多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2对黄瓜和番茄枯萎病的防治效果 被引量：70

1

作者 陈雪丽 王光华 +1 位作者 金剑 吕宝林 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 2008年第2期446-450,共5页

采用室内培养方法，对生防细菌多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2不同稀释倍数的代谢产物抑制黄瓜尖孢镰刀菌、番茄枯萎病菌分生孢子萌发和菌丝生长的试验结果表明，当两菌株代谢产物稀释5倍时，对分生孢子萌发的抑制率达到80％... 采用室内培养方法，对生防细菌多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2不同稀释倍数的代谢产物抑制黄瓜尖孢镰刀菌、番茄枯萎病菌分生孢子萌发和菌丝生长的试验结果表明，当两菌株代谢产物稀释5倍时，对分生孢子萌发的抑制率达到80％以上；两菌株代谢产物在稀释2倍和5倍时，对2种病原真菌菌丝生长的抑制率在40％-80％之间，与对照差异极显著（P〈0．01）。盆栽试验表明，BRF-1和BRF-2生防细菌菌悬液及其无菌代谢物对黄瓜和番茄枯萎病不仅具有较好的防治效果，而且具有明显的促进生长作用。 展开更多

关键词 多粘类芽孢杆菌brf-1 枯草芽孢杆菌brf-2 黄瓜枯萎病 番茄枯萎病 生物量 生物防治

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menD表达强度对枯草芽孢杆菌中维生素K2产量的影响

2

作者 黄俊宝 黄茜琳 +7 位作者 陈宇 高旭丽 罗雅妮 陶伟 郭明雨 刘永圆 吴晶 刘艳 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期32-40,共9页

维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS... 维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS168)为出发菌株,构建BS168-ΔmenD、BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株,使用HPLC检测菌株中MK的含量,使用western-blot检测蛋白质的表达强度,以确定menD在枯草芽孢杆菌中对于MK合成的作用。研究发现,BS168-ΔmenD菌株生长缓慢,无法很好的产生生物膜,在培养基中需要添加甲萘醌标准品细胞才能生长;BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株的生物膜和MK的含量与原始菌株都有较为显著的差异。静态发酵时,孔板中重组菌株BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD生物膜的形成量和褶皱程度相较于原始菌株得到较大的提升,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD重组菌株的生物膜形成量分别为原始菌株的1.36倍与1.59倍,同时,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD MK产量分别为原始菌株的1.64倍和1.87倍,BS168-P_(xylA)-menD的最大产量达39.27 mg/L。结果表明,作为枯草芽孢杆菌中MK合成途径的关键酶,menD的表达量是影响枯草芽孢杆菌中生物膜与MK形成的重要因素。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 维生素K2 启动子 表达强度 菌株选育

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PhrG-RapG-DegU群体感应调控枯草芽孢杆菌中甲萘醌-7的合成

3

作者 黄俊宝 黄茜琳 +7 位作者 陈宇 高旭丽 罗雅妮 陶伟 刘永圆 郭明雨 吴晶 刘艳 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第5期50-62,共13页

【目的】通过挖掘转录调控因子,研究了转录调控系统对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,B.subtilis)168中甲萘醌-7(MK-7)产量的影响。【方法】利用信号分子PhrG五肽、RapG蛋白质与转录调控因子DegU,在B.subtilis 168中成功构建了PhrG-Rap... 【目的】通过挖掘转录调控因子,研究了转录调控系统对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,B.subtilis)168中甲萘醌-7(MK-7)产量的影响。【方法】利用信号分子PhrG五肽、RapG蛋白质与转录调控因子DegU,在B.subtilis 168中成功构建了PhrG-RapG-DegU调控系统,用以微调关键基因的表达,使MK-7合成途径中关键基因的表达能够响应细胞密度变化。【结果】通过该系统,菌株BS06中MK-7的产量达到了102.47 mg/L。【结论】群体感应调控系统的微调能够有效提高B.subtilis 168中MK-7产量。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌168 PhrG-RapG-DegU 群体感应 维生素K2

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产奶香枯草芽孢杆菌的筛选及其在雪茄烟叶中的应用

4

作者 李天笑 张大元 +5 位作者 王跃 雷金山 曹源 许春平 张倩颖 李东亮 《轻工学报》 北大核心 2025年第2期90-99,共10页

为解决国产雪茄烟叶原料香气量不足、刺激感较强等问题,通过嗅香评价筛选烟草源特色产奶香菌株,利用显微特征和16S rDNA测序进行菌株鉴定,结合机制雪茄加香感官评价得分和菌液OD_(600)确定最优菌株培养条件,利用GC-MS分析确定发酵上清... 为解决国产雪茄烟叶原料香气量不足、刺激感较强等问题,通过嗅香评价筛选烟草源特色产奶香菌株,利用显微特征和16S rDNA测序进行菌株鉴定,结合机制雪茄加香感官评价得分和菌液OD_(600)确定最优菌株培养条件,利用GC-MS分析确定发酵上清液中的关键香味成分,并进行国产雪茄烟叶原料发酵增香应用研究。结果表明:筛选到1株产奶香细菌(F2A),经鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);该菌株适宜的培养时间为24 h、培养温度为32℃,培养基中碳源和无机盐为葡萄糖和氯化钙;菌株发酵上清液的主要奶香和甜香成分为2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮,且含量较高(7.58μg/mL);经枯草芽孢杆菌F2A发酵处理后的楚雪14中,香兰素、香豆素、6-乙基-5,6-二氢吡喃-2-酮、2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮等奶香和甜香成分含量均显著增加,奶香香韵及甜感提升明显,巨豆三烯酮、3-羟基-β-大马士革酮、新植二烯等成分含量增加,清香和花香气息增强;由发酵后的楚雪14制成的雪茄中,奶香和甜香香韵显著提升,刺激感降低。该研究首次发现枯草芽孢杆菌F2A能产生2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮等奶甜香香韵成分,可为国产雪茄烟叶品质提升提供新的途径和理论支持。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 奶香香韵 雪茄烟叶 2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮

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分泌表达柔嫩艾美耳球虫EtMIC2重组枯草芽孢杆菌的构建与抗体检测

5

作者 邓瑞鹏 龚海燕 +2 位作者 兰卓 陈兆国 王春仁 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第6期72-78,133,共8页

鸡球虫病是一种严重危害养鸡业生产的流行性肠道寄生原虫病,可造成严重的经济损失。目前,应用抗球虫药是防治球虫病的主要手段,但随着抗药性和环境污染等问题的出现,抗球虫疫苗的研究成为防控球虫病的热点。柔嫩艾美耳球虫是鸡球虫病的... 鸡球虫病是一种严重危害养鸡业生产的流行性肠道寄生原虫病,可造成严重的经济损失。目前,应用抗球虫药是防治球虫病的主要手段,但随着抗药性和环境污染等问题的出现,抗球虫疫苗的研究成为防控球虫病的热点。柔嫩艾美耳球虫是鸡球虫病的主要病原,因此,研究旨在通过芽孢杆菌表达系统,构建能够分泌表达柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2(Eimeria tenella isolate microneme protein 2,EtMIC2)重组枯草芽孢杆菌菌株,为研发新型鸡球虫疫苗奠定基础。首先,采用PCR及质谱分析方法鉴定食用性及饲用性菌株,然后从柔嫩艾美耳球虫基因组中扩增EtMIC2基因,通过无缝克隆技术将其克隆至pBE2-R质粒中,构建重组质粒pBE2-R-EtMIC2,并采用冰浴转化将重组质粒分别整合至两株枯草芽孢杆菌中,最后采用PCR、SDS-PAGE、Western blot进行鉴定。将重组菌株饲喂雏鸡,免疫7 d后初步检测抗体效价。结果表明:EtMIC2基因克隆成功,且成功整合于饲用性枯草芽孢杆菌基因组,目的蛋白正确表达,并分泌至胞外,将重组菌株饲喂给雏鸡后,血液中检测出EtMIC2抗体。研究成功构建了分泌表达柔嫩艾美耳球虫EtMIC2蛋白的重组枯草芽孢杆菌,且重组菌株能刺激动物产生抗体,可用于后续的抗球虫免疫保护性试验。 展开更多

关键词 柔嫩艾美耳球虫 枯草芽孢杆菌 EtMIC2 分泌表达 抗体检测

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枯草芽孢杆菌262XY2′菌剂对番茄枯萎病的预防效果及其对相关抗性生化指标的影响 被引量：2

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作者 敖远 杨成德 +4 位作者 郭庄园 崔凌霄 李柘柘 努尔夏提•努尔买买提 马婷 《生物安全学报（中英文）》 CSCD 北大核心 2024年第4期402-407,共6页

【目的】以番茄为供试作物,研究枯草芽孢杆菌262XY2′菌剂对番茄枯萎病的预防效果及其对番茄植株和根际土壤生化指标的影响,以期为菌剂在农业生产制备和生物安全应用中提供理论依据。【方法】设置不同固态菌剂添加量(分别占育苗基质质量... 【目的】以番茄为供试作物,研究枯草芽孢杆菌262XY2′菌剂对番茄枯萎病的预防效果及其对番茄植株和根际土壤生化指标的影响,以期为菌剂在农业生产制备和生物安全应用中提供理论依据。【方法】设置不同固态菌剂添加量(分别占育苗基质质量的0.5%、1.0%、2.0%、3.0%和4.0%)的试验处理组与不添加固态菌剂的对照组(CK)进行番茄育苗,番茄四叶一心后移栽至花盆进行盆栽试验,定植6周后按照病情程度分级法测定供试菌剂对盆栽番茄枯萎病的预防效果;并测定番茄植株过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性、几丁质酶活性和总巯基含量以及番茄根际土壤游离氨基酸含量、过氧化氢酶活性、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性和脲酶活性等生化指标。【结果】0.5%菌剂处理的番茄根际土壤中游离氨基酸含量比CK高44.325%,N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性比CK高108.848%,过氧化氢酶活性比CK高16.472%,均为最高值;1.0%菌剂处理对番茄枯萎病的预防效果最佳,为73.485%,1.0%菌剂处理的番茄植株过氧化氢酶活性比CK高55.742%,过氧化物酶活性比CK高47.404%,超氧化物歧化酶活性比CK高39.433%,几丁质酶活性比CK高209.989%、番茄根际土壤脲酶活性比CK高12.063%,均为最高值;总巯基含量则以2.0%菌剂处理最高,比CK高191.304%。【结论】总体上,0.5%、1.0%和2.0%菌剂处理均不同程度提高了番茄防御酶活性,改善了番茄根际土壤的生化性质,3.0%和4.0%菌剂处理对番茄及其根际土壤各项生化指标影响效果不明显,甚至产生抑制作用。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌262XY2′菌剂 番茄枯萎病 防御酶 根际土壤酶

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内生拮抗枯草芽孢杆菌BS-2菌株的发酵条件 被引量：49

7

作者 何红 沈兆昌 +3 位作者 邱思鑫 蔡学清 关雄 胡方平 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2004年第1期38-41,共4页

内生拮抗细菌BS 2菌株在以黄豆粉为原料的 3号培养基中生长速度快 ,发酵滤液对辣椒炭疽病菌的抑制作用强 ,菌液对辣椒果炭疽病的防效最好。培养基初始 pH值、培养时间、温度、通气量等对菌株生长及其抗菌物质的分泌有明显影响。结果表... 内生拮抗细菌BS 2菌株在以黄豆粉为原料的 3号培养基中生长速度快 ,发酵滤液对辣椒炭疽病菌的抑制作用强 ,菌液对辣椒果炭疽病的防效最好。培养基初始 pH值、培养时间、温度、通气量等对菌株生长及其抗菌物质的分泌有明显影响。结果表明 ,以黄豆粉培养基、初始 pH值 6 .7(灭菌后 )、2 8℃、培养 4 8h、并尽量增大培养通气量 ,为菌株的最佳发酵条件。 展开更多

关键词 内生细菌 枯草芽孢杆菌 发酵 炭疽病 生物防治 BS-2菌株 培养基

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枯草芽孢杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能的影响研究 被引量：9

8

作者 崔志文 黄琴 +3 位作者 黄怡 吴红照 文静 李卫芬 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期293-298,共6页

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。将Caco-2细胞分为4组,对照Ⅰ(空白对照组,0μmol/L H2O2)和对照Ⅱ(氧化应激组,100μmol/L H2O2),处理Ⅰ和处理Ⅱ分别在对照Ⅱ条件下添加枯草芽孢杆菌B1和B10(... 本试验旨在研究枯草芽孢杆菌对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。将Caco-2细胞分为4组,对照Ⅰ(空白对照组,0μmol/L H2O2)和对照Ⅱ(氧化应激组,100μmol/L H2O2),处理Ⅰ和处理Ⅱ分别在对照Ⅱ条件下添加枯草芽孢杆菌B1和B10(终浓度为0.3×108CFU/mL),分别于12、48h测定氧化应激状态下Caco-2细胞上清液和裂解液的抗氧化活性。结果表明:与空白对照组和氧化应激组相比,添加2株枯草芽孢杆菌均极显著提高了Caco-2细胞培养上清液12、48 h时的总抗氧化能力(P<0.01)。其中,菌株B1可显著提高上清液中抗超氧阴离子(O2-)(P<0.01)、超氧化物歧化酶(SOD)(P<0.01)和过氧化氢酶(CAT)(P<0.01)以及48h的过氧化物酶(POD)活性(P<0.01),而菌株B10除提高了Caco-2细胞上清液中抗O2-、SOD和CAT活性(P<0.01)外,还提高了细胞抑制羟自由基(.OH)能力(P<0.01)和POD活性(P<0.01或P<0.05);添加枯草芽孢杆菌组细胞上清液中12 h时的乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量与氧化应激组相比差异不显著(P>0.05),48 h时则均极显著降低(P<0.01)。细胞培养12 h时,氧化应激组细胞裂解液中SOD活性和GSH含量比空白对照组低(P<0.05)而POD活性高(P<0.01),48h时结果与之相反,此时添加枯草芽孢杆菌组均极显著提高了细胞裂解液中POD的活性(P<0.01)。结果提示,2株枯草芽孢杆菌均提高了氧化应激状态下细胞的抗氧化功能。 展开更多

关键词 CACO-2细胞 枯草芽孢杆菌 抗氧化活性 氧化应激 作用机制

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高压CO_2处理对枯草芽孢杆菌芽孢杀灭及协同作用的影响 被引量：5

9

作者 高媛 周先汉 +2 位作者 曾庆梅 范伟 孙潇雅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期64-68,共5页

选用枯草芽孢杆菌为研究对象,以磷酸盐缓冲液为基质,研究高压(5～25MPa)CO2协同热处理对其芽孢杀灭作用的影响。结果表明:20MPa高压CO2处理前在45℃预热处理30min时枯草芽孢杆菌芽孢的失活率达到了3.84个数量级,单纯20MPa高压CO2处理30... 选用枯草芽孢杆菌为研究对象,以磷酸盐缓冲液为基质,研究高压(5～25MPa)CO2协同热处理对其芽孢杀灭作用的影响。结果表明:20MPa高压CO2处理前在45℃预热处理30min时枯草芽孢杆菌芽孢的失活率达到了3.84个数量级,单纯20MPa高压CO2处理30min时枯草芽孢杆菌芽孢的失活率达到2.44个数量级。采用连续式和间歇式两种不同的施压方式考查其对枯草芽孢杆菌芽孢的灭活及萌发影响,结果表明:10MPa、50℃连续30min高压CO2处理对枯草芽孢杆菌芽孢的杀灭使其数量下降了0.67个数量级,间歇施压(低压10MPa施压10min,高压30MPa施压10min)循环1次时枯草芽孢杆菌芽孢的失活率达到2.55个数量级。选择添加3种组合的营养发芽诱导因子考察在不同的压力条件下(10MPa 30℃、10MPa 50℃、30MPa 30℃、30MPa 50℃)与高压CO2处理相结合对芽孢发芽的影响。结果表明:添加的营养发芽诱导因子在低压(10MPa)时的诱导作用不如高压(30MPa)时明显。 展开更多

关键词 高压CO2 枯草芽孢杆菌芽孢 萌发 杀灭

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枯草芽孢杆菌对Cu^(2+)的吸附及菌体表面基团分析 被引量：7

10

作者 赵颖 王仁国 +3 位作者 陈沿利 郑飞 张云松 赵茂俊 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期72-77,81,共7页

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为生物吸附剂,讨论了其对Cu2+的生物吸附规律,并通过酸碱滴定这一表面分析手段,结合相关软件及傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析了菌体表面主要的基团种类及数量。结果表明,枯草芽孢杆菌对Cu2+吸附的最... 以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为生物吸附剂,讨论了其对Cu2+的生物吸附规律,并通过酸碱滴定这一表面分析手段,结合相关软件及傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析了菌体表面主要的基团种类及数量。结果表明,枯草芽孢杆菌对Cu2+吸附的最佳条件是:pH为6、吸附时间为24h,菌悬液用量和Cu2+初始浓度根据实际情况加以选择,以期达到最佳处理效果并兼顾经济成本;菌体对Cu2+的吸附过程较好地符合Langmuir吸附模型,在设定条件(室温(25℃)、溶液pH为6、吸附时间为24h、Cu2+初始质量浓度为34.52mg/L、菌悬液用量为1.5mL)下,Cu2+的饱和吸附量可达到17.056mg/g;菌体表面带有—COOH、C=O、—OH、—NH、—CONH—、P—O—C等基团,且在酸碱滴定操作过程中,没有掩蔽菌体表面的某种基团,也没有发生细胞溶解而导致基团种类增加;增强溶液酸性可导致菌体表面官能团的质子化效应增加,导致H+与Cu2+竞争官能团,这正是酸度较高不利于菌体与Cu2+结合的原因之一。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 CU2+ 生物吸附 定量分析 酸碱滴定 红外光谱

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氮源对重组枯草芽孢杆菌24/pMX45核黄素发酵的影响 被引量：7

11

作者 李建国 班睿 +1 位作者 司马迎春 赵学明 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第2期180-183,187,共5页

考察了无机氮源NH4 Cl和不同有机氮源对重组枯草芽孢杆菌 2 4 / pMX4 5核黄素发酵的影响 .实验结果表明 ,NH4 Cl作为基础氮源对菌体生长和核黄素合成均有抑制作用 .采用不同有机氮源进行核黄素发酵 ,以酵母粉为氮源时发酵单位最高 ,而... 考察了无机氮源NH4 Cl和不同有机氮源对重组枯草芽孢杆菌 2 4 / pMX4 5核黄素发酵的影响 .实验结果表明 ,NH4 Cl作为基础氮源对菌体生长和核黄素合成均有抑制作用 .采用不同有机氮源进行核黄素发酵 ,以酵母粉为氮源时发酵单位最高 ,而蛋白胨为氮源时核黄素发酵单位最低 . 展开更多

关键词 核黄素 枯草芽孢杆菌 氮源 维生素B2 发酵生产 基因工程 基因重组

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内生枯草芽孢杆菌BS-2防治荔枝霜疫病及其生化机理 被引量：8

12

作者 蔡学清 胡方平 +2 位作者 陈炜 林娜 林建强 《热带作物学报》 CSCD 2010年第2期241-247,共7页

研究内生枯草芽孢杆菌BS-2(Bacillus subtilis)菌株对荔枝采后果实霜疫病的防治效果,及其对体内活性氧代谢(SOD、POD、CAT、MDA、超氧阴离子自由基的产生速率)和病程相关蛋白(β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性)等的影响。结果表明,BS-... 研究内生枯草芽孢杆菌BS-2(Bacillus subtilis)菌株对荔枝采后果实霜疫病的防治效果,及其对体内活性氧代谢(SOD、POD、CAT、MDA、超氧阴离子自由基的产生速率)和病程相关蛋白(β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性)等的影响。结果表明,BS-2菌株对荔枝霜疫病具有较好的防治效果,接种处理后6d,其防治效果为37.83%;经内生细菌处理的荔枝果皮的β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性、CAT和SOD酶活性均比病菌处理的高,而POD、PPO酶活性以及膜透性、MDA含量与超氧阴离子自由基的产生速率却比病菌处理的低。当接种后6d,经内生细菌处理的荔枝果皮的β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性和SOD酶活性分别比病菌处理的高70.73%、30.76%和297.43%;而POD、PPO酶活性和超氧阴离子自由基的产生速率却分别比病菌处理的低15.11%、4.96%和28.95%。 展开更多

关键词 内生枯草芽孢杆菌BS-2 防治效果 防病机制 荔枝霜疫病

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枯草芽孢杆菌B_2发酵工艺及其质量检测方法研究 被引量：3

13

作者 荆卓琼 李美丽 +2 位作者 陈秀蓉 杨成德 薛莉 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期121-126,142,共7页

研究了枯草芽孢杆菌B2从种子发酵液到发酵罐的放大培养,通过正交优化试验筛选枯草芽孢杆菌B2发酵的优化组合、种子罐和发酵罐的发酵时间及发酵液的质量检测方法.结果表明:枯草芽孢杆菌B2的最佳发酵组合为接种量10%,pH 7.5,通气量1 000 L... 研究了枯草芽孢杆菌B2从种子发酵液到发酵罐的放大培养,通过正交优化试验筛选枯草芽孢杆菌B2发酵的优化组合、种子罐和发酵罐的发酵时间及发酵液的质量检测方法.结果表明:枯草芽孢杆菌B2的最佳发酵组合为接种量10%,pH 7.5,通气量1 000 L.h-1,转速200 r.min-1;种子罐的发酵时间为20 h;发酵罐最适放罐时间为36 h.发酵液质量检测以活菌量为主要指标,辅助比浊法检测. 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌B2 发酵工艺 正交试验 检测方法

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枯草芽孢杆菌拮抗病原菌黏附和入侵Caco-2细胞的研究 被引量：4

14

作者 叶小兰 李鹏成 杨倩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期81-84,共4页

为探讨枯草芽孢杆菌及其培养上清液对产肠毒素大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抗黏附作用,本试验将产肠毒素大肠杆菌K88或鼠伤寒沙门氏菌SL1344与枯草芽孢杆菌及其培养上清液先后加到Caco-2细胞上,用活菌计数的方法观察产肠毒素大肠杆菌、... 为探讨枯草芽孢杆菌及其培养上清液对产肠毒素大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抗黏附作用,本试验将产肠毒素大肠杆菌K88或鼠伤寒沙门氏菌SL1344与枯草芽孢杆菌及其培养上清液先后加到Caco-2细胞上,用活菌计数的方法观察产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及枯草芽孢杆菌黏附Caco-2细胞的情况。结果显示:在排斥、竞争和置换试验中,枯草芽孢杆菌菌体均能够明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344的内化,在竞争试验时K88的黏附减少了71.2%、SL1344的黏附及内化减少了92.9%,但枯草芽孢杆菌的培养上清液只有在竞争试验中才能明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344内化。提示:枯草芽孢杆菌通过与病原菌竞争黏附位点来抑制病原菌对Caco-2细胞的黏附和入侵。 展开更多

关键词 病原菌 枯草芽孢杆菌 培养上清液 CACO-2细胞 黏附 入侵

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枯草芽孢杆菌B_2种子液发酵条件的研究 被引量：3

15

作者 闫沛迎 陈秀蓉 +1 位作者 薛莉 杨成德 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第2期110-113,共4页

采用单因子、双因子及正交试验,对枯草芽孢杆菌B2的培养液组成(碳源、氮源、酵母膏、pH值)及培养条件(装液量与转速)进行了研究,结果表明:以葡萄糖1%,牛肉胨0.8%,酵母膏0.5%及pH 8制成的培养液,装液量100 mL/250 mL锥形瓶,转速140 r/min... 采用单因子、双因子及正交试验,对枯草芽孢杆菌B2的培养液组成(碳源、氮源、酵母膏、pH值)及培养条件(装液量与转速)进行了研究,结果表明:以葡萄糖1%,牛肉胨0.8%,酵母膏0.5%及pH 8制成的培养液,装液量100 mL/250 mL锥形瓶,转速140 r/min,培养B236 h为最佳培养条件,在此条件下,活菌数可达2.97×1010cfu/mL,分别是D培养液和NB培养液的2.05倍和52.36倍. 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌B2 培养基组成 培养条件 优化

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高压CO_2对枯草芽孢杆菌杀菌模型及其优化

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作者 高媛 周先汉 +2 位作者 曾庆梅 吴克平 邹旭鹏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期77-80,90,共5页

以枯草芽孢杆菌为主要研究对象,杀灭对数值为衡量高压CO2杀菌效果的指标。在单因素实验基础上,选取压力、温度和保压时间为自变量,杀灭对数值为响应值。通过响应面方法中的Box-Behnken模式,研究各自变量及其交互作用对杀灭对数值的影响... 以枯草芽孢杆菌为主要研究对象,杀灭对数值为衡量高压CO2杀菌效果的指标。在单因素实验基础上,选取压力、温度和保压时间为自变量,杀灭对数值为响应值。通过响应面方法中的Box-Behnken模式,研究各自变量及其交互作用对杀灭对数值的影响,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。确定最佳条件为压力30MPa,温度48℃,时间90min,实际测得的枯草芽孢杆菌杀灭对数值为5.22,与模型预测值5.44相比,实验平均相对误差为2.32%;采用响应曲面优化法建立的回归模型准确可行,优化得到的工艺参数可以应用。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 高压CO2 响应曲面法

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枯草芽孢杆菌B2-GFP菌株的构建及其在土壤中的定殖 被引量：4

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作者 雷晶晶 康业斌 +2 位作者 苗圃 马君红 石秋环 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2022年第5期577-582,共6页

采用质粒消除与热激法构建枯草芽孢杆菌工程菌株B2-GFP,并测定其生长曲线、稳定性及对烟草疫霉的抑制率;同时,采用灌根和稀释平板法测定该菌株在烟株土壤中的活菌数.结果表明:工程菌株B2-GFP较野生型菌株B2提前1 h进入指数增长期,在培养... 采用质粒消除与热激法构建枯草芽孢杆菌工程菌株B2-GFP,并测定其生长曲线、稳定性及对烟草疫霉的抑制率;同时,采用灌根和稀释平板法测定该菌株在烟株土壤中的活菌数.结果表明:工程菌株B2-GFP较野生型菌株B2提前1 h进入指数增长期,在培养11 h后同时进入稳定生长期;B2-GFP与烟草疫霉对峙培养后抑菌率达48.30%;在不含卡那霉素的LB固体培养基中继代培养10代后,在荧光显微镜下,菌落及菌体仍具有较强绿色荧光.烟株根际土壤活菌数大于根围土壤活菌数,且均呈现先升后降再趋于稳定的规律.在灭菌土壤中接种工程菌株B2-GFP第14天,烟株根际土壤活菌数达1.61×10^(7) CFU·g^(-1);在自然土壤中接种该菌第42天,烟株根际土壤活菌数达1.46×10^(7) CFU·g^(-1);接种第70天仍能保持绿色荧光表型.本研究证实工程菌株B2-GFP在烟田土壤中能够定殖并保持其特性. 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌B2 绿色荧光蛋白 定殖 烟草 烟草疫霉

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犬细小病毒VP2基因在枯草芽孢杆菌中的表达及鉴定 被引量：3

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作者 李爽 黄文斌 +1 位作者 黄爱玲 吕暾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期171-174,共4页

从犬细小病毒/犬瘟热二联苗中提取CPV基因组,根据GenBank发表的CPV-VP2基因序列设计一对引物,对VP2基因进行PCR扩增,并克隆至TA Cloning Kit Dual Promoter(pCRⅡ),获得克隆载体pCR-VP2。将重组质粒亚克隆到枯草芽孢杆菌表达载体pHT43上... 从犬细小病毒/犬瘟热二联苗中提取CPV基因组,根据GenBank发表的CPV-VP2基因序列设计一对引物,对VP2基因进行PCR扩增,并克隆至TA Cloning Kit Dual Promoter(pCRⅡ),获得克隆载体pCR-VP2。将重组质粒亚克隆到枯草芽孢杆菌表达载体pHT43上,获得重组表达载体pHT43-VP2。经双酶切鉴定及序列比对分析后,将pHT43-VP2载体转化入枯草芽孢杆菌WB600中进行诱导表达,产物使用PAGE胶蛋白回收法纯化。结果表明,在69 kD处存在目的蛋白,ELISA检测发现,纯化后的目的蛋白与阳性血清存在特异性反应。 展开更多

关键词 犬细小病毒 VP2蛋白 枯草芽孢杆菌

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枯草芽孢杆菌对轮状病毒感染IPEC-J2细胞相关TLRs mRNA表达的影响 被引量：1

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作者 夏璐 张萍 +5 位作者 王莹莹 尹鑫 魏萍 田宗民 刘冠群 赵毅博 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期114-118,共5页

为研究枯草芽孢杆菌(B.subtilis)是否通过激活猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中Toll样受体(TLRs)的表达抑制轮状病毒(RV)的复制,本研究采用RV感染灭活B.subtilis预处理的IPEC-J2细胞,鉴定B.subtilis对RV在细胞中增殖的抑制作用,并检测不同时间... 为研究枯草芽孢杆菌(B.subtilis)是否通过激活猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中Toll样受体(TLRs)的表达抑制轮状病毒(RV)的复制,本研究采用RV感染灭活B.subtilis预处理的IPEC-J2细胞,鉴定B.subtilis对RV在细胞中增殖的抑制作用,并检测不同时间点RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞中相关TLRs的表达。结果显示,RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞24 h后,与未处理细胞相比,其病毒的增殖能力显著被抑制。通过荧光定量PCR检测不同处理组细胞TLRs m RNA的表达水平,结果表明RV感染B.subtilis预处理IPEC-J2细胞在感染早期(1 h和3 h)与其他组相比,TLR2、TLR3、TLR9 m RNA表达均显著增加。本研究表明,灭活的B.subtilis能够抑制RV在IPEC-J2细胞中的增殖,并在病毒感染初期显著提高细胞TLRs m RNA表达,推测可能与调节宿主细胞的先天免疫反应有关。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 猪轮状病毒 IPEC-J2细胞 TLRS

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枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1、B2菌株对当归、黄芪的防病促进生长效果 被引量：29

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作者 辛中尧 徐红霞 陈秀蓉 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期142-144,共3页

对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1、B2菌株在当归、黄芪上的防病促生效果进行了田间试验研究。结果表明:B1、B2对当归、黄芪根腐病具有较好的防治作用。B1对当归、黄芪根腐病的防治效果分别为39.13%、41.48%,B2为41.30%和48.16%,B2... 对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1、B2菌株在当归、黄芪上的防病促生效果进行了田间试验研究。结果表明:B1、B2对当归、黄芪根腐病具有较好的防治作用。B1对当归、黄芪根腐病的防治效果分别为39.13%、41.48%,B2为41.30%和48.16%,B2防治效果与化学农药无显著性差异;同时,B1、B2对当归、黄芪具有促生增产作用,B1增产率分别为7.74%、12.5%;B2分别为17.2%、16.25%。且B1、B2均可提高当归和黄芪的品质。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌B1 B2菌株 当归 黄苠 防病促生 效果

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