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5-Aza-CdR通过抑制大鼠原代肾肌成纤维细胞Epo基因启动子高甲基化逆转PMT
1
作者 袁玲 王蕾 +2 位作者 程鹏 江茜 崔晓雪 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第1期79-85,共7页
目的观察去甲基化剂5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对大鼠原代肾肌成纤维细胞的周细胞肌成纤维细胞转化(pericyte-myofibroblast transition,PMT)的影响。方法取5-Aza-CdR 250 ng/mL处理大鼠原代肾肌成纤维细胞... 目的观察去甲基化剂5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对大鼠原代肾肌成纤维细胞的周细胞肌成纤维细胞转化(pericyte-myofibroblast transition,PMT)的影响。方法取5-Aza-CdR 250 ng/mL处理大鼠原代肾肌成纤维细胞72 h,采用焦磷酸测序方法检测促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)基因启动子甲基化程度,采用免疫荧光与Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMΑ)、血小板源性生长因子受体β(platelet-derived growth factor receptorβ,PDGFRβ)和DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,Dnmt3a)的蛋白表达水平,并检测细胞上清液EPO水平。结果与对照组相比,5-Aza-CdR处理能显著降低Dnmt3a的表达和Epo启动子高甲基化水平,并随之降低了肌成纤维细胞中α-SMA的表达及α-SMA与PDGFRβ的表达比例,同时,5-Aza-CdR处理提高了细胞上清液中EPO的水平。结论5-Aza-CdR可通过抑制大鼠原代肾肌成纤维细胞Epo启动子高甲基化逆转PMT。 展开更多
关键词 周细胞-肌成纤维细胞转化 EPO DNA甲基化 5-氮杂-2’脱氧胞苷 DNA甲基转移酶
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成纤维细胞激活蛋白诱导胞内自组装Gd-纳米粒子对比剂的合成及MR成像研究
2
作者 郭祥源 郑一凡 +2 位作者 张曼琳 任怡博 蒋金辉 《安徽医科大学学报》 北大核心 2024年第12期2087-2094,共8页
目的拟合成一种Gd标记的能够响应肿瘤相关成纤维细胞中高度表达的成纤维细胞激活蛋白(FAP)的分子探针,用于胰腺癌的MR显像研究。方法化学合成Z-Gly-Pro-Cys-Lys(Gd-DOTA)-CBT(下文简称对比剂1)并对其进行质谱分析以表征其化学结构;应用... 目的拟合成一种Gd标记的能够响应肿瘤相关成纤维细胞中高度表达的成纤维细胞激活蛋白(FAP)的分子探针,用于胰腺癌的MR显像研究。方法化学合成Z-Gly-Pro-Cys-Lys(Gd-DOTA)-CBT(下文简称对比剂1)并对其进行质谱分析以表征其化学结构;应用高效液相色谱体外验证对比剂1在FAP的作用下形成二聚体,透射电子显微镜验证酶切还原后自组装形成的“Gd-纳米粒子”;CCK-8实验检测对比剂1的生物安全性;建立BxPc-3胰腺癌裸鼠模型,随机分为3组,静脉注射0.08 mmol/kg对比剂1作为实验组、0.08 mmol/kg Gd-DTPA作为对照组和生理盐水作为空白对照组(每组3只),分别对其进行0~3 h的动态MR扫描,观察T1和T2加权成像的增强效果,并分析时间进程中肿瘤与肌肉灰阶比值(T/M)的变化率。结果对比剂1在体外能够响应FAP,在FAP的作用下能够形成二聚体,并自组装形成了纳米粒子结构。对比剂1具有良好的生物安全性。BxPc-3肿瘤小鼠静脉注射对比剂1和Gd-DTPA后均在2 h时肿瘤的T1加权对比度达到最高:实验组在T1加权成像中T/M在2 h时为0 h的135.20%±0.06%,Gd-DTPA组为115.70%±0.05%,生理盐水组为113.50%±0.02%。实验组比Gd-DTPA对照组增强T1加权对比效果更明显(P<0.01)。T2加权成像中,T/M定量分析结果显示3组的肿瘤T2加权对比增强均较小,实验组、对照组和生理盐水组在0.5 h的T/M分别为0 h的94.60%±0.03%、106.30%±0.04%和102.20%±0.002%,均未显示出明显的肿瘤T2磁共振对比度增强。结论合成靶向FAP且能胞内自组装成Gd-纳米粒子的新型MR对比剂,提高了Gd在靶区的富集,增强了胰腺癌T1加权磁共振成像,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 对比剂 点击反应 自组装 成纤维细胞激活蛋白 胰腺癌 T1加权成像
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靶向成纤维细胞激活蛋白分子影像的临床研究与应用进展
3
作者 付浩 陈皓鋆 吴华 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期917-932,共16页
[背景]肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)在肿瘤生物行为中起重要作用,成纤维细胞激活蛋白(FAP)作为CAF的特异性标志物,在90%的上皮肿瘤中均有表达.近年来,FAP抑制剂(FAPI)正电子发射断层成像(PET)在肿瘤疾病与非肿瘤疾病中的临床... [背景]肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)在肿瘤生物行为中起重要作用,成纤维细胞激活蛋白(FAP)作为CAF的特异性标志物,在90%的上皮肿瘤中均有表达.近年来,FAP抑制剂(FAPI)正电子发射断层成像(PET)在肿瘤疾病与非肿瘤疾病中的临床研究和应用进展迅速,成为领域内的前沿热点.[进展]FAPI PET/计算机断层扫描(CT)在包括头颈部肿瘤、肺癌、消化系统肿瘤、肉瘤等多种肿瘤的诊断评价中显示出克服其氟代脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT的不足、显著提升诊断效能的优点.同时,以FAPI为载体的放射性核素诊疗一体化研究也引起关注.本文对FAPI PET/CT在肿瘤与非肿瘤疾病的临床研究和应用进展以及基于FAPI的放射性核素诊疗一体化研究动向进行综述.[展望]未来随着FAPI分子探针药动学的进一步提升,更多前瞻性大样本量的临床研究系统性评价FAPI分子影像在肿瘤疾病和非肿瘤疾病中的价值,以及不同治疗方式的联合,FAP有望成为重要的诊疗一体化靶点,为肿瘤治疗提供全新的策略. 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白 分子影像 正电子发射断层成像 肿瘤疾病 非肿瘤疾病 放射性核素诊疗
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基于miR-223-3p/NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴探讨新风胶囊对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞焦亡的影响
4
作者 王梦娜 汪元 +4 位作者 曹周芳 黄旦 孙艳秋 孙玥 王露琳 《中成药》 北大核心 2025年第5期1680-1687,共8页
目的 探讨新风胶囊对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)的影响。方法 构建LPS诱导的RA-FLS炎症模型;SD大鼠灌胃给药制备新风胶囊含药血清;双荧光素酶报告分析miR-223-3p和NLRP3的靶向关系;构建miR-223-3p抑制表达质... 目的 探讨新风胶囊对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLS)的影响。方法 构建LPS诱导的RA-FLS炎症模型;SD大鼠灌胃给药制备新风胶囊含药血清;双荧光素酶报告分析miR-223-3p和NLRP3的靶向关系;构建miR-223-3p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至RA-FLS中;分为LPS组、mimics NC组、mimics组、inhibitor NC组、inhibitor组;同时设置NC-FLS组、RA-FLS组、LPS组、新风胶囊组、新风胶囊+inhibitor-NC组、新风胶囊+inhibitor组、新风胶囊+inhibitor+MCC950组。采用CCK-8试剂盒法检测细胞增殖,流式细胞术检测RA-FLS细胞焦亡的改变;ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平;RT-qPCR法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA及miR-223-3p miRNA表达;Western blot法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果 筛选得出20%新风胶囊为最佳含药血清浓度。双荧光素酶报告基因说明miR-223-3p与NLRP3存在结合位点。与NC-inhibitor比较,转染miR-223-3p inhibitor后细胞焦亡增多,IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平升高,同时NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白及mRNA表达升高;与NC-mimics比较,转染miR-223-3p mimics后则出现相反的结果。与模型组比较,新风胶囊含药血清组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8水平降低,miR-223-3p miRNA表达升高,同时NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白及mRNA表达降低,细胞焦亡改善。结论 新风胶囊能够减轻炎症反应,减少细胞焦亡,其机制可能与调控miR-223-3p/NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴有关。 展开更多
关键词 新风胶囊 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 miR-223-3p/NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴 细胞焦亡
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激活蛋白-1调控转化生长因子β_1诱导的人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌 被引量：4
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作者 胡永斌 曾庆富 +2 位作者 冯德云 李翔 彭劲武 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期776-781,共6页
目的:探讨核转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在转化生长因子β1(transfor-ming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌中的作用。方法:以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10μg/L的TGF-β... 目的:探讨核转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在转化生长因子β1(transfor-ming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌中的作用。方法:以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10μg/L的TGF-β1刺激,于不同时间点收集细胞,采用RT-PCR和Wester blot检测细胞Ⅰ型胶原转录和分泌;阻断实验中选用AP-1抑制剂姜黄素为阻断剂,凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测细胞内AP-1的DNA结合活性变化,同时Western印迹检测Ⅰ型胶原分泌变化。结果:TGF-β1能诱导HLF-02细胞Ⅰ型胶原mRNA的转录和分泌(P<0.05);TGF-β1能提高HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力(P<0.05);姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力,抑制率分别为17.1%,17.6%,24.2%,31.3%(P<0.05);同时,姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞Ⅰ型胶原的分泌,抑制率分别为62.1%,58.8%,62.1%,59.6%(P<0.05)。结论:核转录因子AP-1参与TGF-β1刺激的HLF-02细胞Ⅰ型胶原的分泌调控。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 肺成纤维细胞 I型胶原 激活蛋白
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lncRNA FAIF1调控miRNA-424-5p/Smad7轴抑制晚期糖基化终产物诱导的心肌成纤维细胞功能紊乱
6
作者 岳温恒 黄鲲 +2 位作者 吴越 温佳雨 梁春 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第5期586-593,共8页
目的 探讨lncRNA成纤维细胞活化抑制因子1(FAIF1)调控晚期糖基化终产物(AGE)诱导的人心肌成纤维细胞增殖、活化及纤维化的机制。方法 将人心肌成纤维细胞分为对照组、AGE组、FAIF1重组慢病毒(Lv-FAIF1)+AGE组和对照慢病毒(Lv-control)+... 目的 探讨lncRNA成纤维细胞活化抑制因子1(FAIF1)调控晚期糖基化终产物(AGE)诱导的人心肌成纤维细胞增殖、活化及纤维化的机制。方法 将人心肌成纤维细胞分为对照组、AGE组、FAIF1重组慢病毒(Lv-FAIF1)+AGE组和对照慢病毒(Lv-control)+AGE组。通过qPCR和蛋白质印迹法检测AGE诱导下人心肌成纤维细胞中miRNA-424-5p、FAIF1及Smad7的表达水平。通过生物信息学分析预测miRNA-424-5p、FAIF1和Smad7的相互关系,并用萤光素酶报告基因实验验证。利用CCK-8检测细胞增殖活性,免疫荧光染色观察Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的表达分泌情况,qPCR评估Lv-FAIF1对AGE诱导细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响。结果 qPCR及蛋白质印迹法检测结果显示,AGE诱导后人心肌成纤维细胞中FAIF1和Smad7表达降低,miRNA-424-5p表达升高(与对照组比较,均P<0.05)。生物信息学分析显示,Smad7 mRNA 3'-非翻译区存在miRNA-424-5p结合位点(序列为UGCUGCU),而FAIF1序列中存在3个相同的结合位点。萤光素酶报告基因实验显示,miRNA-424-5p抑制Smad7的表达,而FAIF1通过竞争性结合miRNA-424-5p解除miRNA-424-5p对Smad7 mRNA的抑制作用。功能实验显示,Lv-FAIF1能够抑制AGE诱导的细胞增殖、Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白表达分泌及α-SMA和MMP9表达(与AGE组比较,均P<0.01),促进Smad7的表达(与AGE组比较,P<0.01)。结论 miRNA-424-5p抑制Smad7的表达,FAIF1通过调控miRNA-424-5p/Smad7轴有效抑制AGE诱导的人心肌成纤维细胞过度活化。本研究为糖尿病心肌病的防治提供了新的分子靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 微RNA-424-5p SMAD7 心肌成纤维细胞 晚期糖基化终产物
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^(68)Ga-成纤维细胞激活蛋白抑制剂PET/CT显像指南 被引量：9
7
作者 陈跃 邱琳 +10 位作者 石洪成 程登峰 孙龙 霍力 兰晓莉 徐浩 赵军 宋少莉 庞华 朱华 李亚明 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2022年第6期801-806,共6页
^(68)Ga-成纤维细胞激活蛋白抑制剂(FAPI)PET/CT用于各种肿瘤性疾病、感染、炎症性疾病诊治中,均涉及适应证、医务人员岗位职责、操作规范(包括病史采集、患者准备和检查注意事项、放射性药物制备、图像采集和图像分析)、报告、质量控... ^(68)Ga-成纤维细胞激活蛋白抑制剂(FAPI)PET/CT用于各种肿瘤性疾病、感染、炎症性疾病诊治中,均涉及适应证、医务人员岗位职责、操作规范(包括病史采集、患者准备和检查注意事项、放射性药物制备、图像采集和图像分析)、报告、质量控制和显像过程中的辐射安全问题。本指南旨在为临床顺利开展^(68)Ga-FAPI PET/CT检查,并在诊断报告中合理解释及标准化描述^(68)Ga-FAPI PET/CT所见提供依据。 展开更多
关键词 正电子发射断层显像 广谱显像剂 成纤维细胞激活蛋白 操作规范
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成纤维细胞激活蛋白对卵巢癌细胞增殖、迁徙和侵袭的影响 被引量：5
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作者 温秋婷 孙玉荣 +2 位作者 李春红 刘鸿宇 柏青杨 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期441-445,共5页
背景与目的:肿瘤间质活化的成纤维细胞能表达成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP),本研究通过体外实验研究FAP在卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁徙过程中的作用。方法:人类卵巢癌细胞系HO-8910PM体外培养,加入不同浓度的FA... 背景与目的:肿瘤间质活化的成纤维细胞能表达成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP),本研究通过体外实验研究FAP在卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁徙过程中的作用。方法:人类卵巢癌细胞系HO-8910PM体外培养,加入不同浓度的FAP(30、100和300 pmol/L)处理,用MTT法检测FAP对HO-8910PM增殖的影响;细胞划痕实验检测FAP对HO-8910PM迁徙能力的影响;Transwell侵袭实验来研究FAP对HO-8910PM侵袭能力的影响。结果:MTT法及细胞生长曲线显示FAP对卵巢癌细胞有促增殖作用,并呈时间、剂量依赖性;细胞划痕试验结果显示,不同浓度的FAP对卵巢癌细胞系的迁徙均有促进作用,以100 pmol/L组最为明显(P<0.01);Transwell侵袭实验显示FAP对卵巢癌细胞有促侵袭作用,以100 pmol/L组最为明显(P<0.01)。结论:FAP具有促进卵巢癌细胞的增殖、迁徙和侵袭的作用。 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白 肿瘤转移 卵巢癌细胞系HO-8910PM
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胃癌Lauren分型中癌相关成纤维细胞分泌因子的差异表达
9
作者 琚璐 任国涛 +4 位作者 郑诗祺 孙也淇 蔡磊 王瑞芬 王立峰 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第3期324-333,共10页
目的探讨胃癌Lauren分型中弥漫型胃癌相关成纤维细胞(diffuse-type gastric cancer-associated fibroblasts,DGC-CAFs)和肠型胃癌相关成纤维细胞(intestinal-type gastric cancer-associated fibroblasts,IGC-CAFs)分泌因子的表达差异... 目的探讨胃癌Lauren分型中弥漫型胃癌相关成纤维细胞(diffuse-type gastric cancer-associated fibroblasts,DGC-CAFs)和肠型胃癌相关成纤维细胞(intestinal-type gastric cancer-associated fibroblasts,IGC-CAFs)分泌因子的表达差异。方法选取手术切除的6例胃癌新鲜标本,其中弥漫型胃癌(diffuse-type gastric cancer,DGC)和肠型胃癌(intestinal-type gastric cancer,IGC)各3例,分别提取DGC-CAFs、IGC-CAFs原代细胞以获得条件培养基,采用高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测DGC-CAFs与IGC-CAFs分泌因子的表达;根据HPLC-MS/MS结果,选择3个差异因子进行免疫组化检测,研究两者在DGC和IGC配对标本中的表达差异;收集GEO和TCGA数据库中1174个胃癌转录组数据,通过ESTIMATE获取基质细胞的分布并对DGC和IGC进行基质评分,应用Kaplan-Meier生存分析研究高基质评分和癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)比例与预后的关系,运用GO富集进行基因和生物学功能分析。结果HPLC-MS/MS分析显示,在DGC-CAFs和IGC-CAFs中均检测到的蛋白仅有10种,即SPARC、COL6A1、COL1A2、COL1A1、COL3A1、FN1、DCN、ACTG1、TIMP1和SHROOM3。在DGC-CAFs中10种蛋白表达均高于IGC-CAFs,且比值>2的蛋白为COL3A1(5.28)、COL1A2(3.98)、DCN(3.71)、TIMP1(3.40)、COL6A1(3.35)、ACTG1(3.13)、COL1A1(2.84)和SHROOM3(2.50)。3例DGC-CAFs中均检测到TUBB和BASP1,1例IGC-CAFs中检测到TUBB,3例IGC-CAFs中均未检测到BASP1。免疫表型:DCN、ACTG1和COL3A1在DGC中的表达高于IGC,与HPLC-MS/MS分析一致。生信分析显示,DGC的基质评分高于IGC,与预后差相关。分析细胞组分发现,相关基因富集在ECM、含胶原的ECM和细胞-细胞连接处,其相关分子功能和生物学过程也以该组分为基础,与HPLC-MS/MS分析一致。结论DGC-CAFs和IGC-CAFs的分泌因子在种类、含量上均存在差异,其差异多集中在ECM相关的信号通路上;基质中高CAFs含量可能通过影响ECM的基因表达和受体通路等影响胃癌患者预后。 展开更多
关键词 胃肿瘤 Lauren分型 癌相关成纤维细胞 高效液相色谱-质谱联用 分泌因子
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二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达
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作者 邵珊 白薇超 +3 位作者 邹鹏程 罗敏娜 赵新汉 雷建军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期428-436,共9页
目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(... 目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 缺氧诱导因子-1Α 二甲双胍 磷酸化-AMPK 肿瘤微环境
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利用TALE-TFs在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子表达载体
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作者 皮文辉 梁龙 +6 位作者 唐红 张译元 郭延华 王立民 向春和 周平 刘守仁 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第5期13-16,I0003,共5页
目的利用TALE-TFs,在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子,为检测β-酪蛋白基因启动子—目的基因表达框的表达结果,提供一种检测途径。方法将构建的TALE-TFs和β-酪蛋白基因启动子—Red报告基因质粒电转染进入小鼠成纤维细胞,通过... 目的利用TALE-TFs,在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子,为检测β-酪蛋白基因启动子—目的基因表达框的表达结果,提供一种检测途径。方法将构建的TALE-TFs和β-酪蛋白基因启动子—Red报告基因质粒电转染进入小鼠成纤维细胞,通过荧光显微镜直接观察报告基因表达情况。结果与结论利用TALE人工转录因子,在小鼠成纤维细胞中能够激活β-酪蛋白基因启动子表达框,为替代乳腺上皮细胞表达验证系统提供了新的途径。 展开更多
关键词 TALE-TFs 小鼠成纤维细胞 β-酪蛋白基因启动子 表达调控
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低氧通过p38丝裂素激活蛋白激酶途径刺激人肾间质成纤维细胞表达结缔组织生长因子 被引量：4
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作者 荣琳琳 黄海长 +1 位作者 喻陆 李惊子 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期378-381,共4页
目的:研究低氧条件下人肾间质成纤维细胞表达结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)及其可能的信号途径,从而探讨低氧导致肾间质纤维化的分子机制。方法:以人肾间质成纤维细胞TK173作为研究对象,应用Westernblot技术,检... 目的:研究低氧条件下人肾间质成纤维细胞表达结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)及其可能的信号途径,从而探讨低氧导致肾间质纤维化的分子机制。方法:以人肾间质成纤维细胞TK173作为研究对象,应用Westernblot技术,检测低氧标记蛋白分子,低氧诱导因子-1α(hypoxiainducedfactor-1α,HIF-1α)蛋白作为低氧标记物;比较低氧(1%O2,体积分数)和正常氧(21%O2,体积分数)条件下TK173细胞培养12,24,48h后CTGF蛋白水平;低氧刺激TK173细胞30min,1h,6h和12h,运用抗磷酸化抗体检测丝裂素激活蛋白激酶(MAPKs)活化;在低氧刺激半小时前分别加入p38、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、c-Jun-N末端蛋白激酶(JNK)信号通路特异阻断剂SB203580,PD98059,SP600125,低氧培养24h后检测细胞CTGF蛋白水平。用RT-PCR技术分析CTGFmRNA水平变化。结果:TK173细胞正常氧组仅有HIF-1α蛋白微弱表达,低氧组有高水平HIF-1α蛋白表达。在低氧条件下培养12h后细胞CTGF蛋白增加,24h时CTGF蛋白表达最强,是正常氧组的(2.1±0·1)倍,至48h降至对正常氧组水平;同时低氧培养刺激CTGFmRNA表达,在1h时开始增加,6h时达高峰为正常氧组的(6.6±1·0)倍,24h后恢复基础水平。低氧可以活化MAPKs,JNK在30min达到高峰,ERK1/2、p38在刺激1h时达高峰,6h减弱,12h减至基础水平;应用ERK1/2抑制剂PD98059和JNK抑制剂SP00125不能减弱低氧刺激CTGF蛋白表达增加的效应,但应用P38活化抑制剂SB203580可以明显减少低氧刺激的CTGF蛋白和mRNA的增加。结论:低氧可刺激人肾间质成纤维细胞表达CTGF,并且该作用依赖p38通路的活化。 展开更多
关键词 有丝分裂素激活蛋白激酶类 成纤维细胞 结缔组织生长因子 肾
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成纤维细胞激活蛋白在大鼠烫伤创面修复过程中的动态表达 被引量：2
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作者 井刚 陈静 王甲汉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期615-617,共3页
目的观测成纤维细胞激活蛋白(FAP)在大鼠不同深度烫伤创面修复过程中的动态表达特点。方法制作大鼠浅Ⅱ°和深Ⅱ°两组烫伤模型(每组42只),每组在伤后6、12 h,1、3、7、14、21 d各处死6只大鼠,另设6只正常大鼠皮肤作为对照。免... 目的观测成纤维细胞激活蛋白(FAP)在大鼠不同深度烫伤创面修复过程中的动态表达特点。方法制作大鼠浅Ⅱ°和深Ⅱ°两组烫伤模型(每组42只),每组在伤后6、12 h,1、3、7、14、21 d各处死6只大鼠,另设6只正常大鼠皮肤作为对照。免疫组织化学和免疫印迹技术观测创面组织FAP的含量。结果 FAP在创面成纤维细胞的细胞膜和细胞质表达,尤其是创面新生血管周围。烫伤后6 h FAP表达明显增多。浅Ⅱ°创面6 h与12 h,1 d与3 d比较,FAP的表达差异无统计学意义(P>0.05),余各时间点与相邻时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。深Ⅱ°创面12 h与1 d,1 d和3 d比较,FAP的表达差异无统计学意义(P>0.05),余各时间点与相邻时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。两组创面FAP表达的高峰均出现在烫伤后第7天,之后逐渐下降,至伤后第21天FAP的表达量仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FAP的动态表达特点提示它在创面修复过程中起重要作用。 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白 烫伤创面 修复 表达
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成纤维细胞激活蛋白促进肿瘤免疫逃逸和转化治疗研究进展 被引量：5
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作者 赵妍(综述) 刘丽华(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期354-359,共6页
成纤维细胞激活蛋白(FAP)为Ⅱ型丝氨酸蛋白酶,在多种肿瘤间质中高表达,是肿瘤相关成纤维细胞(CAF)表面标志物之一,与肿瘤进展和总生存期缩短显著相关。近年研究发现,FAP具有介导肿瘤免疫逃逸的重要作用,通过影响天然免疫和适应性免疫反... 成纤维细胞激活蛋白(FAP)为Ⅱ型丝氨酸蛋白酶,在多种肿瘤间质中高表达,是肿瘤相关成纤维细胞(CAF)表面标志物之一,与肿瘤进展和总生存期缩短显著相关。近年研究发现,FAP具有介导肿瘤免疫逃逸的重要作用,通过影响天然免疫和适应性免疫反应中细胞种类、数量及功能的变化,调控多种趋化因子和细胞因子的分泌,重塑肿瘤免疫微环境并诱导肿瘤免疫治疗抵抗。通过综述FAP与肿瘤免疫逃逸的关系、作用机制以及在免疫治疗、特别是转化研究进展,可为优化肿瘤免疫治疗提供新思路。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 成纤维细胞激活蛋白 肿瘤微环境 免疫逃逸 转化治疗
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成纤维细胞激活蛋白在妇科恶性肿瘤中的作用研究进展 被引量：1
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作者 陆楠 刘晨雾 +1 位作者 陈俊 徐明娟 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1337-1343,共7页
卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌是妇科三大恶性肿瘤,严重危害着女性的生命健康。肿瘤的发生与发展是一个复杂过程,与肿瘤微环境密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,具有分泌多种细胞因子及合成细胞基质蛋白的能... 卵巢癌、子宫内膜癌、宫颈癌是妇科三大恶性肿瘤,严重危害着女性的生命健康。肿瘤的发生与发展是一个复杂过程,与肿瘤微环境密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,具有分泌多种细胞因子及合成细胞基质蛋白的能力。成纤维细胞激活蛋白(FAP)是CAF最具潜力的分子标志物之一,能够促进肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭,重塑细胞外基质,诱导肿瘤新生血管生成,是参与肿瘤发生、发展必不可少的因素。FAP作为肿瘤诊断示踪剂及作为靶向药物的研究也取得了一定进展,为妇科恶性肿瘤的诊治研究提供了新方向。 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白 妇科恶性肿瘤 卵巢癌 宫颈癌 子宫内膜癌
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成纤维细胞激活蛋白抑制剂用于PET/CT诊断肿瘤研究进展 被引量：1
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作者 武宣辰 穆东亮 张建华 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2023年第10期1575-1578,共4页
成纤维细胞激活蛋白(FAP)是癌相关成纤维细胞的重要分子标志,在恶性肿瘤中呈高表达,而在正常组织及良性肿瘤中表达极低。标记FAP抑制剂(FAPI)对于明确诊断多种肿瘤、肿瘤分期及判断恶性肿瘤复发等具有重要意义。本文就FAPI用于PET/CT诊... 成纤维细胞激活蛋白(FAP)是癌相关成纤维细胞的重要分子标志,在恶性肿瘤中呈高表达,而在正常组织及良性肿瘤中表达极低。标记FAP抑制剂(FAPI)对于明确诊断多种肿瘤、肿瘤分期及判断恶性肿瘤复发等具有重要意义。本文就FAPI用于PET/CT诊断肿瘤研究进展进行综述。 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白α 肿瘤 正电子发射断层显像
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成纤维细胞激活蛋白抑制剂PET显像诊断非恶性疾病研究进展 被引量：1
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作者 李梦婷 胡闻竹 +2 位作者 张晓 覃春霞 兰晓莉 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2023年第12期1893-1897,共5页
成纤维细胞激活蛋白(FAP)可在活化的成纤维细胞中过度表达。近年来,放射性核素标记的FAP抑制剂(FAPI)已继^(18)F-FDG之后成为核医学领域中的重要新型正电子显像剂,越来越多地用于非恶性疾病。本文就FAPI PET显像用于诊断非恶性疾病研究... 成纤维细胞激活蛋白(FAP)可在活化的成纤维细胞中过度表达。近年来,放射性核素标记的FAP抑制剂(FAPI)已继^(18)F-FDG之后成为核医学领域中的重要新型正电子显像剂,越来越多地用于非恶性疾病。本文就FAPI PET显像用于诊断非恶性疾病研究进展进行综述。 展开更多
关键词 成纤维细胞激活蛋白α 正电子发射断层显像
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年轻干细胞抗原-1阳性骨髓干细胞调控年老小鼠心脏成纤维细胞凋亡的分子机制
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作者 吕饶 于佳迪 +5 位作者 李柳蓁 湛楚蓝 赵立越 李月亮 董珺 黎佼 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第17期2369-2374,共6页
目的探讨Sca-1骨髓干细胞对小鼠心脏成纤维细胞(CFC)凋亡的影响,阐明年轻Sca-1骨髓干细胞调控心脏成纤维细胞凋亡的潜在分子机制及其优势。方法比较年轻与年老心脏成纤维细胞在缺氧条件下,细胞凋亡及细胞存活率。将Sca-1骨髓干细胞与年... 目的探讨Sca-1骨髓干细胞对小鼠心脏成纤维细胞(CFC)凋亡的影响,阐明年轻Sca-1骨髓干细胞调控心脏成纤维细胞凋亡的潜在分子机制及其优势。方法比较年轻与年老心脏成纤维细胞在缺氧条件下,细胞凋亡及细胞存活率。将Sca-1骨髓干细胞与年老心脏成纤维细胞共培养。通过TUNEL染色、q RT-PCR、Western Blot、CCK8试剂盒分别检测年轻或年老Sca-1骨髓干细胞对年老心脏成纤维细胞凋亡及存活的影响。通过qRT-PCR、ELISA检测年轻与年老小鼠Sca-1骨髓干细胞旁分泌生长因子并鉴定其功能。结果随年龄增加,年老小鼠心脏成纤维细胞凋亡增加,细胞存活减少。与年老细胞相比,年轻Sca-1骨髓干细胞可明显减少年老心脏成纤维细胞凋亡,增加细胞存活。机制研究发现,与年老细胞相比,年轻Sca-1骨髓干细胞可旁分泌更多的生长和分化因子5(GDF5)(P<0.05)。中和GDF5后,使年轻Sca-1骨髓干细胞失去对年老成纤维细胞凋亡及存活的调控作用。结论年轻Sca-1骨髓干细胞可通过旁分泌GDF5减少年老心脏成纤维细胞凋亡。 展开更多
关键词 干细胞 心脏成纤维细胞 凋亡 细胞存活 生长因子 年轻干细胞抗原-1
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骨形态发生蛋白-2与碱性成纤维细胞生长因子在异位和原位成骨中的作用 被引量：13
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作者 王磊 章燕 +2 位作者 游素兰 谭鸾君 黄远亮 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期420-424,共5页
目的通过骨髓基质细胞(BMSCs)的体外增殖和分化、异位成骨和原位成骨实验来观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在成骨过程中的作用。方法分别用含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液体外培养Beagle犬的BMSCs,通... 目的通过骨髓基质细胞(BMSCs)的体外增殖和分化、异位成骨和原位成骨实验来观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在成骨过程中的作用。方法分别用含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液体外培养Beagle犬的BMSCs,通过甲基噻唑基四唑(MTT)比色法测定细胞增殖水平,通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性观察细胞的分化情况。将BMSCs与多孔磷酸钙(CPC)分别在含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液中复合培养,制成复合材料,一部分植入裸鼠皮下,观察异位成骨情况,另一部分植入Beagle犬的种植体周围骨缺损区,经过荧光标记观察原位成骨情况。结果含有BMP-2+bFGF的培养液促进BMSCs增殖和分化的能力最强。异位成骨情况:BMP-2+bFGF组的成骨量较其他组明显增加,其新骨形成百分比为48.79%±11.31%,高于单一BMP-2组(30.71%±10.85%)和bFGF组(27.33%±9.67%)以及对照组(10.65%±6.05%)。原位成骨术后12周,BMP-2+bFGF组的矿化沉积率高于其他组,其差异有统计学意义(P<0.01)。结论在促进成骨方面,BMP-2和bFGF共同作用优于单一因子。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 骨形态发生蛋白-2 碱性成纤维细胞生长因子 成骨
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TNF-α对体外培养奶牛乳腺成纤维细胞α-SMA mRNA及蛋白表达的影响 被引量：6
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作者 杨磊 王凤龙 +2 位作者 丁玉林 丁旭娜 赵占宽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期170-173,共4页
肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factorα,TNF-α）主要来源于活化的巨噬细胞、肥大细胞和T细胞等,参与炎症反应和免疫调节过程,并能够刺激成纤维细胞的增殖过程。TNF-α通过与细胞的肿瘤坏死因子受体（tumor necrosis factor recepto... 肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factorα,TNF-α）主要来源于活化的巨噬细胞、肥大细胞和T细胞等,参与炎症反应和免疫调节过程,并能够刺激成纤维细胞的增殖过程。TNF-α通过与细胞的肿瘤坏死因子受体（tumor necrosis factor receptor,TNFR）结合发挥作用,TNFR一般分为TNFR1（CD120a）和TNFR2（CD120b）两型。TNFR1分布于多种正常细胞或肿瘤细胞表面,TNFR1被认为是TNF-α的主要受体。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-α 平滑肌肌动蛋白 实时荧光定量PCR Western BLOT 奶牛乳腺成纤维细胞
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