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非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子的受体结合特性及对MAPK信号通路的影响 被引量：18
1
作者 汪小凤 郑青 +6 位作者 蔡绍晖 吴晓萍 许华 赵文 苏志坚 李校堃 张敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-182,共4页
目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖... 目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖活性;采用受体放射性配基结合法,测定haFGF和nm- haFGF与其受体结合的亲和力及受体总结合位点数RT ;利用Western印迹检测haFGF和nm- haFGF分别作用于NIH3T3细胞后MAPK信号通路中ERK信号分子的表达。结果:与haFGF比较,nm- haFGF对NIH3T3细胞的促增殖活性降低,nm -haFGF与NIH3T3细胞胞膜上aFGF受体结合的亲和力下降,但与受体结合的总位点数不变。Western半定量检测结果显示,nm -haFGF组信号蛋白ERK的表达水平明显低于haFGF组。结论:nm -haFGF与受体结合能力下降,下调MAPK信号通路是导致nm haFGF的促分裂活性降低的主要原因之一。 展开更多
关键词 非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子 受体 信号通路
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成纤维细胞生长因子受体各亚型与小鼠肺纤维化及衰老的关系 被引量：4
2
作者 李小溪 常红恩 +4 位作者 奈文青 白晓燕 孙颖 余焱林 戴萌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期607-610,共4页
目的观察成纤维细胞生长因子受体(FGFR)各亚型与肺组织的纤维化及衰老之间的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应方法,分别检测不同鼠龄的小鼠肺组织FGFR1-4的表达水平;同时,采用常规病理切片(HE染色和Masson染色)观察不同鼠龄小鼠肺组... 目的观察成纤维细胞生长因子受体(FGFR)各亚型与肺组织的纤维化及衰老之间的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应方法,分别检测不同鼠龄的小鼠肺组织FGFR1-4的表达水平;同时,采用常规病理切片(HE染色和Masson染色)观察不同鼠龄小鼠肺组织的纤维化状况。结果(1)FGFR各亚型在小鼠肺组织中表达水平不均匀,FGFR2的含量高于其他几个亚型;(2)8月龄小鼠肺组织中FGFR亚型表达水平均显著低于5周龄小鼠肺组织中FGFR的表达;(3)8月龄的小鼠肺组织表现出肺纤维化的变化。结论小鼠肺组织中FGFR水平的下降可能与年龄的增加相关;不同年龄组均以FGFR2的含量为高;小鼠肺组织随着鼠龄增加呈现不同程度的纤维化,可能与FGFR的表达下降相关;提示FGFs/FGFR可能参与衰老的发生及肺纤维化调节。 展开更多
关键词 肺纤维化 成纤维细胞生长因子受体 衰老
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鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定 被引量：2
3
作者 郑少江 黄凤迎 +2 位作者 郑少萍 王伟 吴人亮 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,439,共4页
目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒p... 目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40 ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体 肿瘤血管生成 原核表达 基因重组
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转化生长因子β型受体Ⅰ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在人胚肺成纤维细胞中的表达 被引量：2
4
作者 林时辉 付娟 +1 位作者 王川江 刘琼 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期915-922,共8页
目的:构建转化生长因子β型受体Ⅰ(transforming growth factor beta receptorⅠ,TGFβRⅠ)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体并在人胚肺成纤维细胞株MRC-5上鉴定其沉默效应。方法:构建4种针对人TGFβRⅠ基因不同干扰靶点... 目的:构建转化生长因子β型受体Ⅰ(transforming growth factor beta receptorⅠ,TGFβRⅠ)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体并在人胚肺成纤维细胞株MRC-5上鉴定其沉默效应。方法:构建4种针对人TGFβRⅠ基因不同干扰靶点的慢病毒干扰载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,将筛选出的4种有效重组慢病毒干扰载体和其它辅助质粒一起共转染293T细胞并测定病毒滴度。最后将4种重组的慢病毒干扰载体分别感染MRC-5细胞,采用Real-time PCR和Western blot检测它们对靶基因的沉默效率。结果:经双酶切鉴定和DNA测序,证实短发夹RNA正确插入慢病毒载体且插入的序列正确。4种重组慢病毒干扰载体经293T细胞成功包装后,其病毒滴度分别为:si RNA-1 6.37×107 TU/ml、si RNA-2 1.65×108 TU/ml、si RNA-3 4.50×108TU/ml、si RNA-4 2.31×108TU/ml,阴性对照组载体包装后的病毒滴度为:1.79×109 TU/ml。4种重组慢病毒干扰载体感染MRC-5细胞的效率均为93%左右。与正常对照组和阴性对照组比较,在感染4种重组慢病毒干扰载体(si RNA-1~4)后,MRC-5细胞内TGFβRⅠm RNA表达水平均明显下降(P=0.000),其中TGFβRⅠ-si RNA-2下降最明显,沉默效率最好。Western blot结果与q RT-PCR结果一致,4种重组慢病毒干扰载体均能使MRC-5细胞内TGFβRⅠ蛋白表达明显下降(P=0.000),且TGFβRⅠ-si RNA-2干扰效率最大。结论:筛选并构建了能有效沉默TGFβRⅠ基因的最佳RNAi重组慢病毒载体——TGFβR-si RNA-2,从而为后续研究奠定基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 慢病毒载体 转化生长因子βⅠ型受体 人胚肺成纤维细胞
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血管钙化大鼠模型肾脏β-Klotho及成纤维细胞生长因子受体1表达研究 被引量：4
5
作者 史雨晨 柳景华 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期507-510,共4页
目的:观察血管钙化对大鼠肾功能的损伤情况,及其与肾脏组织局部β-Klotho[成纤维细胞生长因子21(FGF21)的辅助因子]、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)表达变化关系,探讨β-Klotho及FGFR1在血管钙化肾脏损伤中的作用和意义。方法:实验动... 目的:观察血管钙化对大鼠肾功能的损伤情况,及其与肾脏组织局部β-Klotho[成纤维细胞生长因子21(FGF21)的辅助因子]、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)表达变化关系,探讨β-Klotho及FGFR1在血管钙化肾脏损伤中的作用和意义。方法:实验动物按电脑随机数字表法分为正常对照组和钙化组,每组6只。钙化组采用维生素D3联合尼古丁诱导大鼠血管钙化模型。以肌氨酸氧化酶法检测大鼠血清肌酐浓度,以紫外-谷氨酸脱氢酶法检测大鼠血清尿素氮浓度,以生化法检测大鼠血钙及血磷浓度,以碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测大鼠肾脏组织ALP活性,以酶联免疫吸附法检测大鼠肾脏组织β-Klotho及FGFR1蛋白含量。结果:与正常对照组比较,血管钙化组大鼠血清肌酐及尿素氮水平升高[(35.200±4.087)μmol/L vs(26.000±5.0990)μmol/L,(P<0.05);(6.900±0.623)mmol/L vs(5.400±0.803)mmol/L,(P<0.05)];大鼠肾脏组织局部ALP活性升高[(60.510±31.090)U/g vs(26.590±8.664)U/g,(P<0.05)];肾脏组织β-Klotho蛋白表达量增加[(9.052±1.238)ng/mg vs(6.860±1.036)ng/mg,(P<0.05)],而血钙及血磷浓度及大鼠肾脏组织FGFR1蛋白含量较正常对照组未见明显变化。结论:大剂量维生素D3肌肉注射联合尼古丁灌胃可导致大鼠肾脏组织局部钙超载及微血管钙化形成,并导致肾功能不全,出现早期慢性肾脏病(CKD)临床表现。同时病变肾脏组织局部β-Klotho表达量上调,而FGFR1在肾脏组织局部未见明显变化,提示FGF21在血管钙化大鼠肾脏组织局部的调节作用可能不是通过增加其受体FGFR1的数量,而是通过上调其结合辅助因子β-Klotho的表达而实现的。同时提示β-Klotho参与了血管钙化肾脏损伤的早期调节过程,可能为预测机体钙超载情况及CKD早期的预警信号,对CKD的早期诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 β-Klotho 受体 成纤维细胞生长因子 血管钙化
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截短型小鼠成纤维细胞生长因子受体-1基因慢病毒载体构建及在真核细胞中的表达 被引量：1
6
作者 陈伟 陈翀 +4 位作者 张焕新 闫志凌 程海 曾令宇 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期168-172,共5页
本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c... 本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c胎鼠脑组织为模板克隆全长型fgfr1基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,通过反向PCR技术删除胞内磷酸化区域获得△fgfr1,限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移质粒,构建携带EGFP及△fgfr1双顺反子自身失活型重组慢病毒表达质粒,通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,用荧光显微镜及流式细胞术(FCM)检测EGFP的表达,免疫印迹法(Western blot)鉴定截短型FGFR1蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠fgfr1基因,构建重组慢病毒转移载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1及对照载体LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度达到108 TU/ml。以重组病毒载体转染293FT细胞后第4天在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测转染效率可达95%,Western blot检测显示,转染后293FT细胞表达截短型FGFR1蛋白。结论:成功构建了自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1,并在真核细胞中获得表达。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体基因 慢病毒载体构建 基因表达 293FT细胞
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成纤维细胞生长因子在阿尔茨海默病中的作用机制
7
作者 吴嘉静 李岩 +2 位作者 梁玉霞 华卉娟 赵波 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第5期1131-1136,共6页
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是最常见的神经退行性疾病,目前发病群体已呈现年轻化趋势,多数患者一旦发病,认知功能将呈进行性减退,给社会和家庭带来沉重负担。研究表明,成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF... 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是最常见的神经退行性疾病,目前发病群体已呈现年轻化趋势,多数患者一旦发病,认知功能将呈进行性减退,给社会和家庭带来沉重负担。研究表明,成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)可通过多种机制参与AD的发病过程。本文就FGF在AD中的作用进行综述,以期为阐明AD的发病机制及早期诊断提供新思路。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 成纤维细胞生长因子受体 阿尔茨海默病
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成纤维细胞生长因子21对1型糖尿病动物模型的肝糖代谢影响及机制研究 被引量：15
8
作者 孙国鹏 叶贤龙 +2 位作者 任桂萍 李晋南 李德山 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第10期953-960,共8页
成纤维细胞生长因子(FGF)-21是FGF家族的成员之一.作为近年发现的一种新的糖代谢调节因子,大量研究表明,FGF-21是一种不依赖胰岛素,能够独立降糖的2型糖尿病治疗潜力型药物.但是,能否应用于1型糖尿病的治疗,国内外目前尚无报道.通过改... 成纤维细胞生长因子(FGF)-21是FGF家族的成员之一.作为近年发现的一种新的糖代谢调节因子,大量研究表明,FGF-21是一种不依赖胰岛素,能够独立降糖的2型糖尿病治疗潜力型药物.但是,能否应用于1型糖尿病的治疗,国内外目前尚无报道.通过改良传统造模方法,诱导小鼠缓慢产生糖耐量异常,研究FGF-21对此类模型的糖代谢影响及肝糖代谢机制.通过检测FGF-21短期注射和长期注射后模型动物血糖的变化,研究FGF-21在模型动物上对血糖的调控效果.采用实时定量PCR检测FGF-21对模型动物肝脏中葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、4 mRNA的表达影响.利用蒽酮法检测模型动物肝脏中糖原合成量.实验结果显示,FGF-21能够调节1型糖尿病动物的血糖水平,并呈剂量依赖性.同时,首次在1型糖尿病动物模型上证实了低剂量FGF-21(0.125 mg/kg)与胰岛素的协同作用效果优于相同剂量FGF-21和胰岛素单独注射的效果.治疗结果表明,FGF-21能够维持1型糖尿病动物模型血糖在正常范围,效果优于胰岛素.实时定量PCR结果发现,与胰岛素上调GLUT4 mRNA表达量不同的是,FGF-21作用动物模型8周后,GLUT1 mRNA表达量显著提高,长期的FGF-21与胰岛素协同注射使GLUT1、4 mRNA表达量同时显著提高.长期FGF-21与胰岛素协同注射组和高剂量FGF-21注射均可显著提高模型动物肝糖原的合成.结果表明,FGF-21促进动物模型糖代谢机制与增加GLUT1表达、增加糖原合成作用有关.为临床应用FGF-21治疗1型糖尿病,增加胰岛素敏感性提供了理论依据. 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子21 迟发性1型糖尿病动物模型 糖代谢 胰岛素协同作用 糖尿病治疗药物
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2型糖尿病肥胖或超重患者血清成纤维细胞生长因子21水平及其临床价值研究 被引量：11
9
作者 张楠 姜天 +2 位作者 孙莉 代芳 章秋 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2018年第5期521-525,共5页
目的研究2型糖尿病(T2DM)肥胖或超重患者血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)的水平,并探讨其与体质指数(BMI)、稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等因素的相关性。方法选取2014年1月—2016年7月安徽医科大学第一附属医院内分泌科住院治疗的T2D... 目的研究2型糖尿病(T2DM)肥胖或超重患者血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)的水平,并探讨其与体质指数(BMI)、稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等因素的相关性。方法选取2014年1月—2016年7月安徽医科大学第一附属医院内分泌科住院治疗的T2DM患者213例,根据BMI分为T2DM肥胖超重组(BMI≥24.0 kg/m^2,127例)和T2DM非肥胖超重组(BMI<24.0 kg/m^2,86例),另选取同期本院体检健康者为健康对照组(114例)。记录受试者血压、BMI、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR及FGF21水平。结果各组舒张压、体质量、BMI、TG、HDL-C、LDL-C、Hb A1c、FBG、FINS、HOMA-IR比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM非肥胖超重组FGF21水平高于健康对照组,T2DM肥胖超重组FGF21水平高于健康对照组、T2DM非肥胖超重组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,T2DM肥胖超重组FGF21水平与BMI、FINS、HOMA-IR呈正相关(rs=0.312、0.311、0.243,P<0.05)。多元线性回归分析显示,BMI[b=3.654,95%CI(1.543,5.764)]、FINS[b=1.310,95%CI(0.537,2.082)]是T2DM肥胖超重组FGF21水平的影响因素(P<0.05)。结论 T2DM肥胖或超重患者血清FGF21水平升高,且与BMI、胰岛素抵抗等因素有关;FGF21可能用于预测糖尿病、肥胖的发生,并成为治疗糖尿病、肥胖的新一代药物。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 肥胖症 成纤维细胞生长因子21 体脂肪率 胰岛素抵抗
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成纤维细胞生长因子受体1和受体2在小鼠肾发育中的表达 被引量：5
10
作者 田娟 郭敏 王堃 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1471-1474,共4页
目的观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)及受体2(FGFR2)在小鼠肾发育过程中的时空表达,探讨其与肾发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d的胎鼠和生后N1、7、14、21、40d的仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的... 目的观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)及受体2(FGFR2)在小鼠肾发育过程中的时空表达,探讨其与肾发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d的胎鼠和生后N1、7、14、21、40d的仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定位观察;应用图像分析技术、体视学方法及免疫印迹技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定性分析及定量检测。结果免疫组化结果显示,胚龄E12d时FGFR1和FGFR2即开始表达。FGFR1在发育各期的肾小体(即逗号小体、S小体、毛细血管襻期肾小体、未成熟期肾小体及成熟期肾小体)、远端小管和集合管均有表达,而在近端小管未见表达。FGFR2主要在远端小管表达,在各期发育肾小体、近端小管和集合管未见表达。图像分析结果显示,随着肾脏的发育,FGFR1、FGFR2表达逐渐增高。体视学及免疫印迹检测结果显示,FGFR1和FGFR2的含量都随着肾脏的发育逐渐增加。结论 FGFR1和FGFR2对小鼠肾发育所起的作用不同,FGFR1与肾小体、远端小管和集合管发育相关,而FGFR2主要与远端小管发育相关。 展开更多
关键词 受体 成纤维细胞生长闪子 1型 受体 成纤维细胞生长因子 2型 肾 发育生物学 小鼠
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改构型酸性成纤维细胞生长因子对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量：15
11
作者 胡文娟 黄巨恩 +1 位作者 李校堃 肖健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期166-169,共4页
目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(modified aFGF,MaFGF)对大鼠肾缺血/再灌注损伤的影响。方法Wistar大鼠32只,随机分为4组,即假手术组、模型组、MaF-GF1组(8μg.kg-1)和MaFGF2组(16μg.kg-1),每组8只。以肾缺血/再灌注损伤为模型... 目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(modified aFGF,MaFGF)对大鼠肾缺血/再灌注损伤的影响。方法Wistar大鼠32只,随机分为4组,即假手术组、模型组、MaF-GF1组(8μg.kg-1)和MaFGF2组(16μg.kg-1),每组8只。以肾缺血/再灌注损伤为模型,通过光、电镜观察肾组织病理变化。结果MaFGF能明显减轻肾组织水肿、间质浸润以及肾小管扩张与破坏,电镜下见肾小管上皮细胞内细胞器(微绒毛、线粒体、溶酶体等)损伤较轻或基本正常。结论MaFGF对大鼠肾缺血/再灌注损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 改构型酸性成纤维细胞生长因子 肾缺血/再灌注损伤 急性肾功能衰竭 大鼠
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血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子-2及雌激素受体在早产儿视网膜病发病机制中的作用 被引量：4
12
作者 石文静 陈超 +2 位作者 周国民 胡宝洋 肖虹蕾 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期228-232,共5页
目的 测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和雌激素受体（ER）表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病（ROP）发病机制中的作用.方法 选择7日龄（P7）C57BL/6J新生小鼠47... 目的 测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和雌激素受体（ER）表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病（ROP）发病机制中的作用.方法 选择7日龄（P7）C57BL/6J新生小鼠474只,雌雄各半,分为吸氧组和对照组两大组,再按性别分成4小组,用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定VEGF、FGF-2和ER的mRNA水平,用免疫组化测定它们的蛋白水平.具体分组及取材时间为：组1（n=126）,吸氧组,雌性;组2（n=126）,吸氧组,雄性,两组均自吸氧后每天分离视网膜至P21（P8～P21）行RT-PCR,每天摘眼石蜡包埋后行免疫组化;组3（n=111）,对照组,雌性;组4（n=111）,对照组,雄性,均自P7起每天分离视网膜至P17（P7～P17）行RT-PCR,自P7起每天摘眼至P21（P7～P21）行免疫组化.结果 （1）VEGF mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组自P8起显著下降,且在整个吸氧阶段持续降低,至出氧箱后缓慢上升,自P15起显著上升,并和对照组形成显著差异,受氧浓度的调节非常明显.FGF-2 mRNA在正常小鼠始终维持相对稳定的低水平;在吸氧组,吸氧期间无明显变化,出氧箱后3 d开始上升.ER mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组,吸氧期间变化与对照组相似,出氧箱后5 d开始上升,并维持较高水平直至P21.这3个细胞因子的蛋白水平变化均晚于其基因水平变化,但变化趋势基本相同.（2）性别和吸氧都不能单独影响上述细胞因子的表达（P＞0.05）;日龄可独立地影响它们的表达;吸氧和日龄两因素结合起来可显著影响它们的表达（P＜0.000 1）.结论 引起ROP发病的根本原因是早产,吸氧是其重要的外因;VEGF、FGF-2和ER参与血管的形成,在视网膜血管正常发育和ROP的发病机制中起重要作用;VEGF直接受氧浓度调节,在众多细胞因子中可能起关键性作用. 展开更多
关键词 早产儿 视网膜病 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 雌激素受体 小鼠
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改构型酸性成纤维细胞生长因子对紫杉醇诱导体外大鼠肝细胞损伤保护作用的体外实验研究 被引量：4
13
作者 徐雅玲 黄巨恩 +5 位作者 梁菁 唐艳妮 阮丽 韦海滔 李东生 张成磊 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期44-48,共5页
目的：探究改构型酸性成纤维细胞生长因子（MaFGF）对紫杉醇（Taxol）诱导体外培养的大鼠肝细胞损伤的保护作用.方法：选用新生SD大鼠培养原代肝细胞,将原代肝细胞种于96孔培养板：培养7d后加入各种不同浓度的紫杉醇,作用24h,采用四唑盐... 目的：探究改构型酸性成纤维细胞生长因子（MaFGF）对紫杉醇（Taxol）诱导体外培养的大鼠肝细胞损伤的保护作用.方法：选用新生SD大鼠培养原代肝细胞,将原代肝细胞种于96孔培养板：培养7d后加入各种不同浓度的紫杉醇,作用24h,采用四唑盐（MTT）比色法检测细胞抑制率;建立紫杉醇损伤肝细胞的模型,与此同时加入系列质量浓度的MaFGF,观察MaFGF对肝细胞的保护作用.结果：紫杉醇对体外培养的肝细胞具有一定的抑制作用,并呈质量浓度依赖型;在质量浓度为3.25×10^-3~8.20×10^-3mg/L范围内,MaFGF降低了紫杉醇对肝细胞的抑制率,增高了肝细胞的活性;Taxol组与对照组比较,各生化和酶学指标差异均有显著性（P〈0.05）;Taxol＋MaFGF（3.25×10-3~8.20×10-3mg/L）组和Taxol组比较,各生化和酶学指标差异均有统计学意义（P〈0.01）,Taxol＋MaFGF组中超氧化物歧化酶（SOD）活性升高,一氧化氮（NO）、谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）水平降低.结论：MaFGF对紫杉醇损伤的肝细胞具有一定的保护作用. 展开更多
关键词 改构型酸性成纤维细胞生长因子 肝细胞 紫杉醇 保护
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成纤维细胞生长因子与其受体相互作用及其抑制剂的研究进展 被引量：5
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作者 范洪宽 周慧 李惟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期338-341,共4页
成纤维细胞生长因子 (FGF)有许多重要的生理功能 ,并与肿瘤的形成有关 .为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体 (FGFR)相互作用的机制 ,人们对FGF和FGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究 ,定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的... 成纤维细胞生长因子 (FGF)有许多重要的生理功能 ,并与肿瘤的形成有关 .为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体 (FGFR)相互作用的机制 ,人们对FGF和FGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究 ,定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的受体结合区、FGF受体的肝素结合区、配体结合区和FGF受体相互结合区 ,提出了两个FGF与FGFR相互作用的模型 ,在此基础上设计了FGF的核酸类、糖类和多肽类抑制剂 ,为寻找新一代抗癌药物打下了理论基础 . 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 受体 肝素 抑制剂 肿瘤细胞
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表皮生长因子及睾酮对尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体活化水平的影响 被引量：5
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作者 林俊山 谢承 +1 位作者 陈瑞庆 李笃妙 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期507-512,共6页
目的:探讨尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达情况及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和睾酮(testosterone,T)对AR活化水平的影响。方法:原代培养尿道下裂患儿的尿道板成纤维细胞,分别采用EGF... 目的:探讨尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达情况及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和睾酮(testosterone,T)对AR活化水平的影响。方法:原代培养尿道下裂患儿的尿道板成纤维细胞,分别采用EGF和不同浓度睾酮干预,通过免疫细胞化学技术及图形分析技术检测成纤维细胞中AR活化水平的变化。结果:在生理浓度睾酮(3×10^(-8)mol/L)的作用下,中远端型尿道下裂组与对照组AR的活化水平差异无统计学意义(P>0.05),近端型尿道下裂组的成纤维细胞AR的活化水平与其他两组比较有明显的差异(P<0.001)。在睾酮浓度为3×10^(-6)mol/L时,3个组AR活化有明显差异(对照组>中远端型组>近端型组,P<0.001)。在EGF与生理浓度睾酮干预下,近端型尿道下裂组的成纤维细胞AR的活化程度升高最为明显,与对照组及中远端型组有明显差异(P<0.001),中远端型组AR的活化升高的水平与对照组相比也有提高(P=0.02)。结论:尿道下裂尿道板成纤维细胞AR的表达与活化均存在异常,EGF可提升不同类型尿道下裂尿道板成纤维细胞AR的活化水平,尤以近端型明显。 展开更多
关键词 表皮生长因子 睾酮 雄激素受体 尿道下裂 成纤维细胞
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激活蛋白-1调控转化生长因子β_1诱导的人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌 被引量：4
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作者 胡永斌 曾庆富 +2 位作者 冯德云 李翔 彭劲武 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期776-781,共6页
目的:探讨核转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在转化生长因子β1(transfor-ming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌中的作用。方法:以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10μg/L的TGF-β... 目的:探讨核转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在转化生长因子β1(transfor-ming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌中的作用。方法:以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10μg/L的TGF-β1刺激,于不同时间点收集细胞,采用RT-PCR和Wester blot检测细胞Ⅰ型胶原转录和分泌;阻断实验中选用AP-1抑制剂姜黄素为阻断剂,凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测细胞内AP-1的DNA结合活性变化,同时Western印迹检测Ⅰ型胶原分泌变化。结果:TGF-β1能诱导HLF-02细胞Ⅰ型胶原mRNA的转录和分泌(P<0.05);TGF-β1能提高HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力(P<0.05);姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力,抑制率分别为17.1%,17.6%,24.2%,31.3%(P<0.05);同时,姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞Ⅰ型胶原的分泌,抑制率分别为62.1%,58.8%,62.1%,59.6%(P<0.05)。结论:核转录因子AP-1参与TGF-β1刺激的HLF-02细胞Ⅰ型胶原的分泌调控。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 肺成纤维细胞 i型胶原 激活蛋白
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酸性成纤维细胞生长因子受体及信号转导的研究进展 被引量：3
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作者 汪小凤 郑青 +1 位作者 蔡邵辉 许华 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2004年第6期734-739,共6页
　酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的生物学功能与受体结合、细胞信号转导具有密切的关系。近年来已发现5种成纤维细胞生长因子受体(FGFR),其中主要是FGFR-1、FGFR-2与aFGF结合并被激活,启动多条信号转导途径,引起胚胎发育、血管生成以及... 　酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的生物学功能与受体结合、细胞信号转导具有密切的关系。近年来已发现5种成纤维细胞生长因子受体(FGFR),其中主要是FGFR-1、FGFR-2与aFGF结合并被激活,启动多条信号转导途径,引起胚胎发育、血管生成以及创伤修复等多种生物效应,其中,FGFR与aFGF结合后启动的MAPK途径是调节各种细胞趋化应答、分化、分裂的重要途径,是细胞增殖、分化等信息传递途径的交集点和共同通路。 展开更多
关键词 酸性成纤维细胞生长因子 成纤维细胞生长因子受体 信号转导
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白花丹素致体外培养肝细胞的损伤及改构型酸性成纤维细胞生长因子对肝细胞的保护作用 被引量：7
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作者 徐雅玲 黄巨恩 刘华钢 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期786-790,共5页
目的研究白花丹素(plumbagin)对肝细胞的抑制作用及改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)是否对白花丹素引起的肝细胞损伤有保护作用。方法将原代培养的肝细胞接种于96孔培养板:①72 h后加入一系列浓度的白花丹素,实验组在白花丹素作用2... 目的研究白花丹素(plumbagin)对肝细胞的抑制作用及改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)是否对白花丹素引起的肝细胞损伤有保护作用。方法将原代培养的肝细胞接种于96孔培养板:①72 h后加入一系列浓度的白花丹素,实验组在白花丹素作用24 h后加入不同浓度MaF-GF,再培养24 h后用MTT法检测细胞存活率。②以白花丹素建立损伤模型,并在加药后24 h加入一定量的MaFGF,观察MaFGF对白花丹素诱导的肝细胞损伤保护作用。③采用倒置相差显微镜对细胞进行连续的观察并照相,记录对照组、致伤组、细胞生长因子组细胞形态的变化。结果①成功建立白花丹素致肝细胞损伤的模型:白花丹素能明显抑制肝细胞的增殖,抑制效应与白花丹素的浓度相关。②白花丹素+不同浓度的MaFGF对肝细胞的抑制率随MaFGF浓度的增大而减小;IC50随着MaFGF浓度的增大而明显增高,并呈现比较明显的剂量-效应特点。③白花丹素组与对照组比较,各生化和酶学指标差异均有显著性(P<0.01或P<0.05);白花丹素+MaFGF组与白花丹素组比较,SOD活性升高、NO、MDA、LDH、GPT、GOT下降,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。而白花丹素+MaFGF组与对照组比较,各生化和酶学指标活性或含量均未回落至正常水平,差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论白花丹素对肝细胞有毒性作用;MaFGF对白花丹素损伤的原代培养肝细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 白花丹素 肝细胞 损伤 改构型酸性成纤维细胞生长因子 保护 细胞培养
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靶向成纤维细胞生长因子受体抑制胶质瘤中血管生成拟态的生成 被引量：4
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作者 李潇 王昀 +2 位作者 陈韬亮 黄敏 柯以铨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期1735-1738,共4页
目的:探索成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂BGJ398对胶质瘤细胞形成血管生成拟态(VM)的影响。方法:运用Western blot检测BGJ398处理后人胶质瘤细胞株U87MG和U251MG中磷酸化成纤维细胞生长因子受体(p FGFR)的数量,以及基质金属蛋白酶2... 目的:探索成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂BGJ398对胶质瘤细胞形成血管生成拟态(VM)的影响。方法:运用Western blot检测BGJ398处理后人胶质瘤细胞株U87MG和U251MG中磷酸化成纤维细胞生长因子受体(p FGFR)的数量,以及基质金属蛋白酶2和14(MMP2和MMP14)的表达量;在体外应用小管形成实验观察U87MG细胞形成小管的能力;用CD34/PAS免疫组化双染法计数皮下胶质瘤模型中VM的数量;用免疫组织化学染色检测皮下移植瘤中MMP2和MMP14的表达量。结果:Western blot显示BGJ398实验组中p FGFR的数量较对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot与免疫组化染色结果显示实验组MMP2和MMP14的表达明显下调;小管形成实验中实验组中胶质瘤细胞小管周长和交点数较对照组明显减少;皮下瘤模型中实验组中VM的数量(13.85±3.96)较对照组(26.40±5.06)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体内外实验证实BGJ398通过抑制FGFR的激活可以抑制胶质瘤细胞形成VM,提示FGFR信号通路具有调节VM形成的作用。 展开更多
关键词 胶质瘤 成纤维细胞生长因子受体 BGJ398 血管生成拟态
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碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达 被引量：2
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作者 张莹 王美霞 +1 位作者 张郁 史俊南 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-111,130,共3页
目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中表达和意义。方法 :用免疫组化方法检测碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达。结果 :碱性成纤维细胞生长因子在成牙本质细胞层强阳性表达 ,在牙髓其它细胞和血管内皮细... 目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中表达和意义。方法 :用免疫组化方法检测碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达。结果 :碱性成纤维细胞生长因子在成牙本质细胞层强阳性表达 ,在牙髓其它细胞和血管内皮细胞阳性表达 ;碱性成纤维细胞生长因子受体在成牙本质细胞层弱阳性表达 ,牙髓其它细胞为阴性。结论 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 受体 牙髓 修复 牙本质形成
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