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影响多重PCR扩增效果的因素 被引量：131
1
作者 黄银花 胡晓湘 +4 位作者 徐慰倬 高宇 冯继东 孙汉 李宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期65-68,共4页
不同循环参数、PCR缓冲液及反应体积的对比实验表明,循环参数中退火温度和时间、延伸时间及PCR缓冲液的成分影响多重PCR的扩增效果,而反应体积、循环次数对其扩增效果影响较小。
关键词 多重PCR 扩增效果 循环效果 PCR缓冲液 反应体积
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猪繁殖与呼吸综合征病毒不同基因扩增效果的比较研究 被引量：1
2
作者 史开志 汪德生 +3 位作者 王开功 周碧君 李永明 文明 《中国动物检疫》 CAS 2009年第2期28-30,34,共4页
从PRRSV-ZB病毒株感染细胞培养物提取总RNA样本,以Oligo(dT)反转录后,针对PRRSVN、M和GP5基因进行PCR扩增。结果表明:N基因扩增效果明显高于GP5和M基因(p<0.05),N、M、GP5基因的最小检测量分别为0.1ug,0.1ug和0.4ug。对N、M和GP5基... 从PRRSV-ZB病毒株感染细胞培养物提取总RNA样本,以Oligo(dT)反转录后,针对PRRSVN、M和GP5基因进行PCR扩增。结果表明:N基因扩增效果明显高于GP5和M基因(p<0.05),N、M、GP5基因的最小检测量分别为0.1ug,0.1ug和0.4ug。对N、M和GP5基因的稳定性或保守性进行分析可见,M和N基因相对保守,GP5基因相对变异较大。本实验以N基因作目的基因,对11个临床发病猪场进行PRRS病原核酸检测,均扩增出377bp特异性条带。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N基因 M基因 GP5基因 扩增效果
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不同引物组合对新疆扁桃品种S-基因特异扩增效果比较
3
作者 郭春苗 杨波 +4 位作者 吐迪.麦麦提 唐亚萍 李宁 王继勋 龚鹏 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期641-646,共6页
【目的】比较供试品种的S-RNase基因不同引物组合扩增效果。【方法】利用已报道的3对蔷薇科通用引物组合,对新疆23个扁桃品种进行自交不亲和S-RNase基因的PCR扩增,比较扩增系数和扩增成功率,评价3对引物组合的扩增效果。【结果】不同的... 【目的】比较供试品种的S-RNase基因不同引物组合扩增效果。【方法】利用已报道的3对蔷薇科通用引物组合,对新疆23个扁桃品种进行自交不亲和S-RNase基因的PCR扩增,比较扩增系数和扩增成功率,评价3对引物组合的扩增效果。【结果】不同的引物组合对供试扁桃品种的扩增系数和扩增成功率差异较大,其中引物组合AS1Ⅱ+Amy C5R扩增系数和扩增成功率均为最高(84.78%和65.21%),效果最好,其次为Pa Cons Ⅱ-F+Pa Cons Ⅱ-R引物组合(65.22%和34.78%)和Pru C2+Pru C4R引物组合(63.04%和30.43%)。【结论】3对蔷薇科S-RNase基因扩增通用引物均可用于扁桃S-RNase的扩增,扩增效果AS1Ⅱ+Amy C5R最佳,Pa Cons Ⅱ-F+Pa Cons Ⅱ-R次之,Pru C2+Pru C4R最不理想。单一使用某一对引物均不能扩增出供试材料的所有S-RNase基因条带,需多对引物组合使用,必要时需设计扁桃S-RNase扩增专用引物。 展开更多
关键词 扁桃 S-RNASE基因 引物组合 扩增效果
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不同PCR程序对甜菜DAMD引物扩增效果的影响 被引量：1
4
作者 闫彩燕 吴则东 +1 位作者 兴旺 邳植 《中国糖料》 2019年第2期28-31,共4页
为了开发甜菜品种高效鉴定的DAMD-PCR分子标记技术,优化相应的检测技术流程。利用6种DAMD引物,以8个不同甜菜品种的DNA为模板,分别采用常规PCR扩增程序和touchdown PCR(TD-PCR)扩增程序对模板进行扩增。扩增产物利用8%的非变性聚丙烯酰... 为了开发甜菜品种高效鉴定的DAMD-PCR分子标记技术,优化相应的检测技术流程。利用6种DAMD引物,以8个不同甜菜品种的DNA为模板,分别采用常规PCR扩增程序和touchdown PCR(TD-PCR)扩增程序对模板进行扩增。扩增产物利用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,经银染后观察不同PCR程序对甜菜DAMD引物扩增效果的影响。结果表明,TD-PCR扩增程序扩增效果明显好于常规PCR扩增程序,条带明亮、清晰,非特异性条带数量明显减少。推荐在甜菜DAMD引物的扩增中使用TD-PCR扩增程序。 展开更多
关键词 甜菜 DAMD引物 降落PCR 扩增效果
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新疆野生啤酒花DNA提取及RAPD反应体系的建立 被引量：3
5
作者 原俊凤 张霞 +2 位作者 王绍明 张玲 徐基平 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第1期73-77,共5页
采用 2种方法提取啤酒花的基因组DNA ,并分析了样品的不同状况和是否纯化对所提DNA质量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明 :采用改进的高盐低pH法优于CTAB法。以此法所提DNA为模板进行随机扩增多态DNA(RAPD)试验 ,分别测试了Mg2 +、dNTP... 采用 2种方法提取啤酒花的基因组DNA ,并分析了样品的不同状况和是否纯化对所提DNA质量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明 :采用改进的高盐低pH法优于CTAB法。以此法所提DNA为模板进行随机扩增多态DNA(RAPD)试验 ,分别测试了Mg2 +、dNTP、Taq酶、模板DNA浓度和退火温度对反应结果的影响 。 展开更多
关键词 RAPD反应体系 啤酒花 DNA提取 随机扩增多态DNA(RAPD) 野生 新疆 基因组DNA 高盐低pH法 CTAB法 DNA浓度 扩增效果 DNTP Taq酶 退火温度 模板
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利用RAPD研究桂林桂花品种间的亲缘关系(英文) 被引量：9
6
作者 伊艳杰 黄莹 尚富德 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期129-133,178,共6页
采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,从100个随机引物中筛选出扩增效果较好的20个引物,分 析桂林市23个桂花品种的基因组多态性。20个随机引物共检测到193个位点,其中多态位点114个,占 59.1%。并进行了聚类分析,构建出树状聚类图,将... 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,从100个随机引物中筛选出扩增效果较好的20个引物,分 析桂林市23个桂花品种的基因组多态性。20个随机引物共检测到193个位点,其中多态位点114个,占 59.1%。并进行了聚类分析,构建出树状聚类图,将这些品种划分为4个品种群,与传统分类学结果一致。结 果表明,以基因型而不是以表现型为基础,分析桂花品种间的区别是可能的。该技术为解决桂林市的桂花品 种分类问题提供了重要依据。 展开更多
关键词 RAPD研究 随机扩增多态性DNA(RAPD) 亲缘关系 品种间 基因组多态性 桂花品种 随机引物 树状聚类图 扩增效果 多态位点 聚类分析 分类问题 桂林市 品种群 分类学 表现型 基因型 技术
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从绵羊全血提取DNA的改进方法
7
作者 鲁生霞 常洪 +4 位作者 杜垒 角田健司 孙伟 王庆华 徐琪 《中国草食动物》 2004年第2期6-7,共2页
以小尾寒羊冷冻全血为材料 ,介绍了提取DNA的改进方法。试验表明 ,提取的DNA纯度高 ,产量在正常范围之内 ,PCR扩增效果良好 。
关键词 绵羊 小尾寒羊 冷冻全血 DNA 提取技术 DNA纯度 产量 PCR扩增效果 分子遗传学
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水稻稻瘟病抗病基因Pi-1和Pi-9双重PCR检测体系的建立 被引量：5
8
作者 林艳秋 彭江涛 +5 位作者 官华忠 侯新坡 陈志伟 朱秀凤 黄荣德 周元昌 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第2期169-173,共5页
利用分别与抗稻瘟病基因Pi-1和Pi-9紧密连锁的SSR标记MRG4766和SNP标记FP1+FP2+RP组成双重PCR体系,通过设置Mg2+、d NTPs和引物浓度梯度,探索双重PCR体系中各反应物的使用量,由此确定最优双重PCR反应体系.在水稻恢复系R1059与R673杂交的... 利用分别与抗稻瘟病基因Pi-1和Pi-9紧密连锁的SSR标记MRG4766和SNP标记FP1+FP2+RP组成双重PCR体系,通过设置Mg2+、d NTPs和引物浓度梯度,探索双重PCR体系中各反应物的使用量,由此确定最优双重PCR反应体系.在水稻恢复系R1059与R673杂交的BC3F2群体中随机挑选20个单株对该双重PCR反应体系的效果进行验证.结果表明,20个单株的双重PCR扩增结果与2个单一PCR扩增结果相符,并且条带清晰,说明该双重PCR反应体系在利用分子标记进行基因聚合上可提高选择效率和减少费用. 展开更多
关键词 双重PCR 反应剂浓度 扩增效果
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漾濞泡核桃ISSR-PCR反应体系的建立和优化 被引量：4
9
作者 周林涛 陆斌 +3 位作者 周军 苏为耿 原晓龙 孟富宣 《林业调查规划》 2014年第1期14-17,共4页
以漾濞泡核桃优株为研究对象,研究其ISSR-PCR反应体系中的5个影响因子(模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度)对PCR扩增效果的影响,从而建立起漾濞泡核桃的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明:模板DNA最佳浓度为... 以漾濞泡核桃优株为研究对象,研究其ISSR-PCR反应体系中的5个影响因子(模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度)对PCR扩增效果的影响,从而建立起漾濞泡核桃的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明:模板DNA最佳浓度为50 ng/(25μL),Taq聚合酶浓度为0.75U/(25μL),引物浓度为0.7mmol/L,dNTPs浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.0mmol/L,利用该最佳体系对试验中所选取的样本进行扩增反应。建立了适宜于漾濞泡核桃的ISSR-PCR扩增的最佳体系,该体系的建立为利用ISSR分子标记技术对漾濞泡核桃进行种质资源研究奠定了基础。 展开更多
关键词 漾濞泡核桃 ISSR-PCR反应体系 正交优化 扩增效果
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桃嫩叶及DNA处理方法用于RAPD分析的探讨 被引量：1
10
作者 程中平 陈志伟 +1 位作者 胡春根 邓秀新 《湖北林业科技》 2001年第3期6-9,共4页
将桃 (AmygdaluspersicaL .)幼嫩叶 ,用格兰仕微波炉中火档干燥处理 3min、6min ,其中 6min处理明显影响DNA扩增 ;3min处理对DNA扩增没有太大的影响。桃幼嫩叶三种保存方式 ( - 72℃　 1 2 - 1 8d ,- 2 0℃　 30d ,- 2 0℃　 2 40d)DNA... 将桃 (AmygdaluspersicaL .)幼嫩叶 ,用格兰仕微波炉中火档干燥处理 3min、6min ,其中 6min处理明显影响DNA扩增 ;3min处理对DNA扩增没有太大的影响。桃幼嫩叶三种保存方式 ( - 72℃　 1 2 - 1 8d ,- 2 0℃　 30d ,- 2 0℃　 2 40d)DNA的质量和扩增带均较好。DNA在两种温度 ( 4℃和 - 2 0℃ )下保存 2 1 0d ,经过对其扩增 。 展开更多
关键词 桃 幼嫩叶保存 微波干燥 DNA液保存 扩增效果
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