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染色质隔离子研究进展 被引量:5
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作者 章波 刘昕 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期551-555,共5页
染色质隔离子是真核生物染色质上的顺式调控元件,它将染色质隔离成不同的转录功能域,使其一侧的基因免受另一侧调控元件的影响。染色质隔离子发挥作用是通过与其相结合的蛋白质来实现,它能阻断增强子和沉默子的作用,并使插入在两个隔离... 染色质隔离子是真核生物染色质上的顺式调控元件,它将染色质隔离成不同的转录功能域,使其一侧的基因免受另一侧调控元件的影响。染色质隔离子发挥作用是通过与其相结合的蛋白质来实现,它能阻断增强子和沉默子的作用,并使插入在两个隔离子间的外源基因不受染色体位置效应影响。目前存在多种有关隔离子的作用机理的假说,比较成熟的是loop假说。随着研究的深入,染色质隔离子的应用也将受到更大的重视。 展开更多
关键词 染色质隔离子 增强子 沉默子 染色质边界元件
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一种真核生物染色质隔离子筛选方案的初步建立
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作者 章波 王燕 +2 位作者 许雪青 白云 杨晓亚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期1688-1691,共4页
目的探讨建立染色质隔离子的正负筛选工具的可行性。方法合成引物从鸡基因组cHS4区域扩增了1段特异的DNA,将PCR产物克隆到T-载体后测序,验证其对增强子的阻断功能;对pEGFP-N1载体进行一系列改造,评价其正负筛选效果。结果成功地获得已... 目的探讨建立染色质隔离子的正负筛选工具的可行性。方法合成引物从鸡基因组cHS4区域扩增了1段特异的DNA,将PCR产物克隆到T-载体后测序,验证其对增强子的阻断功能;对pEGFP-N1载体进行一系列改造,评价其正负筛选效果。结果成功地获得已知的隔离子片段,初步结果表明该片断能阻断增强子的转录激活作用。将TK基因作为负向筛选标记引入pEGFP-N1载体后获得了改造后的载体,转染COS-7细胞经过G418筛选10d后获得了稳定转染的细胞系,在不同浓度GCV药物作用下细胞杀伤效果有差异。结论正负筛选方法被成功地引入到筛选系统,为进一步进行染色质隔离子的筛选与利用奠定了基础。 展开更多
关键词 染色质隔离子 增强子 基因表达
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利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体
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作者 关亚群 赵学信 +1 位作者 焦谊 范江霖 《实用医学杂志》 CAS 2007年第23期3659-3662,共4页
目的:在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12(hMMP-12)转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法:首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,测序后获得pGEM-T-hMMP-12,然... 目的:在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12(hMMP-12)转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法:首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,测序后获得pGEM-T-hMMP-12,然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR,再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒,构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJC13-SR-hMMP-12,最后pJC13-SR-hMMP-12表达载体线性化,显微注射家兔受精卵制备转基因兔,并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果:(1)通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实,hMMP-12成功克隆到所需表达载体中;(2)转基因后获得仔兔36只,以PCR检测结果计算,转基因总效率为1.4%~3.4%,整合率为20%~50%;以Southern Blot检测结果计算,转基因总效率为0.5%~2.2%,整合率为13%~17%。结论:转基因表达载体的成功构建,为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶类 转基因 染色质隔离子
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真核生物染色质隔离子
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作者 章波 刘昕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期315-315,共1页
关键词 真核生物 染色质隔离子 基因表达 调控
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