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溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响
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作者 彭哲华 《中国实用医药》 2015年第17期72-74,共3页
目的分析不同程度溶血对时间分辨免疫荧光分析法检测胰岛素结果的影响。方法选择健康成年体检者未发生溶血的300例血液标本,利用低渗溶血法分别制备出不同程度溶血标本,其中:轻度溶血100例、中度溶血100例、重度溶血标本100例;均采用时... 目的分析不同程度溶血对时间分辨免疫荧光分析法检测胰岛素结果的影响。方法选择健康成年体检者未发生溶血的300例血液标本,利用低渗溶血法分别制备出不同程度溶血标本,其中:轻度溶血100例、中度溶血100例、重度溶血标本100例;均采用时间分辨免疫荧光分析法对以上三组不同程度溶血标本分别检测其溶血前后的血清胰岛素水平;并进行组间对比分析。结果各组未溶血前检测结果与轻、中、重度溶血后比较,差异具有统计学意义(P<0.05);且轻、中、重度溶血标本间血清胰岛素水平检测结果比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论溶血对临床测定血清胰岛素水平具有较明显的影响,因此,在进行临床血清胰岛素水平检测时须尽量避免溶血现象发生。 展开更多
关键词 血清胰岛素 测定 溶血 时间分辨免疫荧光分析法
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时间分辨免疫荧光法分析CEA的条件研究 被引量:1
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作者 赵启仁 张福华 +5 位作者 刘洁 林汉 李美佳 庄湘莲 陈艾 胡壁 《同位素》 CAS 北大核心 1995年第3期143-147,共5页
报道了应用时间分辨免疫荧光氏分析血清中CEA的条件研究。用我们研制的N ̄1-(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺-N ̄1,N ̄2,N ̄3,N ̄3-四乙酸铕为螯合剂,用Eu标记了抗CEA单克隆抗体(McAb)C_(17)。在... 报道了应用时间分辨免疫荧光氏分析血清中CEA的条件研究。用我们研制的N ̄1-(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺-N ̄1,N ̄2,N ̄3,N ̄3-四乙酸铕为螯合剂,用Eu标记了抗CEA单克隆抗体(McAb)C_(17)。在免疫分析程序中,对包被的McAb的种类、浓度和封闭时间、第一和第二次反应的温育时间、标记C_(17)的浓度、分析缓冲液等主要实验条件,进行了实验最佳化选择。分析方法的灵敏度为1ng/ml。 展开更多
关键词 时间分辨 免疫荧光分析 癌胚抗原 CEA
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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量:13
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作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页
以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5~ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多
关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析 测定 血清 临床分析 CTTA SAM
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时间分辨免疫荧光法测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分 被引量:2
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作者 吉坤美 李就鸿 +2 位作者 李盟 吴序栎 刘志刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期323-326,共4页
目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏... 目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏原总蛋白抗体、Eu3+标记的链酶亲和素和以β-二酮体为主的增强液等试剂,建立双抗夹心TRFIA方法,用于检测10种食品中是否含有鸡蛋蛋白成分。结果:鸡蛋总蛋白SDS-PAGE显示带大致有10条,其中主要条带有4条,分子量分别为71、55、38、14kDa;成功地研制出双抗体夹心TRFIA法检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为0·625ng/mL,标准曲线在12·5~640ng/mL范围内线性良好;8种食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果均呈现阳性。结论:初步建立了检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分的双抗体夹心TRFIA,具有较好的特异性和灵敏度;该方法对于未标注鸡蛋过敏原成分的食品检测具有一定的实际应用价值。 展开更多
关键词 时间分辨免疫荧光 鸡蛋过敏原 多克隆抗体 食物过敏
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用国产时间分辨荧光免疫分析仪建立检测抗CCP抗体的TrFIA法 被引量:2
5
作者 吴俊渊 谢玮 +3 位作者 朱易华 赵枰 陈彤 曹兴建 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期503-504,共2页
目的用国产时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)仪建立TrFIA法检测IgG类抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP-IgG抗体)。方法以人工合成的环瓜氨酸肽作为抗原包被微孔板,异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合铕(Eu3+-DTTA)标记鼠抗人IgG单克隆抗体,建立TrFIA法,... 目的用国产时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)仪建立TrFIA法检测IgG类抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP-IgG抗体)。方法以人工合成的环瓜氨酸肽作为抗原包被微孔板,异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合铕(Eu3+-DTTA)标记鼠抗人IgG单克隆抗体,建立TrFIA法,分析CCP抗原包被浓度和Eu3+标记抗体最适用量,测定Eu3+标记抗体的标记率,用国产TrFIA仪进行检测,绘制标准曲线并分析本法的线性范围、精密度、特异性,计算回收率。对比分析建立的TrFIA法和欧蒙公司的ELISA法结果的一致率。结果本法CCP抗原的最适包被浓度为5μg/mL,最适Eu3+标记抗体稀释度为1∶1 000;平均每个鼠抗人IgG分子上连接10.27个Eu3+;标准曲线为Y=1.162X+2.819,相关系数(r2)=0.998;批内和批间CV分别为4.8%~5.6%和5.9%~7.6%;平均回收率为97.4%(96.5%~98.6%);用本法检测抗核抗体和抗CCP抗体无交叉反应;与ELISA比对试验结果,两法一致率为96.8%(90/93),Kappa值=0.95。结论建立的TrFIA法敏感性高、特异性好,可为抗CCP抗体的检测提供一种新的选择。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 抗环瓜氨酸肽-IgG抗体 类风湿关节炎
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血清Ⅳ型胶原时间分辨荧光免疫分析检测法的建立和临床应用
6
作者 蒋祥虎 裴豪 +4 位作者 黄飚 朱岚 钱金娟 季瑞云 王惠民 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期164-165,共2页
目的研究建立时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA)检测血清中Ⅳ型胶原(CⅣ),并探讨其临床应用价值。方法以CⅣ多克隆抗体包被板条,Eu3+标记CⅣ单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。建立CⅣ的夹心TrFIA测定法,并检测127例肝病患者和3... 目的研究建立时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA)检测血清中Ⅳ型胶原(CⅣ),并探讨其临床应用价值。方法以CⅣ多克隆抗体包被板条,Eu3+标记CⅣ单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。建立CⅣ的夹心TrFIA测定法,并检测127例肝病患者和30例正常对照血清中CⅣ含量。结果CⅣ夹心TrFIA法的灵敏度12.8μg/L;批内和批间平均CV分别为4.54%和8.06%;平均回收率为98.6%。30例正常献血员血清CⅣ含量为(46.06±22.21)μg/L,急性肝炎患者为(47.25±22.58)μg/L,慢性轻度肝炎患者为(129.01±53.68)μg/L,慢性中度肝炎患者为(277.90±92.36)μg/L,慢性重度肝炎患者为(413.90±162.24)μg/L,肝硬化患者为(568.60±210.40)μg/L。除急性肝炎外,均显著高于正常对照组(P<0.01)。结论建立的测定CⅣ的夹心TrFIA法灵敏度和特异性高,重复性好。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 Ⅳ型胶原 肝硬化 肝炎
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CA50时间分辨荧光免疫分析法与免疫放射分析法的对比研究
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作者 汤俊明 王学才 +2 位作者 肖华龙 张晓峰 虞竞峰 《中国医药导报》 CAS 2007年第04X期105-106,共2页
目的:比较时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)和免疫放射分析法(IRMA)检测糖类抗原CA50的优势。方法:用TRFIA和IRMA分别测定肿瘤和正常对照血清标本中CA50含量并对其测定结果和相关性进行分析。结果:160例患者血清TRFIA结果为(20.55±30... 目的:比较时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)和免疫放射分析法(IRMA)检测糖类抗原CA50的优势。方法:用TRFIA和IRMA分别测定肿瘤和正常对照血清标本中CA50含量并对其测定结果和相关性进行分析。结果:160例患者血清TRFIA结果为(20.55±30.82)U/ml,IRMA结果为(31.49±75.59)U/ml,相关系数r=0.928;88例正常对照组TRFIA测定值为(3.12±5.9)U/ml,IRMA测定值为(8.11±9.5)U/ml,r=0.976。结论:TRFIA与IRMA检测CA50两种方法具有较好的相关性。TRFIA试剂稳定性好,有效期长,无放射性污染,更有利于临床大批量检测的需要,值得进一步研究和推广。 展开更多
关键词 CA50时间分辨荧光免疫分析 免疫放射分析
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人C肽时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制 被引量:2
8
作者 汤永平 吴英松 +5 位作者 杭建峰 徐伟文 孙胜利 余伟鸿 周志聪 李明 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期200-202,共3页
目的研制人C肽(C peptide)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心一步法建立C肽TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的可测范围为0.5~22ng/ml,灵敏度为0.045ng/ml,批内、批间的变异系数(CV)分别为4.1... 目的研制人C肽(C peptide)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心一步法建立C肽TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的可测范围为0.5~22ng/ml,灵敏度为0.045ng/ml,批内、批间的变异系数(CV)分别为4.1%~6.7%和5.4%~6.8%;与胰岛素无交叉反应,与胰岛素原的交叉反应率为9.0%。30份血样用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测,其相关系数为0.992。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。 展开更多
关键词 人C肽 时间分辨免疫荧光分析 试剂盒 实验室检查 胰岛素
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时间分辨荧光免疫分析法检测C反应蛋白方法的建立及应用 被引量:1
9
作者 张欣 刘煜垚 +3 位作者 薛运周 马雪梅 闫红 钟儒刚 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第23期26-28,共3页
目的 制备4,7-(氯磺酸基苯基)-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸(BCPDA)鳌合剂,并以其建立时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术检测C反应蛋白(CRP)的方法.方法 用二甲基甲酰胺(DMF)溶解自制BCPDA后测定其吸光度;以BCPDA分别标记铕(Eu3+... 目的 制备4,7-(氯磺酸基苯基)-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸(BCPDA)鳌合剂,并以其建立时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术检测C反应蛋白(CRP)的方法.方法 用二甲基甲酰胺(DMF)溶解自制BCPDA后测定其吸光度;以BCPDA分别标记铕(Eu3+)、CRP多克隆抗体制备CRP多克隆抗体-BCPDA-Eu3+荧光标记物;以纳米磁珠为固相载体包被CRP单克隆抗体,分别加入CRP抗原及CRP多克隆抗体-BCPDA-Eu3+,应用六合一板式检测仪检测CRP荧光强度.结果 自制BCPDA吸收光谱为220~360 nm, 用337 nm 的紫外光激发得到CRP多克隆抗体-BCPDA-Eu3+的荧光发射光谱, 利用TRFIA可检测到0.1 mg/L 的CRP抗原.结论 本研究成功制备CRP多克隆抗体-BCPDA-Eu3+荧光标记物并建立了TRFIA检测CRP的方法,此为临床检测CRP提供了新的思路,亦为TRFIA的推广应用提供了理论依据. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 C反应蛋白
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时间分辨荧光免疫分析法定量测定乙肝两对半 被引量:5
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作者 邓志峰 韦祖兴 +1 位作者 刘行超 彭芬 《华夏医学》 CAS 2007年第1期119-120,共2页
目的:探讨时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)定量测定乙肝两对半的临床应用价值。方法:用TRFIA与ELISA对96例临床标本同时检测,并进行对比分析。结果:两种方法检测结果经配对卡方检验无显著性差异,P>0.05。结论:TRFIA测定乙肝两对半... 目的:探讨时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)定量测定乙肝两对半的临床应用价值。方法:用TRFIA与ELISA对96例临床标本同时检测,并进行对比分析。结果:两种方法检测结果经配对卡方检验无显著性差异,P>0.05。结论:TRFIA测定乙肝两对半具有灵敏、特异、定量、试剂稳定、无放射性污染等优点,具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 乙肝两对半 定量测定
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抗风疹病毒IgM类抗体生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法的建立与性能评价 被引量:1
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作者 谭玉华 于婷 +6 位作者 陈建起 董梅 岑千红 杨伟国 孙勇 李奕辉 范主桥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期901-903,共3页
目的建立抗风疹病毒IgM类抗体(RV IgM)生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法(BA Mac TrFIA)并评价其分析性能。方法用鼠抗人μ链单克隆抗体(抗-μMcAb)作为包被抗体,生物素化RV重组抗原为桥接抗原,链霉亲合素标记铕作为示踪物,配制... 目的建立抗风疹病毒IgM类抗体(RV IgM)生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法(BA Mac TrFIA)并评价其分析性能。方法用鼠抗人μ链单克隆抗体(抗-μMcAb)作为包被抗体,生物素化RV重组抗原为桥接抗原,链霉亲合素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,测定抗RV IgM抗体,并对其检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、试剂热稳定性进行评价,与同类方法学比对检测1 020例样本,比对实验的一致性分析采用Kappa检验。结果本方法检测国家检测限参考品L1、L2和L3的结果均为阳性反应(S/CO≥1.00),批内变异系数(CV)<15.00%,国家阴性参考品符合率为10/10,国家阳性参考品符合率为5/5;本方法的试剂盒于37℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变;与珠海海泰公司试剂结果符合率为98.82%,Kappa=0.96。结论本方法灵敏度高,特异性强,精密度好;与同类方法学检测结果相关性好,能满足临床应用需要。 展开更多
关键词 生物素-亲合素 捕获 时间分辨荧光免疫分析 风疹病毒 IGM抗体
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丙型肝炎病毒抗体的时间分辨荧光分析法检测 被引量:13
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作者 顾爱萍 朱雪明 +2 位作者 单卫民 王晓明 严桂凤 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期215-215,共1页
关键词 丙型肝炎抗体 时间分辨荧光免疫分析 DELFIA
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氯霉素的直接竞争时间分辨荧光免疫检测法 被引量:1
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作者 张艺 黄飚 +4 位作者 王柯 张珏 朱岚 马智鸿 周彬 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第27期12912-12914,共3页
[目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ... [目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ng/ml,用于牛奶样品检测的添加回收率为89.6%,批内和批间变异系数分别为5.5%和10.1%,与甲砜霉素的交叉反应率<0.01%。[结论]CAP TRFIA直接竞争法灵敏度高、特异性好、性能稳定,适于高通量筛查,有良好的应用前景。 展开更多
关键词 氯霉素 时间分辨荧光免疫分析 牛奶 链霉亲和素
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时间分辨荧光免疫分析仪测量时间稳定性的研究与设计
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作者 王慧锋 潘德辉 张芹 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期283-287,共5页
时间分辨荧光免疫分析仪的测量精度取决于微弱荧光信号的测试精度,而测量时间不稳定将导致测量的荧光信号强度发生波动。针对影响测量时间精度的3个因素(时基信号误差、触发误差、量化误差),采用TX2108带温度补偿的晶体振荡器作为时基... 时间分辨荧光免疫分析仪的测量精度取决于微弱荧光信号的测试精度,而测量时间不稳定将导致测量的荧光信号强度发生波动。针对影响测量时间精度的3个因素(时基信号误差、触发误差、量化误差),采用TX2108带温度补偿的晶体振荡器作为时基信号源,减小时基信号误差;采用RISC结构的高速单片机及性能稳定的74HC系列外围器件,减小触发误差;采用双游标法使测时分辨力提高3个数量级,减小量化误差。实验表明:在保证同样测量精度的前提下,所需测量次数由1 000次减少到120次。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 荧光信号测量 测量时间稳定性 游标
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时间分辨荧光免疫法测定肉类食品中的沙丁胺醇 被引量:3
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作者 董嘉 胥顺 郑成斌 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期802-807,共6页
研制一种可检测肉类食品中沙丁胺醇的时间分辨免疫荧光分析(time-resolved x12 25·1 luoroimmunoassay,TRFIA)试剂盒,并评价其效能。将抗SAL的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu3+标记SAL单克隆抗体作为检测抗体,建立SAL单标... 研制一种可检测肉类食品中沙丁胺醇的时间分辨免疫荧光分析(time-resolved x12 25·1 luoroimmunoassay,TRFIA)试剂盒,并评价其效能。将抗SAL的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu3+标记SAL单克隆抗体作为检测抗体,建立SAL单标记TRFIA试剂盒,并评价试剂盒的灵敏度、精密度、稳定性等指标。自制试剂盒SAL的线性范围为0~500 ng·L^(-1),最低检出浓度为0.12 ng·L^(-1);稳定性试验表明该试剂盒可在4℃稳定半年,37℃稳定7 d。自制试剂盒检测阴性样本,阴性符合率为100%。与高浓度的克伦特罗有一定的交叉反应,与500 ng·L^(-1)以内肾上腺素(AD)、去肾上腺素(NO)均无交叉反应,三种样品中SAL的加标回收率分别为108.3%、104.5%、98.6%。所研制的试剂盒的各项性能稳定、灵敏性高、可测范围宽,稳定性好,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨荧光法检测乙肝表面抗原LOD及参考区间的验证和建立 被引量:1
16
作者 黄利君 常凡 +1 位作者 莫展 刁奇志 《中国医药导报》 CAS 2019年第7期149-152,共4页
目的验证时间分辨荧光分析法检测乙肝表面抗原(HBs Ag)的检出限(LOD),评价参考区间的合适性。方法自2017年10月~2018年1月对HBs Ag二级标准物倍比稀释后采用时间分辨荧光分析法及酶联免疫吸附法(ELISA)进行配对检测,标准物浓度除以稀... 目的验证时间分辨荧光分析法检测乙肝表面抗原(HBs Ag)的检出限(LOD),评价参考区间的合适性。方法自2017年10月~2018年1月对HBs Ag二级标准物倍比稀释后采用时间分辨荧光分析法及酶联免疫吸附法(ELISA)进行配对检测,标准物浓度除以稀释后检测结果出现阴性的上一稀释度为LOD,验证厂商的声明,比较两种方法检测同一稀释度样品结果,评估厂商声明的参考区间的合适性;根据美国临床实验室标准委员会(CLSI)EP17-A2规定的方法建立空白限(LOB)及LOD,评价已建立的LOD作为参考区间上限的合适性。结果时间分辨荧光法的LOD验证结果为0.1 U/m L,与厂商声明相符。如使用时间分辨荧光检测系统厂商声明的参考区间,标准物稀释3倍后结果判为假阴性,与ELISA检测结果不符。重庆医科大学附属永川医院(以下简称"我院")检验科建立的HBs Ag的LOB及LOD分别为0.048 ng/m L及0.137 ng/m L,如以我院检验科建立的LOD制订参考区间,稀释3倍后两种方法结果一致,均为阳性。结论时间分辨免疫荧光分析系统声明的LOD可以接受,但厂商声明的参考区间不适宜,易导致假阴性。检验科应建立自己的LOD来制订参考区间。建议在对病毒标志物定量检测项目进行性能验证时增加参考区间的验证。 展开更多
关键词 乙肝表面抗原 EasyCuta全自动时间分辨免疫荧光分析 LOD 参考区间
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TRFIA法检测总免疫球蛋白E的分析灵敏度及可报告范围的建立 被引量:3
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作者 谭玉华 孙宝清 《山东医药》 CAS 2013年第46期21-24,共4页
目的探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测总免疫球蛋白E(总IgE)的分析灵敏度,并建立可报告范围。方法以试剂盒0 IU/mL的校准品A为空白样本,用校准品A将12 IU/mL的校准品稀释成低浓度系列样本作为分析灵敏度试验样品,空白样本批内重... 目的探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测总免疫球蛋白E(总IgE)的分析灵敏度,并建立可报告范围。方法以试剂盒0 IU/mL的校准品A为空白样本,用校准品A将12 IU/mL的校准品稀释成低浓度系列样本作为分析灵敏度试验样品,空白样本批内重复检测20次,分析灵敏度样本天间重复检测20次,记录每次测定的发光值CPs,计算检测低限(LLD)、生物检测限(BLD)和功能灵敏度(FS)。参考EP6-A文件和相关文献,选用1.21 IU/mL和2 001.01 IU/mL的样本按比例精确配制成不同浓度的系列分析测量范围(AMR)试验样品,重复检测4次,将实测值与预期值作比较,建立该系统的AMR,并选用3份接近AMR上限的高浓度样本,用稀释液做不同倍数稀释后检测,计算稀释回收率,确定该系统最大允许稀释倍数,并结合FS建立临床可报告范围(CRR)。结果本研究总IgE TRFIA系统的LLD可达0.21 IU/mL,BLD可达1.00 IU/mL,FS为1.00 IU/mL,AMR为1.12~1 601.03 IU/mL。确定了可最大允许稀释倍数为1:100,CRR为1.00 IU/mL^160 103 IU/mL。结论本研究总IgE TRFIA系统的灵敏度高,AMR和CRR可满足临床需要。 展开更多
关键词 分析灵敏度 可报告范围 时间分辨荧光免疫 免疫球蛋白E
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基于稀土铕离子配合物的时间分辨荧光pH探针的合成及应用
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作者 黄大伟 邴永鑫 +2 位作者 洪伟 崔恺 虢清伟 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期745-749,共5页
以4,7-二苯基-1,10-菲哆啉(母体)和2-噻吩甲酰三氟丙酮为协同剂和β-二酮配体,合成了一种稀土三元铕离子配合物,其荧光寿命为0.5440ms,并以其为荧光探针对水环境的pH进行时间分辨荧光测定。荧光探针的时间分辨荧光强度在pH7.00... 以4,7-二苯基-1,10-菲哆啉(母体)和2-噻吩甲酰三氟丙酮为协同剂和β-二酮配体,合成了一种稀土三元铕离子配合物,其荧光寿命为0.5440ms,并以其为荧光探针对水环境的pH进行时间分辨荧光测定。荧光探针的时间分辨荧光强度在pH7.00~8.95时达到最大值并保持较好的稳定性;在pH小于7.00和pH大于8.95时,荧光探针的时间分辨荧光强度随着pH变化而变化;在pH2.50~7.00和pH9.91-14.00时,荧光探针的时间分辨荧光猝灭率与pH呈线性关系。溶解氧浓度和离子强度变化对pH测定结果无影响。采用荧光探针测定实际水样的pH,结果与玻璃电极的测定结果相符,测定值的相对标准偏差(n=8)在4.3%~8.1%之间。 展开更多
关键词 铕离子配合物 时间分辨荧光分析 探针 PH测定
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氟喹诺酮类药物免疫分析方法研究进展 被引量:12
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作者 蔡新发 张帆 +9 位作者 张家赫 李进 肖娟娟 巴清源 郭梦帅 赵滢喻 邵媛媛 尚慧杰 陈秀金 王耀 《现代农业科技》 2018年第9期266-267,272,共3页
氟喹诺酮类药物是一种广谱高效的抗菌类药物,现已广泛应用于畜牧业生产中,但由于养殖户对该类药物的长期不合理使用,造成了动物组织中的药物残留问题日益严重。因此,建立高灵敏、低成本和高通量的氟喹诺酮类药物检测方法,对于保障动物... 氟喹诺酮类药物是一种广谱高效的抗菌类药物,现已广泛应用于畜牧业生产中,但由于养殖户对该类药物的长期不合理使用,造成了动物组织中的药物残留问题日益严重。因此,建立高灵敏、低成本和高通量的氟喹诺酮类药物检测方法,对于保障动物性食品安全具有重要意义。文章综述了检测氟喹诺酮类药物的各种免疫分析方法,包括酶联免疫分析法、胶体金免疫层析法、荧光免疫分析法、荧光偏振免疫分析法和时间分辨荧光免疫分析法,同时也比较了各种免疫方法的优缺点,并对氟喹诺酮类药物免疫分析方法的发展方向进行了展望,以期为动物性食品中氟喹诺酮类药物的残留检测提供理论依据。 展开更多
关键词 氟喹诺酮类药物 酶联免疫分析 胶体金免疫层析 荧光免疫分析 荧光偏振免疫分析 时间分辨荧光免疫分析
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癌胚抗原与基质蛋白22双标记时间分辨荧光检测试剂盒的研制及效能评价 被引量:2
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作者 梁焕坤 叶景文 +6 位作者 李佳丽 陈翠翠 郭晓晓 刘细潘 钟树海 黎杰星 李来庆 《分子影像学杂志》 2018年第1期63-67,共5页
目的研制膀胱癌早期诊断指标癌胚抗原(CEA)和核基质蛋白22(NMP22)的双标记时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒,并评价其效能。方法将抗CEA和NMP22的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu^(3+)标记CEA单克隆抗体和Sm^(3+)标记NMP22的... 目的研制膀胱癌早期诊断指标癌胚抗原(CEA)和核基质蛋白22(NMP22)的双标记时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒,并评价其效能。方法将抗CEA和NMP22的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu^(3+)标记CEA单克隆抗体和Sm^(3+)标记NMP22的单克隆抗体作为检测抗体,建立CEA和NMP22的双标记TRFIA试剂盒,并评价试剂盒的灵敏度、精密度、稳定性等指标。结果自制试剂盒稀释回收率高。CEA的线性范围为0~600 ng/mL,最低检出浓度为0.12 ng/mL;NMP22的线性范围为0~1000 U/mL,最低检出浓度为0.21 U/mL。精密度良好,分析内精密度分别为2.5%~4.3%,1.1%~4.2%,分析间精密度分别为3.0%~5.7%,4.7%~5.5%。定性试验表明该试剂盒可在4℃稳定半年,37℃稳定7 d。自制试剂盒与膀胱癌镜检的阳性符合率为97.7%,阴性符合率为100%。结论所研制的试剂盒的各项性能及检测指标均达到临床检验的要求,且准确度高、灵敏性高、可测范围宽,稳定性好,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 癌胚抗原 核基质蛋白22 时间分辨免疫荧光分析
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