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鼠抗CD4抗体轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析被引量：1: 1; 作者王志友张爱华闭兰《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期251-253,共3页; 为获得鼠抗人 T细胞分化抗原 4分子单抗的轻链及重链可变区基因。采用 RT- PCR技术 ,从 Wu T4细胞总RNA中扩增出轻链和重链可变区基因 ,进行克隆并作核苷酸序列分析 ,发现 RT- PCR扩增出来的两条轻链和一条重链可变区基因分别为 4 0 0 b... 展开更多; 关键词 T细胞分化抗原4 鼠抗体可变区基因序列分析基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

聚合酶链反应扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因被引量：1: 2; 作者于秀艳张皓 +1 位作者孙敏莉张柏根《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1260-1263,共4页; 目的利用二次聚合酶链反应(PCR)扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,并将其克隆到T载体进行测序验证。方法收集50例动脉粥样硬化患者外周动脉血标本,密度梯度离心法分离淋巴细胞,TR Izol法提取总RNA,用逆转录-PCR扩增轻链可变区基因... 展开更多; 关键词聚合酶链反应抗体可变区基因 T载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛胚系基因中两种JH和Cμ抗体基因的克隆与分析: 3; 作者李敏陈丽梅 +3 位作者林爱星杨兴元安晓荣陈永福《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期857-864,共8页; 根据NCBIGenBankTM中登录的2个牛抗体重链可变区J基因(JH)(序列号为AY158087,AY149283)的序列不同之处设计PCR引物,能从同一个体的Holstein牛基因组DNA中扩增得到与以上2个基因分别相同的序列,证明这2个JH基因的差异不是由于牛个体或品... 展开更多; 关键词 Holstein牛胚系基因抗体抗体重链恒定区μ基因(Cμ) 抗体重链可变区J基因(JH) 重组信号序列(RSS); 在线阅读下载PDF 职称材料

人噬菌体抗体库中异常重组子的分析被引量：4: 4; 作者王琰王刚化冰《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期63-66,共4页; 目的阐明在噬菌体抗体库技术中，选择适当限制性内切酶酶切位点的重要性，并介绍人抗体可变区胚系基因的限制酶谱。方法从正常人外周血提取淋巴细胞总ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＩｇＭ和哪的Ｆｄ片段及ｋ链基因，重组到载体ｐ３... 展开更多; 关键词人抗体可变区基因抗体库限制性内切酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鼠抗CD4抗体轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析被引量：1: 1; 作者王志友张爱华闭兰; 机构武汉生物制品研究所免疫研究室; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期251-253,共3页; 基金卫生部医学科研基金资助项目 (No.94 - 2 - 0 4 4 ); 文摘为获得鼠抗人 T细胞分化抗原 4分子单抗的轻链及重链可变区基因。采用 RT- PCR技术 ,从 Wu T4细胞总RNA中扩增出轻链和重链可变区基因 ,进行克隆并作核苷酸序列分析 ,发现 RT- PCR扩增出来的两条轻链和一条重链可变区基因分别为 4 0 0 bp左右 ,构建的 p MD18T- VL 和 p MD18T- VH 重组克隆载体 ,酶切与预期结果相符。测序得到它们的 DNA序列。结果表明 ,克隆的两条轻链可变区基因序列一致 ,长度均为 32 4 bp,属于鼠轻链亚类。克隆的重链可变区基因长度为 375 bp,属于鼠重链 (C)亚类。; 关键词 T细胞分化抗原4 鼠抗体可变区基因序列分析基因克隆; Keywords cluster of differentiation 4 variable region gene of mouse antibody cloning sequence analysis; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名聚合酶链反应扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因被引量：1: 2; 作者于秀艳张皓孙敏莉张柏根; 机构上海交通大学医学院仁济医院血管外科; 出处《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1260-1263,共4页; 基金上海市卫生局基金(024079)资助项目; 文摘目的利用二次聚合酶链反应(PCR)扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,并将其克隆到T载体进行测序验证。方法收集50例动脉粥样硬化患者外周动脉血标本,密度梯度离心法分离淋巴细胞,TR Izol法提取总RNA,用逆转录-PCR扩增轻链可变区基因(包括VK和Vλ)和重链可变区基因(VH),分别酶切后克隆到T载体上,随机挑取2个克隆进行测序验证。结果总RNA的纯度和完整性都较好,经过2次PCR成功扩增出了抗体全套轻、重链可变区基因。测序结果与已有的人抗体基因的序列高度同源。结论该方法成功扩增出了人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,为下一步噬菌体单链抗体库的构建和筛选奠定了基础。; 关键词聚合酶链反应抗体可变区基因 T载体; Keywords polymerase chain reaction antibody V gene T-vector; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛胚系基因中两种JH和Cμ抗体基因的克隆与分析: 3; 作者李敏陈丽梅林爱星杨兴元安晓荣陈永福; 机构中国农业大学农业生物技术国家重点实验室; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期857-864,共8页; 基金国家高技术"863"计划资助项目(2002AA206311).~~; 文摘根据NCBIGenBankTM中登录的2个牛抗体重链可变区J基因(JH)(序列号为AY158087,AY149283)的序列不同之处设计PCR引物,能从同一个体的Holstein牛基因组DNA中扩增得到与以上2个基因分别相同的序列,证明这2个JH基因的差异不是由于牛个体或品种不同引起的.提取牛脾脏总RNA,RT-PCR扩增IgMcDNA,测序结果显示:序列号为AY149283的JH基因中第六外显子JH6是一个功能基因,它可以编码牛IgM的部分CDR3区和完整的FR4区,从2种IgMcDNA克隆的测序结果可以看出,其恒定区序列分别与序列号为U63637和AY230207的2种抗体重链恒定区μ基因(Cμ)cDNA序列相同.PCR扩增JH-Cμ序列,测序结果表明:序列号为AY158087的JH基因是同以上2种Cμ基因分别串连在一起的(序列号分别为AY230207和U63637).以上结果证明:序列号为U63637和AY230207的2个Cμ基因分别与AY149283的JH基因串联在一起,都能够参与牛IgM的产生,它们与AY158087的JH基因共同存在于同一个体Holstein牛胚系基因中.; 关键词 Holstein牛胚系基因抗体抗体重链恒定区μ基因(Cμ) 抗体重链可变区J基因(JH) 重组信号序列(RSS); Keywords Holstein bovine, germline gene, immunoglobulin, immunoglobulin heavy chain constant region μ gene （Cμ）, immunoglobulin heavy chain joining region （JH）, recombination signal sequence （RSS）; 分类号 Q951.3 [生物学—动物学] S823 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人噬菌体抗体库中异常重组子的分析被引量：4: 4; 作者王琰王刚化冰; 机构海军总医院中心实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期63-66,共4页; 基金全军医药卫生"十五"重点项目资助 NO.01Z015; 文摘目的阐明在噬菌体抗体库技术中，选择适当限制性内切酶酶切位点的重要性，并介绍人抗体可变区胚系基因的限制酶谱。方法从正常人外周血提取淋巴细胞总ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＩｇＭ和哪的Ｆｄ片段及ｋ链基因，重组到载体ｐ３ＭＨ中构建噬菌体抗体库。以限制性内切酶消化及电泳分析所获重组克隆；用ＰＣＧＥＮＥ软件分析人抗体可变区胚系基因的限制性内切酶谱。结果在构建抗体库的过程中，发现高频率的异常重组子克隆。经序列分析证实，在人Ｖ＿Ｈ基因片段中，存在用于克隆轻链的ＳａｃＩ位点。对人全部功能性可变区胚系基因进行限制性内切酶谱分析，发现人Ｖ＿Ｈ第Ⅳ家族的１１个成员均含有ＳａｃＩ位点，其它限制酶切位点在抗体可变区胚系基因中具有不同的出现率。结论构建抗体库时，用于重组可变区基因的酶切位点，对库的构建具有重要的影响，因此，应对表达载体所用的限制性内切酶进行精心选择。现在比较广泛使用的ｐＣＯＭＢ系统载体不利于良好性能抗体库的构建。; 关键词人抗体可变区基因抗体库限制性内切酶; Keywords Human antibody V genes antibody library restric- tion enzyme; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鼠抗CD4抗体轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析	王志友张爱华闭兰	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	聚合酶链反应扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因	于秀艳张皓孙敏莉张柏根	《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛胚系基因中两种JH和Cμ抗体基因的克隆与分析	李敏陈丽梅林爱星杨兴元安晓荣陈永福	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人噬菌体抗体库中异常重组子的分析	王琰王刚化冰	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料