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富血小板血浆的三次离心法制备及其对脂肪干细胞增殖、成骨矿化的影响 被引量:14
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作者 徐燕 叶眉 +4 位作者 陈芳 姜大川 孙晓瑜 林潇 沈继龙 《国际口腔医学杂志》 CAS 2011年第1期14-18,共5页
目的探索高效制备富血小板血浆(PRP)的方法,并观察不同体积分数的PRP对Beagle犬脂肪干细胞(ADSC)体外增殖及其向成骨细胞分化的影响。方法抽取3只Beagle犬静脉血各40 mL,分别用传统的二次离心法和改良的三次离心法制备PRP,进行血小板计... 目的探索高效制备富血小板血浆(PRP)的方法,并观察不同体积分数的PRP对Beagle犬脂肪干细胞(ADSC)体外增殖及其向成骨细胞分化的影响。方法抽取3只Beagle犬静脉血各40 mL,分别用传统的二次离心法和改良的三次离心法制备PRP,进行血小板计数分析。分别将体积分数为5%、10%、15%、20%的PRP加于Beagle犬ADSC的培养液中,于作用后48、72、96 h检测细胞的增殖状况;将ADSC分别培养在添加了体积分数为5%、10%、15%、20%的PRP和不加PRP的成骨细胞诱导液中,观察ADSC的成骨表达以及PRP对其成骨矿化的影响。结果三次离心法制备的PRP中血小板的含量明显高于二次法制备的。各组PRP促ADSC增殖作用均显著强于阴性对照组(P<0.001);不同体积分数PRP组间差异有统计学意义(P<0.001),细胞增殖在体积分数15%PRP组、96 h时达到峰值。von Kossa染色中矿化结节数量随着浓度上升而增多,体积分数20%PRP组最多。结论三次离心法制备PRP的效率高于二次离心法。PRP对Beagle犬ADSC的体外增殖有促进作用,与PRP体积分数和作用时间呈正相关关系。ADSC矿化结节的数量与PRP的体积分数呈正相关关系。 展开更多
关键词 富血小板血浆 脂肪干细胞 细胞增殖 成骨矿化
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机械压应力下骨硬化蛋白对成牙骨质细胞功能影响及机制的体外研究 被引量:4
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作者 柏思羽 陈悦 +1 位作者 戴红卫 黄兰 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期162-167,共6页
目的探究骨硬化蛋白(SOST)对处于机械压应力中的永生化成牙骨质细胞(OCCM-30)的功能影响及其相关的机制。方法用不同浓度SOST培养液(0、25、50、100 ng·mL-1)处理细胞后依靠四点弯曲细胞力学加载器对细胞加载大小为2 000μstrain... 目的探究骨硬化蛋白(SOST)对处于机械压应力中的永生化成牙骨质细胞(OCCM-30)的功能影响及其相关的机制。方法用不同浓度SOST培养液(0、25、50、100 ng·mL-1)处理细胞后依靠四点弯曲细胞力学加载器对细胞加载大小为2 000μstrain、频率是0.5 Hz的单轴压应力6 h,用免疫印迹法检测β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化的细胞信号转导分子p-smad1/5/8、细胞信号转导分子smad1/5/8的蛋白水平;用碱性磷酸酶(ALP)活性检测法检测ALP活性;用荧光实时定量PCR检测核心结合蛋白因子2(Runx-2)、骨钙素(OCN)、骨涎蛋白(BSP)以及细胞核因子κB受体活化因子(RANKL)、骨保护因子(OPG)的表达。结果 p-smad1/5/8随着SOST浓度增加,呈减低的趋势,而β-catenin、smad1/5/8未有显著差异性。在仅对细胞加力时ALP活性降低,随SOST浓度升高,ALP活性逐渐发生下降,Runx-2、OCN和BSP的表达也都呈现降低趋势,RANKL的表达随着SOST增加而升高,OPG则随之下降。结论压应力下,SOST的升高会对骨形态发生蛋白(BMP)/smad通路产生抑制作用,对β-catenin表达未产生明显改变。外源性SOST对于BMP存在反馈性的负向调节作用。压应力下SOST对OCCM-30的矿化功能是抑制的,其机制或许是一方面利用BMP信号通路对成骨相关因子Runx2、OCN、BSP等实现下调,另一方面提高了与破牙骨质有关分子RANKL/OPG的比率。 展开更多
关键词 质细胞 机械压应力 成骨矿化 蛋白 信号通路
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益肾骨康方促进小鼠体外成骨作用的研究 被引量:9
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作者 殷玉琨 李杰 +1 位作者 宋洪丽 冯利 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期451-453,I0014,共4页
目的:研究益肾骨康方对小鼠体外成骨作用的影响。方法:Wistar大鼠灌胃益肾骨康方以提取含药血清,以蒸馏水灌胃获取对照血清,作用于体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞。以生长实验、碱性磷酸酶染色实验、茜红素染色实验分别检测益肾骨康方... 目的:研究益肾骨康方对小鼠体外成骨作用的影响。方法:Wistar大鼠灌胃益肾骨康方以提取含药血清,以蒸馏水灌胃获取对照血清,作用于体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞。以生长实验、碱性磷酸酶染色实验、茜红素染色实验分别检测益肾骨康方含药血清对生长速率、成骨分化及成骨矿化作用的影响。结果:益肾骨康方含药血清体外可增加骨髓间充质干细胞的生长速率,增加其成骨分化及矿化程度,具有统计学差异(P<0.05)。结论:益肾骨康方对小鼠的成骨有促进作用。 展开更多
关键词 益肾康方 成骨矿化 髓间充质干细胞
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