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无血清悬浮培养PK-15细胞及其对猪圆环病毒2型增殖的影响: 1; 作者周伟刘旭平 +3 位作者张艳敏彭雯娟赵亮谭文松《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第6期2397-2405,共9页; 【目的】建立基于无血清悬浮培养PK-15细胞生产猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗的工艺,提高PCV2疫苗生产效率,降低PCV2疫苗生产成本。【方法】首先采用直接驯化法对贴壁生长的PK-15细胞进行无血清悬浮培养驯化,并在无血清悬浮培养体系下,采用... 展开更多; 关键词 PK-15细胞无血清悬浮培养猪圆环病毒2型(PCV2) 增殖氨基酸代谢; 在线阅读下载PDF 职称材料

F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究被引量：2: 2; 作者张久鑫邵宝顺 +6 位作者朱辉贾浩苒梁琳汤新明崔尚金梁瑞英王龙涛《动物医学进展》北大核心 2023年第1期48-53,共6页; 为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^... 展开更多; 关键词 F81细胞细胞驯化无血清悬浮培养猫泛白细胞减少症病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

无血清培养基悬浮培养BHK21细胞驯化的研究被引量：4: 3; 作者井莲娜付智财黄炯《草食家畜》 2013年第3期51-56,共6页; 本研究主要探索用常规BHK21贴壁细胞(F38)驯化为适应无血清培养基的全悬浮细胞的过程并使用生物反应器放大进行了相关研究。实验表明:常规BHK21细胞通过运用相应的商品化培养基进行低血清贴壁驯化、再到低血清全悬浮驯化、最后到无血清... 展开更多; 关键词无血清悬浮培养 BHK21 驯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术研究进展被引量：11: 4; 作者王朋朋黄书林 +2 位作者张云科王展慧吴文学《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第3期839-845,共7页; 随着生物制品行业的快速发展,哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术已经运用到越来越多的领域中。该技术能够扩大哺乳动物细胞培养的规模,提高生物制品的产量及质量,拓宽哺乳动物细胞的应用领域,并促进哺乳动物细胞生产实现工业化与产业化... 展开更多; 关键词哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术优化工艺; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同MDCK单克隆细胞株对H5亚型禽流感病毒增殖条件和放大工艺的研究被引量：1: 5; 作者方琳朱辉 +3 位作者黄皓源彭思力覃海康梁昭平《动物医学进展》北大核心 2020年第4期38-41,共4页; 为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;... 展开更多; 关键词 H5亚型禽流感病毒 MDCK单克隆细胞株无血清全悬浮培养接毒量收获时间; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名无血清悬浮培养PK-15细胞及其对猪圆环病毒2型增殖的影响: 1; 作者周伟刘旭平张艳敏彭雯娟赵亮谭文松; 机构华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海倍谙基生物科技有限公司; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第6期2397-2405,共9页; 基金动物疫苗智能制造新模式应用项目(YB2018-XMS)。; 文摘【目的】建立基于无血清悬浮培养PK-15细胞生产猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗的工艺,提高PCV2疫苗生产效率,降低PCV2疫苗生产成本。【方法】首先采用直接驯化法对贴壁生长的PK-15细胞进行无血清悬浮培养驯化,并在无血清悬浮培养体系下,采用连续传代的方法考察驯化成功的PK-15细胞的传代和生长稳定性。研究不同感染复数(MOI)(0.10、0.05、0.01和0.001)和不同PK-15细胞接种密度(CDI)(1.0×10^(6)、3.0×10^(6)、5.0×10^(6)/mL)对PCV2增殖的影响,同时对感染病毒前后的细胞培养液中葡萄糖、氨基酸及代谢副产物乳酸和氨进行初步分析。【结果】贴壁PK-15细胞经过30 d的直接驯化可以快速适应无血清悬浮培养,且驯化过程中细胞平均比生长速率由0.1 d^(-1)增加到0.6 d^(-1);悬浮PK-15细胞可以至少连续稳定传15代,连续传代过程中平均比生长速率在0.6 d^(-1)附近波动,且细胞活率始终>90%;以1.0×10^(6)/mL接种,第4天可达到峰值活细胞密度6.2×10^(6)/mL,并可维持1 d,第4天前活率均>90%,此后快速下降;病毒增殖最佳工艺参数为:感染复数为0.05,细胞接种密度为1.0×10^(6)/mL,最终收获时病毒滴度可达10^(6.2)TCID_(50)/mL;对细胞感染前后的代谢分析发现,病毒感染后细胞对葡萄糖和多数氨基酸代谢快于感染前,且感染组在感染后72 h附近出现葡萄糖和谷氨酰胺耗竭并伴随代谢副产物乳酸和氨快速积累,之后细胞改变代谢途径并利用乳酸。【结论】30 d的直接驯化可以获得悬浮PK-15细胞株,PK-15细胞可用于PCV2增殖,结果可为大规模无血清悬浮培养PK-15细胞生产PCV2疫苗提供一定理论和实践基础。; 关键词 PK-15细胞无血清悬浮培养猪圆环病毒2型(PCV2) 增殖氨基酸代谢; Keywords PK-15 cells serum-free suspension culture Porcine circovirus type 2(PCV2) proliferation amino acid metabolism; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究被引量：2: 2; 作者张久鑫邵宝顺朱辉贾浩苒梁琳汤新明崔尚金梁瑞英王龙涛; 机构吉林农业大学动物科学技术学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所广东省华晟生物技术有限公司; 出处《动物医学进展》北大核心 2023年第1期48-53,共6页; 基金中央科研院所基本科研业务经费项目(2020-YWF-YTS-10) 中国农业科学院创新工程计划项目(ASTIP-IAS15)。; 文摘为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^(6)cells/mL时,培养48 h后细胞密度可达到7.02×10^(6)cells/mL。对培养猫泛白细胞减少症病毒工艺进行摸索,确定最佳接毒工艺为同步接毒法,初始接毒细胞密度为1×10^(6)cells/mL、MOI为3.5×10^(-2),培养72 h后收毒,病毒滴度可达到10^(7.25)TCID_(50)/0.1 mL。该方法使用同源细胞系且未添加动物血清,为猫泛白细胞减少症生物制品生产降低了下游生产纯化难度,同时降低了生产成本,可显著提高产品核心竞争力。研究结果可为其他猫用生物制品相关研究提供参考。; 关键词 F81细胞细胞驯化无血清悬浮培养猫泛白细胞减少症病毒; Keywords F81 cell line cell domestication serum-free culture Feline panleukopenia virus; 分类号 S852.659.2 [农业科学—基础兽医学] S858.293 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名无血清培养基悬浮培养BHK21细胞驯化的研究被引量：4: 3; 作者井莲娜付智财黄炯; 机构新疆天康畜牧生物技术股份有限公司新疆畜牧科学院兽医研究所; 出处《草食家畜》 2013年第3期51-56,共6页; 文摘本研究主要探索用常规BHK21贴壁细胞(F38)驯化为适应无血清培养基的全悬浮细胞的过程并使用生物反应器放大进行了相关研究。实验表明:常规BHK21细胞通过运用相应的商品化培养基进行低血清贴壁驯化、再到低血清全悬浮驯化、最后到无血清全悬浮驯化,使细胞达到全悬浮的状态。经过四十代的传代后,细胞在无血清悬浮培养基中生长细胞数量可达3.0×106/mL以上,且形态较好,倍增时间稳定,活力在90%以上。实验中采用速降和缓降两种方法进行过渡驯化,结果表明,在贴壁状态下,细胞对缓降方式比速降方式适应性要好,细胞的形态较好,活力在90%以上。细胞从低血清悬浮到无血清悬浮过程中,两种过渡方式无明显差异,均经过了5～10代驯化,细胞就完全适应了无血清悬浮培养基。无血清悬浮细胞从液氮中复苏后,采用直线放大的形式从1.5 mL到250 mL再到5 L反应器最后到650 L反应器中生长。在培养参数方面进行了摸索,最终验证用直线放大的方法是可行的。细胞数量可达4.5×106/mL左右,细胞活力在90%以上,且细胞在放大过程中,形态良好,倍增时间稳定在18 h。; 关键词无血清悬浮培养 BHK21 驯化; Keywords serum-free suspension culture BHK21 cells domesticationinternational PVP; 分类号 S852.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术研究进展被引量：11: 4; 作者王朋朋黄书林张云科王展慧吴文学; 机构中国农业大学动物医学院教育部中国农业大学动物疫病快速诊断技术实验室中牧实业股份有限公司; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第3期839-845,共7页; 基金现代农业(奶牛)产业技术体系建设专项(CARS-36)。; 文摘随着生物制品行业的快速发展,哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术已经运用到越来越多的领域中。该技术能够扩大哺乳动物细胞培养的规模,提高生物制品的产量及质量,拓宽哺乳动物细胞的应用领域,并促进哺乳动物细胞生产实现工业化与产业化。但悬浮驯化后的细胞,与父母代细胞相比,蛋白表达水平与生长调节通路均发生了不同程度的改变,使其生产性能受到影响。对此,国内外学者开展了大量的研究并取得了较好进展。作者阐述了哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术的研究现状以及临床生产工艺的优化策略,以期为哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术的发展提供参考。; 关键词哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术优化工艺; Keywords mammalian cells serum-free suspension culture technology process optimization; 分类号 S852.52 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同MDCK单克隆细胞株对H5亚型禽流感病毒增殖条件和放大工艺的研究被引量：1: 5; 作者方琳朱辉黄皓源彭思力覃海康梁昭平; 机构广州市华南农大生物药品有限公司; 出处《动物医学进展》北大核心 2020年第4期38-41,共4页; 基金广州市民生科技攻关计划(201803020030)。; 文摘为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;在摇瓶工艺的基础上,将该细胞在100 L生物反应器中接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,检测接种后不同时间病毒HA效价和病毒滴度(EID 50),确定最适接毒量和收获时间。共筛选出22株MDCK全悬浮细胞单克隆细胞株,其中5株对H5亚型禽流感病毒rFJ56株最敏感,接种后病毒HA效价均可达到9 log2;对MDCK单克隆细胞株按0.01%体积比接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,在100 L生物反应器中培养60 h,HA效价可达10 log2,病毒含量可达108.17 EID 50/0.1 mL,可为H5亚型禽流感病毒无血清全悬浮培养放大工艺提供参考。; 关键词 H5亚型禽流感病毒 MDCK单克隆细胞株无血清全悬浮培养接毒量收获时间; Keywords H5 subtype avian influenza virus MDCK sub-clonal cell serum-free full suspension culture viral inoculation dose harvest time; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	无血清悬浮培养PK-15细胞及其对猪圆环病毒2型增殖的影响	周伟刘旭平张艳敏彭雯娟赵亮谭文松	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究	张久鑫邵宝顺朱辉贾浩苒梁琳汤新明崔尚金梁瑞英王龙涛	《动物医学进展》北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	无血清培养基悬浮培养BHK21细胞驯化的研究	井莲娜付智财黄炯	《草食家畜》	2013	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术研究进展	王朋朋黄书林张云科王展慧吴文学	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2021	11	在线阅读下载PDF 职称材料
5	不同MDCK单克隆细胞株对H5亚型禽流感病毒增殖条件和放大工艺的研究	方琳朱辉黄皓源彭思力覃海康梁昭平	《动物医学进展》北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料