百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立及应用

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作者 马强 林冠峰 +2 位作者 邹丽萍 李明 吴英松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1509-1512,共4页

目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交... 目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交叉反应,并初步可应用于百日咳疫苗中免疫原的监测。结论自制百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法能够较为可靠的监控百日咳疫苗质量。 展开更多

关键词 百日咳 S1亚基 时间分辨免疫荧光分析法

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γ-干扰素时间分辨免疫荧光分析方法的建立 被引量：2

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作者 额尔敦 郭美香 +5 位作者 韩玲 其其格 刘士山 张丽民 陈杞 张庆荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第4期388-391,共4页

采用生物素 Ｅｕ３ ＋ 标记链亲和素双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析技术 （ Ｔ Ｒ Ｉ Ｆ Ｍ Ａ） ， 建立新的γ干扰素检测技术， 提高γ干扰素检测方法的灵敏度． 用固相包被的兔多抗捕获样品中 Ｉ Ｆ Ｎγ， 以具有中和 Ｉ ... 采用生物素 Ｅｕ３ ＋ 标记链亲和素双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析技术 （ Ｔ Ｒ Ｉ Ｆ Ｍ Ａ） ， 建立新的γ干扰素检测技术， 提高γ干扰素检测方法的灵敏度． 用固相包被的兔多抗捕获样品中 Ｉ Ｆ Ｎγ， 以具有中和 Ｉ Ｆ Ｎγ抗病毒活性的生物素化单抗作为二抗体， 再加 Ｅｕ３ ＋ 标记链亲和素并荧光检测． 已知不同浓度标准 Ｉ Ｆ Ｎγ Ｃ Ｐ Ｓ 值的标准曲线， 判断待检样品中 Ｉ Ｆ Ｎγ量． 本方法最低检测值为００２ μｇ／ Ｌ， 检测范围为００２ ～４００ μｇ／ Ｌ， 而 Ｔ Ｎ Ｆα， Ｉ Ｌ２ 和 Ｉ Ｆ Ｎα等细胞因子无交叉反应． 对基因工程 Ｉ Ｆ Ｎγ的生产， 纯化过程中定性， 定量监控以及对培养细胞上清中 Ｉ Ｆ 展开更多

关键词 Γ-干扰素 EU^3+ 时间分辨 免疫荧光分析

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化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析 被引量：10

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作者 符小玉 邬飞源 +4 位作者 陈钢 谢艳玲 邓国华 甘绍军 谭德明 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期258-262,共5页

目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIF... 目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 乙型肝炎表面抗原 HBSAG 肝炎病毒 乙型 雅培全自动化学发光免疫分析法 时间分辨免疫荧光法 相关性

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时间分辨免疫荧光法定量检测血清HBeAg／HBeAb的可行性分析 被引量：1

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作者 符小玉 邬飞源 +4 位作者 陈钢 谢艳玲 邓国华 甘绍军 傅蕾 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期852-855,共4页

目的:探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法:157份来自... 目的:探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法:157份来自中南大学湘雅医院感染病科门诊的HBV感染患者的血清标本,分别用CMIA和TRIFA两种方法进行HBeAg定量及HBeAg/HBeAb定性检测,并对结果进行对比分析。结果:两种方法定量检测HBeAg的直线回归方程为:Y=0.72779X–4.0551(r=0.712,P<0.001)。与CMIA比较,TRIFA检测HBeAg定性结果的灵敏度和特异性分别为89.89%和100%,两种方法诊断HBeAg符合率为94.27%。TRIFA检测HBeAb定性结果的灵敏度和特异性分别为100%和95.45%,两种方法诊断HBeAb的符合率为97.45%。结论:TRIFA在HBeAg/HBeAb定量检测上的准确性、灵敏度和特异性与CMIA基本相当,二者HBeAg/HBeAb诊断符合率高。 展开更多

关键词 乙型肝炎 HBeAg/HBeAb 全自动化学发光免疫分析法 时间分辨免疫荧光法

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检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价 被引量：4

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作者 毛骞 陈翠翠 +3 位作者 梁焕坤 刘鹏娥 钟树海 李来庆 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期770-776,共7页

目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu... 目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。 展开更多

关键词 β胶联降解产物 N端中分子片段 骨质疏松症 双抗体夹心 双标记时间分辨免疫荧光分析

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犬瘟热病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量：8

6

作者 陈翠翠 赖宏锐 +3 位作者 梁焕坤 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期258-262,共5页

为建立犬瘟热病毒(CDV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法,本研究将抗CDV的3H7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体,Eu3+标记2G4 MAb作为检测抗体,建立了检测CDV抗原的双抗体夹心TRFIA分析法,并初步制备成试剂盒。通过灵敏度、准确度(稀释回收... 为建立犬瘟热病毒(CDV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法,本研究将抗CDV的3H7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体,Eu3+标记2G4 MAb作为检测抗体,建立了检测CDV抗原的双抗体夹心TRFIA分析法,并初步制备成试剂盒。通过灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性、临床样本检测等实验评价其检测性能。结果显示,该双抗体夹心TRFIA分析法对CDV的检测灵敏度为0.58 ng/mL,线性范围在2.5 ng/mL^640 ng/mL,与荧光值有较强的剂量-反应关系;平均稀释回收率为100.48%,与其它常见病毒无明显交叉反应,特异性较强;批内CV值为5.60%~7.58%,批间CV值为5.67%~7.64%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存半年,37℃稳定保存7 d。与RT-PCR法同时检测65份疑似CDV样本和15份健康样本,2种检测方法的符合率为100%。本研究建立的CDV TRFIA方法具有灵敏度高、特异性强、准确率好、方便快捷等优点,为大批量CDV临床样品的检测提供了可行技术手段。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析

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癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制 被引量：28

7

作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 余伟鸿 黄颖 李明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-124,共4页

目的：利用时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）技术，建立一种人血清癌胚抗原（CEA）的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法：采用双抗体夹心法（用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板，另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕）建立CEA... 目的：利用时间分辨免疫荧光分析（TRFIA）技术，建立一种人血清癌胚抗原（CEA）的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法：采用双抗体夹心法（用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板，另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕）建立CEA—TRFIA，增强液采用B-二酮体为主的发光增强系统。结果：CEA-TRFIA的线性测量范围为（1～560）μg／L，分析的灵敏度为0．28μg／L，批内和批间的变异系数（CV）分别为7．2％～8．6％和8．9％～13．2％。与AFP，CA12—5、CA19—9和白蛋白均无交叉反应，与CA15—3的交义反应值为1．62μg／L。将1000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测，其相关系数（r）为0．946。结论：CEA—TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求，可替代国外同类检测试剂盒，用于临床血清CEA水平的测定。 展开更多

关键词 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析

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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量：13

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作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多

关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析法 铕 测定 血清 临床分析 CTTA SAM

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犬细小病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量：4

9

作者 陈翠翠 梁焕坤 +3 位作者 赖宏锐 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期165-170,共6页

为建立犬细小病毒(CPV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,本实验采用抗CPV单克隆抗体(MAb)7D5作为包被抗体,Eu3+标记的MAb 2F7作为检测抗体,对各反应条件优化后制备双抗体夹心TRFIA试剂盒。并评价了其灵敏度、准确度、特... 为建立犬细小病毒(CPV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,本实验采用抗CPV单克隆抗体(MAb)7D5作为包被抗体,Eu3+标记的MAb 2F7作为检测抗体,对各反应条件优化后制备双抗体夹心TRFIA试剂盒。并评价了其灵敏度、准确度、特异性、重复性和稳定性。利用该试剂盒与RT-PCR方法同时检测了疑似患病犬的临床粪便、呕吐物、血液样品(各60份)和CPV阴性犬这3种临床样品各10份,比较并计算二者的符合率。优化结果显示,最佳的TRFIA反应条件为:MAb 7D5的包被浓度为15μg/mL;Eu^(3+)标记试剂与标记MAb 2F7(2.5 mg/mL)最佳体积分别为70μL和30μL;反应体系为25μL CPV标准品或待测样品+200μL分析缓冲液+200μL Eu^(3+)-检测抗体+200μL增强液。灵敏度试验显示TRFIA方法对CPV灭活病毒检测灵敏度为0.83 ng/mL。准确度试验结果显示,不同浓度CPV标准品稀释(1:2、1:4、1:8)后的稀释回收率在89.25%~100.8%;特异性试验结果显示,该方法除对不同亚型CPV的检测结果均为阳性外,对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒I型、犬冠状病毒、猫细小病毒、水貂肠炎病毒等检测均为阴性,无明显交叉反应;对高、中、低3种不同浓度CPV的重复性试验结果显示,批内变异系数为2.34%~4.76%,批间变异系数为2.38%~5.10%;稳定性试验结果显示,该试剂盒至少可在4℃稳定保存6个月,37℃保存7 d;临床样品的检测结果显示,利用该方法从大部分疑似患病犬的粪便、血液以及呕吐物中均检测到了CPV,而CPV阴性犬这3类样品的检测结果均为阴性。本研究建立的TRFIA法和RT-PCR法检测结果一致,符合率达到100%。上述结果表明,本研究制备的CPV TRFIA试剂盒灵敏度准确度高、特异性强、重复性、稳定性好,且可检测的临床样品种类多,为临床样品的检测提供有效技术手段。 展开更多

关键词 犬细小病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析

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人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制 被引量：9

10

作者 杭建峰 吴英松 +4 位作者 余伟鸿 徐伟文 王从容 裘宇容 李明 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期313-317,共5页

目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l～1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3... 目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l～1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%～5.9%,3.7%～6.5%.与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应.稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7 d.426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0～12 U/ml.用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995.结论试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒. 展开更多

关键词 人甲胎蛋白(hAFP) 时间分辨免疫荧光分析(TRFIA) 试剂盒

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犬冠状病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量：3

11

作者 陈翠翠 梁焕坤 +4 位作者 高浩维 赖宏锐 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期92-97,共6页

探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对... 探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对试剂盒的准确度、特异性、重复性、稳定性、临床样本检测等性能进行评估。本研究制备的CCV时间分辨免疫荧光试剂盒灵敏度为0.68 ng/mL;各浓度CCV标准品在不同水平的稀释度回收率在94.6%~105.6%;同步检测CPV、CD、CPIV、CAV-1标准品均为阴性,特异性好;批内CV为1.91%~5.03%,批间CV为1.82%~6.03%,重复性好;试剂盒在4℃保存6个月,37℃保存7 d后,试剂盒各项性能均无明显变化;临床样本检测结果与RT-PCR方法结果一致。本研究制备的CCV TRFIA试剂盒具有灵敏度、准确度高,重复性、稳定性良好的优点,能够对CCV的临床样本进行大量的筛查,为CCV患病犬的早期确诊提供了一种全新的技术手段。 展开更多

关键词 犬冠状病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析

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时间分辨免疫荧光法测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分 被引量：2

12

作者 吉坤美 李就鸿 +2 位作者 李盟 吴序栎 刘志刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期323-326,共4页

目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏... 目的:建立双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA)用于测定食物中鸡蛋过敏原蛋白成分,为进出口食品鸡蛋过敏原成分检测提供技术基础。方法:提取鸡蛋过敏原总蛋白,免疫小鼠获得多克隆抗体,并以此抗体包被酶标板,采用生物素标记抗鸡蛋过敏原总蛋白抗体、Eu3+标记的链酶亲和素和以β-二酮体为主的增强液等试剂,建立双抗夹心TRFIA方法,用于检测10种食品中是否含有鸡蛋蛋白成分。结果:鸡蛋总蛋白SDS-PAGE显示带大致有10条,其中主要条带有4条,分子量分别为71、55、38、14kDa;成功地研制出双抗体夹心TRFIA法检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分,具有特异性,其最低检出限为0·625ng/mL,标准曲线在12·5～640ng/mL范围内线性良好;8种食品检测结果与食物过敏原标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果均呈现阳性。结论:初步建立了检测食品中鸡蛋过敏原蛋白成分的双抗体夹心TRFIA,具有较好的特异性和灵敏度;该方法对于未标注鸡蛋过敏原成分的食品检测具有一定的实际应用价值。 展开更多

关键词 时间分辨免疫荧光法 鸡蛋过敏原 多克隆抗体 食物过敏

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时间分辨荧光免疫分析法通过分析试剂的研究 被引量：2

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作者 贺广彩 陈杞 +1 位作者 陈克明 张丽民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期80-84,共5页

时间分辨荧光免疫分析法通过分析试剂的研究贺广彩，陈杞，陈克明，张丽民时间分辨荧光免疫分析（ＴＲ－ＦＩＡ）［１，２］是８０年代初发展起来的一种新型免疫分析技术，具有标记物稳定，试剂盒货架寿命长，无放射性危害和灵敏度高等... 时间分辨荧光免疫分析法通过分析试剂的研究贺广彩，陈杞，陈克明，张丽民时间分辨荧光免疫分析（ＴＲ－ＦＩＡ）［１，２］是８０年代初发展起来的一种新型免疫分析技术，具有标记物稳定，试剂盒货架寿命长，无放射性危害和灵敏度高等特点。基于第二抗体如羊抗兔抗血清或... 展开更多

关键词 时间分辨 免疫荧光法 标记比率

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血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

14

作者 彭建柳 温莺芬 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1310-1311,共2页

目的建立血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法。方法采用双抗体夹心一步法建立游离β-HCG试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的可测范围为3～200ng/mL,灵敏度为0.12ng/mL,CV分别为4.23%和5.73%,与hLH、hFSH、hTSH的交... 目的建立血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法。方法采用双抗体夹心一步法建立游离β-HCG试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的可测范围为3～200ng/mL,灵敏度为0.12ng/mL,CV分别为4.23%和5.73%,与hLH、hFSH、hTSH的交叉反应低,与2000U/L的hCG的交叉反应结果小于100ng/ml。51份血样用本试剂盒与国外同类试剂同时检测,其相关系数为0.95。结论时间分辨荧光免疫分析法是目前血清游离β-HCG检测中最灵敏的方法,该分析法稳定性好,具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 游离Β-HCG 时间分辨荧光免疫分析法

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狂犬病毒核蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒研制 被引量：4

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作者 黄黉 林冠峰 +3 位作者 陈少琅 刘天才 李明 吴英松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期562-565,569,共5页

目的研制狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立RV NP TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒准确度好,线性范围为5～2 500mEU/mL,灵敏度为1.018mEU/mL,精密度良好,分析内... 目的研制狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立RV NP TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒准确度好,线性范围为5～2 500mEU/mL,灵敏度为1.018mEU/mL,精密度良好,分析内精密度为2.7%～9.3%,分析间精密度为3.5%～12.2%。将15份疫苗样品用本法与国内常用ELISA检测试剂盒同时检测,其相关系数r为0.85,稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定半年,37℃稳定7d。结论试剂盒各项已检测指标达到临床检验要求,有望进一步作临床检测试验。 展开更多

关键词 狂犬病毒 核蛋白 定量检测 双抗夹心时间分辨免疫荧光分析

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时间分辨免疫荧光分析测定人血清铁蛋白 被引量：2

16

作者 魏文清 王仁芝 蒋中华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第5期373-377,共5页

用一种新型非放射性免疫分析——时间分辨荧光免疫分析法测定人血清铁蛋白含量。方法灵敏度达2ng/ml;测量范围5—1500ng/ml;批内、批间变异系数分别为7.1±0.8％和10.0±1.3％(x±SD);回收率为98.4±7.4％。测定值与RI... 用一种新型非放射性免疫分析——时间分辨荧光免疫分析法测定人血清铁蛋白含量。方法灵敏度达2ng/ml;测量范围5—1500ng/ml;批内、批间变异系数分别为7.1±0.8％和10.0±1.3％(x±SD);回收率为98.4±7.4％。测定值与RIA法测定值比较,相关性良好。 展开更多

关键词 时间分辨荧光 免疫荧光分析 铁蛋白

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胃蛋白酶原双标记时间分辨荧光免疫分析及其初步临床应用 被引量：11

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作者 张珏 黄飚 +4 位作者 朱岚 张艺 刘海燕 马智鸿 郭力宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第4期471-476,共6页

采用钐(Sm3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体(PGⅠ)及铕(Eu3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体(PGⅡ),建立了双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),同时检测人血清PGⅠ和PGⅡ.将抗PGⅠ单克隆抗体8003#、抗PGⅡ单克隆抗体8101#以一定比例共... 采用钐(Sm3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体(PGⅠ)及铕(Eu3+)标记抗胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体(PGⅡ),建立了双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),同时检测人血清PGⅠ和PGⅡ.将抗PGⅠ单克隆抗体8003#、抗PGⅡ单克隆抗体8101#以一定比例共包被于96孔微孔板上,用Sm3+标记抗PGⅠ单抗8016#、Eu3+标记抗PGⅡ单抗8102#,采用双抗体夹心法建立PGⅠ/PGⅡ的双标记TRFIA.标准曲线由TRFIA检测仪自带的Log-LogB函数处理.PGⅠ可测范围为0.2～300μg/L,批内和批间变异系数(CV%)分别为5.2%和8.1%,平均回收率为96.9%;PGⅡ可测范围为0.05～55μg/L,批内和批间变异系数(CV%)分别为7.1%和11.7%,平均回收率为103.7%;双标记PGⅠ/PGⅡ-TRFIA与PGⅠ-ELISA法、PGⅡ-ELISA法的测定结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.9426和0.9396.检测300例健康人员的PGⅠ为(157.3±51.0)μg/L,PGⅡ为(10.6±5.9)μg/L,PGⅠ/PGⅡ比值为(14.8±4.3)μg/L.PGⅠ的正常参考值范围在55.3～259.3μg/L之间,PGⅡ正常参考值为<23μg/L,PGⅠ/PGⅡ>6.双标记PGⅠ/PGⅡ-TRFIA方法的研究在国内外尚未见报道,是一种灵敏、简便、快速、经济并可用于大批量样品筛查的方法,有利于各种胃病的大规模普查筛选及患者病程监测. 展开更多

关键词 胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ 双标记 时间分辨荧光免疫分析法

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乙型肝炎病毒核心抗体IgM时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制 被引量：7

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作者 胡妮娅 董志宁 +2 位作者 周卓龙 李明 吴英松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期84-86,共3页

目的利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒抗HBc-IgM的检测试剂盒。方法采用捕获法建立抗HBcIgM TRFIA检测试剂盒,对自制试剂盒的各项性能指标进行评估。结果用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为4.8～7.2%,7.... 目的利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒抗HBc-IgM的检测试剂盒。方法采用捕获法建立抗HBcIgM TRFIA检测试剂盒,对自制试剂盒的各项性能指标进行评估。结果用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为4.8～7.2%,7.5～8.6%;与抗-HBs,抗-HBcIgG和抗-HBe无交叉反应;对584份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果显示自制试剂盒的灵敏度更高;300份健康者血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×3.5。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代酶免法试剂盒。 展开更多

关键词 乙型肝炎病核心抗原zgm 时间分辨荧光免疫分析 酶免法

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氯霉素的直接竞争时间分辨荧光免疫检测法 被引量：1

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作者 张艺 黄飚 +4 位作者 王柯 张珏 朱岚 马智鸿 周彬 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第27期12912-12914,共3页

[目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ... [目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ng/ml,用于牛奶样品检测的添加回收率为89.6%,批内和批间变异系数分别为5.5%和10.1%,与甲砜霉素的交叉反应率<0.01%。[结论]CAP TRFIA直接竞争法灵敏度高、特异性好、性能稳定,适于高通量筛查,有良好的应用前景。 展开更多

关键词 氯霉素 时间分辨荧光免疫分析法 牛奶 链霉亲和素

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时间分辨荧光免疫分析仪测量时间稳定性的研究与设计

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作者 王慧锋 潘德辉 张芹 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期283-287,共5页

时间分辨荧光免疫分析仪的测量精度取决于微弱荧光信号的测试精度,而测量时间不稳定将导致测量的荧光信号强度发生波动。针对影响测量时间精度的3个因素(时基信号误差、触发误差、量化误差),采用TX2108带温度补偿的晶体振荡器作为时基... 时间分辨荧光免疫分析仪的测量精度取决于微弱荧光信号的测试精度,而测量时间不稳定将导致测量的荧光信号强度发生波动。针对影响测量时间精度的3个因素(时基信号误差、触发误差、量化误差),采用TX2108带温度补偿的晶体振荡器作为时基信号源,减小时基信号误差;采用RISC结构的高速单片机及性能稳定的74HC系列外围器件,减小触发误差;采用双游标法使测时分辨力提高3个数量级,减小量化误差。实验表明:在保证同样测量精度的前提下,所需测量次数由1 000次减少到120次。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫分析仪 弱荧光信号测量 测量时间稳定性 游标法

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