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柔嫩艾美耳球虫杨凌株SO7基因的克隆表达与保护性试验 被引量：6
1
作者 王卉 林青 +1 位作者 战美娜 于三科 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第8期40-46,54,共8页
【目的】克隆鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因并进行原核表达,检测表达产物的免疫原性,为鸡球虫基因疫苗的制备奠定基础。【方法】以纯化的柔嫩艾美耳球虫杨凌(Eimeria tenella YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株... 【目的】克隆鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因并进行原核表达,检测表达产物的免疫原性,为鸡球虫基因疫苗的制备奠定基础。【方法】以纯化的柔嫩艾美耳球虫杨凌(Eimeria tenella YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株的SO7基因,对其测序后进行序列分析。将SO7基因克隆到表达载体pET-32a中,构建pET-SO7重组质粒,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,评价其免疫效果。【结果】鸡柔嫩艾美耳球虫SO7基因序列的开放阅读框(ORF)为651个碱基,共编码217个氨基酸。E.tenella YL株SO7基因与E.tenella LS18株、E.tenella BJ株、E.tenella GD株SO7基因ORF区序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%,其氨基酸序列相似性分别为99.1%,98.6%和99.1%。SDS-PAGE分析表明,表达产物成功地表达出了分子质量为45ku的融合蛋白。各种抗球虫指标的测定结果显示,该蛋白对球虫感染鸡体具有一定的保护性。【结论】SO7基因具有很强的保守性,各虫株之间差异不大;重组蛋白具有一定的保护效果,适合用来制备基因疫苗。 展开更多
关键词 SO7基因 柔嫩艾美耳球虫杨凌株 克隆表达 保护性试验
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柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达及免疫保护性研究
2
作者 彭维刚 黄妮 +3 位作者 林青 胡冰 张三东 于三科 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第12期1-7,14,共8页
【目的】对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌株RB1-a基因进行克隆与表达,检测表达产物的免疫保护性,为鸡球虫基因工程疫苗的研制奠定基础。【方法】以纯化的E.tenella杨凌株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出其RB1-a基因,测序... 【目的】对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌株RB1-a基因进行克隆与表达,检测表达产物的免疫保护性,为鸡球虫基因工程疫苗的研制奠定基础。【方法】以纯化的E.tenella杨凌株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出其RB1-a基因,测序后进行序列分析。然后将RB1-a基因N端不含信号肽序列克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a-RB1-a重组质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,对其免疫效果进行评价。【结果】柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的开放阅读框(ORF)包含618个碱基,编码205个氨基酸,与GenBank报道的柔嫩艾美耳球虫PAPa46株ORF序列相似性为99.84%,两者推导的氨基酸序列相同。SDS-PAGE分析表明,重组质粒表达分子质量为42ku的融合蛋白。免疫效果测定结果显示,RB1-a免疫组和RB1-a+佐剂免疫组的相对增重率分别为64.2%和69.4%,卵囊减少率分别达37.22%和30.56%,抗球虫指数分别为146.2和150.4。【结论】RB1-a基因具有很强的保守性,种间差异不大;RB1-a重组蛋白具有一定的免疫保护效果。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫杨凌株 RB1-a基因 克隆 表达 免疫保护
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柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1E基因表达产物的初步免疫效果研究 被引量：3
3
作者 翟军军 于三科 +5 位作者 才学鹏 林青 窦永喜 景志忠 闫鸿斌 田广孚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期238-240,244,共4页
用柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子表面抗原基因原核细胞表达产物免疫雏鸡,观察其对球虫攻击的免疫保护作用。将可溶性重组蛋白和包涵体重组蛋白经肌肉注射分别于7日龄、14日龄两次免疫罗曼小公雏,同时设攻虫对照组和空白对照组... 用柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子表面抗原基因原核细胞表达产物免疫雏鸡,观察其对球虫攻击的免疫保护作用。将可溶性重组蛋白和包涵体重组蛋白经肌肉注射分别于7日龄、14日龄两次免疫罗曼小公雏,同时设攻虫对照组和空白对照组,于第2次免疫后1周(28日龄)用1×104个E.tenella卵囊进行攻毒,观察其诱导产生的保护力。结果表明,3-1E可溶性蛋白组免疫无论从卵囊计数、盲肠病变计分和相对增重均优于包涵体免疫组。说明3-1E基因在大肠杆菌中的表达产物对鸡柔嫩艾美耳球虫的攻击有一定的免疫保护作用。 展开更多
关键词 3-1E基因 柔嫩艾美耳球虫 表达产物
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柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1 E基因的表达及其产物的生物活性分析 被引量：2
4
作者 翟军军 窦永喜 +5 位作者 林青 于三科 景志忠 闫鸿斌 田广孚 才学鹏 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第8期56-60,共5页
【目的】探讨原核表达的柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1E蛋白的生物学活性。【方法】将含有3-1E基因的pGEX-3-1E重组质粒转化大肠杆菌BL21,进行表达并对表达条件进行优化,表达产物纯化后进行Western-blot-ting分析。【结果】表达的3-1E重组蛋... 【目的】探讨原核表达的柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1E蛋白的生物学活性。【方法】将含有3-1E基因的pGEX-3-1E重组质粒转化大肠杆菌BL21,进行表达并对表达条件进行优化,表达产物纯化后进行Western-blot-ting分析。【结果】表达的3-1E重组蛋白相对分子质量为44.7 ku,与推导结果一致。在28℃、IPTG诱导浓度为0.5mmol/L的条件下诱导6 h,可溶性3-1E重组蛋白表达量最高。Western-blotting结果表明,3-1E重组蛋白可与兔抗鸡E.tenellaYL阳性血清发生反应。【结论】3-1E重组蛋白表达成功,表达产物具有免疫原性。 展开更多
关键词 3-1E基因 柔嫩艾美耳球虫 基因表达 生物活性分析
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柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药株诱导及单核苷酸多态性杂合度分析
5
作者 方素芳 顾小龙 +2 位作者 郝成宇 关琛 崔平 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期53-59,共7页
为诱导柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对莫能菌素的耐药虫株,并分析其基因组单核苷酸多态性(SNP)的杂合度(Hp),采用常规药物浓度递增方法,在实验室条件下,以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导... 为诱导柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对莫能菌素的耐药虫株,并分析其基因组单核苷酸多态性(SNP)的杂合度(Hp),采用常规药物浓度递增方法,在实验室条件下,以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导,以最适抗球虫活性百分率(POAA)、相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)和抗球虫指数(ACI)指标综合判定柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素的耐药性。将诱导出的耐药株和敏感株(豪顿株)基因组重测序,并进行基因组Hp分析。经过12次传代,获得了柔嫩艾美耳球虫1倍、2倍、4倍和10倍耐药虫株,其中10倍耐药株的POAA为14.3%,ROP为68%,RLS为27%,ACI为107。与参考基因组进行比对,共检测到132691个突变,其中豪顿株共计11085个突变,耐药株共计121606个突变。从SNPindex分布图中可见,豪顿株、1倍和2倍耐药株绝大多数位点基因频率接近0,而在4倍及10倍耐药株中SNP频率显著增加,其中部分位点的基因频率达到1。耐药群体在第6、第12、第14和第15号染色体上检测到低水平Hp,推测其与柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素耐药性的产生有关。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 莫能菌素 耐药性 单核苷酸多态性 杂合度
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鸡柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药株的诱导与鉴定
6
作者 方素芳 施宇博 +5 位作者 张丽云 顾小龙 关琛 王鹏 郭兵 崔平 《山东畜牧兽医》 2025年第8期8-12,共5页
为研究鸡柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素产生耐药性的机理,本研究采用常规的药物浓度递增方法,在实验室条件下以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导,以最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量、病变记分... 为研究鸡柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素产生耐药性的机理,本研究采用常规的药物浓度递增方法,在实验室条件下以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导,以最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量、病变记分减少率和抗球虫指数四项指标综合判定柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素的耐药性。将诱导出的耐药株单卵囊分离、增殖,建立各纯系耐药虫株,提取卵囊基因组DNA,与敏感株的测序结果比较。经过12次传代,获得了对5 g/kg莫能菌素预混剂耐药的柔嫩艾美耳球虫虫株,即柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素10倍耐药虫株,其中最适抗球虫活性百分率14.3%,相对卵囊产量68%,病变记分减少率27%,抗球虫指数107。测序结果显示,耐药株出现了96个碱基的缺失突变,为进一步应用分子生物学方法筛选耐药候选位点或基因奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 莫能菌素 耐药性 缺失 突变
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柔嫩艾美耳球虫湖南株的分离和鉴定
7
作者 胡盼 陈旭芳 +4 位作者 王晓蕾 李玄 刘伟 蔡鹏 曾建国 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期53-59,共7页
为了鉴定造成湖南省长沙市某黄羽肉鸡养殖场6周龄肉鸡死亡的鸡球虫种类,本试验采用饱和食盐水漂浮法和单卵囊分离技术,从病死鸡的粪便和盲肠内容物中成功分离出1株球虫,通过观察该虫株卵囊的形态和大小,初步鉴定其种类。通过聚合酶链式... 为了鉴定造成湖南省长沙市某黄羽肉鸡养殖场6周龄肉鸡死亡的鸡球虫种类,本试验采用饱和食盐水漂浮法和单卵囊分离技术,从病死鸡的粪便和盲肠内容物中成功分离出1株球虫,通过观察该虫株卵囊的形态和大小,初步鉴定其种类。通过聚合酶链式反应(PCR)技术进一步确定了该球虫的种类,随后检测了该虫株的潜隐期、裂殖体寄生部位和大小、致病力和最短孢子化时间,明确其生物学特性。结果显示,该球虫寄生于盲肠,卵囊平均大小为22.2μm×19.0μm,卵囊指数为1.17;对PCR扩增产物进行测序,比对分析核苷酸同源性,结果显示,该虫株与GenBank中登录的7株柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的同源性为96.44%~100%,将其命名为E.tenella-TCS2404-01;生物学特性鉴定结果显示,该虫株潜隐期为124 h,最短孢子化时间为16 h,接种1.2×10^(4)个卵囊/羽的分离虫株可导致鸡只相对增重率下降至73.8%,平均肠道病变评分达到3.7分,死亡率达到30%。结果表明,本试验分离出1株致病力较强的E.tenella虫株,该发现对于了解湖南省鸡球虫病的流行情况及其防控具有重要意义,为未来针对该虫株的疫苗研发和药物开发提供了基础信息。 展开更多
关键词 湖南省 同源性 柔嫩艾美耳球虫 单卵囊分离技术 PCR鉴定 生物学特性
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柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56 蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定
8
作者 姜明慧 宋勇乐 +9 位作者 苏观志 陈庆彪 李娟 戚南山 廖申权 吕敏娜 林栩慧 蔡海明 张旭 孙铭飞 《广东畜牧兽医科技》 2025年第3期1-7,共7页
为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能,以柔嫩艾美耳球虫广东株配子体cDNA为模板,克隆该分离虫株的gam56基因编码序列。构建pET⁃B2M⁃GAM56截短表达载体,利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备G... 为研究柔嫩艾美耳球虫GAM56蛋白的生物学功能,以柔嫩艾美耳球虫广东株配子体cDNA为模板,克隆该分离虫株的gam56基因编码序列。构建pET⁃B2M⁃GAM56截短表达载体,利用大肠杆菌表达系统通过IPTG诱导表达GAM56蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠制备GAM56多克隆抗体。通过间接ELISA和Western blot分析抗体的效价和特异性;收集E.tenella(GD)配子体阶段样品,利用GAM56多克隆抗体进行免疫荧光检测以评价其应用效果。结果显示:相比E.tenella(Houghton)参考虫株,E.tenella(GD)的gam56基因存在末端部分片段的缺失,CDS序列1077 bp,可编码358个氨基酸;预测蛋白大小41.3 kDa。GAM56保守区域截短原核表达蛋白主要以包涵体形式存在。间接免疫荧光分析显示该抗体能够特异性识别配子体阶段的GAM56蛋白。该研究为进一步解析柔嫩艾美耳球虫广东株GAM56生物学功能提供了材料,为艾美耳球虫有性发育相关蛋白的功能研究与机制解析奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 GAM56 原核表达 多克隆抗体
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柔嫩艾美耳球虫甘肃株SO7基因表达蛋白的免疫保护性
9
作者 刘海霞 《国外畜牧学(猪与禽)》 2025年第4期52-55,共4页
采用RT-PCR方法对柔嫩艾美耳球虫甘肃(GS)株卵囊SO7基因进行扩增,并将SO7基因克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a(+)-SO7重组质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达重组蛋白,经纯化后免疫鸡群,评价免疫效果。结果显示,免疫鸡群后每克粪便... 采用RT-PCR方法对柔嫩艾美耳球虫甘肃(GS)株卵囊SO7基因进行扩增,并将SO7基因克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a(+)-SO7重组质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达重组蛋白,经纯化后免疫鸡群,评价免疫效果。结果显示,免疫鸡群后每克粪便卵囊数(oocysts per gram of faeces,OPG)为305030个,卵囊数下降51.05%,盲肠病变评分为1.5,抗球虫效果比较理想。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 SO7基因 表达蛋白 免疫保护性
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苦参水提物抗柔嫩艾美耳球虫病的效果研究 被引量：1
10
作者 郑哲 王燕春 +5 位作者 张嫱 杨墨寒 张柏慧 兰应娟 于婷婷 蔡亚南 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第3期296-302,共7页
为明确苦参水提物对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果及其作用机制,本实验将100只白羽肉鸡均分为4组,分别为阴性对照组(NC组)、虫体感染组(PC组)、虫体感染后苦参水提物治疗组(PC+SF组)及虫体感染后地克珠利治疗组(PC+DC组)。除NC组外其余... 为明确苦参水提物对鸡柔嫩艾美耳球虫病的治疗效果及其作用机制,本实验将100只白羽肉鸡均分为4组,分别为阴性对照组(NC组)、虫体感染组(PC组)、虫体感染后苦参水提物治疗组(PC+SF组)及虫体感染后地克珠利治疗组(PC+DC组)。除NC组外其余3组雏鸡在14日龄时均以4×10^(4)个/只口服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,PC+SF组和PC+DC组鸡感染后10 d内每日口服相应药剂。在感染虫体第10 d观察各组鸡临床症状,称量体重,记录死亡数,并计算抗球虫指数;对每组鸡剖检后取盲肠观察其剖检病变及组织病理变化。结果显示,除对照组外,其他3组鸡均出现体重增长缓慢,但两个治疗组后期体重得到恢复,且未出现死亡;PC+SF组鸡的抗球虫指数(ACI)为161.8,达到中效抗球虫病效果;PC组鸡盲肠出血、炎性细胞浸润、肠绒毛脱落,PC+SF与PC组相比盲肠组织炎性细胞浸润明显减少。收集各组鸡血清,利用ELISA检测各组鸡血清中促炎细胞因子白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素6(IL-6)的分泌水平;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组鸡盲肠组织中促炎细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素22(IL-22)及抑炎细胞因子白细胞介素10(IL-10)的转录水平;采用western blot检测各组鸡盲肠组织中NF-κB通路关键分子p65、p-p65、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)及磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白的表达水平。结果显示,与PC组相比,PC+SF组和PC+DC组鸡血清中促炎细胞因子IL-6的分泌水平均极显著降低(P<0.0001);qPCR结果显示,与PC组相比,PC+SF组和PC+DC组鸡盲肠组织中IFN-γ、IL-17及IL-22 mRNA的转录水平均极显著降低(P<0.0001),IL-10 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.0001);Western blot结果显示,与NC组相比,PC组鸡盲肠组织中NF-κB通路关键分子p65、p-p65、IκBα及p-IκBα蛋白表达水平均极显著升高(P<0.0001),而PC+SF组与PC组相比上述各蛋白的表达水平均极显著下降(P<0.0001),PC+DC组与NC组则无显著差异(P>0.05)。综上所述,本研究结果首次证实苦参水提物通过抑制NF-κB通路炎症因子表达治疗鸡球虫病,为苦参应用于鸡球虫病的防治提供科学依据。 展开更多
关键词 苦参 柔嫩艾美耳球虫 NF-ΚB通路 炎症
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芦荟提取物治疗鸡柔嫩艾美耳球虫感染的效果研究 被引量：3
11
作者 丁咚 吴楠 +1 位作者 宋臣锋 刘勇 《中国家禽》 北大核心 2025年第2期60-65,共6页
为评价芦荟提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫的治疗效果,试验将14日龄180只雏鸡随机分为6组,即阴性对照组(不感染球虫不给药)、阳性对照组(感染球虫不给药)、地克珠利治疗组(0.2 mL/L地克珠利)、芦荟提取物低(0.5 g/L)、中(1 g/L)、高(2 g/L)... 为评价芦荟提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫的治疗效果,试验将14日龄180只雏鸡随机分为6组,即阴性对照组(不感染球虫不给药)、阳性对照组(感染球虫不给药)、地克珠利治疗组(0.2 mL/L地克珠利)、芦荟提取物低(0.5 g/L)、中(1 g/L)、高(2 g/L)剂量治疗组,每组3个重复,每个重复10只鸡。除阴性对照组外,其余试验组鸡只经口人工感染7.5×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,并在感染球虫当天所有治疗组开始饮水给药,直至试验结束。所有试验鸡在21日龄统计相对增重率、存活率、盲肠病变值、卵囊值,计算抗球虫指数(ACI),综合评价芦荟提取物的抗球虫效果。结果显示:与阳性对照组相比,芦荟提取物组试验鸡相对增重率和存活率均有所提高,盲肠病变记分和每克粪便卵囊数(OPG)显著降低(P<0.05);芦荟提取物高、中、低剂量组均达到低效抗球虫效果,ACI分别为154.23、145.94、122.93;地克珠利治疗组达到高效抗球虫效果,ACI为181.55。研究表明,在饮水中添加2 g/L芦荟提取物对鸡球虫病的治疗有一定效果。 展开更多
关键词 芦荟提取物 鸡 柔嫩艾美耳球虫 治疗效果
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柔嫩艾美耳球虫感染对黄羽肉鸡生产性能、免疫器官和肠道形态的影响
12
作者 董理月 范作堃 +7 位作者 唐美慧 汤建强 于海亮 张涛 张跟喜 谢恺舟 赵振华 戴国俊 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1263-1271,共9页
【目的】探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对黄羽肉鸡生产性能、免疫器官及盲肠肠道形态结构的影响。【方法】7个半同胞家系黄羽肉鸡在感染柔嫩艾美耳球虫后,根据球虫敏感性指标筛选出抗性和易感家系,组成抗性组和易感组,分别... 【目的】探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对黄羽肉鸡生产性能、免疫器官及盲肠肠道形态结构的影响。【方法】7个半同胞家系黄羽肉鸡在感染柔嫩艾美耳球虫后,根据球虫敏感性指标筛选出抗性和易感家系,组成抗性组和易感组,分别在感染期和恢复期比较分析不同抗性组间的生产性能、免疫器官和肠道形态结构的差异。【结果】无论是感染期还是恢复期,抗性与易感鸡平均体重和平均日增重均极显著低于对照组(P<0.01),料重比均极显著高于对照组(P<0.01)。在感染的不同时期,抗性组、易感组和对照组鸡胸腺、脾脏等7种免疫器官指数均差异不显著(P>0.05),但恢复期免疫器官指数高于感染期。此外,感染期抗性组与易感组鸡均出现盲肠黏膜坏死,肌层不完整、断裂等病理变化,易感组鸡盲肠上皮可见球虫配子;而恢复期抗性组鸡盲肠组织结构逐渐恢复至正常,易感组鸡盲肠组织各层结构仍呈现明显变性或坏死。【结论】无论处于感染期还是恢复期,感染柔嫩艾美耳球虫后抗性或易感鸡的生产性能均降低且肠道形态发生改变,但处于恢复期时,抗性鸡能逐渐恢复至健康状态,而易感鸡盲肠则出现不可逆的损伤。本研究结果为深入探究柔嫩艾美耳球虫感染恢复后对鸡的生产性能和肠道的影响提供了参考。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 黄羽肉鸡 抗性 生产性能 肠道形态
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柔嫩艾美耳球虫感染对不同球虫抗性鸡群体炎性相关因子的影响
13
作者 唐美慧 Areej Arif +8 位作者 董理月 于海亮 汤建强 范作堃 张涛 张跟喜 谢恺舟 赵振华 戴国俊 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期39-46,共8页
为了探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响,本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组,根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠病变... 为了探究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响,本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组,根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠病变值和抗球虫指数等抗性评价指标,筛选出抗性组和易感组鸡群体,测定柔嫩艾美耳球虫感染后不同球虫抗性鸡群体血液炎性因子和抗氧化指标以及不同组织中炎性相关基因的表达量。结果显示,抗性组和易感组血液中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及活性氧(ROS)浓度与对照组相比差异极显著(P<0.01),但不同球虫抗性组间血液中SOD和CAT活性及ROS和一氧化氮(NO)浓度无显著差异(P>0.05);抗性组和易感组血液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度极显著高于对照组(P<0.01),且易感组IL-1β和TNF-α浓度极显著高于抗性组(P<0.01);抗性组和易感组盲肠和胸腺中IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α基因表达量极显著高于对照组(P<0.01),且易感组盲肠和胸腺中IL-1β、TNF-α基因表达量极显著高于抗性组(P<0.01)。抗性组与易感组之间进行比较发现,2个组血液中IL-1β和TNF-α浓度与盲肠和胸腺组织中IL-1β和TNF-α基因表达量的变化规律高度一致。结果表明,柔嫩艾美耳球虫感染促进了不同球虫抗性鸡群体免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 京海黄鸡 抗氧化指标 炎性因子
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饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌对柔嫩艾美耳球虫感染肉鸡生长性能、炎症反应及肠道屏障功能的影响
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作者 李建梅 沈海玉 +1 位作者 许明 窦新红 《动物营养学报》 北大核心 2025年第7期4384-4396,共13页
本试验旨在研究饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌对柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)感染肉鸡生长性能、炎症反应及肠道屏障功能的影响。选取体重相近的3日龄爱拔益加(AA)雄性肉鸡360羽,随机分成8个组,每组3个重复,每个重... 本试验旨在研究饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌对柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)感染肉鸡生长性能、炎症反应及肠道屏障功能的影响。选取体重相近的3日龄爱拔益加(AA)雄性肉鸡360羽,随机分成8个组,每组3个重复,每个重复15羽。正对照组(NC组)和负对照组(PC组)饲喂基础饲粮,磺胺类药物组(YW组)饲喂基础饲粮+4.00 g/kg磺胺类药物,枯草芽孢杆菌组(BS组)饲喂基础饲粮+0.50 g/kg枯草芽孢杆菌(1×10~8CFU/kg),屎肠球菌组(EF组)饲喂基础饲粮+0.04 g/kg屎肠球菌(4×10^(9)CFU/kg),酵母菌组(Yeast组)饲喂基础饲粮+2.00 g/kg酵母菌(1×10^(9)CFU/kg),混合1组(Mix1组)饲喂基础饲粮+0.25 g/kg枯草芽孢杆菌(0.5×10~8CFU/kg)+0.02 g/kg屎肠球菌(2×10^(9)CFU/kg)+1.00 g/kg酵母菌(0.5×10^(9)CFU/kg),混合2组(Mix2组)饲喂基础饲粮+0.50 g/kg枯草芽孢杆菌(1×10~8CFU/kg)+0.04 g/kg屎肠球菌(4×10^(9)CFU/kg)+2.00 g/kg酵母菌(1×10^(9)CFU/kg)。14日龄时,PC组、YW组、BS组、EF组、Yeast组、Mix1组和Mix2组肉鸡每只灌服1 mL E.tenella孢子化卵囊,NC组肉鸡每只灌服1 mL灭菌磷酸盐缓冲液。试验鸡21日龄时结束试验。结果表明:1)与PC组相比,Mix1组和Mix2组21日龄体重、平均日增重和平均日采食量显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05)。2)与PC组相比,EF组、Yeast组和Mix2组盲肠病变记分显著降低(P<0.05);BS组、EF组、Yeast组、Mix1组和Mix2组盲肠病变记分显著高于NC组和YW组(P<0.05)。3)与PC组相比,BS组、EF组、Yeast组、Mix1组和Mix2组盲肠白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),盲肠白细胞介素-10(IL-10)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05);Yeast组盲肠干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。4)与NC组、PC组和YW组相比,BS组和Mix2组盲肠紧密连接蛋白2(TJP2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),Mix2组盲肠连接黏附分子2(JAM2)和闭合蛋白(OCLN)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),BS组、EF组和Mix1组盲肠闭锁小带蛋白-2(ZO-2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),BS组、EF组和Mix2组盲肠黏蛋白2(MUC2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、酵母菌及其复合菌可通过增强肠道屏障功能和调节炎症反应,一定程度上缓解E. tenella感染对肉鸡肠道造成的损伤,且Mix2组的作用效果较好。 展开更多
关键词 肉鸡 柔嫩艾美耳球虫 益生菌 炎症反应 肠道屏障
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柔嫩艾美耳球虫AMA1的原核表达及其免疫保护效果评价
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作者 刘永宁 单乙戈 +5 位作者 潘晨帆 刘倩琳 李翌琳 段思彰 安健 张建军 《华北农学报》 北大核心 2025年第1期232-238,共7页
为探究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(AMA1)对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡的免疫保护效果,将AMA1基因扩增产物连接到表达载体pET-32a(+)上构建重组质粒pET-32a(+)-AMA1,并转入大肠杆菌BL21(DE3)来表达重组蛋白。将108只雏鸡随机分为6组,每组3个... 为探究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(AMA1)对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡的免疫保护效果,将AMA1基因扩增产物连接到表达载体pET-32a(+)上构建重组质粒pET-32a(+)-AMA1,并转入大肠杆菌BL21(DE3)来表达重组蛋白。将108只雏鸡随机分为6组,每组3个重复,每个重复6羽,包括不免疫不攻虫组(阴性组)、不免疫攻虫组(阳性组)、弗氏佐剂对照组及12.5,25.0,50.0μg rEtAMA1免疫组,分别于14,21日龄肌肉注射不同浓度的重组蛋白,28日龄口服感染5×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,35日龄处死试验鸡,以体增质量、盲肠病变评分、卵囊产量、免疫器官指数、细胞因子及抗体水平来评价重组AMA1蛋白的免疫保护效果。结果显示,各组间的平均增质量差异不显著;25.0μg及50.0μg rEtAMA1组的盲肠病变计分较阳性组分别显著降低了53%和41%;12.5,25.0,50.0μg rEtAMA1组的克粪便卵囊数量(OPG)分别较阳性组显著减少16%,27%,54%;50.0μg rEtAMA1组的法氏囊指数较阳性组显著提高27%;25.0,50.0μg rEtAMA1组的胸腺指数均显著高于阳性组,分别增加了25%,22%;各组的脾脏指数无显著差异;在二免后7 d, 12.5μg和25.0μg rEtAMA1组的细胞因子IL-2和IFN-γ含量均显著高于阴性组,50.0μg rEtAMA1组血清总IgG含量较阴性组显著增加47%,且二免后含量明显高于首免后。综上,重组AMA1蛋白能够减轻盲肠病变,减少球虫卵囊产量和促进免疫器官发育,提高血清细胞因子和抗体水平,对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡具有一定的免疫保护效果。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 AMA1 原核表达 免疫效果
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石榴皮乙醇提取工艺优化及提取物抗柔嫩艾美耳球虫的效果 被引量：1
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作者 刘婧 王京龙 +3 位作者 高丽丽 张肖 卢永慧 张立华 《贵州农业科学》 2025年第3期126-132,共7页
【目的】探明石榴皮乙醇提取物抗柔嫩艾美耳球虫的最优提取工艺,以及石榴皮不同溶剂提取物抗柔嫩艾美耳球虫的效果,为石榴皮提取物的应用及鸡球虫病的有效防治提供参考。【方法】以球虫孢子化率为指标,采取L9(34)正交试验设计法,考察提... 【目的】探明石榴皮乙醇提取物抗柔嫩艾美耳球虫的最优提取工艺,以及石榴皮不同溶剂提取物抗柔嫩艾美耳球虫的效果,为石榴皮提取物的应用及鸡球虫病的有效防治提供参考。【方法】以球虫孢子化率为指标,采取L9(34)正交试验设计法,考察提取溶剂乙醇浓度(30%、50%、70%)、提取时间(30 min、60 min、90 min)、提取温度(40℃、50℃、60℃)和物料比(g︰mL,1︰10、1︰15、1︰20)对提取工艺的影响,优选石榴皮抗柔嫩艾美耳球虫的乙醇最佳提取工艺;比较石榴皮不同溶剂提取物(水提取物、氯仿提取物、70%甲醇提取物、50%乙醇提取物)及市售抗球虫药物10%磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫的孢子化率,明确石榴皮各溶剂提取物的抗球虫效果。【结果】乙醇提取4个因素中,影响石榴皮提取物抗柔嫩艾美耳球虫效果的因素依次为乙醇浓度>物料比>提取时间>提取温度,乙醇最佳提取工艺参数为浓度50%、物料比1︰10、提取时间30 min、提取温度40℃,此工艺石榴皮提取物对柔嫩艾美耳球虫的孢子化率为70.12%。石榴皮4种溶剂提取物中,作用6 d内50%乙醇提取物抗柔嫩艾美耳球虫的平均孢子化率为51.35%,显著(P<0.05)优于其他溶剂提取物。【结论】石榴皮50%乙醇最佳提取工艺提取物对柔嫩艾美耳球虫的孢子化率为70.12%,作用6 d内抗球虫效果(平均孢子化率为51.35%)优于其他溶剂提取物(水提取物、氯仿提取物、70%甲醇提取物)及10%磺胺氯吡嗪钠(常用抗球虫药物)。 展开更多
关键词 石榴皮 柔嫩艾美耳球虫 提取工艺 正交试验 孢子化率
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常山提取物联合牛至油抗鸡柔嫩艾美耳球虫作用研究
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作者 齐珍珍 苏杰 +6 位作者 郝成宇 徐海城 王鹏 褚耀诚 马利芹 方素芳 付旭东 《中兽医医药杂志》 2025年第2期8-15,共8页
研究常山提取物联合牛至油抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果。选取14日龄无球虫罗斯308肉鸡80只,随机分为常山提取物联合牛至油组、常山提取物组、阳性对照组和空白对照组,15~24日龄时各给药组的雏鸡给予相应药物,16日龄时给药组和阳性对照组... 研究常山提取物联合牛至油抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果。选取14日龄无球虫罗斯308肉鸡80只,随机分为常山提取物联合牛至油组、常山提取物组、阳性对照组和空白对照组,15~24日龄时各给药组的雏鸡给予相应药物,16日龄时给药组和阳性对照组所有雏鸡均经口接种1×10^(4)个柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊,饲养至24日龄时试验结束。结果显示,感染后第5~7天,常山提取物联合牛至油组雏鸡的血便计分显著低于阳性对照组(P<0.05),相对增重率显著高于阳性对照组(P<0.05);两给药组雏鸡的盲肠病变值和卵囊值均显著低于阳性对照组(P<0.05),两给药组ACI均达166以上,具有良好的抗球虫效果。与阳性对照组相比,在感染后第4天与第8天,给药组雏鸡血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等促炎因子的含量显著下调(P<0.05),抑炎因子白细胞介素-10(IL-10)的含量显著上调(P<0.05);与阳性对照组相比,给药组雏鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著上调(P<0.05),丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平显著下调(P<0.05)。在感染后第8天,常山提取物联合牛至油组雏鸡血清中肌酐(CRE)、尿酸(UA)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)等指标与空白对照组无显著性差异(P>0.05),而常山提取物组雏鸡相应指标均显著高于空白对照组(P<0.05)。上述研究表明,常山提取物联合牛至油抗球虫效果良好,且可以减轻常山对雏鸡产生的副作用。 展开更多
关键词 常山提取物 牛至油 柔嫩艾美耳球虫 鸡
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氢溴酸常山酮对鸡柔嫩艾美耳球虫的防治试验研究
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作者 张勇 庄皓翔 +1 位作者 何成华 孙卫东 《现代畜牧科技》 2025年第1期22-26,共5页
鸡球虫病是寄生在鸡肠道的一种常见疾病,对全世界的养鸡业造成重大的危害。艾美耳虫球虫通过感染肠道上皮并引起病变而破坏肠道完整性,最终使受感染鸡表现出营养吸收和利用不良,造成生长性能降低,免疫功能下降引发继发性疾病增加。该研... 鸡球虫病是寄生在鸡肠道的一种常见疾病,对全世界的养鸡业造成重大的危害。艾美耳虫球虫通过感染肠道上皮并引起病变而破坏肠道完整性,最终使受感染鸡表现出营养吸收和利用不良,造成生长性能降低,免疫功能下降引发继发性疾病增加。该研究以致病力强、危害严重的柔嫩艾美耳球虫为研究对象,观察鸡攻虫后氢溴酸常山酮防治效果。试验结果表明,与阳性对照组的相对增重率57.67%相比,药物防治组相对增重率高达84.92%,有显著提高。同时,药物防治组较阳性对照组的盲肠病变计分、盲肠内容物触片中卵囊数量明显降低,盲肠组织的病变程度明显减轻。这表明氢溴酸常山酮有较好的防治柔嫩艾美耳球虫的效果。这些试验结果为临床上鸡球虫病的防控提供了新的思路和方案。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 防治效果 研究
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栗蓬单宁酸抗鸡柔嫩艾美耳球虫感染效果研究
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作者 赵娜 常丽云 +3 位作者 王立中 李华伟 朱莲英 李成会 《北方牧业》 2025年第6期16-16,共1页
鸡球虫病是严重危害家禽业的疾病之一。柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作为鸡球虫病致病力最强病原,可导致鸡采食减少,生长速度下降,腹泻,排白色或血样粪便及精神沉郁。据报道,栗蓬富含多酚、单宁和黄酮等生物活性化合物,具有抗氧化、抗菌... 鸡球虫病是严重危害家禽业的疾病之一。柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作为鸡球虫病致病力最强病原,可导致鸡采食减少,生长速度下降,腹泻,排白色或血样粪便及精神沉郁。据报道,栗蓬富含多酚、单宁和黄酮等生物活性化合物,具有抗氧化、抗菌和抗炎的作用,单宁还具有抗球虫作用。目前,尚未有栗蓬单宁酸防治鸡球虫病的相关研究。因此,本研究建立E.tenella感染雏鸡模型,通过检测雏鸡存活率、增重情况、盲肠病变、每克盲肠内容物卵囊数(OPG)等指标计算抗球虫指数(ACI),探讨栗蓬单宁酸(CTA)对鸡球虫病的防治作用,为养禽业的健康发展提供策略。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 抗球虫作用 栗蓬单宁酸
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1种保留柔嫩艾美耳球虫完整形态的新型破壁技术
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作者 邢涛 沈辉 +1 位作者 李静敏 姜逸 《现代畜牧科技》 2025年第5期18-20,共3页
该试验旨在研究保留未成熟柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊壁完整形态的破壁技术和球虫原生质体的染色方法。采用冻融循环技术和浓盐酸—乙醇预处理未成熟E.tenella卵囊,后加入Hoechst 33258染料,进行E.tenella原生质体的荧光染色。结果... 该试验旨在研究保留未成熟柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊壁完整形态的破壁技术和球虫原生质体的染色方法。采用冻融循环技术和浓盐酸—乙醇预处理未成熟E.tenella卵囊,后加入Hoechst 33258染料,进行E.tenella原生质体的荧光染色。结果显示,冻融循环和盐酸—乙醇处理组可以明显看到卵囊壁完好的整体形态结构、细胞核被浓染,而对照组和仅冻融循环处理组并未看到核浓染,这说明卵囊壁的组织结构被破坏,使得Hoechst 33258染料渗入卵囊壁、穿透细胞膜,可以荧光染色球虫原生质体。结果表明,该研究成功建立了一种保存未成熟E.tenella卵囊壁完整形态的新型破壁技术,首次报道了球虫原生质体的染色方法。对球虫卵囊进行标记和示踪,可以直观地观察到卵囊的形态变化和数量变化,有助于更好地理解球虫病的发病机理,为进一步开发抗球虫药提供新思路。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 卵囊 原生质体 荧光染色
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