应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素 被引量：2

1

作者 肖蕴祺 汪劲能 +1 位作者 邱良祝 施寿荣 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期116-122,共7页

实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进... 实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB_(1)荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB_(1)-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB_(1)-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB_(1)1 mg/kg)、2.86%(FB_(1)15 mg/kg)、4.88%(FB_(1)50 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB_(1)添加回收率为98.33%~102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB_(1)-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB_(1)含量的快速定量检测。 展开更多

关键词 伏马毒素 时间分辨荧光免疫层析法 玉米 定量快检

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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量：13

2

作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多

关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析法 铕 测定 血清 临床分析 CTTA SAM

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纳米均相时间分辨荧光免疫法检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇方法的建立 被引量：11

3

作者 周彬 高雷 +3 位作者 金坚 陈蕴 黄飚 赵卫国 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期338-342,共5页

目的:利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)多克隆抗体,采用纳米均相时间分辨荧光免疫法测定技术(AlphaLISA)建立间接竞争DON定量检测方法。方法:DON-BSA包被发光微粒,生物素化羊抗兔抗体与包被有链霉素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测... 目的:利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)多克隆抗体,采用纳米均相时间分辨荧光免疫法测定技术(AlphaLISA)建立间接竞争DON定量检测方法。方法:DON-BSA包被发光微粒,生物素化羊抗兔抗体与包被有链霉素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果:该方法的灵敏度为0.007ng/mL,检测范围为0.007～100ng/mL,批内批间变异系数均<5%。不同样品添加回收实验:玉米、小麦、啤酒回收率分别为84%～110%、67%～100%、74%～100%。结论:DON-AlphaLISA是目前DON检测中最灵敏的方法之一,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 脱氧雪腐镰刀烯醇 生物毒素 纳米均相时间分辨荧光免疫法(AlphaLISA)

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时间分辨免疫荧光法测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分 被引量：2

4

作者 吉坤美 李就鸿 +2 位作者 李盟 吴序栎 刘志刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期323-326,共4页

目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏... 目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏原总蛋白抗体、Eu3+标记的链酶亲和素和以β-二酮体为主的增强液等试剂,建立双抗夹心TRFIA方法,用于检测10种食品中是否含有鸡蛋蛋白成分。结果:鸡蛋总蛋白SDS-PAGE显示带大致有10条,其中主要条带有4条,分子量分别为71、55、38、14kDa;成功地研制出双抗体夹心TRFIA法检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为0·625ng/mL,标准曲线在12·5～640ng/mL范围内线性良好;8种食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果均呈现阳性。结论:初步建立了检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分的双抗体夹心TRFIA,具有较好的特异性和灵敏度;该方法对于未标注鸡蛋过敏原成分的食品检测具有一定的实际应用价值。 展开更多

关键词 时间分辨免疫荧光法 鸡蛋过敏原 多克隆抗体 食物过敏

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氯霉素的直接竞争时间分辨荧光免疫检测法 被引量：1

5

作者 张艺 黄飚 +4 位作者 王柯 张珏 朱岚 马智鸿 周彬 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第27期12912-12914,共3页

[目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ... [目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ng/ml,用于牛奶样品检测的添加回收率为89.6%,批内和批间变异系数分别为5.5%和10.1%,与甲砜霉素的交叉反应率<0.01%。[结论]CAP TRFIA直接竞争法灵敏度高、特异性好、性能稳定,适于高通量筛查,有良好的应用前景。 展开更多

关键词 氯霉素 时间分辨荧光免疫分析法 牛奶 链霉亲和素

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化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析 被引量：10

6

作者 符小玉 邬飞源 +4 位作者 陈钢 谢艳玲 邓国华 甘绍军 谭德明 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期258-262,共5页

目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIF... 目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 乙型肝炎表面抗原 HBSAG 肝炎病毒 乙型 雅培全自动化学发光免疫分析法 时间分辨免疫荧光法 相关性

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时间分辨免疫荧光法定量检测血清HBeAg／HBeAb的可行性分析 被引量：1

7

作者 符小玉 邬飞源 +4 位作者 陈钢 谢艳玲 邓国华 甘绍军 傅蕾 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期852-855,共4页

目的:探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法:157份来自... 目的:探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法:157份来自中南大学湘雅医院感染病科门诊的HBV感染患者的血清标本,分别用CMIA和TRIFA两种方法进行HBeAg定量及HBeAg/HBeAb定性检测,并对结果进行对比分析。结果:两种方法定量检测HBeAg的直线回归方程为:Y=0.72779X–4.0551(r=0.712,P<0.001)。与CMIA比较,TRIFA检测HBeAg定性结果的灵敏度和特异性分别为89.89%和100%,两种方法诊断HBeAg符合率为94.27%。TRIFA检测HBeAb定性结果的灵敏度和特异性分别为100%和95.45%,两种方法诊断HBeAb的符合率为97.45%。结论:TRIFA在HBeAg/HBeAb定量检测上的准确性、灵敏度和特异性与CMIA基本相当,二者HBeAg/HBeAb诊断符合率高。 展开更多

关键词 乙型肝炎 HBeAg/HBeAb 全自动化学发光免疫分析法 时间分辨免疫荧光法

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百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立及应用

8

作者 马强 林冠峰 +2 位作者 邹丽萍 李明 吴英松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1509-1512,共4页

目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交... 目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交叉反应,并初步可应用于百日咳疫苗中免疫原的监测。结论自制百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法能够较为可靠的监控百日咳疫苗质量。 展开更多

关键词 百日咳 S1亚基 时间分辨免疫荧光分析法

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血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

9

作者 彭建柳 温莺芬 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1310-1311,共2页

目的建立血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法。方法采用双抗体夹心一步法建立游离β-HCG试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的可测范围为3～200ng/mL,灵敏度为0.12ng/mL,CV分别为4.23%和5.73%,与hLH、hFSH、hTSH的交... 目的建立血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法。方法采用双抗体夹心一步法建立游离β-HCG试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的可测范围为3～200ng/mL,灵敏度为0.12ng/mL,CV分别为4.23%和5.73%,与hLH、hFSH、hTSH的交叉反应低,与2000U/L的hCG的交叉反应结果小于100ng/ml。51份血样用本试剂盒与国外同类试剂同时检测,其相关系数为0.95。结论时间分辨荧光免疫分析法是目前血清游离β-HCG检测中最灵敏的方法,该分析法稳定性好,具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 游离Β-HCG 时间分辨荧光免疫分析法

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时间分辨荧光免疫层析法检测酥油中黄曲霉毒素M1的研究 被引量：1

10

作者 魏娜 张飞龙 《西藏农业科技》 2019年第4期37-39,共3页

为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便... 为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便快速、灵敏度高、重现性好等特点,可用于酥油中黄曲霉毒素M1的快速检测。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫层析法 黄曲霉毒素M1 酥油 快速检测

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非洲猪瘟病毒抗体时间分辨免疫荧光方法的建立及初步应用 被引量：8

11

作者 陈翠翠 钟树海 +3 位作者 赖宏锐 梁焕坤 郭桂玲 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期284-288,319,共6页

为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的时间分辨荧光免疫法(TRFIA),本研究将原核表达的ASFV重组P54蛋白(rP54)包被酶联板,并将Eu^(3+)标记rP54蛋白,经各反应条件的优化建立了双抗原夹心TRFIA。并确定该方法的cut-off值,绘制其标准曲线。... 为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的时间分辨荧光免疫法(TRFIA),本研究将原核表达的ASFV重组P54蛋白(rP54)包被酶联板,并将Eu^(3+)标记rP54蛋白,经各反应条件的优化建立了双抗原夹心TRFIA。并确定该方法的cut-off值,绘制其标准曲线。结果显示,rP54最佳包被浓度为4μg/mL,100μL/孔;用150μL Eu^(3+)标记试剂标记1 mg抗原;反应体系为30μL标准品(即不同浓度的ASFV P54蛋白MAb)或待测样品+200μL/孔Eu^(3+)标记抗原+200μL/孔增强液。利用该方法检测100份健康猪血清样品得出该方法的cut off值为2.52 ng/mL。建立的标准曲线结果显示,ASFV P54抗体的线性范围为0.1 ng/mL~1000 ng/mL,R^(2)=0.9930,表明该检测方法具有良好的剂量-反应效应。通过特异性、敏感性、重复性、稳定性试验评估了该方法的检测性能。将23份疑似ASF患病猪和20份健康猪口鼻咽拭子/血清样品同时采用本TRFIA、PCR法及ELISA方法检测,分别计算配对卡方检验(McNemar test)P值和一致性检验(Kappa test)的Kappa值,分析它们之间的一致性。采用该方法检测P54 MAb标准品与其他常见猪病毒阳性血清,结果显示除了P54 MAb标准品检测为阳性结果外,其余均为阴性结果,无明显交叉反应,特异性较强;通过标准曲线方程得出该方法对ASFV P54抗体的检测下限为0.067 ng/mL,敏感性较高;重复性试验结果显示,该方法批内变异系数小于10%,回收率在95.80%~105.62%;批间变异系数小于15%,回收率在92.50%~108.97%。组装的TRFIA试剂盒在37℃可以稳定保存7 d。对23份疑似ASF患病猪和20份健康猪口鼻咽拭子/血清样品检测,结果显示,TRFIA和PCR法同时检测出4份ASFV阳性样品,其余均为阴性样品,该方法与常规PCR法检测结果的McNemar test P值为1.00,Kappa值为1.00,提示TRFIA法与PCR法检测结果的一致性较高(符合率100%),准确性高于ELISA法。本研究首次建立了基于ASFV P54抗体的双抗原夹心TRFIA,且其具有定量、准确、特异性强、敏感性高等优点,为ASF的快速、精准检测提供新的技术手段。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 抗体检测 双抗原夹心 时间分辨荧光免疫法

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时间分辨荧光免疫层析法定量检测稻谷中的镉 被引量：3

12

作者 张海涛 祁苏娴 +2 位作者 董曼佳 陆廷瑾 杨婷婷 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期170-173,共4页

本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL... 本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL,标准曲线线性范围为0.1~5.0 ng/mL,检出限和定量限分别为0.026 mg/kg和0.064 mg/kg,对有证标准物质的正确度在81.0%~91.7%,对实际样本的检测与ICP-MS检测结果一致性较高。该法重复性较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位大量样本的快速初步筛查。 展开更多

关键词 镉 稻谷 时间分辨荧光免疫层析法 快速定量检测

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应用时间分辨法检测石蜡包埋子宫颈组织p16^(INK4a)蛋白

13

作者 丁莉 邹先进 +2 位作者 范婉婷 郑杰 陈琼 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期17-21,共5页

目的探讨时间荧光分辨法(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)检测子宫颈组织中p16^(INK4a)蛋白的表达。方法选取子宫颈组织病理学小活检标本126例,采用免疫组化EnVision两步法及TRFIA法检测石蜡包埋组织中p16^(INK4a)蛋白。结果12... 目的探讨时间荧光分辨法(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)检测子宫颈组织中p16^(INK4a)蛋白的表达。方法选取子宫颈组织病理学小活检标本126例,采用免疫组化EnVision两步法及TRFIA法检测石蜡包埋组织中p16^(INK4a)蛋白。结果126例标本中,未见上皮内病变细胞及恶性细胞20例、低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)24例、高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL)53例、子宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)29例。免疫组化检测未见上皮内病变细胞及恶性细胞组、LSIL组、HSIL组、SCC组中p16^(INK4a)蛋白阳性病例分别为1、19、53、28例,TRFIA检测p16^(INK4a)蛋白阳性病例分别为3、17、50、27例。LSIL、HSIL及SCC组中,TRFIA检测p16^(INK4a)蛋白阳性的病例经免疫组化结果均为阳性。TRFIA检测p16^(INK4a)蛋白在未见上皮内病变细胞及恶性细胞组、LSIL、HSIL及SCC组的阳性率分别为15.00%、70.83%、93.90%,差异有显著性(P<0.01)。结论 TRFIA适合于检测p16^(INK4a)蛋白,且对检测条件要求低,有利于临床工作中不同机构大规模检测。 展开更多

关键词 子宫颈组织 P16^INK4A 免疫组织化学 时间荧光分辨法

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时间分辨荧光免疫法检测环境中四溴双酚A衍生物(TBBPA DHEE) 被引量：1

14

作者 黄梦璐 张祯 吴向阳 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2124-2130,共7页

本研究利用前期制备的四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚(TBBPA DHEE)的多克隆抗体,构建了一种高灵敏的时间分辨荧光免疫分析法,用于检测环境中的四溴双酚A衍生物TBBPA DHEE.为提高分析方法的灵敏度,本研究对反应体系中有机溶剂(甲醇)、离子强... 本研究利用前期制备的四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚(TBBPA DHEE)的多克隆抗体,构建了一种高灵敏的时间分辨荧光免疫分析法,用于检测环境中的四溴双酚A衍生物TBBPA DHEE.为提高分析方法的灵敏度,本研究对反应体系中有机溶剂(甲醇)、离子强度及缓冲体系p H等参数进行了优化.在最适条件下,本方法的最低检测限(LOD,基于F/F_0=90%)与IC_(50)分别为0.27 ng·m L^(-1)及4.3 ng·m L^(-1).该方法具有较高的准确度(水样加标回收率为96%—120%;土样及生物加标回收率为75%—90%).利用该方法对江苏省苏州某地区的环境样品进行了调查:在采集的56个样本中,13个样本检出了这种污染物.检出浓度为:水样0.5—2.7 ng·m L^(-1)、土样0.6—1.6 ng·g^(-1),干重、生物样2.9—4.6 ng·g^(-1),湿重.本研究为首次针对环境中TBBPA DHEE污染状况的系统性分析. 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫法 多克隆抗体 四溴双酚A衍生物 四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚 环境污染调查

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胃蛋白酶原双标记时间分辨荧光免疫分析及其初步临床应用 被引量：11

15

作者 张珏 黄飚 +4 位作者 朱岚 张艺 刘海燕 马智鸿 郭力宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第4期471-476,共6页

采用钐(Sm3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体(PGⅠ)及铕(Eu3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体(PGⅡ),建立了双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),同时检测人血清PGⅠ和PGⅡ.将抗PGⅠ单克隆抗体8003#、抗PGⅡ单克隆抗体8101#以一定比例共... 采用钐(Sm3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体(PGⅠ)及铕(Eu3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体(PGⅡ),建立了双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),同时检测人血清PGⅠ和PGⅡ.将抗PGⅠ单克隆抗体8003#、抗PGⅡ单克隆抗体8101#以一定比例共包被于96孔微孔板上,用Sm3+标记抗PGⅠ单抗8016#、Eu3+标记抗PGⅡ单抗8102#,采用双抗体夹心法建立PGⅠ/PGⅡ的双标记TRFIA.标准曲线由TRFIA检测仪自带的Log-LogB函数处理.PGⅠ可测范围为0.2～300μg/L,批内和批间变异系数(CV%)分别为5.2%和8.1%,平均回收率为96.9%;PGⅡ可测范围为0.05～55μg/L,批内和批间变异系数(CV%)分别为7.1%和11.7%,平均回收率为103.7%;双标记PGⅠ/PGⅡ-TRFIA与PGⅠ-ELISA法、PGⅡ-ELISA法的测定结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.9426和0.9396.检测300例健康人员的PGⅠ为(157.3±51.0)μg/L,PGⅡ为(10.6±5.9)μg/L,PGⅠ/PGⅡ比值为(14.8±4.3)μg/L.PGⅠ的正常参考值范围在55.3～259.3μg/L之间,PGⅡ正常参考值为<23μg/L,PGⅠ/PGⅡ>6.双标记PGⅠ/PGⅡ-TRFIA方法的研究在国内外尚未见报道,是一种灵敏、简便、快速、经济并可用于大批量样品筛查的方法,有利于各种胃病的大规模普查筛选及患者病程监测. 展开更多

关键词 胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ 双标记 时间分辨荧光免疫分析法

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基于稀土铕离子配合物的时间分辨荧光pH探针的合成及应用

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作者 黄大伟 邴永鑫 +2 位作者 洪伟 崔恺 虢清伟 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期745-749,共5页

以4，7-二苯基-1，10-菲哆啉（母体）和2-噻吩甲酰三氟丙酮为协同剂和β-二酮配体，合成了一种稀土三元铕离子配合物，其荧光寿命为0．5440ms，并以其为荧光探针对水环境的pH进行时间分辨荧光测定。荧光探针的时间分辨荧光强度在pH7．00... 以4，7-二苯基-1，10-菲哆啉（母体）和2-噻吩甲酰三氟丙酮为协同剂和β-二酮配体，合成了一种稀土三元铕离子配合物，其荧光寿命为0．5440ms，并以其为荧光探针对水环境的pH进行时间分辨荧光测定。荧光探针的时间分辨荧光强度在pH7．00～8．95时达到最大值并保持较好的稳定性；在pH小于7．00和pH大于8．95时，荧光探针的时间分辨荧光强度随着pH变化而变化；在pH2．50～7．00和pH9．91-14．00时，荧光探针的时间分辨荧光猝灭率与pH呈线性关系。溶解氧浓度和离子强度变化对pH测定结果无影响。采用荧光探针测定实际水样的pH，结果与玻璃电极的测定结果相符，测定值的相对标准偏差（n=8）在4．3％～8．1％之间。 展开更多

关键词 铕离子配合物 时间分辨荧光分析法 探针 PH测定

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用于时间分辨荧光免疫分析的结核分枝杆菌培养滤液蛋白10参照品的制备

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作者 郭芳芳 邹立林 +4 位作者 吴英松 胡志明 李金龙 吕建新 高基民 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期955-959,共5页

目的通过基因工程技术制备结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)、链亲和素(SA)/CFP10融合蛋白(包括SA-CFP10、CFP10-SA),筛选灵敏度最高、稳定性最好者作为时间分辨荧光免疫分析法检测(TRFIA)的参考标准品。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准... 目的通过基因工程技术制备结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)、链亲和素(SA)/CFP10融合蛋白(包括SA-CFP10、CFP10-SA),筛选灵敏度最高、稳定性最好者作为时间分辨荧光免疫分析法检测(TRFIA)的参考标准品。方法以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组为模板,扩增CFP10基因,将其克隆到pET24b、pET24b-SA、pET21a-SA三种载体中,转化到大肠杆菌Rosetta中进行表达,表达产物经镍离子亲和层析(Ni-NTA)柱纯化,透析法复性。三种重组蛋白用双抗体夹心法TRFIA从灵敏度、稳定性两方面进行评价。结果成功构建了pET24b-CFP10、pET24b-SA-CFP10和pET21a-CFP10-SA三种表达载体,重组蛋白CFP10主要为可溶形式表达,融合蛋白CFP10-SA、SA-CFP10均以包涵体形式存在,Ni-NTA柱纯化后透析复性,纯度均可达90%以上。三种重组蛋白经双抗体夹心TRFIA,CFP10-SA灵敏度最高(0.02μg/L),稳定性最好。结论得到了灵敏度高、稳定性好的TRFIA检测CFP10的参照品CFP10-SA融合蛋白,为研制该结核分支杆菌时间分辨荧光诊断试剂盒,并应用于临床打下了基础。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 培养滤液蛋白10 时间分辨荧光分析法

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玉米赤霉烯酮时间分辨荧光试纸条的制备及特性研究 被引量：5

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作者 顾建华 严艺琳 +3 位作者 杨婷婷 祁苏娴 张海涛 王宝春 《粮油食品科技》 2021年第2期59-65,共7页

研究制备一种基于时间分辨荧光免疫层析法的玉米赤霉烯酮(ZEN)快速定量检测试纸条。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗ZEN的单克隆抗体,应用竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学考核。结果表明:ZEN荧光试纸条的灵敏度为0... 研究制备一种基于时间分辨荧光免疫层析法的玉米赤霉烯酮(ZEN)快速定量检测试纸条。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗ZEN的单克隆抗体,应用竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学考核。结果表明:ZEN荧光试纸条的灵敏度为0.1 ng/mL,线性范围为0.1~5.0 ng/mL,玉米、小麦阴性样品的加标回收率在93.45%~112.20%之间,对于同一个样品5次重复测定的变异系数小于15%。ZEN快速定量检测试纸条具有灵敏度高、反应时间短、准确定量、稳定性好等技术特点,适用于谷物及制品中玉米赤霉烯酮的快速定量检测。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 时间分辨荧光免疫层析法 试纸条 快速定量检测

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时间分辨荧光免疫层析法检测新型冠状病毒抗原

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作者 常宇 刘作家 +2 位作者 叶育鑫 刘思奇 潘利华 《吉林大学学报(理学版)》 2025年第6期1795-1802,共8页

利用稀土小分子螯合剂制备新型冠状病毒抗体标记物,并用时间分辨荧光免疫层析法检测新型冠状病毒抗原.实验结果表明:该方法线性范围为0.04~100 ng/mL,线性方程为y=0.0072x+0.0332,相关系数R^(2)=0.9995,检出限为0.028 ng/mL,批内和批间... 利用稀土小分子螯合剂制备新型冠状病毒抗体标记物,并用时间分辨荧光免疫层析法检测新型冠状病毒抗原.实验结果表明:该方法线性范围为0.04~100 ng/mL,线性方程为y=0.0072x+0.0332,相关系数R^(2)=0.9995,检出限为0.028 ng/mL,批内和批间变异系数小于6.72%,回收率为94.35%~103.00%.该方法具有精准、快速(小于20 min)、成本低和操作简单等优点. 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫层析法 新型冠状病毒抗原 小分子螯合剂标记抗体 即时检测

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稀土荧光探针用于快速检测乙肝表面抗原 被引量：1

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作者 张瑞起 常宇 +2 位作者 刘作家 李雪松 潘利华 《应用化学》 CSCD 北大核心 2024年第12期1760-1769,共10页

采用自合成的稀土螯合剂4,4′-双(1″,1″,1″,2″,2″,3″,3″-7氟-4″,6″-己二酮-6″-基)氯磺化三联苯(BHHCT)制备乙肝表面抗体标记物,应用侧流免疫层析试纸条和配套的时间分辨荧光检测系统,建立了一种时间分辨荧光免疫分析对乙肝表... 采用自合成的稀土螯合剂4,4′-双(1″,1″,1″,2″,2″,3″,3″-7氟-4″,6″-己二酮-6″-基)氯磺化三联苯(BHHCT)制备乙肝表面抗体标记物,应用侧流免疫层析试纸条和配套的时间分辨荧光检测系统,建立了一种时间分辨荧光免疫分析对乙肝表面抗原(HBsAg)快速检测的方法。该方法线性范围为0.2~500 ng/mL,检出限为0.16 ng/mL,线性回归决定系数(R^(2))为0.9996。批内变异系数小于5%,批间变异系数小于8%,样品回收率94.3%~107.8%。该方法操作简便快捷,20 min内获得检测结果,具有精准、快速、特异性强和无需专业人员操作等优势,满足了乙肝表面抗原的即时检测的精准、快速要求。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫分析法 侧流免疫层析试纸条 乙肝表面抗原 即时检测

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