日本血吸虫可溶性虫卵抗原对实验性自身免疫性脑脊髓炎的预防保护研究

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作者 郑雪平 胡学强 +4 位作者 陆正齐 周国钰 王敦敬 朱灿胜 邱伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期855-856,共2页

关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 可溶性虫卵抗原 日本血吸虫 预防保护 自身免疫性疾病 血吸虫虫卵 TH2反应 临床行为学

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日本血吸虫可溶性虫卵抗原对B细胞的活化作用及其机制的初步研究

2

作者 田芳 胡雪莉 +4 位作者 魏慧 刘浩 陈瑾 钱莉 杨维平 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1502-1507,共6页

目的:观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)是否能够诱导小鼠B细胞活化及其机制。方法:SEA和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏CD19+B细胞,72 h后用流式细胞术分别检测B细胞表面CD80、CD86及CD40的表达和B细胞细胞周期的改变;用荧光染料CFS... 目的:观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)是否能够诱导小鼠B细胞活化及其机制。方法:SEA和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏CD19+B细胞,72 h后用流式细胞术分别检测B细胞表面CD80、CD86及CD40的表达和B细胞细胞周期的改变;用荧光染料CFSE分裂法检测B细胞增殖;用ELISA法检测培养上清中白介素(IL-)10、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。同时利用ERK、JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测B细胞分泌细胞因子水平的变化。结果:SEA与LPS组可以活化小鼠脾脏CD19+B细胞,使其表面高表达CD80、CD86和CD40;同时诱导S/G2期的B细胞比例显著增加,SEA可以诱导B细胞增殖。SEA与LPS能刺激脾脏CD19+B细胞分泌高水平的IL-10、IL-6。分别阻断NF-κB、ERK、JNK和p38MAPK信号转导通路后可以抑制B细胞IL-10和IL-6的分泌。结论:SEA可以上调小鼠脾脏B细胞表面共刺激分子表达、促进其增殖。同时,SEA可以通过NF-κB、ERK、JNK和p38MAPK信号转导通路刺激小鼠B细胞分泌细胞因子。 展开更多

关键词 日本血吸虫 可溶性虫卵抗原 B细胞 信号转导通路

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日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的免疫学特异性分析 被引量：1

3

作者 唐天才 石团员 +6 位作者 袁东波 侯巍 莫茜 尹杰 阳爱国 郭莉 郝力力 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第8期1857-1861,共5页

【目的】分析日本血吸虫可溶性虫卵抗原的特异组分,为建立牛血吸虫病免疫学诊断方法提供数据支持。【方法】用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹法(Western-blot)、葡聚糖凝胶层析和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),对日本血吸... 【目的】分析日本血吸虫可溶性虫卵抗原的特异组分,为建立牛血吸虫病免疫学诊断方法提供数据支持。【方法】用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹法(Western-blot)、葡聚糖凝胶层析和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),对日本血吸虫可溶性虫卵抗原进行了分离、鉴定。【结果】SDS-PAGE分离出10条蛋白条带,依次为100、80、60、55、45、28、27、17、15和13 KDa的小分子量蛋白;采用阳性病牛血清进行Western-blot,共鉴定出有3条特异带,分子量分别为50、28、17 KDa,28和17KDa条带较为明显,而50KDa条带较弱;葡聚糖凝胶层析分离出2个蛋白质高峰,即大分子量蛋白组分峰(Ⅰ峰)和小分子量蛋白组分峰(Ⅱ峰);再经Dot-ELISA鉴定表明,Ⅱ峰中高速离心后的上清蛋白是可用于牛血吸虫病诊断的特异性抗原。【结论】葡聚糖凝胶层析分离出的Ⅱ峰蛋白再经过高速离心后,其上清蛋白是能够用于牛日本血吸虫病诊断的特异性天然蛋白。 展开更多

关键词 日本血吸虫 可溶性虫卵抗原 SDS-PAGE WESTERN-BLOT DOT-ELISA

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日本血吸虫虫卵可溶性抗原抑制TNBS小鼠结肠炎的实验研究 被引量：1

4

作者 李路 陈熙 +4 位作者 武艺 徐永伟 徐元宏 王书书 沈继龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第10期1556-1561,共6页

目的探讨日本血吸虫虫卵可溶性抗原(Sj SEA)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎的保护作用。方法将Balb/c雌鼠分为三组:正常对照组、TNBS模型组、TNBS+Sj SEA干预组(TNBS灌肠后6 h、24 h经腹腔注射给予50μg Sj SEA)。测定小鼠肠疾... 目的探讨日本血吸虫虫卵可溶性抗原(Sj SEA)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎的保护作用。方法将Balb/c雌鼠分为三组:正常对照组、TNBS模型组、TNBS+Sj SEA干预组(TNBS灌肠后6 h、24 h经腹腔注射给予50μg Sj SEA)。测定小鼠肠疾病活动指数(DAI)、体质量变化、结肠长度、宏观炎症评分(MAO)、镜下组织学评分(MIO)和髓过氧化物酶活性(MPO)及HE染色。同时用流式细胞仪(FACS)检测各组脾中Th1、Th2、Treg的表达。结果与TNBS模型组相比,TNBS+Sj SEA干预组小鼠体质量、结肠长度均有所回升,DAI降低,结肠组织MAO、MIO、MPO均显著降低;HE染色结果显示,TNBS+Sj SEA干预组小鼠结肠炎症程度减弱;FACS检测结果显示:Sj SEA干预后的小鼠脾Th1(CD4+IFNγ+)降低,Th2(CD4+IL-4+)、Treg显著升高。结论 Sj SEA可有效减轻TNBS诱导的小鼠结肠炎症,此保护作用可能与平衡T淋巴细胞亚群Th1/Th2和Treg细胞免疫相关因子的表达、下调Th1、上调Th2、升高CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的表达比例有关。 展开更多

关键词 日本血吸虫 可溶性虫卵抗原 结肠炎 炎症性肠病

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日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导抗卵免疫的初步研究 被引量：31

5

作者 汪世平 易新元 +3 位作者 曾宪芳 赵慰先 吴观陵 管晓虹 《湖南医科大学学报》 CSCD 1995年第3期193-196,共4页

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力；与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝、肠组... 采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力；与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝、肠组织内总虫卵数明显下降，成熟虫卵数和粪卵数分别降低了５９．９８％，６６．８６％和６６．９７％；粪卵下降程度与肝、肠组织中成熟虫卵的减少相一致，ＳＥＡ免疫后未呈现上述效应。 展开更多

关键词 日本血吸虫 卵 自动免疫 可溶性抗原

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应用免疫蛋白质组学方法鉴定日本血吸虫虫卵诊断抗原 被引量：3

6

作者 王越 杨再峰 +4 位作者 马安 施晓华 陈璋辉 刘晓龙 干小仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期861-865,881,共6页

目的虫卵可溶性抗原(soluble egg antigen,SEA)是目前日本血吸虫病免疫诊断中最常用的抗原。本研究联合应用双向凝胶电泳(2-DE)、Western blot和MALDI-TOF质谱等技术,鉴定SEA中诊断抗原蛋白质。方法 SEA经2-DE分离蛋白质后进行银染,或... 目的虫卵可溶性抗原(soluble egg antigen,SEA)是目前日本血吸虫病免疫诊断中最常用的抗原。本研究联合应用双向凝胶电泳(2-DE)、Western blot和MALDI-TOF质谱等技术,鉴定SEA中诊断抗原蛋白质。方法 SEA经2-DE分离蛋白质后进行银染,或应用日本血吸虫感染兔血清Western blot筛选抗原蛋白点,用MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定每一抗原蛋白质分子。结果虫卵可溶性蛋白分子经2-DE分离后转印PVDF膜上,与感染兔血清孵育出现29个特异性阳性反应点,与健康兔血清出现3个非特异的阳性反应点;29个特异性抗阳性反应点中,从银染2-DE胶图上找到21个匹配的抗原蛋白质点;MALDI-TOF/TOF质谱鉴定和NCBI数据库检索,13个点(61.9%)获得匹配蛋白质,4个点(19.0%)获得匹配EST,4个点(19.0%)未能从数据库中找到相匹配的信息。重组表达筛选出的SjCHGC06040和SjP40两个抗原蛋白质,Western blot结果显示reSjCHGC06040、reSjP40均能与感染兔血清抗体发生特异性反应,具有潜在的应用价值。结论 2-DE、MALDI-TOF质谱联合Western blot的免疫蛋白质组学研究方法,用于筛选、鉴定SEA中诊断抗原蛋白质,是切实可行的;但该方法存在一定的局限性,有待进一步改进。 展开更多

关键词 日本血吸虫 虫卵可溶性抗原 免疫蛋白质组学

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SjR12和SjR47组分抗原对日本血吸虫感染小鼠肝内虫卵肉芽肿形成的影响 被引量：5

7

作者 毛佐华 李允鹤 +4 位作者 夏超明 曹岷 郑葵阳 骆伟 胡永德 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第2期24-27,共4页

本项研究将从日本血吸虫感染家兔红细胞上分离、纯化的12kDa和47kDa蛋白分子，分别称为SjR12（虫源性）和SjR47（卵源性）组分抗原，加福氏完全佐剂免疫小鼠，攻击感染后35d、39d和42d时，各组分三批在相同条件下剖杀小鼠的观察结果：获... 本项研究将从日本血吸虫感染家兔红细胞上分离、纯化的12kDa和47kDa蛋白分子，分别称为SjR12（虫源性）和SjR47（卵源性）组分抗原，加福氏完全佐剂免疫小鼠，攻击感染后35d、39d和42d时，各组分三批在相同条件下剖杀小鼠的观察结果：获得31．27～31．33％的减虫率和54．95～72．36％的减卵率；SjR12和SjR47组分抗原均能显著地抑制感染小鼠肝内虫卵肉芽肿形成，特别是SjR47组分抗原具有更显著的免疫抑制作用。本项研究尚未见有类似报道，具有理论意义和应用前景。 展开更多

关键词 日本血吸虫 组分抗原 虫卵肉芽肿 SjR12 SjR47

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未成熟日本血吸虫卵抗原诱导宿主肉芽肿病变免疫调节机理的研究

8

作者 郑葵阳 李允鹤 +3 位作者 骆伟 龚唯 夏超明 胡永德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期421-423,共3页

采用 4wk_SEA、5wk_SEA和 6wk_SEA免疫BALB/c小鼠 ,在攻击感染后 0～ 8周对其血清抗体水平、脾脏淋巴细胞表型进行动态观察。结果显示 ,4wk_SEA免疫鼠血清抗体水平 (ELISA法 )较 5wk_SEA和 6wk_SEA及对照鼠者高 1～ 3个稀释度 ,且用 4wk... 采用 4wk_SEA、5wk_SEA和 6wk_SEA免疫BALB/c小鼠 ,在攻击感染后 0～ 8周对其血清抗体水平、脾脏淋巴细胞表型进行动态观察。结果显示 ,4wk_SEA免疫鼠血清抗体水平 (ELISA法 )较 5wk_SEA和 6wk_SEA及对照鼠者高 1～ 3个稀释度 ,且用 4wk_SEA为抗原检测的特异性抗体水平也较 5wk_SEA和 6wk_SEA者高。应用流式细胞仪分析表明三期SEA免疫鼠脾脏CD4 + /CD8+ 淋巴细胞随攻击感染时间的后移而下降。提示 4wk_SEA的抗病免疫机理与其诱导出的短程特异性抗体的体液免疫和CD4 + /CD8+ 细胞抑制趋势的细胞免疫相关。 展开更多

关键词 日本血吸虫 小鼠 虫卵抗原 肉芽肿病变 免疫调节机理 抗病免疫力 血吸虫病

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黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响 被引量：10

9

作者 朱虹 吴强 +3 位作者 杨雁 袁小松 汪学龙 沈继龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期555-558,共4页

目的观察黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响。方法小鼠腹腔注射日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Solub le egg antigen,SEA),制备SEA活化的腹腔巨噬细胞条件培养基(Solub le egg antigen inducedm acrophage cond i... 目的观察黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响。方法小鼠腹腔注射日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Solub le egg antigen,SEA),制备SEA活化的腹腔巨噬细胞条件培养基(Solub le egg antigen inducedm acrophage cond itioned m ed ium,SEA-MCM)。采用肝星状细胞株HSC-T6细胞,以细胞增殖抑制率为指标,用噻唑蓝(MTT)测定黄芪总苷对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞增殖的影响;通过3H-脯氨酸参入法测定黄芪总苷对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞胶原合成的影响。结果SEA-MCM能明显促进HSC-T6细胞的增殖和胶原合成。黄芪总苷(32.5、65和130 mg.L-1)对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞增殖及胶原合成有明显的抑制作用,且呈药物浓度依赖性关系。结论黄芪总苷对SEA-MCM诱导的肝星状细胞增殖及胶原合成有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 黄芪总苷 血吸虫可溶性虫卵抗原 肝星状细胞 增殖 胶原合成

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日本血吸虫SIEA26-28kDa的抗雌虫生殖免疫作用——HGPRT是否是主要的靶抗原(英文) 被引量：11

10

作者 李文凯 汪世平 +9 位作者 吕志跃 彭先楚 徐绍锐 何卓 周松华 肖小芹 曾少华 戴橄 余俊龙 车宏丽 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第1期1-4,M004,共5页

目的　观察日本血吸虫SIEA2 6 2 8kDa抗原的抗雌虫生殖作用。方法用AcA柱层析纯化日本血吸虫早期胚卵中的SIEA和SIEA2 6 2 8kDa成分 ,并以此纯化产物免疫BALB/c小鼠。将小鼠分为三组 ,分别用SIEA、SIEA2 6 2 8kDa和免疫佐剂免疫动物 ... 目的　观察日本血吸虫SIEA2 6 2 8kDa抗原的抗雌虫生殖作用。方法用AcA柱层析纯化日本血吸虫早期胚卵中的SIEA和SIEA2 6 2 8kDa成分 ,并以此纯化产物免疫BALB/c小鼠。将小鼠分为三组 ,分别用SIEA、SIEA2 6 2 8kDa和免疫佐剂免疫动物 ,然后进行尾蚴攻击感染。 4 6天后剖杀动物 ,冲虫 ,然后作虫荷测定及虫卵分类计数。结果　SIEA2 6 2 8kDa免疫组雌虫子宫内减卵率为 5 4 .8% ,与对照组比较有极显著性差异 ;该实验组动物肝脏和小肠组织内的虫卵数比对照组分别降低了 4 8.0 7%和 77.4 1% ,且以成熟虫卵数的下降较为显著 ,分别降低了 83.6 %和 93.3% ;粪卵数的下降幅度最为显著 ,达87.2 6 %。结论　SIEA2 6 2 8kDa可作为一种抗卵胚发育及抗雌虫生殖的候选抗原分子。 展开更多

关键词 日本血吸虫 靶抗原 对照组 虫卵 宫内 候选抗原 免疫组 雌虫 生殖 免疫动物

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日本血吸虫未成熟卵抗原和成虫抗原分别与联合免疫小鼠的研究 被引量：5

11

作者 杨明义 杨孟祥 +3 位作者 蒋明森 余祖江 董惠芬 李瑛 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第3期28-31,共4页

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）和成虫抗原（SA）分别与联系免疫小鼠的抗卵胚胎发育效果和抗感染效果。方法采用SIEA与SA分别与联合免疫小鼠，于攻击感染后48天剖杀，统计雌雄虫数及肝脏各期虫卵数。结果与对照组比较，S... 目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）和成虫抗原（SA）分别与联系免疫小鼠的抗卵胚胎发育效果和抗感染效果。方法采用SIEA与SA分别与联合免疫小鼠，于攻击感染后48天剖杀，统计雌雄虫数及肝脏各期虫卵数。结果与对照组比较，SIEA单独免疫产生显著抗卵胚胎发育的免疫力，肝组织成熟卵数下降37，3％，成熟卵比例下降24．0％；SA单独免疫产生显著抗感染免疫力，减虫率为34．5％；SIEA与SA联合免疫，产生显著抗感染免疫力和最佳抗卵胚胎发育免疫力，减虫率33．5％，成熟卵数和成熟卵比例分别下降73．8％和45．0％，抗卵胚胎发育免疫力显著高于SIEA单独免疫组。结论提示来源于成虫的抗感染抗原与来源于未成熟虫卵的抗卵胚胎发育抗原联合应用是血吸虫疫苗研制中有希望的发展方向。 展开更多

关键词 日本血吸虫 免疫 抗原 虫卵 SIEA SA

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日本血吸虫成虫抗原合并蚯蚓抗原对小鼠胸腺淋巴细胞及亚群的影响 被引量：3

12

作者 姜昌富 贺宇飞 +1 位作者 于爽 孙焱 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期57-59,共3页

ＢＡＬＢ／ｃ小鼠经可溶性日本血吸虫成虫抗原（ＳＷＡＰ）或／和可溶性蚯蚓抗原（ＳＥＷＰ）免疫后，观察、计数其胸腺Ｔ细胞总数、活性Ｔ细胞、Ｌ３Ｔ４细胞以及Ｌｙｔ２细胞。结果显示，ＳＷＡＰ免疫组Ｌ３Ｔ４细胞明显增加（Ｐ＜０... ＢＡＬＢ／ｃ小鼠经可溶性日本血吸虫成虫抗原（ＳＷＡＰ）或／和可溶性蚯蚓抗原（ＳＥＷＰ）免疫后，观察、计数其胸腺Ｔ细胞总数、活性Ｔ细胞、Ｌ３Ｔ４细胞以及Ｌｙｔ２细胞。结果显示，ＳＷＡＰ免疫组Ｌ３Ｔ４细胞明显增加（Ｐ＜０．０５）；ＳＥＷＰ免疫组４个指标则均无明显变化（Ｐ＞０．０５）；ＳＷＡＰ与ＳＥＷＰ混合制剂免疫组Ｔ细胞总数、活性Ｔ细胞以及Ｌ３Ｔ４细胞均显增加（Ｐ＜０．０５）。相关分析表明：ＣＤ＋４Ｔ细胞（即Ｌ３Ｔ４细胞）在ＳＷＡＰ所诱导的保护性免疫力中可能起重要作用，而ＳＥＷＰ存在细胞免疫以外的其它可能保护性免疫机制。 展开更多

关键词 日本血吸虫 可溶性 成虫抗原 蚯蚓抗原

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应用LHD-Sj23和SjCL基因重组抗原诊断水牛日本血吸虫病的研究 被引量：7

13

作者 陆珂 李浩 +1 位作者 石耀军 林矫矫 《中国兽医寄生虫病》 2005年第1期1-4,共4页

目的:验证日本血吸虫基因重组抗原检测水牛日本血吸虫病的效果。方法:以日本血吸虫基因重组抗原 LHD Sj23/pGEX和SjCL/pET 28a(+)作为抗原,应用ELISA法检测水牛日本血吸虫病。结果:感染日本血吸虫病 阳性符合率分别为93.3%(42/45)和... 目的:验证日本血吸虫基因重组抗原检测水牛日本血吸虫病的效果。方法:以日本血吸虫基因重组抗原 LHD Sj23/pGEX和SjCL/pET 28a(+)作为抗原,应用ELISA法检测水牛日本血吸虫病。结果:感染日本血吸虫病 阳性符合率分别为93.3%(42/45)和95.6%(43/45),阴性符合率分别为93.3%(42/45)和80%(36/45)。和以血 吸虫成虫抗原(SWAP)和虫卵(SEA)抗原作为诊断抗原获得的结果差异不明显。同时将上述两种基因重组抗原混 合作为诊断抗原,检测水牛血吸虫病,结果阳性符合率为88.9%(40/45),阴性符合率为33.3%(15/45)。结论:由 于基因重组抗原制备简便、价廉,有利于诊断技术的标准化。因此,基因重组抗原在血吸虫病诊断领域有着良好的 研究和应用前景。 展开更多

关键词 基因重组抗原 诊断抗原 日本血吸虫病 符合率 阴性 阳性 成虫抗原 水牛 虫卵 应用

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日本血吸虫SIEA66-68kDa抗原的分离、纯化及免疫保护性研究

14

作者 姜孝新 汪世平 +5 位作者 刘雪琴 李庆华 刘明社 何卓 彭先楚 徐绍锐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期271-274,共4页

目的研究日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原66-68kDa(SIEA66-68kDa)的动物免疫保护力,并对其作为天然分子疫苗的可行性进行评估。方法采用电泳切胶、电洗脱、超滤离心等技术,分离纯化SIEA66-68kDa天然分子抗原,免疫小鼠,待其产生抗体后进... 目的研究日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原66-68kDa(SIEA66-68kDa)的动物免疫保护力,并对其作为天然分子疫苗的可行性进行评估。方法采用电泳切胶、电洗脱、超滤离心等技术,分离纯化SIEA66-68kDa天然分子抗原,免疫小鼠,待其产生抗体后进行尾蚴攻击感染(40尾/只),计算减虫率和减卵率。结果 SIEA66-68kDa天然蛋白质分子能刺激机体产生抗日本血吸虫的作用,其减虫率为41.70%,每克肝脏减卵率为51.23%,雌虫子宫减卵率为29.30%,每克大肠减卵率为59.26%,每克粪便减卵率为45.17%,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SIEA66-68kDa天然分子抗原具有刺激小鼠产生较好的抗日本血吸虫感染的免疫保护作用,可作为抗日本血吸虫感染候选分子疫苗的靶标。 展开更多

关键词 日本血吸虫 未成熟虫卵可溶性抗原SIEA66-68kDa 疫苗

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蚯蚓与日本血吸虫交叉反应抗原的初步探讨 被引量：1

15

作者 黄华 姜昌富 黄进 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期470-472,共3页

关键词 日本血吸虫病 交叉反应抗原 蚯蚓 WESTERN-BLOT SDS-PAGE 饱和硫酸铵 硫酸铵梯度 初步 可溶性蛋白 免疫反应性

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日本血吸虫虫卵蛋白组双向凝胶电泳的初步探讨

16

作者 谭耀武 汪世平 《海南医学院学报》 CAS 2004年第4期220-222,共3页

目的:寻找日本血吸虫虫卵蛋白质抗原组分分析的一条新途径。方法:以日本血吸虫虫卵为材料,用固相pH梯度等电聚焦和SDS-PAGE双向凝胶电泳方法对其进行蛋白组分析。结果:获得日本血吸虫虫卵蛋白组双向凝胶电泳图谱。结论:双向凝胶电泳蛋... 目的:寻找日本血吸虫虫卵蛋白质抗原组分分析的一条新途径。方法:以日本血吸虫虫卵为材料,用固相pH梯度等电聚焦和SDS-PAGE双向凝胶电泳方法对其进行蛋白组分析。结果:获得日本血吸虫虫卵蛋白组双向凝胶电泳图谱。结论:双向凝胶电泳蛋白组分析方法可运用于日本血吸虫虫卵蛋白组的分析。 展开更多

关键词 日本血吸虫 虫卵 双向凝胶电泳 血吸虫病 抗原

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日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用 被引量：13

17

作者 何卓 汪世平 +4 位作者 肖小芹 曾少华 刘明社 李林 周帅锋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期921-928,共8页

运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26～28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26～28k... 运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26～28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26～28ku特异性scFv大量表达.随后以此为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,以期获得SIEA26～28ku天然分子候选疫苗相关的编码基因.结果显示,所获得的SIEA26～28ku特异性scFv,表达量高,采用该探针初步筛选出相关基因核糖体蛋白S4.SIEA26～28ku特异性scFv的获得,为进一步筛选、分析鉴定抗日本血吸虫病天然分子候选疫苗SIEA26～28ku的编码基因奠定了基础. 展开更多

关键词 日本血吸虫 未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA) 单链抗体(scFv) 噬菌体展示抗体库 CDNA文库

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检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用(英文) 被引量：3

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作者 汪世平 余路新 +4 位作者 车宏莉 陈秀春 秦永华 高冬梅 刘明社 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1063-1069,共7页

目的:开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法:用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原(SEA),与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸... 目的:开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法:用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原(SEA),与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的。结果:检测137份血清,与间接血凝法(indirect haemagglutination assay,IHA)检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析。结论:胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测。 展开更多

关键词 日本血吸虫病 胶体碳试纸条 抗体检测 可溶性虫卵抗原

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抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究 被引量：3

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作者 何卓 汪世平 +6 位作者 周帅锋 秦永华 高冬梅 汪希雅 李林 余路新 徐绍锐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期704-707,共4页

目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位，探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因．克隆至PET32a／SIEA26～28kDa-scFv质粒，构建PET... 目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位，探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因．克隆至PET32a／SIEA26～28kDa-scFv质粒，构建PET32a／EGFP-scFv质粒。转化至感受态E．coli BL21（DE3）中。并诱导表达单链抗体融合蛋白。分析单链抗体融合蛋白与SIEA26～28kDa的结合特异性。单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育，荧光显微镜下观测GFP信号。确定特异性单链抗体的靶向性。结果重组质粒PET32a／EGFP-scFv构建成功．Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达．与SIEA26-28kDa特异性结合。GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚．雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织。结论SIEA26-28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性，具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用，为SIEA26-28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 未成熟卵可溶性抗原(SIEA) 单链抗体(scFv) 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 靶向性

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日本血吸虫新基因的克隆及分析 被引量：3

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作者 陈欲晓 唐连飞 +3 位作者 章洁 袁仕善 曾宪芳 易新元 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期167-170,共4页

目的:克隆并分析日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)新基因,提供有效的疫苗候选分子。方法用Sj雄虫可溶性抗原免疫家兔血清为探针筛选Sj成虫cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片断进行PCR扩增并测序,通过互联网NCBIGenBank和蛋白质分析... 目的:克隆并分析日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)新基因,提供有效的疫苗候选分子。方法用Sj雄虫可溶性抗原免疫家兔血清为探针筛选Sj成虫cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片断进行PCR扩增并测序,通过互联网NCBIGenBank和蛋白质分析软件进行分析。结果:共筛选得11个阳性克隆,经分析有2个新基因,分别是Sj P8(GenBank注册号AF517843)和Sj肌球蛋白cDNA序列(GenBank注册号AY770506),分别编码含75个氨基酸的跨膜蛋白和含212个氨基酸的蛋白片断。结论:Sj P8和Sj肌球蛋白cDNA序列可能为日本血吸虫疫苗的研究提供有价值的材料。 展开更多

关键词 日本血吸虫 新基因 成虫CDNA文库 cDNA序列 阳性克隆 肌球蛋白 PCR扩增 血吸虫疫苗 探针筛选 抗原免疫 NCBI 分析软件 跨膜蛋白 氨基酸 兔血清 可溶性 互联网 蛋白质 片断 注册

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