黄瓜籽正丁醇提取物对人牙髓干细胞增殖及成牙向分化的影响 被引量：4

1

作者 车静怡 李艳萍 +2 位作者 潘爽 何丽娜 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第4期380-383,共4页

目的:探讨黄瓜籽正丁醇提取物(n-butanol extract of cucumis sativus seeds,CSB)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及成牙向分化能力的影响。方法:体外扩增培养hDPSCs,采用细胞计数法(cell counting kit-8,CCK... 目的:探讨黄瓜籽正丁醇提取物(n-butanol extract of cucumis sativus seeds,CSB)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及成牙向分化能力的影响。方法:体外扩增培养hDPSCs,采用细胞计数法(cell counting kit-8,CCK-8)法检测CSB对hDPSCs增殖能力的影响;通过碱性磷酸酶(ALP)染色及活性测定、Western blot检测牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COLⅠ)等矿化相关蛋白的表达水平观察细胞成牙向分化能力的变化。结果:CCK-8结果显示,与对照组相比,100mg/L CSB可显著促进hDPSCs的增殖(P<0.05),500mg/L组则明显抑制hDPSCs的增殖(P<0.05);经矿化诱导后,100mg/L CSB组ALP染色明显加深,活性显著升高(P<0.05);Western blot结果显示100mg/L CSB组DSPP和COLⅠ的表达均高于对照组(P<0.05)。结论:适宜浓度的CSB可促进hDPSCs的增殖及成牙向分化。 展开更多

关键词 黄瓜籽正丁醇提取物 人牙髓干细胞 增殖 成牙向分化

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经典Wnt信号通路对hDPSCs增殖、迁移和成牙本质向分化的影响 被引量：8

2

作者 关孟莹 何丽娜 +3 位作者 潘爽 李艳萍 刘会梅 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第9期861-865,共5页

目的:探究经典Wnt/β-catenin信号通路对人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖、迁移、成牙本质向分化及矿化的影响。方法:筛选DKK1抑制Wnt信号通路的最佳浓度,并用该浓度处理hDPSCs。通过MTT和划痕实验观察细胞增殖和迁移能力的变化。碱性磷酸酶... 目的:探究经典Wnt/β-catenin信号通路对人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖、迁移、成牙本质向分化及矿化的影响。方法:筛选DKK1抑制Wnt信号通路的最佳浓度,并用该浓度处理hDPSCs。通过MTT和划痕实验观察细胞增殖和迁移能力的变化。碱性磷酸酶染色实验及Western Blot分析DKK1对hDPSCs成牙本质向分化能力的影响。茜素红染色探究DKK1对hDPSCs矿化前期阶段矿化能力的影响。结果:(1)MTT实验结果显示,DKK1组在第5天时,hDPSCs的A值高于对照组(P<0.05)。(2)划痕实验结果显示,细胞从划痕边界不断向中间迁移,在24 h时DKK1组细胞迁移距离明显大于对照组。(3)茜素红染色结果观察到,DKK1组可见多个大小不等的矿化结节。(4)Western blot结果显示,DKK1上调DMP-1的蛋白表达。结论:抑制经典Wnt信号通路能够促进hDPSCs的增殖、迁移、成牙本质向分化及矿化。 展开更多

关键词 Dikkopf-1 人牙髓干细胞 增殖 迁移 成牙本质向分化

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整合素α6对hDPSCs增殖和成牙本质向分化的影响 被引量：4

3

作者 殷晓薇 张爽 +5 位作者 邓皓天 何丽娜 李艳萍 张巍巍 潘爽 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第12期1132-1136,共5页

目的:探讨整合素α6(integrin alpha 6)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖和成牙本质向分化的影响。方法:采用酶消化法,体外分离并培养hDPSCs,构建整合素α6沉默慢病毒,感染hDPSCs,分为阴性对照组(shMock)和整... 目的:探讨整合素α6(integrin alpha 6)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖和成牙本质向分化的影响。方法:采用酶消化法,体外分离并培养hDPSCs,构建整合素α6沉默慢病毒,感染hDPSCs,分为阴性对照组(shMock)和整合素α6沉默组(shITGA6)。采用噻唑蓝(MTT)法及对增殖标志物Ki-67进行免疫荧光染色,检测整合素α6对hDPSCs增殖的影响;采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、Western blot检测矿化相关蛋白牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein-1,DMP-1)的表达以及茜素红染色检测整合素α6对hDPSCs成牙本质向分化和矿化的影响。结果:MTT结果显示,沉默组hDPSCs的增殖能力明显降低(P<0.01);Ki-67免疫荧光染色结果显示,沉默组Ki-67阳性细胞率明显低于阴性对照组(P<0.001)。碱性磷酸酶染色结果显示,沉默组ALP染色明显加深;Western blot结果显示,沉默组DSPP和DMP-1的蛋白表达量明显增加,高于阴性对照组(P<0.05);茜素红染色结果显示,沉默组染色矿化结节明显增多。结论:整合素α6可以促进hDPSCs的增殖,抑制其成牙本质向分化。 展开更多

关键词 整合素Α6 人牙髓干细胞 增殖 成牙本质向分化

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沉默整合素α6通过激活FOXO1信号通路促进人牙髓干细胞的成牙本质向分化 被引量：1

4

作者 王凯丽 张巍巍 +4 位作者 李艳萍 何丽娜 张爽 潘爽 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期930-935,共6页

目的:探讨沉默整合素α6(integrinα6,ITGA6)是否通过激活FOXO信号通路影响人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)的成牙本质向分化。方法:利用课题组前期构建的ITGA6沉默慢病毒干扰hDPSCs,通过Real-time PCR和Western blo... 目的:探讨沉默整合素α6(integrinα6,ITGA6)是否通过激活FOXO信号通路影响人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)的成牙本质向分化。方法:利用课题组前期构建的ITGA6沉默慢病毒干扰hDPSCs,通过Real-time PCR和Western blot验证干扰效率,同时检测空载组(sh-NC)和ITGA6沉默组(sh-ITGA6)的FOXO信号通路活性。然后用AS1842856抑制FOXO1,经矿化诱导7 d后进行Western blot和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色来观察hDPSCs的成牙本质向分化情况。结果:Real-time PCR和Western blot结果显示构建的ITGA6沉默慢病毒能有效干扰hDPSCs中ITGA6的表达;与sh-NC组比,sh-ITGA6组FOXO1在mRNA水平表达上调(P<0.05),同时Western blot结果显示其在胞核表达量增加(P<0.05);Western blot检测成牙本质向分化标记物显示,sh-ITGA6组牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)表达上调(P<0.05),经AS1842856处理sh-ITGA6后,DSPP和DMP-1表达下降(P<0.05);ALP染色结果显示,sh-ITGA6组ALP染色明显加深,经AS1842856处理sh-ITGA6后,ALP染色变浅。结论:沉默ITGA6通过激活FOXO1信号通路促进hDPSCs的成牙本质向分化。 展开更多

关键词 整合素Α6 牙髓干细胞 FOXO1信号通路 成牙本质向分化

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小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中环状RNA的表达谱研究 被引量：4

5

作者 占云燕 张皓 +1 位作者 杨国斌 樊明文 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第4期371-374,共4页

目的:探讨环状RNA(circle RNA,circRNA)在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化前后的表达差异,研究circRNA在成牙本质细胞发育过程中发挥的作用。方法:利用circRNA芯片技术检测矿化诱导组与未矿化组原代小鼠牙乳头细胞的circRNA表达谱,... 目的:探讨环状RNA(circle RNA,circRNA)在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化前后的表达差异,研究circRNA在成牙本质细胞发育过程中发挥的作用。方法:利用circRNA芯片技术检测矿化诱导组与未矿化组原代小鼠牙乳头细胞的circRNA表达谱,经过对原始数据进行预处理,均一化后,找出差异表达的circRNA。根据表达差异倍数较高和样本间一致性较好的原则筛选circRNA。结果:与未矿化组相比,矿化诱导组小鼠牙乳头细胞中2倍以上表达,并且差异具有统计学意义(P≤0.01)的circRNA定义为差异表达的circRNA。在经矿化诱导的牙乳头细胞中,差异表达circRNA共4064条,其中上调表达3255条,下调表达809条。结论:circRNA芯片可用于筛选牙乳头细胞向成牙本质细胞分化过程中差异表达的circRNA,在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中,circRNA表达谱发生了显著变化,说明circRNA在成牙本质细胞发育过程中发挥着重要的调控作用。 展开更多

关键词 成牙本质细胞向分化 环状RNA 环状RNA芯片

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微小RNA-1895参与小鼠牙乳头细胞成牙本质向分化的研究 被引量：1

6

作者 张皓 杨国斌 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期28-32,共5页

目的:研究微小RNA(miRNA,miR)-1895在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中的功能。方法:建立小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的模型,检测miR-1895在此过程中的表达。使用生物信息学分析miR-1895在Klf4 mRNA中的结合位点。向... 目的:研究微小RNA(miRNA,miR)-1895在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中的功能。方法:建立小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的模型,检测miR-1895在此过程中的表达。使用生物信息学分析miR-1895在Klf4 mRNA中的结合位点。向细胞内转染miR-1895 inhibitor,利用Western blot和Real-time PCR检测抑制miR-1895后,对小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的影响。结果:在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中miR-1895表达降低。Klf4 mRNA中存在miR-1895结合位点。抑制细胞内miR-1895表达后,细胞内成牙本质细胞相关基因表达增加。结论:在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的过程中,miR-1895抑制细胞分化,可能参与分化调节过程。 展开更多

关键词 牙乳头细胞 成牙本质细胞向分化 微小RNA-1895

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非编码RNA在牙源性干细胞成牙本质向分化中作用的研究进展

7

作者 张凯莹 房付春 吴补领 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期540-545,共6页

牙源性干细胞是从口腔组织中分离出来的成体干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能。成牙本质向分化作为产生修复性牙本质的重要防御反应,其过程涉及一系列转录及转录后的基因表达调控。多项研究证实非编码RNA(ncRNA)在牙源性干细胞特别... 牙源性干细胞是从口腔组织中分离出来的成体干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能。成牙本质向分化作为产生修复性牙本质的重要防御反应,其过程涉及一系列转录及转录后的基因表达调控。多项研究证实非编码RNA(ncRNA)在牙源性干细胞特别是牙髓干细胞成牙本质向分化过程中发挥了重要作用,是细胞分化的重要调控靶点,以维持细胞分化特性。新研究技术体系的建立使得ncRNA的调控机制得以进一步阐明。本文从功能、调控的靶基因及通路等方面,对目前ncRNA在牙源性干细胞成牙本质向分化过程中的相关研究进行综述。 展开更多

关键词 牙源性干细胞 成牙本质向分化 非编码RNA

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HDAC5对成牙本质细胞增殖和分化影响的研究

8

作者 白玉 柳鑫 +3 位作者 程小刚 郭倩 何文喜 余擎 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期737-742,共6页

目的:研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC5)对成牙本质细胞增殖及成牙/成骨分化的影响。方法:收集临床因治疗拔除的健康和牙髓炎状态的第三磨牙进行免疫荧光染色观察HDAC5在牙髓中的表达情况,慢病毒载体转染成牙本质细胞系(OLCs),建立过表达HDAC... 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC5)对成牙本质细胞增殖及成牙/成骨分化的影响。方法:收集临床因治疗拔除的健康和牙髓炎状态的第三磨牙进行免疫荧光染色观察HDAC5在牙髓中的表达情况,慢病毒载体转染成牙本质细胞系(OLCs),建立过表达HDAC5的OLCs,CCK8实验检测细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)染色及活性检测、茜素红染色观察矿化能力,Western blot检测I型胶原(COL1α)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙蛋白(OCN)、骨涎蛋白(BSP)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)的蛋白表达。结果:与健康牙髓组织相比,炎症牙髓成牙本质细胞层见高表达的HDAC5,过表达HDAC5后OLCs增殖活力抑制,ALP活性降低,矿化结节形成减少,成牙/成骨相关蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:HDAC5在牙髓炎成牙本质细胞层高表达且抑制OLCs的增殖和成牙/成骨向分化。 展开更多

关键词 成牙本质细胞 表观遗传学 组蛋白去乙酰化酶5 成骨/成牙本质向分化 细胞增殖

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牙髓干细胞分化的研究进展 被引量：3

9

作者 苟文亭 叶玲 谭红 《国际口腔医学杂志》 CAS 2012年第3期380-383,共4页

牙髓干细胞(DPSC)是一种具有高度增生、自我更新能力和多相分化潜能的成体干细胞,在一定条件下可向特定的细胞类型分化,在牙髓修复和牙齿再生中发挥着重要的作用。本文主要就DPSC成骨向分化、成牙本质向分化的研究进展作一综述。

关键词 牙髓干细胞 成牙本质向分化 成骨向分化

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硅酸钙类盖髓剂生物学性能的研究进展 被引量：2

10

作者 陈燕活 安少锋 高燕 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期459-464,共6页

随着牙髓生物学和生物材料学研究的进步,微创诊疗理念的普及,活髓保存治疗已成为牙髓病学的研究热点之一。盖髓剂的生物学性能是决定活髓保存治疗效果的关键因素,硅酸钙类水门汀是一类具有良好的理化性能和生物相容性的新型盖髓剂,能诱... 随着牙髓生物学和生物材料学研究的进步,微创诊疗理念的普及,活髓保存治疗已成为牙髓病学的研究热点之一。盖髓剂的生物学性能是决定活髓保存治疗效果的关键因素,硅酸钙类水门汀是一类具有良好的理化性能和生物相容性的新型盖髓剂,能诱导牙髓组织中具有分化潜能的细胞分化为成牙本质样细胞,促进修复性牙本质的形成,已广泛应用于活髓保存治疗,取得了良好的治疗效果。但其种类相对较多,且有大量相关基础和临床应用研究报道,因此本文将对目前常用的硅酸钙类盖髓剂的生物学性能进行综述,以期为临床合理应用提供参考。 展开更多

关键词 硅酸钙 盖髓剂 牙髓细胞 成牙本质向分化

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生物活性玻璃和牙本质浸提蛋白对人牙髓细胞的作用

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作者 信义 王赛楠 +1 位作者 崔彩云 董艳梅 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期331-336,共6页

目的:明确生物活性玻璃(bioactive glass,BG)和牙本质浸提蛋白(extracted dentin proteins,EDP)对人牙髓细胞增殖、成牙本质向分化、矿化的作用。方法:采用酶消化法培养牙髓细胞,传代至第4代用于实验。分别用含BG-EDP浸提液、BG浸提液、... 目的:明确生物活性玻璃(bioactive glass,BG)和牙本质浸提蛋白(extracted dentin proteins,EDP)对人牙髓细胞增殖、成牙本质向分化、矿化的作用。方法:采用酶消化法培养牙髓细胞,传代至第4代用于实验。分别用含BG-EDP浸提液、BG浸提液、EDP浸提液的达尔伯克必需基本培养基(Dulbecco’s minimum essential medium,DMEM)培养牙髓细胞,对照组为DMEM培养组;通过细胞活性噻唑蓝比色法检测细胞增殖能力,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测及real-time PCR检测细胞成牙本质向分化能力,茜素红钙化结节染色及氯化十六烷基吡啶半定量分析检测细胞矿化能力。结果:BG-EDP组3、7、9 d时(光密度值1.36±0.06、2.52±0.20、2.72±0.29)能够增强人牙髓细胞增殖活性,同BG组(光密度值1.20±0.26、2.33±0.26、2.50±0.30)、EDP组(光密度值1.13±0.15、2.10±0.13、2.38±0.22)和对照组(光密度值0.84±0.17、1.84±0.18、1.95±0.19)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。7 d时,BG-EDP组ALP活性与EDP组、对照组差异无统计学意义,分化相关基因(DSPP、DMP-1)表达无明显升高。14 d时,BG-EDP组ALP活性升高(56.67±1.83),显著高于EDP组(41.98±9.71)及对照组(30.82±6.70),P<0.05,但同BG组(56.29±6.20)相比差异无统计学意义(P>0.05);BG-EDP组DSPP表达量明显升高(5.79±1.94),显著高于BG组(2.62±0.46)、EDP组(2.66±1.06)及对照组(1.84±0.76),P<0.05;BG-EDP组DMP-1表达升高(3.87±1.87),略高于BG组(1.89±0.90)、EDP组(2.38±1.04)和对照组(2.25±0.93),但差异无统计学意义(P>0.05)。诱导2周后,BG-EDP组形成较多矿化结节,氯化十六烷基吡啶半定量分析显示BG-EDP组钙化量最高(0.27±0.01)。结论:同单纯的BG及EDP相比,BG-EDP复合后具有更强的促进人牙髓细胞的增殖、成牙本质向分化、矿化作用。 展开更多

关键词 生物活性玻璃 牙本质浸提蛋白 成牙本质向分化 牙再矿化

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