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时间分辨荧光免疫分析技术在产毒霉菌检测中的研究进展
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作者 王子煊 麦丹 《畜禽业》 2025年第8期27-31,共5页
产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved ... 产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)凭借其高灵敏度、特异性强、操作简便等优势,在产毒霉菌检测领域展现出良好的应用前景。综述了TRFIA的基本原理及其在食品检测中的应用前景,介绍了其在食品中常见的产毒霉菌检测方面的最新研究进展,并对该技术目前存在的问题及未来发展方向进行了探讨。研究表明:TRFIA作为一种高效、可靠的检测技术,有望在食品安全检测领域发挥更为重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 产毒霉菌 食品安全 快速检测
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应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素 被引量:1
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作者 肖蕴祺 汪劲能 +1 位作者 邱良祝 施寿荣 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期116-122,共7页
实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进... 实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB_(1)荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB_(1)-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB_(1)-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB_(1)1 mg/kg)、2.86%(FB_(1)15 mg/kg)、4.88%(FB_(1)50 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB_(1)添加回收率为98.33%~102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB_(1)-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB_(1)含量的快速定量检测。 展开更多
关键词 伏马毒素 时间分辨荧光免疫层析法 玉米 定量快检
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时间分辨荧光免疫分析仪的校准方法研究 被引量:1
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作者 周瑾艳 武利庆 +6 位作者 黄彦捷 王晶 黄哲峰 李志雄 孙雅玲 许俊斌 陈玲 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第S01期305-310,共6页
研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准... 研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准项目与技术指标,确定了校准用的仪器设备,设计了完备的校准方案,使时间分辨荧光免疫分析仪的量值准确、可靠、可溯源,为统一相关量值发挥重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光 免疫分析
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时间分辨荧光免疫分析技术与牦牛肉兽药残留检测研究进展 被引量:2
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作者 赵维章 黄文颖 +1 位作者 张正英 陈成 《现代畜牧科技》 2024年第11期141-144,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本... 时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本低,检测速度快等诸多优势,因此TRFIA技术为牦牛肉质安全检测开辟一条崭新的检测途径。该文就TRFIA技术及其在牦牛肉质安全检测应用进展做一简要综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 牦牛肉 安全检测 兽药残留
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赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量:28
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作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03 ̄1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 真菌毒素 单克隆抗体
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时间分辨荧光免疫分析的新进展 被引量:17
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作者 辛甜甜 郭松林 +2 位作者 王艺磊 冯建军 林鹏 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-118,共7页
对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TR... 对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TRFIA的发展前景进行了展望(引用文献82篇)。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 荧光共振能量转移-trfia 酶放大-trfia 纳米颗粒-trfia
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T-2毒素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量:10
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作者 杨润琳 计融 +4 位作者 江涛 汤鲁宏 朱海 李文新 黄飚 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2010年第1期74-76,85,共4页
以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析... 以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立T-2-TRFIA。同时对这一方法的稳定性、灵敏度、回收率和特异性进行考核。此方法灵敏度为0.2μg/L,测量范围0.2~500μg/L,批内变异为7.5%,批间变异为12.7%,平均回收率为89.6%。与赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白无交叉反应。10条不同时间进行的间接竞争T-2-TRFIA的效应点均值ED80、ED50和ED20分别为2.66,6.97,29.11μg/L。同时,用TRFIA和ELISA试剂盒同时检测T-2毒素,在ELISA和TRFIA产品的共同可测范围之内,两者的相关系数为0.926。 展开更多
关键词 T-2毒素(T-2 toxin) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 单克隆抗体
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人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制 被引量:9
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作者 杭建峰 吴英松 +4 位作者 余伟鸿 徐伟文 王从容 裘宇容 李明 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期313-317,共5页
目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l~1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3... 目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l~1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%~5.9%,3.7%~6.5%.与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应.稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7 d.426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~12 U/ml.用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995.结论试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒. 展开更多
关键词 人甲胎蛋白(hAFP) 时间分辨免疫荧光分析(trfia) 试剂盒
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应用生物素-链霉亲和素的时间分辨荧光免疫分析检测玉米赤霉烯酮 被引量:3
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作者 马智鸿 黄飚 +3 位作者 屠蔷 高蕾 张珏 王柯 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期905-909,共5页
采用基于生物素(Biotin)-链霉亲和素(Strepavidin)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮(ZEN)检测方法。以strepavidin包被板条,加入生物素化的ZEN—BSA,结合在板条上的ZEN—BSA与标准/样本中的游... 采用基于生物素(Biotin)-链霉亲和素(Strepavidin)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮(ZEN)检测方法。以strepavidin包被板条,加入生物素化的ZEN—BSA,结合在板条上的ZEN—BSA与标准/样本中的游离ZEN共同竞争限量的抗ZEN单克隆抗体,用稀土离子Eu“标记的羊抗鼠IgG进行示踪,建立了间接竞争的ZEN-TRFIA。该方法的检测灵敏度为0.2ng/ml,测量范围是0.2~200.0ng/ml,批内、批间变异系数分别为5.7%和8.3%,平均回收率为91.1%。与玉米赤霉醇的平均交叉反应是12.3%,与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应,说明该方法的特异性较好。相关试剂在4℃放6个月后各检测参数基本无变化,说明该方法稳定。样品同时用ZEN—TRFIA和商品ELISA试剂盒测定样品ZEN含量,两者的相关系数为0.9664,说明该方法测量准确。ZEN—TRFIA具有测量准确、检测灵敏度高、检测范围宽、操作简便、标记物稳定等优点,适合于ZEN大量筛查的应用。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮(ZEN) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 生物素-链霉亲和素 真菌毒素
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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用 被引量:12
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作者 李丽华 白瑞樱 +6 位作者 孙远明 沈玉栋 徐振林 雷红涛 张挺 王弘 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期216-220,共5页
建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20~IC80)为1.14~28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%~100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%~95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。 展开更多
关键词 环丙沙星 时间分辨荧光免疫分析 抗体 添加回收
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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量:13
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作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页
以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5~ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多
关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析 测定 血清 临床分析 CTTA SAM
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时间分辨荧光免疫分析技术在真菌毒素检测的应用 被引量:11
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作者 王坤 侯玉泽 +4 位作者 胡骁飞 王耀 李文君 裴亚峰 邓瑞广 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期197-201,共5页
近些年,生物标记技术不断的发展。免疫分析技术得到了快速的发展。例如放射免疫分析技术,由于放射分析技术存在污染性和局限性,限制其进一步发展与应用,继由放射免疫分析技术之后,又研究形成了各种非放射免疫技术,包括酶标记分析... 近些年,生物标记技术不断的发展。免疫分析技术得到了快速的发展。例如放射免疫分析技术,由于放射分析技术存在污染性和局限性,限制其进一步发展与应用,继由放射免疫分析技术之后,又研究形成了各种非放射免疫技术,包括酶标记分析技术、荧光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析(Time.resolvednuoreimmuoassay,TRFIA)技术等。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 真菌毒素 应用 放射免疫分析技术 化学发光免疫分析技术 检测 放射免疫技术 标记技术
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癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制 被引量:28
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作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 余伟鸿 黄颖 李明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-124,共4页
目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA... 目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA—TRFIA,增强液采用B-二酮体为主的发光增强系统。结果:CEA-TRFIA的线性测量范围为(1~560)μg/L,分析的灵敏度为0.28μg/L,批内和批间的变异系数(CV)分别为7.2%~8.6%和8.9%~13.2%。与AFP,CA12—5、CA19—9和白蛋白均无交叉反应,与CA15—3的交义反应值为1.62μg/L。将1000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测,其相关系数(r)为0.946。结论:CEA—TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求,可替代国外同类检测试剂盒,用于临床血清CEA水平的测定。 展开更多
关键词 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨激光荧光光谱技术在免疫分析中的应用 被引量:9
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作者 潘利华 杜继贤 +2 位作者 谢文兵 杜庆洋 恽勤 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期277-279,共3页
本研究以时间分辨激发荧光光谱分析技术为基础 ,进行稀土离子标记的激光激发的时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA)研究。实验以自行合成的二乙三胺五醋酸酐 (DTPAA)为双功能螯合剂。用 Eu3+标记兔抗人 (RAH) Ig G抗体 ,依据解离增强原理 (DEL... 本研究以时间分辨激发荧光光谱分析技术为基础 ,进行稀土离子标记的激光激发的时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA)研究。实验以自行合成的二乙三胺五醋酸酐 (DTPAA)为双功能螯合剂。用 Eu3+标记兔抗人 (RAH) Ig G抗体 ,依据解离增强原理 (DEL FIA) ,研究了 Eu3+ -β萘甲酰三氟丙酮 (β- NTA)的荧光分辨体系 ,测定了荧光光谱和荧光寿命 ,建立了铕离子分析检出方法 ,其工作曲线范围为 1× 10 - 7~ 1× 10 - 1 1g· m L- 1 ,检测限为 1× 10 - 1 3g· m L- 1 ,相对标准偏差为 6 .4%。结合 TRFIA方法学研究 ,进行了人血清丙型肝炎病毒抗体 (Anti- HCV)检测。并同酶联免疫法 (EL ISA)对比。取得 TRFIA法阳性检测率明显高于EL ISA法的结果。 展开更多
关键词 稀土标记 荧光免疫分析 时间分辨荧光光谱
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基于免疫层析技术的时间分辨荧光免疫分析仪研究 被引量:23
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作者 任冰强 黄立华 黄惠杰 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1330-1335,共6页
基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物... 基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物的含量,参照标准浓度曲线就可以定量得到待测样品溶液的浓度。实验表明,仪器的最低检测浓度可达到ng/mL量级,测量的相对标准偏差小于3%,在5~103ng/mL浓度范围内具有良好的线性响应特性,相关系数R2=0.9997。 展开更多
关键词 传感器技术 标记免疫 时间分辨荧光免疫分析 免疫层析技术
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人附睾蛋白4时间分辨荧光免疫分析在妇科肿瘤诊断中的价值 被引量:16
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作者 张艺 陈道桢 +6 位作者 王珂 许飞 赵军 黄飚 张珏 范俊 周彬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第5期793-796,共4页
目的:建立人附睾蛋白4(HE4)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA),探讨血清HE4检测在妇科肿瘤诊断中的价值。方法:采用铕标记示踪,构建HE4的双抗体夹心TRFIA,并检测了225例受试者血清HE4水平,分析血清HE4在妇科肿瘤中的诊断意义,并探讨诊断子宫... 目的:建立人附睾蛋白4(HE4)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA),探讨血清HE4检测在妇科肿瘤诊断中的价值。方法:采用铕标记示踪,构建HE4的双抗体夹心TRFIA,并检测了225例受试者血清HE4水平,分析血清HE4在妇科肿瘤中的诊断意义,并探讨诊断子宫内膜癌、卵巢癌及宫颈癌的最佳参考值。结果:HE4 TRFIA工作线性范围10~10 000 pmol/L,灵敏度7.5 pmol/L,与CA125和CA199无交叉反应,批间变异系数小于10%,与化学发光法检测结果一致。子宫内膜癌、卵巢癌及宫颈癌组的血清HE4水平明显高于健康对照组,子宫肌瘤组与健康对照组无显著差异;随年龄增长,妇科良恶性肿瘤的患病风险增加。HE4在上述恶性肿瘤检测中ROC^(AUG)>0.5,运用本方法测定的参考值为60 pmol/L。结论:建立了稳定、准确的HE4 TRFIA,有助于妇科肿瘤的诊断。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 卵巢肿瘤 宫颈肿瘤 人附睾蛋白4 时间分辨荧光免疫分析
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时间分辨荧光免疫分析技术的研究进展及在食品安全领域中的应用 被引量:29
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作者 金晶 赖卫华 +1 位作者 涂祖新 李鹏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期886-889,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术是一种建立在免疫吸附分离和时间分辨荧光技术基础上的超灵敏检测方法。这项技术发展迅速,已广泛地应用于诸如临床检测、食品安全快速检测等领域。本文旨在全面地介绍时间分辨免疫荧光分析技术的原理和优点,并... 时间分辨荧光免疫分析技术是一种建立在免疫吸附分离和时间分辨荧光技术基础上的超灵敏检测方法。这项技术发展迅速,已广泛地应用于诸如临床检测、食品安全快速检测等领域。本文旨在全面地介绍时间分辨免疫荧光分析技术的原理和优点,并对这项技术的研究进展和在食品安全领域的应用作一综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光分析 研究进展 食品安全
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胃蛋白酶原双标记时间分辨荧光免疫分析及其初步临床应用 被引量:11
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作者 张珏 黄飚 +4 位作者 朱岚 张艺 刘海燕 马智鸿 郭力宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第4期471-476,共6页
采用钐(Sm3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体(PGⅠ)及铕(Eu3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体(PGⅡ),建立了双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),同时检测人血清PGⅠ和PGⅡ.将抗PGⅠ单克隆抗体8003#、抗PGⅡ单克隆抗体8101#以一定比例共... 采用钐(Sm3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体(PGⅠ)及铕(Eu3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体(PGⅡ),建立了双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),同时检测人血清PGⅠ和PGⅡ.将抗PGⅠ单克隆抗体8003#、抗PGⅡ单克隆抗体8101#以一定比例共包被于96孔微孔板上,用Sm3+标记抗PGⅠ单抗8016#、Eu3+标记抗PGⅡ单抗8102#,采用双抗体夹心法建立PGⅠ/PGⅡ的双标记TRFIA.标准曲线由TRFIA检测仪自带的Log-LogB函数处理.PGⅠ可测范围为0.2~300μg/L,批内和批间变异系数(CV%)分别为5.2%和8.1%,平均回收率为96.9%;PGⅡ可测范围为0.05~55μg/L,批内和批间变异系数(CV%)分别为7.1%和11.7%,平均回收率为103.7%;双标记PGⅠ/PGⅡ-TRFIA与PGⅠ-ELISA法、PGⅡ-ELISA法的测定结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.9426和0.9396.检测300例健康人员的PGⅠ为(157.3±51.0)μg/L,PGⅡ为(10.6±5.9)μg/L,PGⅠ/PGⅡ比值为(14.8±4.3)μg/L.PGⅠ的正常参考值范围在55.3~259.3μg/L之间,PGⅡ正常参考值为<23μg/L,PGⅠ/PGⅡ>6.双标记PGⅠ/PGⅡ-TRFIA方法的研究在国内外尚未见报道,是一种灵敏、简便、快速、经济并可用于大批量样品筛查的方法,有利于各种胃病的大规模普查筛选及患者病程监测. 展开更多
关键词 胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ 双标记 时间分辨荧光免疫分析
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间接竞争时间分辨荧光免疫分析法检测稻米中Cry1C毒素 被引量:6
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作者 徐重新 杨晶祎 +6 位作者 陆梦晓 仲建峰 张存政 张霄 何鑫 刘媛 刘贤金 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期44-48,共5页
利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析(CI-TRFIA)方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制... 利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析(CI-TRFIA)方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制备Eu-N1标记的羊抗兔IgG作为检测抗体,建立Cry1C毒素的CI-TRFIA检测方法,并进行抗原类似物的特异性分析和Cry1C毒素在稻米中的添加回收试验。结果表明:获得的多克隆抗体质量浓度为3.86 mg·mL^-1,效价为1∶48 000;建立的CI-TRFIA检测方法,其灵敏度(IC10)为0.074 ng·mL^-1,中抑制浓度(IC50)为60.16 ng·mL^-1,线性检测范围(IC20~IC80)为0.96~1 633.60 ng·mL^-1;对Cry1B、Cry1Ab和Cry1Ac均有一定的交叉反应;添加回收试验的批内、批间回收率为84.53%~107.12%,变异系数为6.05%~11.24%。结论:该检测方法稳定性和重复性较好,可以满足Cry1C毒素的检测要求。 展开更多
关键词 Cry1C毒素 多克隆抗体 稻米 时间分辨荧光免疫分析
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C肽与胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步临床应用 被引量:4
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作者 马强 李来庆 +4 位作者 贺安 林冠峰 邹丽萍 李明 吴英松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第7期670-676,共7页
建立钐(Sm3+)标记检测C肽(C-peptide)及铕(Eu3+)标记检测胰岛素(insulin)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),并初步尝试检测人血C肽以及胰岛素含量.将抗C肽单克隆抗体(Biodesign No.E54094M)与抗insulin单克隆抗体(BiodesignNo.E86... 建立钐(Sm3+)标记检测C肽(C-peptide)及铕(Eu3+)标记检测胰岛素(insulin)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),并初步尝试检测人血C肽以及胰岛素含量.将抗C肽单克隆抗体(Biodesign No.E54094M)与抗insulin单克隆抗体(BiodesignNo.E86306M)混合包被96孔板,然后用Sm3+标记抗C肽单克隆抗体(Medix No.9103),Eu3+标记抗insulin单克隆抗体(Biodesign No.E86802M),运用双抗体夹心一步法建立C肽/胰岛素双标记时间分辨免疫荧光分析法.结果显示:C肽分析灵敏度为0.2μg/L,线性范围为0.5~22μg/L,平均回收率达到99.6%,分析内和分析间变异系数分别为4.6%~6.0%和5.1%~7.6%.胰岛素分析灵敏度为0.8 mU/L,线性范围为3.6~180 mU/L,平均回收率为99.4%,分析内和分析间变异系数分别为3.7%~6.0%和5.1%~8.0%.C肽/胰岛素双标记检测试剂与PerkinElmer公司对应的单标记进口试剂盒分别同时测定血清样本200份,检测结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.98与0.99.总之,自建C肽/胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析方法的性能均可以达到临床检测要求,有望替代现有国内外较为昂贵的单标记试剂,可用于胰岛素分泌不足导致的糖尿病诊断及糖尿病的大规模普查筛选. 展开更多
关键词 双标记 时间分辨荧光免疫分析 C肽 胰岛素
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