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RCCS中犬成骨细胞-nBGC复合物联合培养的实验研究 被引量:2
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作者 何川 邓廉夫 +3 位作者 周来生 冯伟 万超 杨庆铭 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第4期301-304,共4页
目的探讨联合应用成骨细胞、活性玻璃 /胶原纳米复合材料 (nBGC)和旋转式细胞培养系统 (RCCS)体外构建组织工程化骨的可行性。 方法采用骨片组织培养法 ,分离培养犬皮质骨成骨细胞 ,传代培养至第 2代后 ,利用浸泡接种方法 ,形成成骨细... 目的探讨联合应用成骨细胞、活性玻璃 /胶原纳米复合材料 (nBGC)和旋转式细胞培养系统 (RCCS)体外构建组织工程化骨的可行性。 方法采用骨片组织培养法 ,分离培养犬皮质骨成骨细胞 ,传代培养至第 2代后 ,利用浸泡接种方法 ,形成成骨细胞 -nBGC支架复合物 ,然后在RCCS中培养。扫描电镜观察和上清液分析了解nBGC支架上成骨细胞生长、胞外基质沉积和成骨表型维持的情况。 结果成骨细胞吸附于nBGC支架表面 ,表面可见颗粒状分泌物和丝状胶原纤维 ,形成三维结构的细胞外基质 ;上清液生化分析显示 ,成骨细胞分泌大量Ⅰ型胶原、骨特异性碱性磷酸酶 (B -AKP)和骨钙素 (OCN) ,且分别在 18、2 4和 30d达分泌高峰。 结论nBGC材料和RCCS可以为成骨细胞提供良好的生物学环境 。 展开更多
关键词 旋转细胞培养系统 活性玻璃/胶原纳米复合材料 成骨细胞 骨组织工程
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香菇多糖对抗模拟微重力环境培养的淋巴细胞免疫功能抑制的实验研究 被引量:6
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作者 郝彤 王滟濛 +7 位作者 李俊杰 杜芝燕 段翠密 王常勇 宋锦苹 王林杰 李莹辉 王妍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期182-186,共5页
本研究旨在探索香菇多糖对抗旋转式细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)模拟微重力环境下淋巴细胞免疫功能降低的作用。体外分离培养小鼠脾淋巴细胞,在正常重力环境和RCCS模拟微重力环境下分别添加10、20和40μg/ml的香菇多... 本研究旨在探索香菇多糖对抗旋转式细胞培养系统(rotary cell culture system,RCCS)模拟微重力环境下淋巴细胞免疫功能降低的作用。体外分离培养小鼠脾淋巴细胞,在正常重力环境和RCCS模拟微重力环境下分别添加10、20和40μg/ml的香菇多糖溶液,培养24、48和72 h取样,用MTT法、ELISA和流式细胞术分别检测香菇多糖对细胞增殖度、细胞因子分泌量和表面标志表达的影响。结果表明,10、20和40μg/ml香菇多糖在处理时间内对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显促进作用;不同浓度的香菇多糖均可提高小鼠脾淋巴细胞在模拟微重力环境下IL-2和IFN-γ的分泌量和促进小鼠脾淋巴细胞表面CD4和CD8分子的表达。结论:香菇多糖具有对抗模拟微重力环境造成的淋巴细胞免疫功能降低的作用。 展开更多
关键词 香菇多糖 旋转细胞培养系统 模拟微重力 淋巴细胞 免疫抑制
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HepG2细胞在模拟微重力条件下的生长研究——体外细胞三维生长模型构建 被引量:6
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作者 徐大勇 汪蕴 丰美福 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期146-153,共8页
将人肝癌细胞(HepG2)接种于生物可降解支架聚羟基乙酸(polyglycolicacid,PGA)上,采用模拟微重力方法,在具有低剪应力和适宜气体扩散的旋转细胞培养系统(RCCS)中培养,构建体外三维培养模型.通过扫描电镜、透射电镜、RT-PCR、流式细胞术... 将人肝癌细胞(HepG2)接种于生物可降解支架聚羟基乙酸(polyglycolicacid,PGA)上,采用模拟微重力方法,在具有低剪应力和适宜气体扩散的旋转细胞培养系统(RCCS)中培养,构建体外三维培养模型.通过扫描电镜、透射电镜、RT-PCR、流式细胞术等方法观察分析.结果表明,细胞在此模型中生长良好,细胞呈多面体,含有丰富的微绒毛、线粒体以及胞间有紧密连接形成.该系统有利于细胞形成三维结构,更接近于体内细胞实际生长状况.另外,通过黏附分子表达分析,表明该模型重现了肝癌细胞某些体内侵袭转移特征.一些在肿瘤细胞侵袭和转移过程中具有重要作用的细胞黏附分子(celladhesionmolecules,CAMs)表达有了显著的变化,其中E-钙粘素(E-cadherin)表达降低,CD44、细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1,CD54)以及整合素β1(integrinβ1,CD29)表达增高.在体外实验中,对实验模型的适当选择是得到理想客观实验结果的必要前提,采用模拟微重力的方法构建的体外细胞三维培养模型,将为肿瘤生物学研究、药物敏感性试验等提供更为理想的研究模型. 展开更多
关键词 HEPG2 模拟微重力 三维培养 旋转细胞培养系统 聚羟基乙酸 细胞黏附分子
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模拟微重力对人牙髓干细胞在裸鼠体内矿化能力的影响
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作者 徐丹丹 李艳萍 +3 位作者 潘爽 张巍巍 何丽娜 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期234-236,241,共4页
目的:研究模拟微重力环境对聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架上的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)在裸鼠体内矿化能力的影响。方法:分离、培养hDPSCs并进行鉴定,然后将hDPSCs接种到PLGA支架上培养72h后随机分为两组,普通... 目的:研究模拟微重力环境对聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架上的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)在裸鼠体内矿化能力的影响。方法:分离、培养hDPSCs并进行鉴定,然后将hDPSCs接种到PLGA支架上培养72h后随机分为两组,普通重力组和模拟微重力组,经矿化诱导液培养1周后分别将细胞支架复合物移植到裸鼠体内,植入术后4周取材,进行组织学(HE和Vonkossa)和免疫组织化学(DSPP)检测。结果:HE染色均可见有血管生成,Vonkossa染色均为阳性,模拟微重力组DSPP的表达水平明显高于普通重力组(P<0.05)。结论:模拟微重力有利于hDPSCs在裸鼠体内的矿化。 展开更多
关键词 人牙髓干细胞 旋转细胞培养系统 支架 矿化
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失重条件对小鼠NK细胞体外生物活性的影响 被引量:2
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作者 董兴丽 王菁华 +4 位作者 宋纯 戢玉环 田野 金连弘 李呼伦 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期40-43,共4页
建立在失重环境下NK细胞的培养体系,探讨失重培养条件对NK细胞活性的影响。取C57BL/6小鼠脾,分离NK细胞,在正常重力和失重状态下旋转细胞两种培养体系中培养NK细胞48 h。以Yac-1细胞为靶细胞,采用MTT法检测其杀伤活性;半定量PCR分析穿... 建立在失重环境下NK细胞的培养体系,探讨失重培养条件对NK细胞活性的影响。取C57BL/6小鼠脾,分离NK细胞,在正常重力和失重状态下旋转细胞两种培养体系中培养NK细胞48 h。以Yac-1细胞为靶细胞,采用MTT法检测其杀伤活性;半定量PCR分析穿孔素、颗粒酶的转录水平。与正常重力培养对照相比,失重培养的NK细胞杀伤活性显著降低,其穿孔素和颗粒酶B的转录水平均显著低于正常重力培养组,穿孔素/GAPDH结果为失重培养组0.625±0.042;正常重力培养组1.054±0.036(P<0.01);得到颗粒酶B/GAPDH结果为失重培养组0.700±0.042;正常重力培养组1.068±0.058(P<0.01)。成功建立了NK细胞体外培养体系,在失重环境下NK细胞杀伤活性降低。 展开更多
关键词 失重 NK细胞 旋转细胞培养系统 生物学活性
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RCCS模拟微重力对人角化细胞代谢组学的影响 被引量:2
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作者 李鳌 姜楠 +6 位作者 吴莹莹 闫洪锋 孙培鸣 孙宏伟 徐冰心 周金莲 崔彦 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期735-740,共6页
目的探讨旋转式细胞培养系统(RCCS)模拟微重力对人永生化角质形成细胞系(HaCaT)细胞代谢组学的影响。方法应用RCCS建立模拟微重力细胞培养系统,体外培养HaCaT细胞,随机分为模拟微重力组(SMG组)和正常重力组(NG组),细胞培养1、2、3 d后... 目的探讨旋转式细胞培养系统(RCCS)模拟微重力对人永生化角质形成细胞系(HaCaT)细胞代谢组学的影响。方法应用RCCS建立模拟微重力细胞培养系统,体外培养HaCaT细胞,随机分为模拟微重力组(SMG组)和正常重力组(NG组),细胞培养1、2、3 d后收集样本,进行LC/MS代谢组学分析。结合正交偏最小二乘法(O-PLS-DA)和两样本独立t检验寻找两组细胞的差异代谢物,将差异代谢物输入KEGG数据库,进行代谢通路的构建与功能分析。结果 LC/MS代谢组学分析结果显示,与NG组比较,SMG组HaCaT细胞在RCCS模拟微重力环境中培养1 d后共有74种差异代谢物,其中16种表达上调,58种表达下调;2 d后共有89种差异代谢物,其中15种表达上调,74种表达下调;3 d后共有100种差异代谢物,其中23种表达上调,77种表达下调;以表达有统计学差异(VIP>1且P<0.05)的49种代谢物作为目标代谢标记物,其中鞘氨醇、谷氨酸、二十二碳五烯酸下调,脱水山梨糖醇等物质表达上调。KEGG分析显示,其涉及的代谢通路有氨基酸代谢、脂质代谢、细胞增殖和凋亡、物质转运、分解代谢、信号转导等。结论 RCCS模拟微重力环境可对角化细胞代谢产生明显影响,主要涉及鞘脂类、谷氨酸等代谢产物及相关信号通路。 展开更多
关键词 模拟失重 旋转细胞培养系统 HACAT细胞 代谢组学 创伤与修复
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兔MSCs-PGA复合物在RCCS中的成骨潜能 被引量:1
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作者 万超 杨庆铭 +3 位作者 邓廉夫 何川 沈玮 朱雅萍 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2002年第5期403-407,共5页
目的探讨联合应用兔骨髓基质干细胞 (MSCs)、聚乙醇酸 (PGA)支架材料和成骨诱导因子在旋转式细胞培养系统 (RCCS)中构建组织工程化骨的可行性。 方法利用密度梯度离心法分离培养兔骨髓基质干细胞 ,采用动力接种方法形成骨髓基质干细胞... 目的探讨联合应用兔骨髓基质干细胞 (MSCs)、聚乙醇酸 (PGA)支架材料和成骨诱导因子在旋转式细胞培养系统 (RCCS)中构建组织工程化骨的可行性。 方法利用密度梯度离心法分离培养兔骨髓基质干细胞 ,采用动力接种方法形成骨髓基质干细胞—PGA支架复合物 ,以成骨条件培养液为生长介质 ,在RCCS中进行培养。用趋骨性荧光素四环素标记、茜素红染色以及扫描电镜、透射电镜观察 ,研究细胞—PGA支架在RCCS中的成骨潜能。结果组织化学研究显示 ,兔骨髓基质干细胞—PGA支架结构在RCCS中培养第 7d时 ,茜素红钙质染色呈弱阳性反应 ,至第 2 1d及 2 8d时 ,茜素红钙质染色呈强阳性反应。荧光显微镜下 ,培养组织经趋骨性荧光素四环素标记呈现金黄色荧光 ,荧光亮度与分泌物堆积程度成正相关 ,与钙质染色阳性反应结果一致。超微结构观察 ,见骨髓基质干细胞合成分泌胶原纤维 ,释放基质小泡 ,并出现钙盐沉积 ,形成丛毛球状钙球 ,最终形成骨组织。 结论在旋转式细胞培养系统中 ,骨髓基质干细胞—PGA支架结构具有形成类似活体骨组织特征的组织工程化骨的潜能。 展开更多
关键词 组织工程 骨形成 骨髓基质干细胞 聚乙醇酸 旋转细胞培养系统
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