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竞争ELISA测定单抗衍生物的抗原结合活性: 1; 作者张德胜曹惠婷张祖传《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期347-349,共3页; 应用简易的测定单抗衍生物抗原结合活性的竞争ＥＬＩＳＡ方法。不同浓度的抗铁蛋白单克隆抗体Ａ－ｈＦ－ｃ及其衍生物与一定浓度的Ａ－ｈＦ－Ｃ－ＨＲＰ偶联物一起竞争固相铁蛋白抗原，以５０％偶联物被竞争抑制时的抗体浓度作为活性相... 展开更多; 关键词单克隆抗体铁蛋白抗原结合活性竞争ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定被引量：5: 2; 作者徐重新张存政 +3 位作者张霄刘媛黄鹰刘贤金《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期47-52,共6页; 利用含有重组噬菌粒的噬菌体直接侵染大肠杆菌(Escherichia coli)HB2151,原核分泌表达了抗苏云金芽孢杆菌(Ba-cillus thuringiensis,Bt)Cry1B毒素蛋白的单链抗体(single chain-variable fragment,scFv),经纯化、鉴定抗原结合活性后,建立... 展开更多; 关键词 Cry1B毒素蛋白单链抗体可溶性表达抗原结合活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗癌胚抗原免疫毒素生物学功能的研究: 3; 作者何丹杨慧 +2 位作者晁开林晴黄华樑《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期368-374,共7页; 为了研究免疫毒素发挥生物学作用的全过程 ,构建了两种不同形式的基于假单胞菌外毒素 (PseudomonasexotoxinA ,PE)的抗癌胚抗原 (carcinoembryonicantigen ,CEA)免疫毒素CEA (Fv) /PE38/KDEL和PE35 /CEA(Fv) /KDEL .用流式细胞术经间接... 展开更多; 关键词癌胚抗原 CEA 免疫毒素抗原结合活性内吞作用凋亡细胞毒性; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1可溶性单链抗体b12-scFv的表达与活性分析被引量：2: 4; 作者杨雄刘秀侠 +2 位作者南昊许晓东陈红英《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第5期205-210,216,共7页; 【目的】合成并克隆HIV-1单克隆抗体b12的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达,并分析表达产物的活性。【方法】以单抗b12的重链和轻链全基因为模板,分别扩增其可变区基因片段后,用重叠PCR的方法将二者拼接起来,形成scFv-VL-Linker-VH结... 展开更多; 关键词 HIV-1 单链抗体 B12 载体构建亲和纯化抗原结合活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

天花粉蛋白基因的克隆、表达和活性鉴定被引量：1: 5; 作者蔡煊胡拥军 +2 位作者徐洪俞吉安孙兵《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1503-1505,共3页; 用 PCR( Polymerase Chain Reaction)扩增出天花粉蛋白 ( Trichosanthin,TCS)基因全长序列 ,插入表达载体 .经双酶切鉴定及测序分析 ,表明阅读框正确 .表达 His- TCS活性融合蛋白并纯化天花粉蛋白 ,鉴定出其具有 RNA; 关键词天花粉蛋白基因克隆分离纯化生物活性基因表达 RNA N-糖苷酶活性抗原抗体结合活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名竞争ELISA测定单抗衍生物的抗原结合活性: 1; 作者张德胜曹惠婷张祖传; 机构中国科学院上海生物化学研究所; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期347-349,共3页; 文摘应用简易的测定单抗衍生物抗原结合活性的竞争ＥＬＩＳＡ方法。不同浓度的抗铁蛋白单克隆抗体Ａ－ｈＦ－ｃ及其衍生物与一定浓度的Ａ－ｈＦ－Ｃ－ＨＲＰ偶联物一起竞争固相铁蛋白抗原，以５０％偶联物被竞争抑制时的抗体浓度作为活性相互比较的依据，所得到的结果能够较真实地反映单抗衍生物活性保留的百分比。; 关键词单克隆抗体铁蛋白抗原结合活性竞争ELISA; Keywords Monoclonal antibody Ferritin Antigen-bindig activity Competi-tive ELISA; 分类号 R446.61 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定被引量：5: 2; 作者徐重新张存政张霄刘媛黄鹰刘贤金; 机构江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室南京师范大学生命科学学院/江苏省微生物与功能基因组学重点实验室; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期47-52,共6页; 基金国家973计划项目(2012CB722505) 国家自然科学基金项目(31272109 31201535); 文摘利用含有重组噬菌粒的噬菌体直接侵染大肠杆菌(Escherichia coli)HB2151,原核分泌表达了抗苏云金芽孢杆菌(Ba-cillus thuringiensis,Bt)Cry1B毒素蛋白的单链抗体(single chain-variable fragment,scFv),经纯化、鉴定抗原结合活性后,建立了Cry1B毒素蛋白的ELISA检测方法。方法以展示scFv抗体的重组噬菌体感染E.coli HB2151,经PCR和基因测序检测克隆scFv基因片段的完整性,用SDS-PAGE方法检测scFv在E.coli HB2151宿主菌中的表达水平,用ELISA测定法检测scFv的抗原结合活性,通过时间梯度优化获得可溶性表达蛋白的最佳培养时间。结果表明:经PCR、DNA电泳及基因测序等,均证实重组噬菌体对E.coli HB2151宿主菌侵染成功,SDS-PAGE电泳结果表明scFv抗体表达成功,纯化后的蛋白质量浓度为132μg.mL-1。以纯化的scFv蛋白为基础建立了对Cry1B毒素蛋白的间接竞争ELISA法,方法的抑制中质量浓度(IC50)为1.398μg.mL-1,最低检测限(IC10)为0.025 7μg.mL-1,线性检测范围为0.5～5.0μg.mL-1,scFv对Cry1C的交叉反应率为7.51%;与Cry1Ab、Cry1Ac的交叉反应率均小于0.1%;在培养温度30℃,1 mmol.L-1IPTG诱导条件下,scFv在E.coliHB2151宿主中的最佳诱导表达时间为12 h。本研究成功地将抗Cry1B毒素蛋白的scFv在E.coli HB2151中进行了可溶性表达,获得了具有抗原结合活性的scFv融合型抗体,为实际生产应用与试剂盒研发提供了基础。; 关键词 Cry1B毒素蛋白单链抗体可溶性表达抗原结合活性; Keywords CrylB toxin single chain variable fragments（scFv） soluble expression antigen binding activity; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗癌胚抗原免疫毒素生物学功能的研究: 3; 作者何丹杨慧晁开林晴黄华樑; 机构中国科学院遗传与发育生物学研究所沈阳药科大学制药工程学院西北农林科技大学生命科学学院; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期368-374,共7页; 文摘为了研究免疫毒素发挥生物学作用的全过程 ,构建了两种不同形式的基于假单胞菌外毒素 (PseudomonasexotoxinA ,PE)的抗癌胚抗原 (carcinoembryonicantigen ,CEA)免疫毒素CEA (Fv) /PE38/KDEL和PE35 /CEA(Fv) /KDEL .用流式细胞术经间接免疫荧光法测定免疫毒素的抗原结合活性 .免疫毒素的内化 (internalization)通过间接免疫荧光标记的方法在激光共聚焦显微镜下进行检测 ,采用流式细胞术进行免疫毒素内化的定量分析 .细胞凋亡采用FITC annexinV/PI双荧光染色方法进行分析 .用噻唑蓝 (MTT)法测定免疫毒素的靶细胞杀伤功能 .对两种形式的免疫毒素在各个功能阶段的性质进行研究和比较 ,全面展现了免疫毒素发挥生物学功能的过程及各个生物作用过程之间的相互影响 ,为详尽的机制研究和免疫毒素的进一步优化改造提供了重要的依据 .; 关键词癌胚抗原 CEA 免疫毒素抗原结合活性内吞作用凋亡细胞毒性; Keywords carcinoembryonic antigen (CEA) immunotoxins antigen binding activity endocytosis apoptosis cytotoxicity; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1可溶性单链抗体b12-scFv的表达与活性分析被引量：2: 4; 作者杨雄刘秀侠南昊许晓东陈红英; 机构西北农林科技大学生命科学学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第5期205-210,216,共7页; 基金教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-09-0652); 文摘【目的】合成并克隆HIV-1单克隆抗体b12的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达,并分析表达产物的活性。【方法】以单抗b12的重链和轻链全基因为模板,分别扩增其可变区基因片段后,用重叠PCR的方法将二者拼接起来,形成scFv-VL-Linker-VH结构,并将其插入pET28a载体,构建原核表达载体pETb12-scFv。将pETb12-scFv转入大肠杆菌BL21StarTM(DE3),经IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析;用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达产物进行分离纯化,用酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光显微镜和流式细胞仪(FCM)检测纯化蛋白与HIV-1gp120的结合活性。【结果】得到了b12的单链抗体基因b12-scFv,长度为768bp;SDS-PAGE电泳结果显示,b12-scFv表达量较高,蛋白质分子质量约为29ku,主要以可溶性蛋白的形式存在,但也有部分形成不溶的包涵体;纯化后蛋白的产量约为2mg/L;活性检测结果表明,b12-scFv对分泌表达和锚定在细胞膜表面的HIV-1gp120都具有良好的特异性结合活性。【结论】单链抗体b12-scFv可以用于HIV-1受体结合位点的表位检测。; 关键词 HIV-1 单链抗体 B12 载体构建亲和纯化抗原结合活性; Keywords HIV-1 scFv b12 vector construction affinity purification antigen binding activity; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名天花粉蛋白基因的克隆、表达和活性鉴定被引量：1: 5; 作者蔡煊胡拥军徐洪俞吉安孙兵; 机构上海交通大学生命科学技术学院中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所; 出处《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1503-1505,共3页; 文摘用 PCR( Polymerase Chain Reaction)扩增出天花粉蛋白 ( Trichosanthin,TCS)基因全长序列 ,插入表达载体 .经双酶切鉴定及测序分析 ,表明阅读框正确 .表达 His- TCS活性融合蛋白并纯化天花粉蛋白 ,鉴定出其具有 RNA; 关键词天花粉蛋白基因克隆分离纯化生物活性基因表达 RNA N-糖苷酶活性抗原抗体结合活性; Keywords trichosanthin gene clone protein expression and purification biological activity; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	竞争ELISA测定单抗衍生物的抗原结合活性	张德胜曹惠婷张祖传	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	1994	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人源化抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的原核表达及生物学活性测定	徐重新张存政张霄刘媛黄鹰刘贤金	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗癌胚抗原免疫毒素生物学功能的研究	何丹杨慧晁开林晴黄华樑	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	HIV-1可溶性单链抗体b12-scFv的表达与活性分析	杨雄刘秀侠南昊许晓东陈红英	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	天花粉蛋白基因的克隆、表达和活性鉴定	蔡煊胡拥军徐洪俞吉安孙兵	《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料