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手工组织显微切割食管癌不同病变阶段细胞提取高质量RNA
被引量:
6
1
作者
胡盛平
张可浩
+4 位作者
沈忠英
吴名耀
邓小玲
杨捷生
方福德
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期659-663,共5页
目的建立手工组织显微切割方法准确挖取食管癌不同病变阶段细胞,从中提取高质量RNA,以满足后续基因表达分析的需要。方法常规制备冰冻组织切片,用无水乙醇一次性脱水固定,显微镜下用1ml注射器针头从组织冰冻切片中分别挖取不同病变阶段...
目的建立手工组织显微切割方法准确挖取食管癌不同病变阶段细胞,从中提取高质量RNA,以满足后续基因表达分析的需要。方法常规制备冰冻组织切片,用无水乙醇一次性脱水固定,显微镜下用1ml注射器针头从组织冰冻切片中分别挖取不同病变阶段的细胞,用TRIzol提取总RNA。结果手工挖取面积可准确到1/25mm2,从挖取的细胞中提取出高质量的总RNA,凝胶电泳分析见清晰的18S和28SrRNA带,可满足后续分子水平研究的要求。结论无水乙醇固定冰冻组织切片可有效保存RNA的完整性,手工组织显微切割能够准确挖取小至1/25mm2面积的细胞,方法简单、易掌握、易操作,不须特殊仪器设备,适合在一般实验室推广应用。
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关键词
手工
组织
显
微
切割
食管癌
RNA提取
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职称材料
鼻咽癌组织的显微切割及其RNA线性扩增
被引量:
8
2
作者
周艳宏
曾朝阳
+12 位作者
熊炜
罗晓敏
李小玲
范松青
张文玲
刘华英
李征
杨一新
武明花
唐珂
曹利
沈守荣
李桂源
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期463-467,共5页
从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,...
从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,显微切割技术来获得高纯度鼻咽癌细胞,利用RNA线性扩增技术得到cDNA微阵列实验所需RNA.结果表明:利用RNAlater技术可以很好地保持组织RNA的稳定,通过优化显微切割和RNA线性扩增的条件获得了cDNA微阵列实验所需的高纯度、高质量RNA.
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关键词
RNAlater技术
手工显微切割
RNA线性扩增技术
CDNA
微
阵列
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职称材料
题名
手工组织显微切割食管癌不同病变阶段细胞提取高质量RNA
被引量:
6
1
作者
胡盛平
张可浩
沈忠英
吴名耀
邓小玲
杨捷生
方福德
机构
汕头大学医学院分子生物学中心
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期659-663,共5页
基金
广东省自然科学基金(000819)
国家教育部留学回国人员科研启动基金(外教司2001345号)
汕头大学研究与发展基金(L00007)资助~~
文摘
目的建立手工组织显微切割方法准确挖取食管癌不同病变阶段细胞,从中提取高质量RNA,以满足后续基因表达分析的需要。方法常规制备冰冻组织切片,用无水乙醇一次性脱水固定,显微镜下用1ml注射器针头从组织冰冻切片中分别挖取不同病变阶段的细胞,用TRIzol提取总RNA。结果手工挖取面积可准确到1/25mm2,从挖取的细胞中提取出高质量的总RNA,凝胶电泳分析见清晰的18S和28SrRNA带,可满足后续分子水平研究的要求。结论无水乙醇固定冰冻组织切片可有效保存RNA的完整性,手工组织显微切割能够准确挖取小至1/25mm2面积的细胞,方法简单、易掌握、易操作,不须特殊仪器设备,适合在一般实验室推广应用。
关键词
手工
组织
显
微
切割
食管癌
RNA提取
Keywords
manual tissue microdissection
esophageal carcinoma
RNA extractionActa Acad Med Sin, 2003,25(6)659 ~ 663
分类号
Q7 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
鼻咽癌组织的显微切割及其RNA线性扩增
被引量:
8
2
作者
周艳宏
曾朝阳
熊炜
罗晓敏
李小玲
范松青
张文玲
刘华英
李征
杨一新
武明花
唐珂
曹利
沈守荣
李桂源
机构
中南大学湘雅医学院肿瘤研究所
中南大学湘雅三医院消化内科
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期463-467,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30300201
30470955
+2 种基金
3030560
30200312)
新世纪优秀人才支持计划资助项目(NCET-04-0761)~~
文摘
从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,显微切割技术来获得高纯度鼻咽癌细胞,利用RNA线性扩增技术得到cDNA微阵列实验所需RNA.结果表明:利用RNAlater技术可以很好地保持组织RNA的稳定,通过优化显微切割和RNA线性扩增的条件获得了cDNA微阵列实验所需的高纯度、高质量RNA.
关键词
RNAlater技术
手工显微切割
RNA线性扩增技术
CDNA
微
阵列
Keywords
RNAlater technology
manual microdissection
RNA line-amplification technology
cDNA microarray
分类号
Q734.2 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
手工组织显微切割食管癌不同病变阶段细胞提取高质量RNA
胡盛平
张可浩
沈忠英
吴名耀
邓小玲
杨捷生
方福德
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
6
在线阅读
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职称材料
2
鼻咽癌组织的显微切割及其RNA线性扩增
周艳宏
曾朝阳
熊炜
罗晓敏
李小玲
范松青
张文玲
刘华英
李征
杨一新
武明花
唐珂
曹利
沈守荣
李桂源
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2005
8
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