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时间分辨荧光免疫分析方法的光谱研究 被引量：4
1
作者 郭周义 田振 贾雅丽 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期596-599,共4页
时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物 ,标记蛋白质、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞 ,待反应体系 (如 :抗原抗体免疫反应、生物素亲合反应、核酸探针杂交反应、靶细胞与效应细胞的杀伤反应等 )发生后 ,用... 时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物 ,标记蛋白质、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞 ,待反应体系 (如 :抗原抗体免疫反应、生物素亲合反应、核酸探针杂交反应、靶细胞与效应细胞的杀伤反应等 )发生后 ,用时间分辨荧光技术测定反应体系中分析物的浓度 ,达到定量分析的目的。它之所以能够继放射性同位素标记、酶标记、化学发光、电化学发光后成为一种更新、更灵敏的检测方法 ,主要取决于它所用标记物三价稀土离子螯合物独一无二的物理及化学性质。主要报导了对使用的长寿命荧光团Eu3 + 螯合物的光谱研究结果 ,时间分辨技术及荧光增强技术的原理。实验表明 :选择 336～ 337nm的激发波长 ,有利于Eu3 + 的配位二酮体的激发及能量转移。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析方法 定量分析 铕离子螯合物 荧光增强技术 时间分辨光谱技术
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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用 被引量：12
2
作者 李丽华 白瑞樱 +6 位作者 孙远明 沈玉栋 徐振林 雷红涛 张挺 王弘 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期216-220,共5页
建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。 展开更多
关键词 环丙沙星 时间分辨荧光免疫分析 抗体 添加回收
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时间分辨荧光免疫分析方法建立中有关问题的探讨 被引量：5
3
作者 李振甲 陈津藻 +1 位作者 杨梅芳 陈素娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期315-317,共3页
本文报告了时间分辨荧光免疫分析技术建立中有关问题的实验研究结果。包括对Eu^(3+)标记技术的改进,增强液的配制和检定,抗体包被固相材料的选择及操作中必须注意的防止稀土元素污染的措施。
关键词 荧光免疫分析 时间分辨 稀土元素
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莱克多巴胺钐标记时间分辨荧光免疫分析方法的建立 被引量：3
4
作者 李贞 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第3期36-40,共5页
基于抗莱克多巴胺(SAL)的单克隆抗体,初步建立了检测SAL的高灵敏度时间分辨直接竞争免疫分析法(CD-TRFIA)。采用辛酸-硫酸铵纯化抗SAL杂交瘤细胞株腹水单克隆抗体,用稀土离子Sm^(3+)偶联物进行标记,制备钐标抗体;通过合成SAL-SUC半抗原... 基于抗莱克多巴胺(SAL)的单克隆抗体,初步建立了检测SAL的高灵敏度时间分辨直接竞争免疫分析法(CD-TRFIA)。采用辛酸-硫酸铵纯化抗SAL杂交瘤细胞株腹水单克隆抗体,用稀土离子Sm^(3+)偶联物进行标记,制备钐标抗体;通过合成SAL-SUC半抗原并与卵清蛋白偶联获得SAL-OVA包被抗原;采用直接竞争的方式,游离SAL和固相SAL-OVA包被原共同竞争有限的钐标SAL单抗,初步建立SAL时间分辨免疫分析方法。研究发现,优化的TRFIA半抑制量IC_(50)为1.6 ng/m L,检测范围为0.39~12.77 ng/m L,最低检测限为0.136 ng/m L。 展开更多
关键词 莱克多巴胺 钐标单克隆抗体 时间分辨荧光免疫分析
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恩诺沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立 被引量：8
5
作者 赵莉莉 黄飚 +3 位作者 王晓岚 宓晓黎 金坚 陆茂林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期110-114,共5页
目的:采用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术建立高灵敏的恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)快速检测方法。方法:以包被抗原(ENR-OVA)包被微孔板,与游离的恩诺沙星共同竞争抗恩诺沙星抗体,以铕(Eu3+)标记的羊... 目的:采用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术建立高灵敏的恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)快速检测方法。方法:以包被抗原(ENR-OVA)包被微孔板,与游离的恩诺沙星共同竞争抗恩诺沙星抗体,以铕(Eu3+)标记的羊抗兔抗体进行示踪。结果:方法的批内变异系数小于10%、批间变异系数小于15%,平均回收率为91.62%,灵敏度为5ng/L,可测范围为0.01～100μg/L,ED20、ED50和ED80分别为0.088、3.40μg/L和32.81μg/L。结论:ENR-TRFIA方法稳定性好、可测范围宽,具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 恩诺沙星 时间分辨荧光免疫分析 兽药残留
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时间分辨荧光免疫分析技术在产毒霉菌检测中的研究进展
6
作者 王子煊 麦丹 《畜禽业》 2025年第8期27-31,共5页
产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved ... 产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)凭借其高灵敏度、特异性强、操作简便等优势,在产毒霉菌检测领域展现出良好的应用前景。综述了TRFIA的基本原理及其在食品检测中的应用前景,介绍了其在食品中常见的产毒霉菌检测方面的最新研究进展,并对该技术目前存在的问题及未来发展方向进行了探讨。研究表明:TRFIA作为一种高效、可靠的检测技术,有望在食品安全检测领域发挥更为重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 产毒霉菌 食品安全 快速检测
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时间分辨荧光免疫分析仪的校准方法研究 被引量：1
7
作者 周瑾艳 武利庆 +6 位作者 黄彦捷 王晶 黄哲峰 李志雄 孙雅玲 许俊斌 陈玲 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第S01期305-310,共6页
研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准... 研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准项目与技术指标,确定了校准用的仪器设备,设计了完备的校准方案,使时间分辨荧光免疫分析仪的量值准确、可靠、可溯源,为统一相关量值发挥重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光 免疫分析 铕
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应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素 被引量：1
8
作者 肖蕴祺 汪劲能 +1 位作者 邱良祝 施寿荣 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期116-122,共7页
实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进... 实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB_(1)荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB_(1)-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB_(1)-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB_(1)1 mg/kg)、2.86%(FB_(1)15 mg/kg)、4.88%(FB_(1)50 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB_(1)添加回收率为98.33%~102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB_(1)-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB_(1)含量的快速定量检测。 展开更多
关键词 伏马毒素 时间分辨荧光免疫层析法 玉米 定量快检
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γ-干扰素时间分辨免疫荧光分析方法的建立 被引量：2
9
作者 额尔敦 郭美香 +5 位作者 韩玲 其其格 刘士山 张丽民 陈杞 张庆荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第4期388-391,共4页
采用生物素 Ｅｕ３ ＋ 标记链亲和素双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析技术 （ Ｔ Ｒ Ｉ Ｆ Ｍ Ａ） ， 建立新的γ干扰素检测技术， 提高γ干扰素检测方法的灵敏度． 用固相包被的兔多抗捕获样品中 Ｉ Ｆ Ｎγ， 以具有中和 Ｉ ... 采用生物素 Ｅｕ３ ＋ 标记链亲和素双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析技术 （ Ｔ Ｒ Ｉ Ｆ Ｍ Ａ） ， 建立新的γ干扰素检测技术， 提高γ干扰素检测方法的灵敏度． 用固相包被的兔多抗捕获样品中 Ｉ Ｆ Ｎγ， 以具有中和 Ｉ Ｆ Ｎγ抗病毒活性的生物素化单抗作为二抗体， 再加 Ｅｕ３ ＋ 标记链亲和素并荧光检测． 已知不同浓度标准 Ｉ Ｆ Ｎγ Ｃ Ｐ Ｓ 值的标准曲线， 判断待检样品中 Ｉ Ｆ Ｎγ量． 本方法最低检测值为００２ μｇ／ Ｌ， 检测范围为００２ ～４００ μｇ／ Ｌ， 而 Ｔ Ｎ Ｆα， Ｉ Ｌ２ 和 Ｉ Ｆ Ｎα等细胞因子无交叉反应． 对基因工程 Ｉ Ｆ Ｎγ的生产， 纯化过程中定性， 定量监控以及对培养细胞上清中 Ｉ Ｆ 展开更多
关键词 Γ-干扰素 EU^3+ 时间分辨 免疫荧光分析
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检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价 被引量：4
10
作者 毛骞 陈翠翠 +3 位作者 梁焕坤 刘鹏娥 钟树海 李来庆 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期770-776,共7页
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu... 目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。 展开更多
关键词 β胶联降解产物 N端中分子片段 骨质疏松症 双抗体夹心 双标记时间分辨免疫荧光分析
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犬瘟热病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量：7
11
作者 陈翠翠 赖宏锐 +3 位作者 梁焕坤 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期258-262,共5页
为建立犬瘟热病毒(CDV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法,本研究将抗CDV的3H7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体,Eu3+标记2G4 MAb作为检测抗体,建立了检测CDV抗原的双抗体夹心TRFIA分析法,并初步制备成试剂盒。通过灵敏度、准确度(稀释回收... 为建立犬瘟热病毒(CDV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法,本研究将抗CDV的3H7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体,Eu3+标记2G4 MAb作为检测抗体,建立了检测CDV抗原的双抗体夹心TRFIA分析法,并初步制备成试剂盒。通过灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性、临床样本检测等实验评价其检测性能。结果显示,该双抗体夹心TRFIA分析法对CDV的检测灵敏度为0.58 ng/mL,线性范围在2.5 ng/mL^640 ng/mL,与荧光值有较强的剂量-反应关系;平均稀释回收率为100.48%,与其它常见病毒无明显交叉反应,特异性较强;批内CV值为5.60%~7.58%,批间CV值为5.67%~7.64%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存半年,37℃稳定保存7 d。与RT-PCR法同时检测65份疑似CDV样本和15份健康样本,2种检测方法的符合率为100%。本研究建立的CDV TRFIA方法具有灵敏度高、特异性强、准确率好、方便快捷等优点,为大批量CDV临床样品的检测提供了可行技术手段。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨荧光免疫分析螯合剂的制备及标记方法 被引量：3
12
作者 赵劼 马庆杰 +3 位作者 赵伟 潘立华 徐文贵 孙文伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期810-812,共3页
目的 :制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4,7-二 (氯磺酸基苯基 ) - 1 ,1 0 -菲咯啉 -2 ,9-二羧酸 ( BCPDA)。方法 :合成物 BCPDA的结构由熔点、元素分析、红外光谱和核磁共振谱确证 ;采用标记曲线法测定标记物中蛋白质的含量 ;应... 目的 :制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4,7-二 (氯磺酸基苯基 ) - 1 ,1 0 -菲咯啉 -2 ,9-二羧酸 ( BCPDA)。方法 :合成物 BCPDA的结构由熔点、元素分析、红外光谱和核磁共振谱确证 ;采用标记曲线法测定标记物中蛋白质的含量 ;应用荧光分光光度计测定 Eu3 + - BCPDA的荧光强度 ;采用放免法测定标记蛋白质的活性。结果 :BCPDA与 Eu3 + 结合后可测量到的最低浓度为1× 1 0 -1 5mol· L-1 标记蛋白质的相对生物活性高于 80 %。结论 :成功地制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 BCPDA,并建立 Eu3 + - 展开更多
关键词 荧光免疫测定 螯合剂 化学合成 光谱法 时间分辨
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犬细小病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量：3
13
作者 陈翠翠 梁焕坤 +3 位作者 赖宏锐 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期165-170,共6页
为建立犬细小病毒(CPV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,本实验采用抗CPV单克隆抗体(MAb)7D5作为包被抗体,Eu3+标记的MAb 2F7作为检测抗体,对各反应条件优化后制备双抗体夹心TRFIA试剂盒。并评价了其灵敏度、准确度、特... 为建立犬细小病毒(CPV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,本实验采用抗CPV单克隆抗体(MAb)7D5作为包被抗体,Eu3+标记的MAb 2F7作为检测抗体,对各反应条件优化后制备双抗体夹心TRFIA试剂盒。并评价了其灵敏度、准确度、特异性、重复性和稳定性。利用该试剂盒与RT-PCR方法同时检测了疑似患病犬的临床粪便、呕吐物、血液样品(各60份)和CPV阴性犬这3种临床样品各10份,比较并计算二者的符合率。优化结果显示,最佳的TRFIA反应条件为:MAb 7D5的包被浓度为15μg/mL;Eu^(3+)标记试剂与标记MAb 2F7(2.5 mg/mL)最佳体积分别为70μL和30μL;反应体系为25μL CPV标准品或待测样品+200μL分析缓冲液+200μL Eu^(3+)-检测抗体+200μL增强液。灵敏度试验显示TRFIA方法对CPV灭活病毒检测灵敏度为0.83 ng/mL。准确度试验结果显示,不同浓度CPV标准品稀释(1:2、1:4、1:8)后的稀释回收率在89.25%~100.8%;特异性试验结果显示,该方法除对不同亚型CPV的检测结果均为阳性外,对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒I型、犬冠状病毒、猫细小病毒、水貂肠炎病毒等检测均为阴性,无明显交叉反应;对高、中、低3种不同浓度CPV的重复性试验结果显示,批内变异系数为2.34%~4.76%,批间变异系数为2.38%~5.10%;稳定性试验结果显示,该试剂盒至少可在4℃稳定保存6个月,37℃保存7 d;临床样品的检测结果显示,利用该方法从大部分疑似患病犬的粪便、血液以及呕吐物中均检测到了CPV,而CPV阴性犬这3类样品的检测结果均为阴性。本研究建立的TRFIA法和RT-PCR法检测结果一致,符合率达到100%。上述结果表明,本研究制备的CPV TRFIA试剂盒灵敏度准确度高、特异性强、重复性、稳定性好,且可检测的临床样品种类多,为临床样品的检测提供有效技术手段。 展开更多
关键词 犬细小病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析
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犬冠状病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量：2
14
作者 陈翠翠 梁焕坤 +4 位作者 高浩维 赖宏锐 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期92-97,共6页
探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对... 探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对试剂盒的准确度、特异性、重复性、稳定性、临床样本检测等性能进行评估。本研究制备的CCV时间分辨免疫荧光试剂盒灵敏度为0.68 ng/mL;各浓度CCV标准品在不同水平的稀释度回收率在94.6%~105.6%;同步检测CPV、CD、CPIV、CAV-1标准品均为阴性,特异性好;批内CV为1.91%~5.03%,批间CV为1.82%~6.03%,重复性好;试剂盒在4℃保存6个月,37℃保存7 d后,试剂盒各项性能均无明显变化;临床样本检测结果与RT-PCR方法结果一致。本研究制备的CCV TRFIA试剂盒具有灵敏度、准确度高,重复性、稳定性良好的优点,能够对CCV的临床样本进行大量的筛查,为CCV患病犬的早期确诊提供了一种全新的技术手段。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨荧光免疫分析技术与牦牛肉兽药残留检测研究进展 被引量：2
15
作者 赵维章 黄文颖 +1 位作者 张正英 陈成 《现代畜牧科技》 2024年第11期141-144,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本... 时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本低,检测速度快等诸多优势,因此TRFIA技术为牦牛肉质安全检测开辟一条崭新的检测途径。该文就TRFIA技术及其在牦牛肉质安全检测应用进展做一简要综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 牦牛肉 安全检测 兽药残留
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时间分辨荧光免疫分析法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ方法学的建立及临床应用 被引量：5
16
作者 张洁 卢玲玲 +2 位作者 潘晓夫 邹立林 高基民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1093-1097,共5页
目的:建立时间分辨荧光免疫分析检测心肌肌钙蛋白Ⅰ的方法并应用于临床。方法:采用时间分辨荧光免疫分析及双抗体夹心法,对检测体系的标准曲线、最低检测量、稳定性、精密度和交叉反应等相关性能指标进行评价,通过检测健康体检人员及临... 目的:建立时间分辨荧光免疫分析检测心肌肌钙蛋白Ⅰ的方法并应用于临床。方法:采用时间分辨荧光免疫分析及双抗体夹心法,对检测体系的标准曲线、最低检测量、稳定性、精密度和交叉反应等相关性能指标进行评价,通过检测健康体检人员及临床急性心肌梗死患者血清标本并与目前应用于临床的微粒子发光法进行比对,评价TRFIA方法的临床应用可行性。结果:该方法检测肌钙蛋白I的标准曲线Y=7 485.878+1 400.924X,相关系数为0.999,最低检测限为0.052 ng/ml。批内、批间精密度均<10%。该方法的正常参考范围为<0.14μg/L,ROC曲线的AUC为0.971,敏感度96.45%,特异性91.43%,准确度95.69%,阳性预示值98.45%,阴性预示值82.05%。该方法与微粒子发光法具有很强的相关性(r=0.993),与ECG、cTnT、CK-MB没有明显的统计学差异(P>0.05)。急性心肌梗死患者治疗前后的检测结果具有明显的统计学差异(P<0.001)。结论:时间分辨荧光免疫分析法检测肌钙蛋白Ⅰ符合临床诊断的相关要求,可应用于临床急性心肌梗死患者的诊断及疾病检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 心肌梗死 肌钙蛋白Ⅰ 分析性能 Eu3+
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牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立 被引量：4
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作者 王旭 孙雨 +8 位作者 王睿男 肖颖 蒋菲 毕一鸣 李硕 杨林 董虹 宋晓晖 王传彬 《中国草食动物科学》 CAS 2019年第3期33-39,共7页
为研究快速定量检测牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的方法,试验通过优化抗原表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中表达可溶性的3A-3B融合蛋白,并基于纯化的可溶性融合蛋白建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测... 为研究快速定量检测牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的方法,试验通过优化抗原表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中表达可溶性的3A-3B融合蛋白,并基于纯化的可溶性融合蛋白建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒。结果表明:建立的方法能够检测牛血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的牛类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性。对300份临床牛血清样品进行检测,同Procheck公司的口蹄疫非结构蛋白抗体试剂盒进行比较,阳性样品符合率96%,阴性样品符合率93.3%,总的符合率95.7%。重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。文章首次建立了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法,同传统的ELISA方法相比,该检测方法特异性相当、敏感性更高,操作更简单、快速,具有较高的应用推广价值。 展开更多
关键词 牛血清 口蹄疫病毒 非结构蛋白 可溶性表达与纯化 时间分辨荧光免疫分析
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赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量：28
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作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03￣1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 真菌毒素 单克隆抗体
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癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制 被引量：28
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作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 余伟鸿 黄颖 李明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-124,共4页
目的：利用时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）技术，建立一种人血清癌胚抗原（CEA）的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法：采用双抗体夹心法（用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板，另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕）建立CEA... 目的：利用时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）技术，建立一种人血清癌胚抗原（CEA）的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法：采用双抗体夹心法（用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板，另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕）建立CEA—TRFIA，增强液采用B-二酮体为主的发光增强系统。结果：CEA-TRFIA的线性测量范围为（1～560）μg／L，分析的灵敏度为0．28μg／L，批内和批间的变异系数（CV）分别为7．2％～8．6％和8．9％～13．2％。与AFP，CA12—5、CA19—9和白蛋白均无交叉反应，与CA15—3的交义反应值为1．62μg／L。将1000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测，其相关系数（r）为0．946。结论：CEA—TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求，可替代国外同类检测试剂盒，用于临床血清CEA水平的测定。 展开更多
关键词 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量：13
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作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页
以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多
关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析法 铕 测定 血清 临床分析 CTTA SAM
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