAA、RLS、ROP、ACI作为评定指标对该虫株对氯羟吡啶、莫能菌素、地克珠利... 将柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)石家庄、沧州、保定、唐山分离株感染14日龄罗曼蛋公雏,每个地区设立5个用药组、1个感染不用药对照组和1个不感染不用药对照组,以POAA、RLS、ROP、ACI作为评定指标对该虫株对氯羟吡啶、莫能菌素、地克珠利、妥曲珠利、磺胺喹噁啉5种常用抗球虫药的抗药性进行了综合评定,分析了该地区球虫的抗药性及用药对策。结果表明:E.tenella石家庄分离株对氯羟吡啶呈完全抗药性,对莫能菌素、妥曲珠利、磺胺喹噁啉呈重度抗药,对地克珠利表现轻度抗药;E.tenella沧州分离株对氯羟吡啶、莫能菌素、地克珠利呈完全抗药性,对妥曲珠利、磺胺喹噁啉呈中度抗药;E.tenella保定分离株对氯羟吡啶呈完全抗药性,对妥曲珠利呈重度抗药,对莫能菌素、地克珠利、磺胺喹噁啉呈中度抗药;E.tenella唐山分离株对莫能菌素、妥曲珠利呈完全抗药性,对氯羟吡啶、地克珠利呈中度抗药,对磺胺喹噁啉呈轻度抗药。 展开更多
关键词 柔嫩艾美球虫 球虫 耐药性
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