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二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达
1
作者 邵珊 白薇超 +3 位作者 邹鹏程 罗敏娜 赵新汉 雷建军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期428-436,共9页
目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(... 目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 缺氧诱导因子-1Α 二甲双胍 磷酸化-AMPK 肿瘤微环境
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转化生长因子-β2诱导人Tenon囊成纤维细胞转化及其在瘢痕形成中的作用 被引量：7
2
作者 朱晓燕 李磊 +3 位作者 鲜光军 李海军 谭燕 谢琳 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期215-219,共5页
背景研究表明转化生长因子-β2（TGF-β2）能够促进瘢痕形成，但其在青光眼滤过术后局部瘢痕形成中的作用机制值得研究。目的探讨TGF-β2对人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）转化以及在滤过术后瘢痕形成中的作用。方法在斜视手术中获取3例患... 背景研究表明转化生长因子-β2（TGF-β2）能够促进瘢痕形成，但其在青光眼滤过术后局部瘢痕形成中的作用机制值得研究。目的探讨TGF-β2对人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）转化以及在滤过术后瘢痕形成中的作用。方法在斜视手术中获取3例患者的Tenon囊组织，并用组织块培养法在含质量分数10％胎牛血清的DMEM中培养，培养的细胞贴壁后达到70％～80％亚融合状态时更换为无血清培养基饥饿培养24h，然后分别加入质量浓度1、2、5、10、20Ixg／LTGF-β2诱导HTFs24h，另用2tzg／L或5μg／LTGF-β2 诱导HTFs6、24、48、72h，阴性对照组培养基中不加TGF-β2 用Westernblot法检测HTFs中α-平滑肌肌动蛋白（n—SMA）和pSmad2蛋白的表达，采用细胞免疫荧光技术检测“-SMA及纤维状肌动蛋白（F—actin）表达的定位，采用凝胶收缩实验检测培养细胞收缩力的变化。结果不同质量浓度TGF—B，组HTFs中0I—SMA表达的强度均明显强于阴性对照组，2tzg／L、5μg／LTGF—B，作用24～48h后HTFs中d—SMA表达强度达峰值，10μg／L、20μg／LTGF-β2组较2μg／L、5μg／LTGF-β2组α—SMA蛋白表达强度减弱。对照组HTFs中有少量α—SMA及F—actin表达，1、2、5μg／LTGF-β2组d—SMA及F—actin荧光表达明显增强，阳性细胞数明显增加，10μg／LTGF-β2组α—SMA及F-actin荧光表达较低质量浓度组减弱。2μg／LTGF-β2作用后pSmad2表达强度明显强于PBS组和FBS组，在作用后30rain～2h表达较强，2h后开始出现下降。对照组HTFs收缩凝胶面积所占原面积的百分数为（78．00-3．13）％，1、2、5、10tzg／LTGF-β2组分别为（63．88±1．78）％、（20．69±O．65）％、（19．49±O．54）％、（16．24~0．84）％，HTFs收缩凝胶面积占原面积的百分数随着TGF-β2质量浓度的增加而明显增加（F组别=859．400，P=0．000）。结论TGF-β2可诱导成纤维细胞转分化，一定程度上其作用呈质量浓度依赖性和时间依赖性，且细胞收缩力随质量浓度的增加而增强，可能是青光眼滤过术后滤过通道建立失败的重要机制。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β2 青光眼 滤过手术 瘢痕形成 TENON囊成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白
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肝细胞生长因子阻抑TGF-β1诱导大鼠韧带成纤维细胞α-SMA过表达及其机制 被引量：2
3
作者 姜大朋 李昭铸 +3 位作者 蒋志涛 刘君阳 李天竹 王娜 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期906-909,共4页
目的:研究肝细胞生长因子(HGF)能否阻抑TGF-β1诱导的大鼠内侧副韧带(MCL)成纤维细胞α-SMA过表达及其可能涉及的信号传导通路。方法:采用组织块培养法培养大鼠MCL成纤维细胞,培养液中加入TGF-β1(5ng/ml)及HGF(10—40ng/ml)。培养72h后... 目的:研究肝细胞生长因子(HGF)能否阻抑TGF-β1诱导的大鼠内侧副韧带(MCL)成纤维细胞α-SMA过表达及其可能涉及的信号传导通路。方法:采用组织块培养法培养大鼠MCL成纤维细胞,培养液中加入TGF-β1(5ng/ml)及HGF(10—40ng/ml)。培养72h后,用RT-PCR检测各组α-SMAmRNA及Smad3mRNA的变化;细胞免疫组化检测α-SMA蛋白的表达。结果:TGF-β1能显著诱导α-SMA及Smad3的表达(P<0.01),而HGF则可以有效地阻抑其表达,其效应呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:HGF可以通过下调Smad3的表达来阻抑TGF-β1诱导的α-SMA过表达。这为利用HGF预防和治疗MCL损伤后瘢痕及纤维化在细胞和分子水平提供了依据。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 转化生长因子-Β 内侧副韧带 成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白
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成纤维细胞生长因子-21对体外诱导的非酒精性脂肪肝细胞模型脂代谢的影响 被引量：3
4
作者 刘敏 孔祥鑫 +3 位作者 杨苹 陈玉斌 李校堃 王会岩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期477-481,I0001,共6页
目的:探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)对体外诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型脂代谢的影响及其可能的作用机制。方法:采用MTT法筛选医用脂肪乳注射液使用浓度和FGF-21作用浓度,将体外诱导的NAFLD细胞分为对照组、模型组、脱离... 目的:探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)对体外诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型脂代谢的影响及其可能的作用机制。方法:采用MTT法筛选医用脂肪乳注射液使用浓度和FGF-21作用浓度,将体外诱导的NAFLD细胞分为对照组、模型组、脱离脂肪乳组和FGF-21治疗组,光学显微镜观察油红O染色情况,全自动生化仪检测NAFLD细胞内甘油三酯(TG)水平,免疫细胞化学方法观察细胞内肉毒碱脂酰转移酶-1(CPT-1)、过氧化氢酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达。结果:MTT法筛选出0.1%医用脂肪乳注射液作为建立体外诱导NAFLD细胞模型的最佳诱导浓度,与正常肝细胞株HL7702比较,模型组油红O染色后细胞浆内有大量被染成橘红色的脂滴,细胞内TG水平显著升高(P<0.01),CPT-1蛋白表达减弱,PPARγ和SREBP-1c蛋白表达增加。MTT法筛选出0.5mg.L-1FGF-21作为观察该药物对NAFLD细胞模型影响的作用浓度,与模型组比较,FGF-21处理组细胞内TG水平显著降低(P<0.01),CPT-1蛋白表达增加,PPARγ和SREBP-1c蛋白表达减弱。结论:FGF-21处理能减轻NAFLD细胞中TG蓄积,并使HL7702细胞CPT-1蛋白表达增加,而PPARγ和SREBP-1c蛋白表达减少。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子-21 非酒精性脂肪肝病 医用脂肪乳注射液
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杨梅素阻断转化生长因子-β诱导的心脏成纤维细胞活化增殖和分泌 被引量：3
5
作者 邵玲 周梦桥 +2 位作者 熊涛 邓长金 金露萍 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第6期590-594,共5页
目的有关杨梅素能否抑制心脏成纤维细胞的激活和功能进而抑制心肌纤维化的报道不多。文章探讨杨梅素对心脏成纤维细胞活化增殖和分泌功能的影响,以及可能的分子机制。方法分离培养SD大鼠乳鼠成纤维细胞,采用转化生长因子(TGF-β)刺激诱... 目的有关杨梅素能否抑制心脏成纤维细胞的激活和功能进而抑制心肌纤维化的报道不多。文章探讨杨梅素对心脏成纤维细胞活化增殖和分泌功能的影响,以及可能的分子机制。方法分离培养SD大鼠乳鼠成纤维细胞,采用转化生长因子(TGF-β)刺激诱导成纤维细胞的活化增殖和分泌。采用不同浓度的杨梅素(1,3,10,30,100μmol/L)孵育成纤维细胞24h,观察其对心脏成纤维细胞活化,增殖和分泌的影响;采用CKK8试剂盒检测细胞增殖活性;采用RT-PCR检测促纤维化因子的转录水平;采用免疫荧光染色检测α-SMA蛋白的表达;采用免疫印迹检测可能的信号蛋白的改变。结果免疫荧光结果显示:与对照组比较,TGF-β组、30μmol/L杨梅素+TGF-β组、100μmol/L杨梅素+TGF-β组成纤维细胞α-SMA表达的荧光亮度明显增强(P<0.05);与TGF-β组比较,30μmol/L杨梅素+TGF-β组、100μmol/L杨梅素+TGF-β组α-SMA表达的荧光亮度减弱(P<0.05)。RT-PCR结果显示:TGF-β组、30μmol/L杨梅素+TGF-β组、100μmol/L杨梅素+TGF-β组刺激成纤维细胞48 h,成纤维细胞I型胶原、III型胶原、纤维连接蛋白和结缔组织生长因子表达的转录水平明显高于对照组(P<0.05);而30μmol/L杨梅素+TGF-β和100μmol/L杨梅素+TGF-β组细胞中上述促纤维化因子的转录水平均低于TGF-β组(P<0.05)。免疫印迹结果显示:与对照组比较,TGF-β组、30μmol/L杨梅素+TGF-β组、100μmol/L杨梅素+TGF-β组成纤维细胞smad2、smad3的磷酸化水平升高(P<0.05),TGF-β组smad4表达增加(P<0.05);与TGF-β组smad2、smad3磷酸化水平和smad4表达(3.24±0.01、3.65±0.01、0.69±0.01)比较,30μmol/L杨梅素+TGF-β组(2.11±0.02、2.98±0.03、0.45±0.03)和100μmol/L杨梅素+TGF-β组(1.98±0.02、1.56±0.028、0.41±0.02)均明显降低(P<0.05)。结论杨梅素可以通过抑制smad信号通路阻断TGF-β诱导的成纤维细胞活化增殖和分泌。 展开更多
关键词 杨梅素 成纤维细胞 心肌纤维化 SMAD信号通路 转化生长因子-Β
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壳聚糖-碱性成纤维细胞生长因子载体诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化 被引量：4
6
作者 段红梅 杨朝阳 李晓光 《中国康复理论与实践》 CSCD 2011年第4期329-333,共5页
目的探索壳聚糖-碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)载体对骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的诱导作用。方法免疫组织化学、Western blot检测MSCs诱导分化为神经细胞,MTT检测诱导后细胞的活性。结果 MSCs经壳聚糖-bFGF载体诱导后,表达... 目的探索壳聚糖-碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)载体对骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的诱导作用。方法免疫组织化学、Western blot检测MSCs诱导分化为神经细胞,MTT检测诱导后细胞的活性。结果 MSCs经壳聚糖-bFGF载体诱导后,表达神经干细胞的标记物Nestin以及神经细胞的标记物β-tubulinⅢ和MAP-2,比例高达83.54%。结论壳聚糖-bF-GF载体可以诱导MSCs高比例向神经细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 碱性成纤维细胞生长因子 壳聚糖 诱导 神经分化 细胞因子 神经细胞
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TGF-β_1诱导体外培养角膜成纤维细胞结缔组织生长因子的表达 被引量：4
7
作者 黄琼 胡燕华 +1 位作者 张明昌 张缨 《眼科新进展》 CAS 2006年第7期508-510,共3页
目的观察转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对体外培养的角膜成纤维细胞结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的诱导表达作用。方法体外培养的角膜成纤维细胞分实验组和对照组,对照组弃原培养液,加... 目的观察转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对体外培养的角膜成纤维细胞结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的诱导表达作用。方法体外培养的角膜成纤维细胞分实验组和对照组,对照组弃原培养液,加无血清培养液继续培养,实验组用不同浓度的TGFβ1(0.1μg·L-1、1μg·L-1、10μg·L-1)处理24h,用RTPCR方法检测角膜成纤维细胞CTGFmRNA的表达情况。结果1μg·L-1和10μg·L-1TGFβ1处理组CTGF/GAPDH像素比值分别为0.35±0.05和1.25±0.10,均较对照组高(0.13±0.02),差异具有统计学意义,同时CTGF/GAPDH比值随TGFβ1浓度增加而增加。结论TGFβ1可以诱导角膜成纤维细胞CTGF的表达,在角膜成纤维细胞中CTGF也可能是TGFβ1对细胞起作用的下游信号分子。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 结缔组织生长因子 角膜成纤维细胞
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白塞综合征肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子及其受体成纤维细胞生长诱导因子14表达的初步研究
8
作者 李萌萌 郭在培 +3 位作者 陈涛 黎静宜 曹娜 秦沙 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期134-136,共3页
白塞综合征（BS）是一种慢性、可累及多系统的血管炎性疾病。临床上以口腔溃疡、生殖器溃疡、葡萄膜炎和皮肤损害等反复发作为主要特征．亦可累及胃肠道、关节、心血管、肾脏及神经等多个系统。
关键词 肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子 成纤维细胞生长诱导因子14 白塞综合征
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乳糖诱导成纤维细胞生长因子-21在大肠杆菌中的表达
9
作者 王会岩 尹彬彬 +5 位作者 明盛金 李俊 宋莹 王蕾 尹维笳 蔡建辉 《安徽农业科学》 CAS 2012年第30期14636-14638,共3页
[目的]研究用乳糖作为诱导剂诱导成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor 21,FGF21)基因重组蛋白的表达,以探讨其工程化生产的可能性。[方法]对影响重组表达产物的乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度等进行比较,并以I... [目的]研究用乳糖作为诱导剂诱导成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor 21,FGF21)基因重组蛋白的表达,以探讨其工程化生产的可能性。[方法]对影响重组表达产物的乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度等进行比较,并以IPTG诱导作为对照,确定最佳的乳糖诱导条件。[结果]对于重组目的蛋白,乳糖可以起到很好的诱导效果,诱导产物的表达量与IPTG诱导产物相当。其最佳表达条件为:在A600为0.8～1.0时,加入乳糖至终浓度为0.5 g/L,在35℃下诱导6 h。[结论]乳糖可诱导FGF21基因表达,并取得良好效果,为工程化生产提供了试验数据和借鉴。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子-21 乳糖诱导 大肠杆菌
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培哚普利对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚中碱性成纤维细胞生长因子-2的影响 被引量：4
10
作者 辛颖 赵玉兰 +1 位作者 董静 黄亚萍 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期630-633,共4页
目的:探讨培哚普利片对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌肥厚大鼠碱性成纤维细胞生长因子-2(basic fibroblast growth factor,bFGF-2)表达的影响。方法:将研究大鼠分为对照组、模型组及药物干预组,对照组大鼠背部行皮下注射生... 目的:探讨培哚普利片对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)所致心肌肥厚大鼠碱性成纤维细胞生长因子-2(basic fibroblast growth factor,bFGF-2)表达的影响。方法:将研究大鼠分为对照组、模型组及药物干预组,对照组大鼠背部行皮下注射生理盐水;模型组大鼠皮下注射ISO;药物干预组大鼠皮下注射ISO,培哚普利片灌胃,称量计算各组大鼠左心室质量/体质量(left ventricular mass/body mass,LVM/BM)和全心质量/体质量(heart mass/body mass,HM/BM)并进行对比,应用免疫组化及逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法比较各组大鼠左心室中bFGF-2含量、3组大鼠LVM/BM和HM/BM。结果:大鼠LVM/HM、HM/BM比较,对照组<药物干预组<模型组,组间比较差异有统计学意义(F=25.220,P=0.000;F=76.761,P=0.000)。免疫组化及RT-PCR显示药物干预组中bFGF-2 mRNA含量高于对照组,但低于模型组(P=0.000,P=0.038)。结论:通过皮下注射ISO能成功制备心肌肥厚大鼠模型。bFGF-2对大鼠心肌肥厚具有促进作用,培哚普利可通过降低bFGF-2表达抑制心肌肥厚。 展开更多
关键词 心肌肥厚 碱性成纤维细胞生长因子-2 培哚普利 逆转录聚合酶链反应
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枸杞中绿原酸对转化生长因子-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响 被引量：7
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作者 牛丕莲 周学章 白明生 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第7期158-164,共7页
目的:考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)纤维化的干预效果。方法:质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型,用不同... 目的:考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)纤维化的干预效果。方法:质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型,用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞,细胞毒性实验(cell counting kit-8,CCK-8)检测绿原酸对CFs增殖的影响;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测纤维化标志蛋白胶原蛋白(collagen,Col)I、Col Ⅲ和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平;Westernblot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果:CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖;ELISA和免疫荧光检测表明,枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col Ⅲ和α-SMA的表达;qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达(P<0.001);Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达(P<0.001)。结论:在本研究质量浓度范围内,枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程,其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。 展开更多
关键词 心肌纤维化 转化生长因子-Β1 TGF-β1/Smads信号通路 绿原酸 心肌成纤维细胞
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鼠源成纤维细胞生长因子-21对脂肪细胞糖代谢的作用 被引量：18
12
作者 姜媛媛 刘铭瑶 +3 位作者 任桂萍 王文飞 刘晓民 李德山 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期157-164,共8页
成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是FGF家族的成员之一.近年发现FGF-21是一种新的代谢调节因子.从小鼠肝脏克隆FGF-21cDNA,经测序正确后亚克隆至具有羟胺切割位点的小泛素相关修饰物表达载体上,转化宿主菌Rosetta,得到的转化子经IPTG诱导... 成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是FGF家族的成员之一.近年发现FGF-21是一种新的代谢调节因子.从小鼠肝脏克隆FGF-21cDNA,经测序正确后亚克隆至具有羟胺切割位点的小泛素相关修饰物表达载体上,转化宿主菌Rosetta,得到的转化子经IPTG诱导后获得稳定、高效、可溶的表达产物.表达产物经羟胺切割、透析、复性、柱层析纯化后,在每升宿主菌中可获得4mg纯度为95%的成熟鼠源FGF-21蛋白,利用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(POD-GOD)法在小鼠3T3-L1脂肪细胞中进行生物学活性检测.结果表明,鼠源FGF-21具有促进脂肪细胞吸收葡萄糖的作用,短期作用(1h)与胰岛素相似,长期作用(8和12h)明显优于胰岛素.这一结果为以鼠源FGF-21为模型进一步研究FGF-21的生物学活性及其在糖代谢方面的作用机理奠定了基础. 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子-21 糖尿病 糖代谢 3T3-L1
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碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β1复合骨髓间充质干细胞对大鼠退变椎间盘的修复作用 被引量：16
13
作者 江潮 李大鹏 +4 位作者 张志坚 束浩明 胡浪 李正南 黄永辉 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期456-465,共10页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)以温敏性壳聚糖(TCH)为载体对大鼠退变椎间盘的修复作用。方法针刺法建立SD大鼠椎间盘退变模型,4周后核磁共振下观察退变效果。体外培养B... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)以温敏性壳聚糖(TCH)为载体对大鼠退变椎间盘的修复作用。方法针刺法建立SD大鼠椎间盘退变模型,4周后核磁共振下观察退变效果。体外培养BMSCs,并用含增强型绿色荧光蛋白的腺病毒转染使带有增强型绿色荧光蛋白基因,作荧光标记。将椎间盘退变的SD大鼠分成4组,实验组A组使用b FGF+TGF-β1+BMSCs+TCH凝胶移植入退变的椎间盘中,B组和C组分别使用BMSCs+TCH凝胶和b FGF+TGF-β1+TCH凝胶,对照组D组使用PBS缓冲液。继续培养4周后核磁共振观察各组椎间盘的修复情况。HE、Masson染色、组织病理学观察各组椎间盘结构。逆转录PCR,Western blot检测各组髓核蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Sox-9、Ⅰ型胶原的表达。结果移植注射的BMSCs能在椎间盘中生长,呈类髓核分化。核磁共振结果显示:A组髓核信号明显高于其他3组,B组高于C组,D组髓核信号最低,硬脊膜受压,脊髓呈串珠状改变,各组间Pfirrmann分级结果差异有统计学意义(P<0.05)。HE、Masson染色显示:A组椎间盘结构完整,髓核细胞数量优于其他3组,髓核和纤维环界限清楚,B组髓核数量多于C组,B组纤维环未见断裂,而C组可见断裂的纤维环,D组髓核细胞被杂乱的纤维组织取代。逆转录PCR、Western blot显示:A组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Sox-9的表达最高,B组优于C组,D组表达最低(P<0.05)。而Ⅰ型胶原的表达在4组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论移植的BMSCs在退变椎间盘中能够存活,呈类髓核分化。b FGF+TGF-β1+BMSCs+TCH凝胶复合体对退变的椎间盘具有明显修复作用。BMSCs+TCH凝胶治疗退变椎间盘的效果优于b FGF+TGF-β1+TCH凝胶但低于b FGF+TGF-β1+BMSCs+TCH凝胶复合体。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子-Β1 骨髓间充质干细胞 温敏性壳聚糖 腺病毒 椎间盘退变
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骨形态发生蛋白-2与碱性成纤维细胞生长因子在异位和原位成骨中的作用 被引量：13
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作者 王磊 章燕 +2 位作者 游素兰 谭鸾君 黄远亮 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期420-424,共5页
目的通过骨髓基质细胞(BMSCs)的体外增殖和分化、异位成骨和原位成骨实验来观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在成骨过程中的作用。方法分别用含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液体外培养Beagle犬的BMSCs,通... 目的通过骨髓基质细胞(BMSCs)的体外增殖和分化、异位成骨和原位成骨实验来观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在成骨过程中的作用。方法分别用含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液体外培养Beagle犬的BMSCs,通过甲基噻唑基四唑(MTT)比色法测定细胞增殖水平,通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性观察细胞的分化情况。将BMSCs与多孔磷酸钙(CPC)分别在含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液中复合培养,制成复合材料,一部分植入裸鼠皮下,观察异位成骨情况,另一部分植入Beagle犬的种植体周围骨缺损区,经过荧光标记观察原位成骨情况。结果含有BMP-2+bFGF的培养液促进BMSCs增殖和分化的能力最强。异位成骨情况:BMP-2+bFGF组的成骨量较其他组明显增加,其新骨形成百分比为48.79%±11.31%,高于单一BMP-2组(30.71%±10.85%)和bFGF组(27.33%±9.67%)以及对照组(10.65%±6.05%)。原位成骨术后12周,BMP-2+bFGF组的矿化沉积率高于其他组,其差异有统计学意义(P<0.01)。结论在促进成骨方面,BMP-2和bFGF共同作用优于单一因子。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 骨形态发生蛋白-2 碱性成纤维细胞生长因子 成骨
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TGF-β_1对Tenon’s囊成纤维细胞增殖和结缔组织生长因子表达的影响 被引量：11
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作者 黄明海 郭海科 +2 位作者 吴静 陈建苏 赵松滨 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期272-275,共4页
目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)对Tenon’s囊成纤维细胞增殖和诱导表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法用MTT法检测不同质量浓度TGFβ1(0、0.1、1、10ng/mL)对Tenon’s囊成纤维细胞增殖的影响;免疫细胞化学染色法检测不同质量浓度... 目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)对Tenon’s囊成纤维细胞增殖和诱导表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法用MTT法检测不同质量浓度TGFβ1(0、0.1、1、10ng/mL)对Tenon’s囊成纤维细胞增殖的影响;免疫细胞化学染色法检测不同质量浓度TGFβ1(0、0.1、1、10ng/mL)对Tenon’s囊成纤维细胞诱导表达CTGF的影响。结果GFβ1能够剂量依赖性地促进Tenon’s囊成纤维细胞增殖(P<0.05);TGFβ1能够促进CTGF的表达,有随质量浓度的增加而增强的趋势(P<0.05),但1ng/mL和10ng/mLTGFβ1组之间无统计学差异(P>0.05)。结论GFβ1能够促进Tenon’s囊成纤维细胞增殖,并促进其下游介质CTGF的表达,可能是青光眼滤过术后滤过泡瘢痕形成的重要机制。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 结缔组织生长因子 Tenon’s囊成纤维细胞 青光眼滤过术
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20(s)-原人参二醇对肝癌血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达的影响 被引量：15
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作者 冷吉燕 付军 王继萍 《临床肝胆病杂志》 CAS 2008年第1期42-43,共2页
目的探讨20(s)-原人参二醇(Ppd)对肝癌血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组,每组10只,分对照组、环磷酰胺组(CTX)、20(s)-原人参二醇25mg/kg、50mg/kg、100mg/k... 目的探讨20(s)-原人参二醇(Ppd)对肝癌血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组,每组10只,分对照组、环磷酰胺组(CTX)、20(s)-原人参二醇25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg给药组,给药二周后处死动物。称肿瘤重量及肿瘤体积,制成组织切片,以备免疫组化应用。结果与对照组相比,给药组VEGF、bFGF表达受到抑制,肿瘤的重量及体积明显减轻,组间有显著性差异(P<0.01)。结论提示Ppd抑制了VEGF、bFGF蛋白的表达,抑制了肿瘤生长。 展开更多
关键词 20(S)-原人参二醇 肝癌 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子
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胰岛素样细胞生长因子-1、碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子α对人表皮干细胞增殖的影响 被引量：10
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作者 陈建国 孟庆楠 +1 位作者 赵德梅 谭谦 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第8期789-792,共4页
目的表皮干细胞是组织工程化皮肤的"种子细胞"。文中研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)、胰岛素样细胞生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和转化生长因子α(transforming growth ... 目的表皮干细胞是组织工程化皮肤的"种子细胞"。文中研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)、胰岛素样细胞生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和转化生长因子α(transforming growth factorα,TGFα)对人表皮干细胞增殖的影响。方法采用两步酶消化法和Ⅳ型胶原差速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞,将表皮干细胞分为A组(K-SFM)、B组(K-SFM+bFGF)、C组(K-SFM+IGF-1)及D组(K-SFM+TGFα)进行培养。比较不同组之间表皮干细胞的克隆形成率、生长增殖、生长曲线和细胞周期等指标。结果 B组、C组及D组培养的表皮干细胞在细胞增殖、细胞克隆率方面检测结果均明显高于A组(P<0.05);流式细胞仪检测B组、C组与A组及D组处于G0/G1细胞比例比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-1、bFGF及TGF-α均对表皮干细胞的增殖有促进作用,IGF-1及bFGF对表皮干细胞表型的维持有较好的作用。 展开更多
关键词 胰岛素样细胞生长因子-1 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子Α 表皮干细胞 增殖
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水蛭素对牙龈成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β_1表达的影响 被引量：7
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作者 郑怡 禤坤 +1 位作者 南澜 莫水学 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-10,共5页
目的观察水蛭素对人牙龈成纤维细胞(HGFs)碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的规律,探讨水蛭素影响牙龈改建的可能作用机制。方法体外培养并鉴定HGFs,利用不同浓度的水蛭素分别作用于正常(对照组)和受... 目的观察水蛭素对人牙龈成纤维细胞(HGFs)碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的规律,探讨水蛭素影响牙龈改建的可能作用机制。方法体外培养并鉴定HGFs,利用不同浓度的水蛭素分别作用于正常(对照组)和受长期机械外力作用后增生的HGFs(实验组),通过实时定量聚合酶链反应法和免疫细胞化学法检测TGF-β1及b FGF的表达。结果未加入水蛭素时,受长期机械外力作用后,实验组促进HGFs增殖胶原合成的TGF-β1表达升高,而抑制胶原合成的b FGF表达降低(P<0.05)。加入水蛭素干预增生的HGFs后,可正向调节b FGF表达,而负向调节TGF-β1的表达(P<0.05)。结论外力作用干扰了HGFs胶原合成与降解之间的平衡,水蛭素可能通过调节这一平衡而促进牙龈改建过程。 展开更多
关键词 水蛭素 人牙龈成纤维细胞 转化生长因子-Β1 碱性成纤维细胞生长因子
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转化生长因子-β2对实验性近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响 被引量：4
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作者 陈博宇 王超英 +5 位作者 马景学 陈维毅 郝岚 刘迎庆 仝春梅 王彩荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期296-301,共6页
背景以往对近视眼巩膜力学特性变化的研究局限于其巩膜整体和条带的力学特性变化方面，目前对近视眼细胞水平力学特性的研究日益受到重视。目的明确TGF-β2对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响。方法2周龄豚鼠12... 背景以往对近视眼巩膜力学特性变化的研究局限于其巩膜整体和条带的力学特性变化方面，目前对近视眼细胞水平力学特性的研究日益受到重视。目的明确TGF-β2对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响。方法2周龄豚鼠12只，随机选取一侧眼用镜片诱导方法制备近视动物模型，对侧眼为对照。造模30d后，用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞并传2代，采用免疫组织化学法以兔抗鼠波形蛋白、结蛋白、角蛋白、S-100抗体进行细胞鉴定。将不同质量浓度的TGF-β2（分别为0、1、10、100mg／L）加入无血清DMEM中作用24h，利用细胞微管吸吮的方法测定各组巩膜成纤维细胞的力学特性。结果模型眼0mg／LTGF—p：组与对照眼0mg／LTGF—p：组比较，模型眼的巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数明显升高，二者之间差异有统计学意义（P〈0．05）。模型眼与对照眼在TGF-β2作用下，0mg／L组与1mg／L组、10mg／组比较，细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均有统计学意义（P〈0．05）。模型眼和对照眼培养细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数与TGF-β2的质量浓度均呈正相关（r=0．743、r=0．533；r=0．654、r=0．576），模型眼和对照眼中的0mg／L组与100mg／L组比较细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均无统计学意义（P〉0．05），模型眼1mg／L组、10mg／L组与对照眼1mg／L组、10mg／L组比较，巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数之间差异有统计学意义（P〈0．05）；模型眼组100mg／LTGF-β2与对照眼的100mg／LTGF-β2组比较，巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论随着TGF—B，质量浓度的增加，近视眼巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数值明显升高，1mg／L和10mg／LTGF-β2可以降低正常巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量及黏弹性参数，导致细胞力学特性的更大变化。 展开更多
关键词 近视 转化生长因子-Β2 巩膜 成纤维细胞 力学
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环氧合酶-2和碱性成纤维细胞生长因子在鼻咽癌组织中的表达及与放疗敏感性的相关性 被引量：5
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作者 赵建夫 徐萌 +3 位作者 陈文慧 赵凤芝 王奕鸣 庄承海 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1718-1722,共5页
目的探讨环氧合酶-2(COX-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在鼻咽癌组织中的表达及其与放疗敏感性的相关性。方法应用免疫组化方法检测97例鼻咽癌患者活检组织放疗前COX-2和bFGF的表达,并分析二者与放疗敏感性的关系。结果97例鼻咽癌组... 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在鼻咽癌组织中的表达及其与放疗敏感性的相关性。方法应用免疫组化方法检测97例鼻咽癌患者活检组织放疗前COX-2和bFGF的表达,并分析二者与放疗敏感性的关系。结果97例鼻咽癌组织COX-2和bFGF阳性表达率分别为71.1%(69/97)和64.9%(63/97);COX-2的阳性表达与鼻咽癌的T分期和N分期有显著的相关性(P<0.05),bFGF的阳性表达与鼻咽癌的N分期有显著的相关性(P<0.05)。COX-2在放疗敏感组和放疗不敏感组的阳性表达率分别为62.8%和92.6%,bFGF在放疗敏感组和放疗不敏感组的阳性表达率分别为57.1%和85.2%,在鼻咽癌组织中Spearman相关分析发现,COX-2的表达与bFGF的表达呈明显正相关(相关系数r=0.486,P<0.05);根据COX-2和bFGF表达情况,把患者分为4组:COX-2(-)and bFGF(-),COX-2(-)and bFGF(+),COX-2(+)and bFGF(-),and COX-2(+)and bFGF(+)。联合COX-2表达和bFGF表达分析后,发现不同亚组与鼻咽癌的放疗敏感性明显相关(P<0.05)。结论 COX-2和bFGF在鼻咽癌组织中的表达升高,且两者与肿瘤的放疗敏感性明显相关,可作为预测鼻咽癌放疗敏感性的重要指标。 展开更多
关键词 鼻咽癌 环氧合酶-2 碱性成纤维细胞生长因子 放疗敏感性
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