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染色质隔离子研究进展
被引量:
5
1
作者
章波
刘昕
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期551-555,共5页
染色质隔离子是真核生物染色质上的顺式调控元件,它将染色质隔离成不同的转录功能域,使其一侧的基因免受另一侧调控元件的影响。染色质隔离子发挥作用是通过与其相结合的蛋白质来实现,它能阻断增强子和沉默子的作用,并使插入在两个隔离...
染色质隔离子是真核生物染色质上的顺式调控元件,它将染色质隔离成不同的转录功能域,使其一侧的基因免受另一侧调控元件的影响。染色质隔离子发挥作用是通过与其相结合的蛋白质来实现,它能阻断增强子和沉默子的作用,并使插入在两个隔离子间的外源基因不受染色体位置效应影响。目前存在多种有关隔离子的作用机理的假说,比较成熟的是loop假说。随着研究的深入,染色质隔离子的应用也将受到更大的重视。
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关键词
染色质隔离子
增强子
沉默子
染色质
边界元件
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职称材料
一种真核生物染色质隔离子筛选方案的初步建立
2
作者
章波
王燕
+2 位作者
许雪青
白云
杨晓亚
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第17期1688-1691,共4页
目的探讨建立染色质隔离子的正负筛选工具的可行性。方法合成引物从鸡基因组cHS4区域扩增了1段特异的DNA,将PCR产物克隆到T-载体后测序,验证其对增强子的阻断功能;对pEGFP-N1载体进行一系列改造,评价其正负筛选效果。结果成功地获得已...
目的探讨建立染色质隔离子的正负筛选工具的可行性。方法合成引物从鸡基因组cHS4区域扩增了1段特异的DNA,将PCR产物克隆到T-载体后测序,验证其对增强子的阻断功能;对pEGFP-N1载体进行一系列改造,评价其正负筛选效果。结果成功地获得已知的隔离子片段,初步结果表明该片断能阻断增强子的转录激活作用。将TK基因作为负向筛选标记引入pEGFP-N1载体后获得了改造后的载体,转染COS-7细胞经过G418筛选10d后获得了稳定转染的细胞系,在不同浓度GCV药物作用下细胞杀伤效果有差异。结论正负筛选方法被成功地引入到筛选系统,为进一步进行染色质隔离子的筛选与利用奠定了基础。
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关键词
染色质隔离子
增强子
基因表达
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职称材料
利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体
3
作者
关亚群
赵学信
+1 位作者
焦谊
范江霖
《实用医学杂志》
CAS
2007年第23期3659-3662,共4页
目的:在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12(hMMP-12)转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法:首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,测序后获得pGEM-T-hMMP-12,然...
目的:在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12(hMMP-12)转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法:首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,测序后获得pGEM-T-hMMP-12,然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR,再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒,构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJC13-SR-hMMP-12,最后pJC13-SR-hMMP-12表达载体线性化,显微注射家兔受精卵制备转基因兔,并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果:(1)通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实,hMMP-12成功克隆到所需表达载体中;(2)转基因后获得仔兔36只,以PCR检测结果计算,转基因总效率为1.4%~3.4%,整合率为20%~50%;以Southern Blot检测结果计算,转基因总效率为0.5%~2.2%,整合率为13%~17%。结论:转基因表达载体的成功构建,为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。
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关键词
基质金属蛋白酶类
转基因
染色质隔离子
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职称材料
真核生物染色质隔离子
4
作者
章波
刘昕
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期315-315,共1页
关键词
真核生物
染色质隔离子
基因表达
调控
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职称材料
题名
染色质隔离子研究进展
被引量:
5
1
作者
章波
刘昕
机构
第三军医大学分子遗传学教研室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期551-555,共5页
文摘
染色质隔离子是真核生物染色质上的顺式调控元件,它将染色质隔离成不同的转录功能域,使其一侧的基因免受另一侧调控元件的影响。染色质隔离子发挥作用是通过与其相结合的蛋白质来实现,它能阻断增强子和沉默子的作用,并使插入在两个隔离子间的外源基因不受染色体位置效应影响。目前存在多种有关隔离子的作用机理的假说,比较成熟的是loop假说。随着研究的深入,染色质隔离子的应用也将受到更大的重视。
关键词
染色质隔离子
增强子
沉默子
染色质
边界元件
Keywords
chromatin insulaotr
enhancer
silencer
chromatin boundary element
分类号
Q343 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
一种真核生物染色质隔离子筛选方案的初步建立
2
作者
章波
王燕
许雪青
白云
杨晓亚
机构
第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第17期1688-1691,共4页
基金
第三军医大学科研创新基金(2005)~~
文摘
目的探讨建立染色质隔离子的正负筛选工具的可行性。方法合成引物从鸡基因组cHS4区域扩增了1段特异的DNA,将PCR产物克隆到T-载体后测序,验证其对增强子的阻断功能;对pEGFP-N1载体进行一系列改造,评价其正负筛选效果。结果成功地获得已知的隔离子片段,初步结果表明该片断能阻断增强子的转录激活作用。将TK基因作为负向筛选标记引入pEGFP-N1载体后获得了改造后的载体,转染COS-7细胞经过G418筛选10d后获得了稳定转染的细胞系,在不同浓度GCV药物作用下细胞杀伤效果有差异。结论正负筛选方法被成功地引入到筛选系统,为进一步进行染色质隔离子的筛选与利用奠定了基础。
关键词
染色质隔离子
增强子
基因表达
Keywords
chromatin insulator
enhancer
gene expression
分类号
Q756 [生物学—分子生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体
3
作者
关亚群
赵学信
焦谊
范江霖
机构
新疆医科大学基础医学院
出处
《实用医学杂志》
CAS
2007年第23期3659-3662,共4页
文摘
目的:在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12(hMMP-12)转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法:首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,测序后获得pGEM-T-hMMP-12,然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR,再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒,构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJC13-SR-hMMP-12,最后pJC13-SR-hMMP-12表达载体线性化,显微注射家兔受精卵制备转基因兔,并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果:(1)通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实,hMMP-12成功克隆到所需表达载体中;(2)转基因后获得仔兔36只,以PCR检测结果计算,转基因总效率为1.4%~3.4%,整合率为20%~50%;以Southern Blot检测结果计算,转基因总效率为0.5%~2.2%,整合率为13%~17%。结论:转基因表达载体的成功构建,为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。
关键词
基质金属蛋白酶类
转基因
染色质隔离子
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
R543 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
真核生物染色质隔离子
4
作者
章波
刘昕
机构
第三军医大学分子遗传学教研室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期315-315,共1页
关键词
真核生物
染色质隔离子
基因表达
调控
分类号
Q756 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
染色质隔离子研究进展
章波
刘昕
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
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下载PDF
职称材料
2
一种真核生物染色质隔离子筛选方案的初步建立
章波
王燕
许雪青
白云
杨晓亚
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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下载PDF
职称材料
3
利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体
关亚群
赵学信
焦谊
范江霖
《实用医学杂志》
CAS
2007
0
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下载PDF
职称材料
4
真核生物染色质隔离子
章波
刘昕
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
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职称材料
已选择
0
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