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斯钙素蛋白-1和缺氧诱导因子-1α的相互作用对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响 被引量：4
1
作者 杨清滔 谷江 +4 位作者 张永春 朱致晖 杨永安 王楠 祝庆亮 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期12-19,共8页
目的研究斯钙素蛋白-1(STC-1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)相互作用后的调钙功能对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响。方法构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,采用不同浓度STC-1蛋白分别干预荷基因肾癌细胞和单纯肾癌细胞,MTT法检测细胞增... 目的研究斯钙素蛋白-1(STC-1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)相互作用后的调钙功能对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响。方法构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,采用不同浓度STC-1蛋白分别干预荷基因肾癌细胞和单纯肾癌细胞,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR和ELISA法检测细胞内HIF-1α和STC-1的基因及蛋白表达情况,荧光探针检测细胞内Ca2+变化,荧光分光光度计检测线粒体膜电位(Δψm),紫外分光光度计检测线粒体通透性转换孔(mPTP)。结果 HIF-1α基因转染、STC-1干预及基因转染后再STC-1干预3种方式均可提高Δψm,降低细胞内Ca2+和mPTP水平,促进细胞增殖(P均<0.05),以上结果可随着STC-1浓度的增加而逐渐增强,但细胞增殖率的升高趋势却逐渐减缓。结论 HIF-1α可能通过促进STC-1表达,下调Ca2+水平,从而稳定线粒体膜电势来参与肾癌细胞的恶性增殖,但此作用亦因外源性STC-1对HIF-1α的抑制而逐渐减弱。 展开更多
关键词 肾癌细胞 斯钙素蛋白-1 缺氧诱导因子-1Α 线粒体
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MiR-101-3p通过靶向抑制斯钙素1减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤 被引量：4
2
作者 梁小菊 张丽君 +1 位作者 成德亮 梁小弟 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期976-984,共9页
目的:探究微小RNA-101-3p(microRNA-101-3p,miR-101-3p)对IL-1β诱导的骨关节软骨细胞损伤的影响及其潜在的机制。方法:将骨关节软骨细胞随机分为对照组(NC组)、IL-1β组、阴性对照组(IL-1β+miR-NC组),miR-101-3p组(IL-1β+miR-101-3p... 目的:探究微小RNA-101-3p(microRNA-101-3p,miR-101-3p)对IL-1β诱导的骨关节软骨细胞损伤的影响及其潜在的机制。方法:将骨关节软骨细胞随机分为对照组(NC组)、IL-1β组、阴性对照组(IL-1β+miR-NC组),miR-101-3p组(IL-1β+miR-101-3p组),细胞转染后再用IL-1β(10ng/mL)诱导软骨细胞。Real-timePCR和蛋白质印迹法检测不同浓度的IL-1β(0,1,5,10ng/mL)诱导的细胞中miR-101-3p和斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)的表达;采用MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;caspases检测试剂盒检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9(caspase-3/9)的表达;蛋白质印迹法检测炎性和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)、金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)和II型胶原的表达。另外,将野生型STC1的3'-非编码区(untranslated regions,UTR)(STC1-3'-UTR-WT)或者突变型STC1的3'-UTR(STC1-3'-UTR-MUT)分别与miR-101-3p模拟物(miR-101-3p mimic)和对照物(miR-NC)共转染细胞,采用荧光素酶报告实验检测miR-101-3p对STC1的调控作用。在miR-NC(miR-NC组),miR-101-3p(miR-101-3p组),anti-NC(anti-NC组)和anti-miR-101-3p(anti-miR-101-3p组)分别转染细胞后,采用蛋白质印迹法检测细胞中STC1蛋白的表达。为检测STC1是否参与miR-101-3p对软骨细胞的作用,将细胞随机分为miR-101-3p组(IL-1β+miR-101-3p组)、过表达对照组(IL-1β+miR-101-3p+ad-GFP组)、过表达STC1组(IL-1β+miR-101-3p+ad-STC1组)。同样分别用MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;caspases检测试剂盒检测caspase-3/9的表达;蛋白印迹法检测炎性和ECM相关蛋白的表达。结果:与0ng/mLIL-1β相比,不同浓度IL-1β诱导的软骨细胞中miR-101-3p水平显著下降(均P<0.05),STC1的水平则显著上升(均P<0.05)。与NC组相比,IL-1β组软骨细胞增殖率下降(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05),caspase-3/9,IL-6和TNF-α的水平均显著上升(均P<0.05),MMP9的表达显著上调(P<0.05),II型胶原表达显著下调(P<0.05)。与IL-1β+miR-NC组相比,IL-1β+miR-101-3p组软骨细胞增殖率上升(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);caspases,IL-6和TNF-α的水平均显著下降(均P<0.05);MMP9的表达下降(P<0.05),II型胶原表达上调(P<0.05)。荧光素酶报告检测结果表明:与miR-NC组相比,miR-101-3p组可靶向抑制STC1的水平(P<0.05)。蛋白质印迹法结果表明:与miR-NC组相比,miR-101-3p组STC1水平下降(P<0.05);与anti-NC组相比,anti-miR-101-3p组STC1水平上升(P<0.05)。与miR-101-3p+ad-GFP组相比,miR-101-3p+ad-STC1组STC1反转了miR-101-3p对IL-1β诱导的软骨细胞增殖、凋亡、炎性反应及ECM相关蛋白的影响。结论:调节miR-101-3p/STC1通路能够保护IL-1β诱导的骨关节软骨细胞损伤。 展开更多
关键词 微小RNA-101-3p IL-1Β 骨关节炎 斯钙素1
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人支气管上皮细胞表达的斯钙素-1在上皮间充质转化中的作用研究 被引量：4
3
作者 许家艳 孟亚奇 +1 位作者 贾嫚 姚欣 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1198-1203,共6页
目的:明确斯钙素-1(stanniocalcin-1,STC1)对支气管上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,以及香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对支气管上皮细胞STC1表达调控的效应,探讨STC1在慢性阻塞性肺疾病气... 目的:明确斯钙素-1(stanniocalcin-1,STC1)对支气管上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,以及香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对支气管上皮细胞STC1表达调控的效应,探讨STC1在慢性阻塞性肺疾病气道EMT中的可能作用。方法:采用转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)处理人支气管上皮(16HBE)细胞72 h诱导EMT模型:外源加入STC1重组蛋白(rh STC1),Western blot及免疫荧光法检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达。采用CSE刺激16HBE细胞24 h:实时定量PCR及Western blot检测STC1 m RNA和蛋白表达差异,外源加入NF-κB抑制剂JSH23,Western blot检测STC1表达差异。结果:TGF-β可诱导16HBE细胞由典型的多边铺路石样变为长梭形,上皮细胞标志物E-cadherin表达下降,间质细胞标志物α-SMA表达增加,rh STC1可逆转上述改变。CSE可刺激16HBE细胞STC1表达增高,且呈浓度依赖性增加,外源加入NF-κB抑制剂JSH23可抑制上述效应。结论:STC1在慢性阻塞性肺疾病形成过程中,是抑制气道EMT的保护性因素。CSE局部刺激支气管上皮细胞,通过NF-κB信号导致STC1反应性增加可能是其主要来源之一。 展开更多
关键词 斯钙素-1 人支气管上皮细胞 上皮间充质转化 慢性阻塞性肺疾病
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血清斯钙素-1在稳定期慢性阻塞性肺病中的表达及意义 被引量：1
4
作者 何淑娟 许家艳 +3 位作者 贾嫚 欧英炜 周军 姚欣 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1404-1408,共5页
目的:探讨斯钙素-1(stanniocalcin-1,STC1)在稳定期慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血清中的表达及意义。方法:收集55例稳定期COPD患者,根据肺功能和问卷评分进行相应分组,且以24例健康者作为对照。采... 目的:探讨斯钙素-1(stanniocalcin-1,STC1)在稳定期慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血清中的表达及意义。方法:收集55例稳定期COPD患者,根据肺功能和问卷评分进行相应分组,且以24例健康者作为对照。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各研究对象的血清斯钙素-1表达情况,进行相关分析。结果:(1)与健康对照组相比,稳定期COPD患者血清斯钙素-1表达水平明显降低(P <0.05)。(2)血清斯钙素-1在初筛COPD上具有一定价值(P=0.025,AUC=0.659),最佳阈值为1 350 pg/mL(敏感度81.82%;特异度50.00%)。(3)血清斯钙素-1与稳定期COPD患者病情严重程度[包括GOLD分级、慢阻肺评估测试(COPD assessment test,CAT)评分、ABCD分组、肺功能]无明显相关性。结论:血清斯钙素-1在COPD中显著降低,可能对于COPD的诊治具有一定临床意义。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺病 斯钙素-1
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STC-1基因在大、小体型猪中表达与分布的差异分析 被引量：2
5
作者 杨开典 齐传翔 +1 位作者 祁钰钰 鞠辉明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期2845-2850,共6页
试验分别采集40日龄小体型猪(巴马猪)和大体型猪(大白猪)的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、头骨、骨骼肌组织,利用实时荧光定量PCR检测斯钙素-1(stanniocalcin 1,STC-1)基因mRNA在各个组织中的表达水平,并通过Western blotting检测STC-... 试验分别采集40日龄小体型猪(巴马猪)和大体型猪(大白猪)的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、头骨、骨骼肌组织,利用实时荧光定量PCR检测斯钙素-1(stanniocalcin 1,STC-1)基因mRNA在各个组织中的表达水平,并通过Western blotting检测STC-1蛋白在各个组织中的分布。实时荧光定量PCR检测结果表明,STC-1基因mRNA在巴马猪和大白猪肺脏、肾脏中相对表达水平较高,在骨骼肌中的表达水平最低;除心脏和骨骼肌外,巴马猪其余各组织中STC-1基因mRNA表达水平均显著高于大白猪(P<0.05)。Western blotting检测结果表明,巴马猪肝脏中STC-1蛋白的表达量最高,而大白猪脾脏中STC-1蛋白表达量最高,两者差异显著(P<0.05);巴马猪肺脏、肝脏、骨骼肌及心脏组织中STC-1蛋白表达量均极显著高于大白猪(P<0.01);而巴马猪肾脏、脾脏中STC-1蛋白表达量极显著低于大白猪(P<0.01)。本研究首次对大、小体型猪不同组织的STC-1基因mRNA表达水平及其STC-1蛋白分布进行检测,导致该基因表达与分布差异的原因可能与两种猪受外界环境应激及生长发育差异有关。 展开更多
关键词 猪 体型 斯钙素-1(stc-1)基因 表达与分布
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缺氧及复氧对hepG2细胞STC-1和STC-2的mRNA表达影响 被引量：1
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作者 吴子安 谭志容 +3 位作者 徐宁 李涛 李曼 尹芳芳 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2015年第8期58-61,共4页
目的:研究缺氧及复氧对hepG2细胞STC-1和STC-2的mRNA表达影响。方法:用化学缺氧剂氯化钴模拟缺氧环境,用RT-PCR法分别检测在hepG2细胞缺氧和复氧条件下STC-1、STC-2的mRNA表达情况。结果:在hepG2细胞中,STC-1mRNA无论在缺氧还是复氧情况... 目的:研究缺氧及复氧对hepG2细胞STC-1和STC-2的mRNA表达影响。方法:用化学缺氧剂氯化钴模拟缺氧环境,用RT-PCR法分别检测在hepG2细胞缺氧和复氧条件下STC-1、STC-2的mRNA表达情况。结果:在hepG2细胞中,STC-1mRNA无论在缺氧还是复氧情况下,几乎不表达;STC-2mRNA在缺氧条件下表达升高,并随着缺氧时间延长而升高,复氧后表达又降低,并随复氧时间延长而恢复至正常。结论:STC-2与肝癌的发生发展过程密切相关。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 人斯钙素-1 人斯钙素-2 缺氧 复氧 stc-1 stc-2
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STC1诱导上皮-间质转化促进肺癌细胞的侵袭和迁移 被引量：1
7
作者 魏丽荣 滕小艳 +1 位作者 夏前林 杜玉珍 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期497-504,共8页
背景与目的:斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)与癌症的发展和不良预后相关,但STC1对肺癌细胞转移的影响及其作用机制目前还未完全阐明。探讨STC1对肺癌细胞侵袭和迁移的影响及其可能的内在分子机制。方法:构建STC1过表达的细胞系HLEC-STC... 背景与目的:斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)与癌症的发展和不良预后相关,但STC1对肺癌细胞转移的影响及其作用机制目前还未完全阐明。探讨STC1对肺癌细胞侵袭和迁移的影响及其可能的内在分子机制。方法:构建STC1过表达的细胞系HLEC-STC1及对照细胞系HLEC-EV,STC1沉默的细胞系A549-STC1 siRNA及对照细胞系A549-EV;采用Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerasechainreaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Westernblot)检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物的mRNA和蛋白质水平变化;并使用细胞免疫荧光技术进一步验证细胞EMT标志物的表达和定位;采用Western blot检测EMT相关信号通路蛋白和转录因子的水平。结果:与对照细胞相比,过表达STC1的HLEC-STC1细胞的侵袭和迁移能力增强,STC1沉默的A549-STC1 siRNA细胞的侵袭和迁移能力减弱(P<0.05);过表达STC1的HLEC-STC1细胞中上皮标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达下调,间质标志物神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及肿瘤干细胞标志物上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)表达上调(P<0.05);低表达STC1的A549-STC1 siRNA细胞中E-cadherin的表达上调,N-cadherin、vimentin及EpCAM的表达下调(P<0.05);同时,HLEC-STC1细胞中细胞外调节蛋白激酶信号通路(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路激活相关的磷酸化(p)-ERK和β-catenin的水平升高,转录因子E盒结合锌指蛋白1(zinc finger E-box-binding homeobox 1,ZEB1)和锌指转录因子1(Snail1)的表达水平上调,A549-STC1 siRNA细胞中的结果则相反(P<0.05)。结论:STC1可能通过激活ERK和Wnt/β-catenin信号通路上调转录因子ZEB1和Snail1的表达水平,从而诱导EMT促进肺癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 斯钙素1 肺癌细胞 上皮-间质转化 侵袭 迁移
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骨质疏松分子生物学研究专家共识 被引量：14
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作者 《中国骨质疏松杂志》社 《中国骨质疏松杂志》骨代谢专家组 +2 位作者 张萌萌 毛未贤 马倩倩 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期157-162,共6页
骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活... 骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。 展开更多
关键词 核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素信号通路 核因子κB受体活化因子信号通路 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路 巨噬细胞集落刺激因子信号通路 钙离子信号通路 酪氨酸激酶、蛋白激酶B信号通路 蛋白激酶C信号通路 免疫球蛋白样受体信号通路 Wnt/β-连环蛋白信号通路 Hedghog信号通路 骨形态发生蛋白2/Smad信号通路 胞内磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B信号通路 维生素D受体基因 低密度脂蛋白相关蛋白5基因 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 雌激素受体基因 Ⅰ型胶原α1和Ⅰ型胶原α2基因 甲状旁腺素基因 降钙素受体基因 甲状旁腺素相关蛋白受体基因 载脂蛋白E Klotho蛋白 骨形态发生蛋白 骨涎蛋白 低密度脂蛋白受体相关蛋白5 激活蛋白-1 硬化蛋白 靶向治疗 骨质疏松 分子生物学
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