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应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素 被引量：1
1
作者 肖蕴祺 汪劲能 +1 位作者 邱良祝 施寿荣 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期116-122,共7页
实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进... 实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB_(1)荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB_(1)-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB_(1)-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB_(1)1 mg/kg)、2.86%(FB_(1)15 mg/kg)、4.88%(FB_(1)50 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB_(1)添加回收率为98.33%~102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB_(1)-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB_(1)含量的快速定量检测。 展开更多
关键词 伏马毒素 时间分辨荧光免疫层析法 玉米 定量快检
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时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用 被引量：19
2
作者 李静 李培武 +3 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期256-262,共7页
采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品... 采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。 展开更多
关键词 油料饼粕 黄曲霉毒素B1 时间分辨荧光免疫层析试纸条 时间分辨荧光速测仪 定量检测
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牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量：6
3
作者 张正英 崔乃元 +4 位作者 高海燕 刘海珍 黄文颖 郝云晴 马立才 《肉类研究》 北大核心 2020年第8期57-62,共6页
为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T... 为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),制备免疫层析试纸条;利用牦牛肉样本阿维菌素添加量和对应的T线与C线荧光信号峰值比值(T/C)拟合得到四参数标准曲线,建立牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法,并对所建立方法的灵敏度、准确度、特异性、精密度和稳定性等进行评价,用液相色谱-串联质谱方法对所建立方法的性能进行确证。结果表明:本方法对牦牛肉中阿维菌素的定量限为1.0μg/kg,加标回收率为86.9%~105.2%,与阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素及依普菌素的交叉反应率分别为100.0%、73.1%、42.6%和97.5%,批内变异系数为5.4%~9.5%,批间变异系数为7.5%~11.2%,该方法准确度、精密度、灵敏度均较高,且性能稳定。 展开更多
关键词 牦牛肉 阿维菌素 时间分辨荧光免疫层析
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时间分辨荧光免疫层析法检测酥油中黄曲霉毒素M1的研究 被引量：1
4
作者 魏娜 张飞龙 《西藏农业科技》 2019年第4期37-39,共3页
为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便... 为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便快速、灵敏度高、重现性好等特点,可用于酥油中黄曲霉毒素M1的快速检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 黄曲霉毒素M1 酥油 快速检测
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时间分辨荧光免疫层析法定量检测稻谷中的镉 被引量：3
5
作者 张海涛 祁苏娴 +2 位作者 董曼佳 陆廷瑾 杨婷婷 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期170-173,共4页
本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL... 本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL,标准曲线线性范围为0.1~5.0 ng/mL,检出限和定量限分别为0.026 mg/kg和0.064 mg/kg,对有证标准物质的正确度在81.0%~91.7%,对实际样本的检测与ICP-MS检测结果一致性较高。该法重复性较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位大量样本的快速初步筛查。 展开更多
关键词 镉 稻谷 时间分辨荧光免疫层析法 快速定量检测
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同时检测玉米中黄曲霉毒素B_(1)和赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制 被引量：20
6
作者 卢迪莎 王序 +2 位作者 杨金易 罗林 肖治理 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第2期346-354,共9页
研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标... 研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠IgG浓度、样品前处理条件等因素。结果表明:检测AFB_(1)和OTA的IC_(50)分别为1.58、3.91μg/kg,线性范围分别为0.26~9.73、1.14~13.29μg/kg,肉眼检测限分别为3.70、5.55μg/kg;与黄曲霉毒素类似物交叉率为12%~62%,与赭曲霉毒素B交叉率为58%,与其他真菌毒素无明显交叉反应;选择玉米样品进行添加回收实验,2种毒素回收率在92%~103%之间,变异系数小于15%;对实际样品的检测与高效液相色谱法和市售胶体金试纸检测结果一致;且该试纸条可在4℃稳定保存5个月以上,稳定性较好。本研究所制备的时间分辨荧光免疫层析试纸条具有灵敏、准确、快速和简便等特点,非常适用于玉米等食品和农产品中AFB_(1)和OTA的现场快速筛查。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 赭曲霉毒素A 时间分辨 荧光免疫层析试纸条
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呕吐毒素时间分辨荧光免疫层析法的建立与评价 被引量：6
7
作者 张东升 严艺琳 +3 位作者 熊晓辉 董曼佳 游京晶 张一平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期233-239,共7页
构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲... 构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲体系;研究了方法的灵敏度、精密度及准确度。结果表明,每100μL荧光微球结合纯单抗50μg,最佳划膜浓度为1.0 mg/m L,最佳测定条件为室温(25±2)℃,10 min,加样体积100μL,PBS (0.01 mol/L,pH7.2)的缓冲体系,方法的灵敏度为0.25 ng/m L,线性范围为0.5~25.0 ng/m L,玉米、小麦阴性样本(加标浓度200、500、1000、2000μg/kg)平均加标回收率为91.4%~109.3%,6种典型样本经TRFIA与免疫亲和净化-高效液相色谱法(IAC-HPLC)同时测定DON含量,相关系数r达0.9754。TRFIA具有灵敏度高、速度快、定量准等技术特点,适用于谷物及制品中DON的快速定量。 展开更多
关键词 呕吐毒素 时间分辨荧光微球 免疫层析法 评价 检测
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时间分辨荧光免疫层析技术在PRRS检测中的应用
8
作者 原小燕 许珈琛 +3 位作者 耿玉静 吴彬 杨高磊 郎洪武 《河南畜牧兽医》 2023年第19期7-9,28,共4页
采用荧光免疫层析技术,以时间分辨荧光微球作为标记物,研制出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)荧光微球抗体检测试纸。对检测试纸的敏感性、特异性、重复性及符合率进行了试验研究。结果表明,研制出的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光微球抗体... 采用荧光免疫层析技术,以时间分辨荧光微球作为标记物,研制出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)荧光微球抗体检测试纸。对检测试纸的敏感性、特异性、重复性及符合率进行了试验研究。结果表明,研制出的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光微球抗体检测试纸灵敏度高、特异性好,与IDEXX公司酶免试剂盒比较,符合率可达到92.5%。适用于临床样本的快速检测. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析技术 猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗体 荧光微球 检测试纸
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降钙素原时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立及性能评价 被引量：7
9
作者 黄德智 应昊俊 +1 位作者 刘飞 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期581-586,共6页
目的建立一种时间分辨荧光免疫层析定量降钙素原(procalcitonin, PCT)的检测方法并评价其性能。方法利用双抗体夹心法原理,以时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析技术建立PCT免疫检测方法,并对该方法进行线性、灵敏度、... 目的建立一种时间分辨荧光免疫层析定量降钙素原(procalcitonin, PCT)的检测方法并评价其性能。方法利用双抗体夹心法原理,以时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析技术建立PCT免疫检测方法,并对该方法进行线性、灵敏度、精密度、特异性、相关性等性能指标的测定。结果本检测方法线性良好,线性范围为0.05～100 ng/mL,方程为Y=0.074 7X+0.524 6,R^2=0.990 4,灵敏度为0.03 ng/mL,批内精密度CV≤5.42%,批间精密度CV≤6.86%,与AE-180全自动化学发光免疫分析仪结果一致性较好,阳性符合率96.61%,阴性符合率94.44%,假阳性率5.56%,假阴性率3.39%和诊断符合率95.53%。结论本研究建立了PCT时间分辨免疫层析检测方法,该方法简便、经济、快速、并可以定量,各项性能参数均达到临床检测要求,可用于临床血清PCT浓度的检测。 展开更多
关键词 降钙素原 时间分辨荧光微球 免疫层析
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时间分辨荧光免疫层析技术在动物疫病快速诊断中的应用进展
10
作者 庄金秋 李峰 +2 位作者 梅建国 苗立中 谢金文 《中国动物检疫》 2025年第9期41-48,共8页
时间分辨荧光免疫层析技术(TRFICA)是一种结合时间分辨荧光技术与免疫层析技术的高灵敏度检测方法,它利用镧系稀土元素标记物替代传统胶体金,通过延迟信号采集消除背景荧光干扰,实现快速、精准的定量检测。该技术具有操作简便、成本低... 时间分辨荧光免疫层析技术(TRFICA)是一种结合时间分辨荧光技术与免疫层析技术的高灵敏度检测方法,它利用镧系稀土元素标记物替代传统胶体金,通过延迟信号采集消除背景荧光干扰,实现快速、精准的定量检测。该技术具有操作简便、成本低、特异性强、稳定性好及无污染等优势,被广泛应用于动物疫病诊断、食品安全及医学标志物检测等领域。TRFICA通过其高灵敏度和抗干扰能力,显著提升了检测可靠性,为动物疫病早期预警和防控提供了重要技术支持。本文综述了TRFICA技术的工作原理及其在动物疫病快速诊断中的应用进展,以期为兽医临床诊断、疫病防控提供技术参考。 展开更多
关键词 时间分辨荧光 免疫层析 镧系元素 动物疫病诊断
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时间分辨荧光免疫分析技术在产毒霉菌检测中的研究进展
11
作者 王子煊 麦丹 《畜禽业》 2025年第8期27-31,共5页
产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved ... 产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)凭借其高灵敏度、特异性强、操作简便等优势,在产毒霉菌检测领域展现出良好的应用前景。综述了TRFIA的基本原理及其在食品检测中的应用前景,介绍了其在食品中常见的产毒霉菌检测方面的最新研究进展,并对该技术目前存在的问题及未来发展方向进行了探讨。研究表明:TRFIA作为一种高效、可靠的检测技术,有望在食品安全检测领域发挥更为重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 产毒霉菌 食品安全 快速检测
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时间分辨荧光免疫分析仪的校准方法研究 被引量：1
12
作者 周瑾艳 武利庆 +6 位作者 黄彦捷 王晶 黄哲峰 李志雄 孙雅玲 许俊斌 陈玲 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第S01期305-310,共6页
研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准... 研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准项目与技术指标,确定了校准用的仪器设备,设计了完备的校准方案,使时间分辨荧光免疫分析仪的量值准确、可靠、可溯源,为统一相关量值发挥重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光 免疫分析 铕
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基于免疫层析技术的时间分辨荧光免疫分析仪研究 被引量：23
13
作者 任冰强 黄立华 黄惠杰 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1330-1335,共6页
基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物... 基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物的含量,参照标准浓度曲线就可以定量得到待测样品溶液的浓度。实验表明,仪器的最低检测浓度可达到ng/mL量级,测量的相对标准偏差小于3%,在5～103ng/mL浓度范围内具有良好的线性响应特性,相关系数R2=0.9997。 展开更多
关键词 传感器技术 标记免疫学 时间分辨荧光免疫分析仪 免疫层析技术
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时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ的实验研究 被引量：4
14
作者 周衍 范俊 +4 位作者 蒋叶华 张珏 张艺 傅利新 黄飚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期1803-1807,共5页
目的研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogensⅠ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能。方法以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PGⅠ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符... 目的研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogensⅠ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能。方法以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PGⅠ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符合率。结果试纸定量检测的线性良好,方程为Y=0.027 9+0.004 8X,r=0.997 8;灵敏度为0.27μg/L;批内CV小于10%,批间CV11.03%;与市售PGⅠ试剂平行检测489份血清样本,有良好的相关性(YTRFIA=0.856 6Xstrip+7.545 6,R2=0.989 1,P<0.01)。结论 PGⅠ时间分辨荧光纳米微球免疫层析试纸操作简单、快速、经济、可定量,满足临床检测血清PGⅠ的需求。 展开更多
关键词 胃蛋白酶原Ⅰ 时间分辨荧光纳米微球 免疫层析
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时间分辨荧光免疫分析技术与牦牛肉兽药残留检测研究进展 被引量：2
15
作者 赵维章 黄文颖 +1 位作者 张正英 陈成 《现代畜牧科技》 2024年第11期141-144,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本... 时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本低,检测速度快等诸多优势,因此TRFIA技术为牦牛肉质安全检测开辟一条崭新的检测途径。该文就TRFIA技术及其在牦牛肉质安全检测应用进展做一简要综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 牦牛肉 安全检测 兽药残留
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时间分辨免疫荧光层析快速检测水产品中高效氯氰菊酯方法的建立 被引量：1
16
作者 姜琳琳 苏捷 《渔业研究》 2018年第4期258-267,共10页
高效氯氰菊酯在农业中应用广泛,其中水产品可以富集水系统中的高效氯氰菊酯,并通过食物链,影响人体的健康。本研究通过铕(Eu)颗粒标记氯氰菊酯抗体,研发针对高效氯氰菊酯检测的时间分辨免疫荧光检测卡。在对虾样品中添加高效氯氰菊酯标... 高效氯氰菊酯在农业中应用广泛,其中水产品可以富集水系统中的高效氯氰菊酯,并通过食物链,影响人体的健康。本研究通过铕(Eu)颗粒标记氯氰菊酯抗体,研发针对高效氯氰菊酯检测的时间分辨免疫荧光检测卡。在对虾样品中添加高效氯氰菊酯标准品分析检测卡的准确度、精确度等指标时,研究发现氯氰菊酯检测卡的平均相对误差在4.24%~8.66%之间,检测卡的批内变异系数在3.0%~8.6%之间,批间变异系数在4.8%~6.6%之间,最低检测限为0.35 ng/m L,检测范围为1~19.3 ng/m L,四参数拟合曲线决定系数R2=0.999 0;检测卡检测结果与气相色谱检测结果的相对误差在8%~20%之间,线性相关系数R=0.989 9。结果表明本技术方法可以应用于水产品中高效氯氰菊酯的快速定量检测。 展开更多
关键词 高效氯氰菊酯 时间分辨免疫荧光 快速定量检测
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赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量：28
17
作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03￣1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 真菌毒素 单克隆抗体
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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用 被引量：12
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作者 李丽华 白瑞樱 +6 位作者 孙远明 沈玉栋 徐振林 雷红涛 张挺 王弘 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期216-220,共5页
建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。 展开更多
关键词 环丙沙星 时间分辨荧光免疫分析 抗体 添加回收
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癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制 被引量：28
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作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 余伟鸿 黄颖 李明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-124,共4页
目的：利用时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）技术，建立一种人血清癌胚抗原（CEA）的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法：采用双抗体夹心法（用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板，另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕）建立CEA... 目的：利用时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）技术，建立一种人血清癌胚抗原（CEA）的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法：采用双抗体夹心法（用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板，另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕）建立CEA—TRFIA，增强液采用B-二酮体为主的发光增强系统。结果：CEA-TRFIA的线性测量范围为（1～560）μg／L，分析的灵敏度为0．28μg／L，批内和批间的变异系数（CV）分别为7．2％～8．6％和8．9％～13．2％。与AFP，CA12—5、CA19—9和白蛋白均无交叉反应，与CA15—3的交义反应值为1．62μg／L。将1000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测，其相关系数（r）为0．946。结论：CEA—TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求，可替代国外同类检测试剂盒，用于临床血清CEA水平的测定。 展开更多
关键词 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量：13
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作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页
以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多
关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析法 铕 测定 血清 临床分析 CTTA SAM
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