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人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制 被引量:9
1
作者 杭建峰 吴英松 +4 位作者 余伟鸿 徐伟文 王从容 裘宇容 李明 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期313-317,共5页
目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l~1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3... 目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l~1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%~5.9%,3.7%~6.5%.与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应.稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7 d.426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~12 U/ml.用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995.结论试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒. 展开更多
关键词 人甲胎蛋白(hAFP) 时间分辨免疫荧光分析(trfia) 试剂盒
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癌胚抗原的时间分辨免疫荧光分析及其诊断试剂的研制 被引量:28
2
作者 杭建峰 吴英松 +2 位作者 余伟鸿 黄颖 李明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-124,共4页
目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA... 目的:利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,建立一种人血清癌胚抗原(CEA)的快速全自动检测方法并研制其诊断试剂。方法:采用双抗体夹心法(用1株抗CEA的mAbM86160M用于包被微孔板,另1株抗CEA的mAb M86110M用于标记铕)建立CEA—TRFIA,增强液采用B-二酮体为主的发光增强系统。结果:CEA-TRFIA的线性测量范围为(1~560)μg/L,分析的灵敏度为0.28μg/L,批内和批间的变异系数(CV)分别为7.2%~8.6%和8.9%~13.2%。与AFP,CA12—5、CA19—9和白蛋白均无交叉反应,与CA15—3的交义反应值为1.62μg/L。将1000份血清标本用本法与国外罗氏化学发光试剂盒同时检测,其相关系数(r)为0.946。结论:CEA—TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求,可替代国外同类检测试剂盒,用于临床血清CEA水平的测定。 展开更多
关键词 癌胚抗原 时间分辨免疫荧光分析
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γ-干扰素时间分辨免疫荧光分析方法的建立 被引量:2
3
作者 额尔敦 郭美香 +5 位作者 韩玲 其其格 刘士山 张丽民 陈杞 张庆荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第4期388-391,共4页
采用生物素 Eu3 + 标记链亲和素双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析技术 ( T R I F M A) , 建立新的γ干扰素检测技术, 提高γ干扰素检测方法的灵敏度. 用固相包被的兔多抗捕获样品中 I F Nγ, 以具有中和 I ... 采用生物素 Eu3 + 标记链亲和素双抗体夹心时间分辨免疫荧光分析技术 ( T R I F M A) , 建立新的γ干扰素检测技术, 提高γ干扰素检测方法的灵敏度. 用固相包被的兔多抗捕获样品中 I F Nγ, 以具有中和 I F Nγ抗病毒活性的生物素化单抗作为二抗体, 再加 Eu3 + 标记链亲和素并荧光检测. 已知不同浓度标准 I F Nγ C P S 值的标准曲线, 判断待检样品中 I F Nγ量. 本方法最低检测值为002 μg/ L, 检测范围为002 ~400 μg/ L, 而 T N Fα, I L2 和 I F Nα等细胞因子无交叉反应. 对基因工程 I F Nγ的生产, 纯化过程中定性, 定量监控以及对培养细胞上清中 I F 展开更多
关键词 Γ-干扰素 EU^3+ 时间分辨 免疫荧光分析
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化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析 被引量:10
4
作者 符小玉 邬飞源 +4 位作者 陈钢 谢艳玲 邓国华 甘绍军 谭德明 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期258-262,共5页
目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIF... 目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 乙型肝炎表面抗原 HBSAG 肝炎病毒 乙型 雅培全自动化学发光免疫分析 时间分辨免疫荧光 相关性
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时间分辨免疫荧光法定量检测血清HBeAg/HBeAb的可行性分析 被引量:1
5
作者 符小玉 邬飞源 +4 位作者 陈钢 谢艳玲 邓国华 甘绍军 傅蕾 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期852-855,共4页
目的:探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法:157份来自... 目的:探讨国产时间分辨免疫荧光法(time-resolved immunofluorescence assay,TRIFA)是否与全自动化学发光免疫分析法(automatic chemiluminescence immunoassay,CMIA)在定量检测HBeAg/HBeAb中具有同样的准确性和特异性。方法:157份来自中南大学湘雅医院感染病科门诊的HBV感染患者的血清标本,分别用CMIA和TRIFA两种方法进行HBeAg定量及HBeAg/HBeAb定性检测,并对结果进行对比分析。结果:两种方法定量检测HBeAg的直线回归方程为:Y=0.72779X–4.0551(r=0.712,P<0.001)。与CMIA比较,TRIFA检测HBeAg定性结果的灵敏度和特异性分别为89.89%和100%,两种方法诊断HBeAg符合率为94.27%。TRIFA检测HBeAb定性结果的灵敏度和特异性分别为100%和95.45%,两种方法诊断HBeAb的符合率为97.45%。结论:TRIFA在HBeAg/HBeAb定量检测上的准确性、灵敏度和特异性与CMIA基本相当,二者HBeAg/HBeAb诊断符合率高。 展开更多
关键词 乙型肝炎 HBeAg/HBeAb 全自动化学发光免疫分析 时间分辨免疫荧光
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检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价 被引量:4
6
作者 毛骞 陈翠翠 +3 位作者 梁焕坤 刘鹏娥 钟树海 李来庆 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期770-776,共7页
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu... 目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。 展开更多
关键词 β胶联降解产物 N端中分子片段 骨质疏松症 双抗体夹心 双标记时间分辨免疫荧光分析
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百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立及应用
7
作者 马强 林冠峰 +2 位作者 邹丽萍 李明 吴英松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1509-1512,共4页
目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交... 目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交叉反应,并初步可应用于百日咳疫苗中免疫原的监测。结论自制百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法能够较为可靠的监控百日咳疫苗质量。 展开更多
关键词 百日咳 S1亚基 时间分辨免疫荧光分析
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狂犬病毒核蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒研制 被引量:4
8
作者 黄黉 林冠峰 +3 位作者 陈少琅 刘天才 李明 吴英松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期562-565,569,共5页
目的研制狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立RV NP TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒准确度好,线性范围为5~2 500mEU/mL,灵敏度为1.018mEU/mL,精密度良好,分析内... 目的研制狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立RV NP TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒准确度好,线性范围为5~2 500mEU/mL,灵敏度为1.018mEU/mL,精密度良好,分析内精密度为2.7%~9.3%,分析间精密度为3.5%~12.2%。将15份疫苗样品用本法与国内常用ELISA检测试剂盒同时检测,其相关系数r为0.85,稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定半年,37℃稳定7d。结论试剂盒各项已检测指标达到临床检验要求,有望进一步作临床检测试验。 展开更多
关键词 狂犬病毒 核蛋白 定量检测 双抗夹心时间分辨免疫荧光分析
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时间分辨免疫荧光分析测定人血清铁蛋白 被引量:2
9
作者 魏文清 王仁芝 蒋中华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第5期373-377,共5页
用一种新型非放射性免疫分析——时间分辨荧光免疫分析法测定人血清铁蛋白含量。方法灵敏度达2ng/ml;测量范围5—1500ng/ml;批内、批间变异系数分别为7.1±0.8%和10.0±1.3%(x±SD);回收率为98.4±7.4%。测定值与RI... 用一种新型非放射性免疫分析——时间分辨荧光免疫分析法测定人血清铁蛋白含量。方法灵敏度达2ng/ml;测量范围5—1500ng/ml;批内、批间变异系数分别为7.1±0.8%和10.0±1.3%(x±SD);回收率为98.4±7.4%。测定值与RIA法测定值比较,相关性良好。 展开更多
关键词 时间分辨荧光 免疫荧光分析 铁蛋白
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犬瘟热病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量:8
10
作者 陈翠翠 赖宏锐 +3 位作者 梁焕坤 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期258-262,共5页
为建立犬瘟热病毒(CDV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法,本研究将抗CDV的3H7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体,Eu3+标记2G4 MAb作为检测抗体,建立了检测CDV抗原的双抗体夹心TRFIA分析法,并初步制备成试剂盒。通过灵敏度、准确度(稀释回收... 为建立犬瘟热病毒(CDV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法,本研究将抗CDV的3H7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体,Eu3+标记2G4 MAb作为检测抗体,建立了检测CDV抗原的双抗体夹心TRFIA分析法,并初步制备成试剂盒。通过灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性、临床样本检测等实验评价其检测性能。结果显示,该双抗体夹心TRFIA分析法对CDV的检测灵敏度为0.58 ng/mL,线性范围在2.5 ng/mL^640 ng/mL,与荧光值有较强的剂量-反应关系;平均稀释回收率为100.48%,与其它常见病毒无明显交叉反应,特异性较强;批内CV值为5.60%~7.58%,批间CV值为5.67%~7.64%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存半年,37℃稳定保存7 d。与RT-PCR法同时检测65份疑似CDV样本和15份健康样本,2种检测方法的符合率为100%。本研究建立的CDV TRFIA方法具有灵敏度高、特异性强、准确率好、方便快捷等优点,为大批量CDV临床样品的检测提供了可行技术手段。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析
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犬细小病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量:4
11
作者 陈翠翠 梁焕坤 +3 位作者 赖宏锐 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期165-170,共6页
为建立犬细小病毒(CPV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,本实验采用抗CPV单克隆抗体(MAb)7D5作为包被抗体,Eu3+标记的MAb 2F7作为检测抗体,对各反应条件优化后制备双抗体夹心TRFIA试剂盒。并评价了其灵敏度、准确度、特... 为建立犬细小病毒(CPV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,本实验采用抗CPV单克隆抗体(MAb)7D5作为包被抗体,Eu3+标记的MAb 2F7作为检测抗体,对各反应条件优化后制备双抗体夹心TRFIA试剂盒。并评价了其灵敏度、准确度、特异性、重复性和稳定性。利用该试剂盒与RT-PCR方法同时检测了疑似患病犬的临床粪便、呕吐物、血液样品(各60份)和CPV阴性犬这3种临床样品各10份,比较并计算二者的符合率。优化结果显示,最佳的TRFIA反应条件为:MAb 7D5的包被浓度为15μg/mL;Eu^(3+)标记试剂与标记MAb 2F7(2.5 mg/mL)最佳体积分别为70μL和30μL;反应体系为25μL CPV标准品或待测样品+200μL分析缓冲液+200μL Eu^(3+)-检测抗体+200μL增强液。灵敏度试验显示TRFIA方法对CPV灭活病毒检测灵敏度为0.83 ng/mL。准确度试验结果显示,不同浓度CPV标准品稀释(1:2、1:4、1:8)后的稀释回收率在89.25%~100.8%;特异性试验结果显示,该方法除对不同亚型CPV的检测结果均为阳性外,对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒I型、犬冠状病毒、猫细小病毒、水貂肠炎病毒等检测均为阴性,无明显交叉反应;对高、中、低3种不同浓度CPV的重复性试验结果显示,批内变异系数为2.34%~4.76%,批间变异系数为2.38%~5.10%;稳定性试验结果显示,该试剂盒至少可在4℃稳定保存6个月,37℃保存7 d;临床样品的检测结果显示,利用该方法从大部分疑似患病犬的粪便、血液以及呕吐物中均检测到了CPV,而CPV阴性犬这3类样品的检测结果均为阴性。本研究建立的TRFIA法和RT-PCR法检测结果一致,符合率达到100%。上述结果表明,本研究制备的CPV TRFIA试剂盒灵敏度准确度高、特异性强、重复性、稳定性好,且可检测的临床样品种类多,为临床样品的检测提供有效技术手段。 展开更多
关键词 犬细小病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析
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犬冠状病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用 被引量:3
12
作者 陈翠翠 梁焕坤 +4 位作者 高浩维 赖宏锐 钟树海 黎杰星 李来庆 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期92-97,共6页
探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对... 探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对试剂盒的准确度、特异性、重复性、稳定性、临床样本检测等性能进行评估。本研究制备的CCV时间分辨免疫荧光试剂盒灵敏度为0.68 ng/mL;各浓度CCV标准品在不同水平的稀释度回收率在94.6%~105.6%;同步检测CPV、CD、CPIV、CAV-1标准品均为阴性,特异性好;批内CV为1.91%~5.03%,批间CV为1.82%~6.03%,重复性好;试剂盒在4℃保存6个月,37℃保存7 d后,试剂盒各项性能均无明显变化;临床样本检测结果与RT-PCR方法结果一致。本研究制备的CCV TRFIA试剂盒具有灵敏度、准确度高,重复性、稳定性良好的优点,能够对CCV的临床样本进行大量的筛查,为CCV患病犬的早期确诊提供了一种全新的技术手段。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 双抗体夹心 时间分辨免疫荧光分析
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赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量:28
13
作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03 ̄1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 真菌毒素 单克隆抗体
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时间分辨荧光免疫分析的新进展 被引量:17
14
作者 辛甜甜 郭松林 +2 位作者 王艺磊 冯建军 林鹏 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-118,共7页
对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TR... 对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TRFIA的发展前景进行了展望(引用文献82篇)。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 荧光共振能量转移-trfia 酶放大-trfia 纳米颗粒-trfia
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T-2毒素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量:10
15
作者 杨润琳 计融 +4 位作者 江涛 汤鲁宏 朱海 李文新 黄飚 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2010年第1期74-76,85,共4页
以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析... 以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立T-2-TRFIA。同时对这一方法的稳定性、灵敏度、回收率和特异性进行考核。此方法灵敏度为0.2μg/L,测量范围0.2~500μg/L,批内变异为7.5%,批间变异为12.7%,平均回收率为89.6%。与赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白无交叉反应。10条不同时间进行的间接竞争T-2-TRFIA的效应点均值ED80、ED50和ED20分别为2.66,6.97,29.11μg/L。同时,用TRFIA和ELISA试剂盒同时检测T-2毒素,在ELISA和TRFIA产品的共同可测范围之内,两者的相关系数为0.926。 展开更多
关键词 T-2毒素(T-2 toxin) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 单克隆抗体
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应用生物素-链霉亲和素的时间分辨荧光免疫分析检测玉米赤霉烯酮 被引量:3
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作者 马智鸿 黄飚 +3 位作者 屠蔷 高蕾 张珏 王柯 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期905-909,共5页
采用基于生物素(Biotin)-链霉亲和素(Strepavidin)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮(ZEN)检测方法。以strepavidin包被板条,加入生物素化的ZEN—BSA,结合在板条上的ZEN—BSA与标准/样本中的游... 采用基于生物素(Biotin)-链霉亲和素(Strepavidin)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮(ZEN)检测方法。以strepavidin包被板条,加入生物素化的ZEN—BSA,结合在板条上的ZEN—BSA与标准/样本中的游离ZEN共同竞争限量的抗ZEN单克隆抗体,用稀土离子Eu“标记的羊抗鼠IgG进行示踪,建立了间接竞争的ZEN-TRFIA。该方法的检测灵敏度为0.2ng/ml,测量范围是0.2~200.0ng/ml,批内、批间变异系数分别为5.7%和8.3%,平均回收率为91.1%。与玉米赤霉醇的平均交叉反应是12.3%,与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应,说明该方法的特异性较好。相关试剂在4℃放6个月后各检测参数基本无变化,说明该方法稳定。样品同时用ZEN—TRFIA和商品ELISA试剂盒测定样品ZEN含量,两者的相关系数为0.9664,说明该方法测量准确。ZEN—TRFIA具有测量准确、检测灵敏度高、检测范围宽、操作简便、标记物稳定等优点,适合于ZEN大量筛查的应用。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮(ZEN) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 生物素-链霉亲和素 真菌毒素
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时间分辨荧光免疫法测定肉类食品中的沙丁胺醇 被引量:3
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作者 董嘉 胥顺 郑成斌 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期802-807,共6页
研制一种可检测肉类食品中沙丁胺醇的时间分辨免疫荧光分析(time-resolved x12 25·1 luoroimmunoassay,TRFIA)试剂盒,并评价其效能。将抗SAL的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu3+标记SAL单克隆抗体作为检测抗体,建立SAL单标... 研制一种可检测肉类食品中沙丁胺醇的时间分辨免疫荧光分析(time-resolved x12 25·1 luoroimmunoassay,TRFIA)试剂盒,并评价其效能。将抗SAL的单克隆抗体作为捕获抗体包被96孔板,用Eu3+标记SAL单克隆抗体作为检测抗体,建立SAL单标记TRFIA试剂盒,并评价试剂盒的灵敏度、精密度、稳定性等指标。自制试剂盒SAL的线性范围为0~500 ng·L^(-1),最低检出浓度为0.12 ng·L^(-1);稳定性试验表明该试剂盒可在4℃稳定半年,37℃稳定7 d。自制试剂盒检测阴性样本,阴性符合率为100%。与高浓度的克伦特罗有一定的交叉反应,与500 ng·L^(-1)以内肾上腺素(AD)、去肾上腺素(NO)均无交叉反应,三种样品中SAL的加标回收率分别为108.3%、104.5%、98.6%。所研制的试剂盒的各项性能稳定、灵敏性高、可测范围宽,稳定性好,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 时间分辨免疫荧光分析
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免疫荧光技术在寄生虫病诊断中的应用 被引量:2
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作者 杨旭清 张韬 《云南畜牧兽医》 2016年第6期40-41,共2页
免疫荧光技术是把血清学和显微镜示踪法结合起来的一种技术。介绍了直接免疫荧光技术、间接免疫荧光技术、时间分辨荧光免疫分析法在寄生虫病诊断中的应用。
关键词 直接免疫荧光技术 间接免疫荧光技术 时间分辨荧光免疫分析 寄生虫病
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TRFIA螯合剂中间体2,6-二(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-4-溴吡啶的合成、分离与表征
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作者 刘婷婷 宁志刚 +1 位作者 赫文龙 潘利华 《化学与生物工程》 CAS 2009年第6期40-42,共3页
以2,6-二(3-甲基-1-H-吡唑基)-4-溴吡啶为原料,经重氮化、溴化合成了新型时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)双功能螯合剂中间体2,6-二(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-4-溴吡啶,通过IR、GC-MS1、HNMR和元素分析等对其结构进行了确认,探讨了合成条... 以2,6-二(3-甲基-1-H-吡唑基)-4-溴吡啶为原料,经重氮化、溴化合成了新型时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)双功能螯合剂中间体2,6-二(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-4-溴吡啶,通过IR、GC-MS1、HNMR和元素分析等对其结构进行了确认,探讨了合成条件及反应机理。同时,通过GC-MS1、HNMR和元素分析等对第一副产物4-溴-2-(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-6-(3′-甲基-1′-吡唑基)吡啶的结构也进行了确认,以其为原料可继续合成目标化合物,大幅提高总产率。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 2 6-二(3'-溴甲基-1'-吡唑基)-4-溴吡啶 4-溴-2-(3'-溴甲基-1'-吡唑基)-6-(3'-甲基-1'-吡唑基)吡啶 螯合剂
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光谱分析与光谱测量
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《中国光学》 EI CAS 1995年第6期10-13,共4页
O433.1 95063601分光光度法测定羽绒产品的清洁度=Measurementof clearness of eider products by spectrophotometry[刊,中]/李俊杰(南宁广西大学化学系.广西,南宁(530004))//计量技术.—1994,(11).—25—33采用分光光度法代替目视法... O433.1 95063601分光光度法测定羽绒产品的清洁度=Measurementof clearness of eider products by spectrophotometry[刊,中]/李俊杰(南宁广西大学化学系.广西,南宁(530004))//计量技术.—1994,(11).—25—33采用分光光度法代替目视法测定羽绒产品清洁度。 展开更多
关键词 光谱分析 清洁度 分光光度法测定 光电子技术 时间分辨荧光免疫分析 平面光栅摄谱仪 时间分辨荧光免疫 严寒 时间分辨免疫荧光分析 化学系
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