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脱水时间对超低温保存橡胶树花药愈伤组织生理指标的影响
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作者 周权男 吉辛 +4 位作者 吴胤乐 李季 杨先锋 吴日智 黄天带 《热带作物学报》 北大核心 2025年第9期2127-2134,共8页
超低温保存可降低橡胶树花药愈伤组织长期继代发生的遗传变异风险,是长期保存愈伤组织的有效方法。为评价脱水时间对超低温保存过程中橡胶树花药愈伤组织与抗性相关生理指标的影响,本研究将花药愈伤组织于植物玻璃化溶液(plant vitrific... 超低温保存可降低橡胶树花药愈伤组织长期继代发生的遗传变异风险,是长期保存愈伤组织的有效方法。为评价脱水时间对超低温保存过程中橡胶树花药愈伤组织与抗性相关生理指标的影响,本研究将花药愈伤组织于植物玻璃化溶液(plant vitrification solution,PVS)PVS2中分别脱水0、10、20、40 min后进行超低温保存24 h,分析脱水时间对超低温保存前后愈伤组织中可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性等生理指标的影响。结果显示:脱水时间对超低温保存后花药愈伤组织中可溶性蛋白、MDA含量、SOD和POD活性具有显著影响(P<0.05),而对CAT活性无显著影响。除MDA外,超低温保存后每个脱水时间的各生理指标值均高于保存前。脱水40 min的花药愈伤组织超低温保存后,其可溶性蛋白含量、CAT、SOD和POD活性均达最大值,分别为129.63μg/mL、627.30 U/g、290.38 U/g、25643.33 U/g,MDA含量最低,为41.31 nmol/g,表明脱水40 min可明显增强超低温保存后愈伤组织细胞的持水能力和抗氧化水平。进一步对脱水40 min后超低温保存的花药愈伤组织进行复苏,平均存活率在70%以上,且能诱导易碎胚性愈伤系的形成,平均诱导率为13.33%,为橡胶树花药愈伤组织超低温保存再生奠定生理基础。 展开更多
关键词 橡胶树 花药愈伤组织 超低温保存 脱水时间 生理指标 存活率
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麻花秦艽愈伤组织诱导及植株再生体系的构建
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作者 刘秀丽 范小峰 +1 位作者 卜婷 胡世芳 《种子》 北大核心 2025年第2期246-252,共7页
以麻花秦艽无菌苗根段、叶片外植体为材料,采用MS基本培养基,附加不同植物生长调节剂进行愈伤组织诱导和增殖分化,继而进行麻花秦艽的生根培养。结果表明,根段、叶块均可作为愈伤组织诱导的外植体,其中根段效果最好;MS+6-BA 0.5 mg/L+NA... 以麻花秦艽无菌苗根段、叶片外植体为材料,采用MS基本培养基,附加不同植物生长调节剂进行愈伤组织诱导和增殖分化,继而进行麻花秦艽的生根培养。结果表明,根段、叶块均可作为愈伤组织诱导的外植体,其中根段效果最好;MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L分别为根段愈伤组织诱导和愈伤组织增殖及分化的最佳培养基;MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L和MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L分别为叶片愈伤组织的诱导和愈伤组织增殖及分化的最佳培养基;生根最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L,生根率达93.3%,可获得完整的再生植株。说明通过诱导胚性愈伤组织后分化产生不定芽,继而获得大量丛生苗,可达到快速繁殖的目的。因此,可通过该途径进行麻花秦艽的生物技术育苗,继而推动麻花秦艽的人工栽培。 展开更多
关键词 麻花秦艽 胚性愈伤组织 诱导 植株再生
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红松PkSERKs基因克隆及在不同类型愈伤组织中的表达分析
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作者 梁艳 王宇含 +3 位作者 赵雪莹 马天意 贯春雨 周璐 《中南林业科技大学学报》 北大核心 2025年第8期1-11,94,共12页
【目的】通过克隆红松PkSERKs基因,分析其表达特性,为研究该基因在红松体胚发生中的功能奠定基础。【方法】克隆红松PkSERK1~3基因的编码区序列(CDS)全长,采用生物信息学分析方法分析其蛋白结构、理化性质、进化关系,利用绿色荧光蛋白(G... 【目的】通过克隆红松PkSERKs基因,分析其表达特性,为研究该基因在红松体胚发生中的功能奠定基础。【方法】克隆红松PkSERK1~3基因的编码区序列(CDS)全长,采用生物信息学分析方法分析其蛋白结构、理化性质、进化关系,利用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术进行亚细胞定位,同时采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)技术研究3个红松PkSERKs基因在7种类型红松愈伤组织中的表达模式。【结果】成功克隆PkSERK1、PkSERK2和PkSERK3基因,其cDNA全长分别为1824、1887和1437 bp,分别编码607、628和448个氨基酸。PkSERK1为酸性的亲水性稳定蛋白,PkSERK2为酸性的亲水性不稳定蛋白,PkSERK3为碱性的亲水性不稳定蛋白;PkSERK1和PkSERK2有1个信号肽,而PkSERK3没有信号肽;3个蛋白均为跨膜蛋白。PkSERK1、PkSERK2、PkSERK3分别与杉木ClSERK1~3、茶树CsSERK1-like、柳杉CjSERK3亲缘关系最近。PkSERK1和PkSERK2定位在细胞膜,PkSERK3定位在细胞膜和细胞核。qRT-PCR分析结果表明,PkSERK1基因在红松高胚性的愈伤组织和含球形胚的愈伤组织中均高表达;PkSERK2在褐化的愈伤组织中高表达;PkSERK3仅在高胚性的愈伤组织中高表达。【结论】从红松中克隆获得PkSERK1、PkSERK2、PkSERK3基因,PkSERK1可能在红松愈伤组织胚性的保持及早期球形胚分化中起作用,高水平的PkSERK2可能与红松胚性愈伤组织(Embryogenic callus,EC)褐化及球形胚分化有关,PkSERK3可能仅在红松愈伤组织胚性的保持中起作用。 展开更多
关键词 红松 体细胞胚发生 胚性愈伤组织 PkSERKs 基因克隆 表达分析
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秋水仙素诱导桑树愈伤组织、萌发种子和绿枝形成四倍体桑树的研究
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作者 刘伟强 谢振奖 《种业导刊》 2025年第2期71-75,共5页
为建立秋水仙素诱导桑树组织形成四倍体桑树的诱导体系,选用传统桑树品种沙2×伦109,以桑树愈伤组织、萌发种子和绿枝作为诱导材料,筛选秋水仙素诱导桑树愈伤组织形成四倍体桑树的适宜质量浓度,以及秋水仙素诱导桑树萌发种子和绿枝... 为建立秋水仙素诱导桑树组织形成四倍体桑树的诱导体系,选用传统桑树品种沙2×伦109,以桑树愈伤组织、萌发种子和绿枝作为诱导材料,筛选秋水仙素诱导桑树愈伤组织形成四倍体桑树的适宜质量浓度,以及秋水仙素诱导桑树萌发种子和绿枝形成四倍体桑树的最佳质量浓度和浸泡处理时间。结果表明,秋水仙素质量浓度为10 mg/L时诱导桑树愈伤组织形成四倍体桑树的效果最好,诱导率达到2.67%;秋水仙素质量浓度为5 mg/L、浸泡萌发种子48 h诱导形成四倍体桑树效果最好,诱导率达到29.00%;秋水仙素质量浓度为15 mg/L、浸泡绿枝24 h诱导形成四倍体桑树效果最好,诱导率达到16.67%。适宜的秋水仙素质量浓度和浸泡处理时间对培育四倍体桑树品种及桑树多倍体育种具有重要意义。 展开更多
关键词 桑树 四倍体 愈伤组织 萌发种子 绿枝
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2种野生芍药茎段愈伤组织诱导研究 被引量:1
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作者 崔雅琦 陈曦 +3 位作者 王梅婷 刘晓菲 董刚强 于晓南 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第1期128-136,共9页
本研究以窄叶芍药(Paeonia anomala,又名新疆芍药)和块根芍药(Paeonia intermedia)2个芍药野生种的茎段为主要试验材料,在1/2 MS(Murashige&Skoog)培养基中添加6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine, 6-BA)、萘乙酸(naphthalene acetic... 本研究以窄叶芍药(Paeonia anomala,又名新疆芍药)和块根芍药(Paeonia intermedia)2个芍药野生种的茎段为主要试验材料,在1/2 MS(Murashige&Skoog)培养基中添加6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine, 6-BA)、萘乙酸(naphthalene acetic acid, NAA)、噻苯隆(thidiazuron, TDZ)、2,4-二氯苯氧乙酸(2, 4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)等植物生长调节剂,研究影响芍药茎段愈伤组织诱导和增殖的主要因素。结果表明:不同芍药品种的愈伤组织诱导效果存在差异,其中窄叶芍药的诱导效果最好,其愈伤组织诱导率最高。窄叶芍药愈伤组织诱导的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,块根芍药愈伤组织诱导的最佳培养基为1/2 MS+TDZ 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L。窄叶芍药愈伤组织增殖的最佳培养基为1/2 MS+2,4-D 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,块根芍药愈伤组织增殖的最佳培养基为1/2 MS+TDZ 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。本研究不仅为今后的研究提供了理论参考,而且为寻找野生芍药繁殖保护的新途径提供了可能。 展开更多
关键词 芍药 野生种 茎段 愈伤组织 诱导 植物组织培养
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‘突尼斯软籽’石榴叶片愈伤组织诱导条件研究 被引量:1
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作者 王虹 贾毛毛 +4 位作者 陶爱丽 李玉英 源朝政 杨玲 高小峰 《中国果菜》 2025年第2期51-55,共5页
为了开展石榴遗传转化研究,以‘突尼斯软籽’石榴为试材,叶片为外植体,采用响应面回归分析方法研究了不同生长调节物质对离体叶片愈伤组织再生的影响。结果表明,‘突尼斯软籽’石榴叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-... 为了开展石榴遗传转化研究,以‘突尼斯软籽’石榴为试材,叶片为外植体,采用响应面回归分析方法研究了不同生长调节物质对离体叶片愈伤组织再生的影响。结果表明,‘突尼斯软籽’石榴叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率可达83.9%,且愈伤组织生长状况良好。本研究建立了‘突尼斯软籽’石榴高效的离体快繁体系,为石榴繁育技术的改善提供了理论依据。 展开更多
关键词 ‘突尼斯软籽’石榴 植物生长调节剂 愈伤组织 响应面法
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外源黄酮对红松胚性愈伤组织增殖和体胚发生的影响
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作者 郭文慧 王越 +5 位作者 吴琳 杨剑飞 杨玲 张鹏 吴海波 沈海龙 《植物研究》 北大核心 2025年第1期130-138,共9页
黄酮在植物体胚发生过程中扮演重要角色。为了探究黄酮对红松(Pinus koraiensis)体胚发生的作用效果,该研究以红松胚性愈伤组织为试材,通过添加不同浓度、不同种类黄酮(槲皮素、柚皮素、儿茶素)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)抑制剂2-氨基茚满-2... 黄酮在植物体胚发生过程中扮演重要角色。为了探究黄酮对红松(Pinus koraiensis)体胚发生的作用效果,该研究以红松胚性愈伤组织为试材,通过添加不同浓度、不同种类黄酮(槲皮素、柚皮素、儿茶素)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)抑制剂2-氨基茚满-2-膦酸盐酸盐,测定处理后胚性愈伤组织增殖率、体胚数量及氧化胁迫相关指标变化。结果表明:胚性愈伤组织的增殖率随着外源黄酮浓度的升高逐渐降低,而体胚诱导数量先升高后降低,体胚产生数量在20μmol⋅L^(-1)的外源黄酮处理下达到最高。黄酮能够降低胚性愈伤组织中总活性氧水平(ROS)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽过氧化物酶活性(GPX)。综上所述,外源黄酮主要通过影响胚性愈伤组织氧化胁迫水平,调控细胞增殖及胚性愈伤组织分化进程,促进红松体胚形成。 展开更多
关键词 红松 胚性愈伤组织 黄酮 体胚发生 氧化胁迫指标
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山银花‘金翠蕾’愈伤组织诱导及植物生长调节剂2,4-D对愈伤组织中绿原酸质量分数的影响
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作者 陈蓉 罗景鸣 +5 位作者 胡辉亮 申莹莹 彭国平 饶力群 刘实 汪启明 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期44-50,96,共8页
为构建山银花‘金翠蕾’愈伤组织诱导体系并分析植物生长调节剂2,4–二氯苯氧乙酸(2,4-D)对愈伤组织中绿原酸质量分数的影响,以‘金翠蕾’幼叶为外植体诱导愈伤组织,比较不同质量浓度生长调节剂组合对愈伤组织生长量的影响,并分析不同... 为构建山银花‘金翠蕾’愈伤组织诱导体系并分析植物生长调节剂2,4–二氯苯氧乙酸(2,4-D)对愈伤组织中绿原酸质量分数的影响,以‘金翠蕾’幼叶为外植体诱导愈伤组织,比较不同质量浓度生长调节剂组合对愈伤组织生长量的影响,并分析不同质量浓度2,4-D对愈伤组织中绿原酸质量分数和绿原酸合成关键基因表达的影响。结果表明:在0.6 mg/L激动素+1.0 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L 6-苄基腺嘌呤组合下30 d‘金翠蕾’愈伤组织生长量最高,为5.505 g。2,4-D对愈伤组织绿原酸质量分数的影响表现为低浓度促进、高浓度抑制,当2,4-D质量浓度为1mg/L时绿原酸质量分数最高,为26.224 mg/g;2,4-D处理能促进绿原酸合成关键基因HQT与CCoAOMT的表达,说明施加适量植物生长调节剂2,4–D能提升山银花愈伤组织的绿原酸质量分数。 展开更多
关键词 山银花‘金翠蕾’ 愈伤组织 2 4-二氯苯氧乙酸 绿原酸
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强抗寒甘蓝型冬油菜愈伤组织体系构建及ROS信号传导规律探究
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作者 祁伟亮 孙万仓 +5 位作者 邓素敏 高雪梅 马骊 李妮 张雅 杨财容 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第2期311-318,共8页
为了解活性氧(ROS)介导甘蓝型冬油菜愈伤组织生长发育中的作用机制,以甘蓝型冬油菜16VHNTS309为材料,分别以其下胚轴和幼叶作为外植体,构建甘蓝型油菜的再生体系,并对愈伤组织进行(ROS)O_(2)^(-)信号定位。结果表明:幼叶和下胚轴分别在M... 为了解活性氧(ROS)介导甘蓝型冬油菜愈伤组织生长发育中的作用机制,以甘蓝型冬油菜16VHNTS309为材料,分别以其下胚轴和幼叶作为外植体,构建甘蓝型油菜的再生体系,并对愈伤组织进行(ROS)O_(2)^(-)信号定位。结果表明:幼叶和下胚轴分别在MS+1 mg/L和1.5 mg/L 2,4-D培养基预培养7 d后,再以MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+3 mg/L AgNO_(3)为最优培养基进行芽的诱导,最后以MS+0.2 mg/L NAA为生根培养基,可得到较好的甘蓝型油菜再生苗。ROS(O_(2)^(-))信号定位结果表明:具有分裂能力的愈伤组织细胞、顶端分生组织细胞和叶或茎边缘组织细胞会检测到大量的ROS(O_(2)^(-))信号,而已完成芽体分化或未形成愈伤组织的细胞周围,未检测到ROS(O_(2)^(-))信号,该研究结果进一步说明ROS(O_(2)^(-))信号在细胞分裂过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 幼叶 下胚轴 愈伤组织 活性氧 信号传导
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长期继代培养的楸树胚性愈伤组织难以分化的成因
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作者 赵珊 董静 +3 位作者 郑帅 陈发菊 刘文 梁宏伟 《林业科学》 北大核心 2025年第6期130-138,共9页
【目的】探究长期继代下楸树胚性愈伤组织难以分化再生的发生机制,为楸树体细胞胚胎发生体系的分化再生和遗传稳定性提供理论基础。【方法】以新诱导的非胚性愈伤组织和初代胚性愈伤组织、继代培养7年的胚性愈伤组织为材料,开展细胞倍... 【目的】探究长期继代下楸树胚性愈伤组织难以分化再生的发生机制,为楸树体细胞胚胎发生体系的分化再生和遗传稳定性提供理论基础。【方法】以新诱导的非胚性愈伤组织和初代胚性愈伤组织、继代培养7年的胚性愈伤组织为材料,开展细胞倍性、差异表达基因及内源激素水平分析。【结果】1)通过染色体计数发现,初代胚性愈伤组织染色体保持二倍体状态(2n=40),而连续培养7年的胚性愈伤组织染色体数目发生了加倍现象,染色体数目为80~162;流式细胞仪鉴定发现连续培养7年的胚性愈伤DNA含量相比楸树实生苗增加3倍,其细胞倍性为六倍体。2)通过对转录组数据的GO和KEGG富集分析,发现差异表达基因显著富集在植物激素激活信号通路、转录调控、MAPK信号通路、发育过程的调控等通路,其中响应生长素信号的SAUR、ARF、AUX/IAA、GH3,脱落酸受体PYR/PYL,胞外蛋白AGP,转录因子ABI3等促进体胚分化发生的基因表达均下调,而乙烯合成抑制因子ETO1则表达上调。3)内源激素水平分析表明,连续继代7年的胚性愈伤组织中IAA和ABA的含量显著低于新诱导的胚性愈伤组织,这与其参与植物激素信号转导基因的下调表达相对应,而高水平的IAA和ABA可能是调控体细胞胚胎发生的关键。【结论】楸树胚性愈伤组织在长期继代过程中发生的染色体加倍、促进体胚发生相关基因的异常表达以及内源激素水平的显著下降,可能是造成其难以分化再生的根本原因。 展开更多
关键词 楸树 胚性愈伤组织 染色体加倍 转录组测序 内源激素
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藜麦ANT基因家族的鉴定及其在愈伤组织中的表达分析
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作者 高爱红 张侠 +5 位作者 曹萌 安珂欣 尹海波 郭善利 张平 赵波 《山东农业科学》 北大核心 2025年第4期22-31,共10页
ANT/euANT(AINTEGUMENTA)是一类仅存在于植物中的APETALA2(AP2)型转录因子,隶属于AP2/EREBP家族。本研究利用藜麦基因组数据库,对藜麦ANT基因家族进行鉴定和生物信息学分析,并通过qRT-PCR分析藜麦ANT基因家族成员在不同愈伤组织与芽中... ANT/euANT(AINTEGUMENTA)是一类仅存在于植物中的APETALA2(AP2)型转录因子,隶属于AP2/EREBP家族。本研究利用藜麦基因组数据库,对藜麦ANT基因家族进行鉴定和生物信息学分析,并通过qRT-PCR分析藜麦ANT基因家族成员在不同愈伤组织与芽中的表达。结果表明,在藜麦中共鉴定出13个含有两个AP2保守结构域的ANT基因家族成员,不均匀地分布在藜麦9条染色体上,根据在染色体上的位置将其分别命名为CqANT1—CqANT13。它们编码蛋白的氨基酸长度为244~710 aa,分子量为27.20~77.22 kDa,等电点为5.57~9.21,为不稳定的亲水蛋白,均定位于细胞核。基因共线性分析发现12个CqANT基因组成6对片段复制,未鉴定到串联复制事件。启动子顺式作用元件分析发现,藜麦ANT家族成员的启动子区含有多种激素和环境响应元件,暗示其参与调控藜麦的非生物胁迫及激素信号级联体调控应答等过程。其与双子叶植物拟南芥的ANT同源性较高;表达模式分析结果表明,藜麦ANT基因的表达具有组织特异性,并对非生物胁迫具有一定响应;藜麦ANT基因在发生芽和不同愈伤组织中均有一定的表达,说明其在芽与愈伤组织诱导和维持中发挥重要作用。本研究结果可为进一步揭示藜麦ANT基因的功能和调控机制提供依据。 展开更多
关键词 藜麦 ANT基因家族 生物信息学分析 愈伤组织表达
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香瓜茄茎段愈伤组织离体再生体系的建立
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作者 别赵微 詹得利 +3 位作者 曹云河 吴雨江 王丽慧 杨世鹏 《中国蔬菜》 北大核心 2025年第4期116-125,共10页
以青海地区香瓜茄(人参果)栽培品种青灿香脱毒苗为试验材料,探究不同消毒处理对香瓜茄茎段外植体的消毒效果以及不同激素配比对愈伤组织形成、不定芽和不定根分化的影响。结果表明,0.1%升汞处理香瓜茄茎段外植体8 min,污染率和死亡率最... 以青海地区香瓜茄(人参果)栽培品种青灿香脱毒苗为试验材料,探究不同消毒处理对香瓜茄茎段外植体的消毒效果以及不同激素配比对愈伤组织形成、不定芽和不定根分化的影响。结果表明,0.1%升汞处理香瓜茄茎段外植体8 min,污染率和死亡率最低;香瓜茄茎段试管苗快繁时最适合使用不含外源激素的MS培养基;诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+1 mg·L^(-1)NAA或MS+2 mg·L^(-1)6-BA+2 mg·L^(-1)KT,诱导率与愈伤组织量都较高;愈伤组织不定芽分化最佳培养基为MS+2 mg·L^(-1)6-BA+1 mg·L^(-1)KT,分化率达98.50%,共获取180株再生苗母株(愈伤组织未继代),后续经快繁处理,再生苗与母株皆未出现显著的形态变异;诱导不定根分化的最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)IBA。研究结果为香瓜茄主栽品种青灿香离体再生和遗传转化体系的构建提供了技术支持。 展开更多
关键词 香瓜茄 人参果 茎段 愈伤组织 离体再生
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毛竹种子愈伤组织诱导和增殖研究 被引量:1
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作者 袁斯齐 邹欢欢 +3 位作者 李子叶 钟红 刘春霞 邹娜 《农业与技术》 2025年第14期104-108,共5页
为了提高毛竹愈伤组织诱导和增殖效率,以毛竹种子为外植体,探究植物生长调节剂种类与浓度、氮源浓度对愈伤组织诱导和增殖的影响。结果表明,最佳诱导培养基为MS加8mg·L^(-1)2,4-D加1mg·L^(-1)ZT,愈伤组织在含4.0mg·L^(-1... 为了提高毛竹愈伤组织诱导和增殖效率,以毛竹种子为外植体,探究植物生长调节剂种类与浓度、氮源浓度对愈伤组织诱导和增殖的影响。结果表明,最佳诱导培养基为MS加8mg·L^(-1)2,4-D加1mg·L^(-1)ZT,愈伤组织在含4.0mg·L^(-1)2,4-D的MS培养基上培养30d后转至无植物生长物质添加的MS培养基上,增殖效率为86.08%;当总氮浓度为30mmol·L^(-1)时,愈伤组织诱导率最高为82.14%;当总氮浓度为90mmol·L^(-1)时,愈伤组织增殖率最高为181.35%。本研究优化了毛竹种子愈伤组织诱导和增殖的培养条件,可为毛竹遗传改良研究提供受体材料和技术支持。 展开更多
关键词 毛竹 植物生长调节物质 氮浓度 愈伤组织诱导 增殖
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香榧胚性愈伤组织的悬浮培养动力学及对赤霉素的响应
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作者 杨正宇 周佳君 +1 位作者 胡恒康 张启香 《浙江农林大学学报》 北大核心 2025年第1期103-111,共9页
【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚性愈伤组织为试验材料,对其悬浮细胞的生长以及悬浮培养动力学进行研究,探究香榧胚性愈伤组织对赤霉素的响应。【方法】以实验室培育的香榧胚性愈伤组织为试验材料,通过测定细胞活力、细... 【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚性愈伤组织为试验材料,对其悬浮细胞的生长以及悬浮培养动力学进行研究,探究香榧胚性愈伤组织对赤霉素的响应。【方法】以实验室培育的香榧胚性愈伤组织为试验材料,通过测定细胞活力、细胞鲜质量进行悬浮培养动力学的研究,优化培养条件,并对施加外源赤霉素A3 (GA3)的愈伤组织进行转录组分析。【结果】(1)在培养周期内,悬浮细胞的鲜质量增长呈“S”型曲线,细胞活力在3 d时达最高值后平稳下降。(2)香榧悬浮细胞培养最佳继代周期为9~12 d,最佳接种量为30 g·L^(-1),培养基最佳初始pH为5.7,最佳摇床转速为110r·min^(-1)。(3)对外源GA3处理后的香榧胚性愈伤组织进行转录组分析,共获得差异表达基因428个,其中上调基因236个,下调基因192个。在差异基因的GO富集分析中,GA3处理后上调表达基因主要参与催化活性、氧化还原过程、氧化还原酶活性等,在KEGG代谢通路中,差异表达基因主要富集在苯丙烷类生物合成、木栓质生物合成等途径中。【结论】香榧胚性愈伤组织培养动力学分析能获得最佳接种时期,优化培养条件能提高其细胞增长率及抗逆性,外源GA3处理下的香榧胚性愈伤组织细胞中,苯丙烷生物合成、木栓质生物合成等代谢通路为差异基因主要参与部分,且部分关键基因表达量变化可能在香榧愈伤组织生长发育、适应环境及应对胁迫中发挥重要作用。 展开更多
关键词 香榧 胚性愈伤组织 悬浮培养 赤霉素
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米槁胚性愈伤组织玻璃化法超低温保存体系的建立
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作者 陈宇凡 吴媛 +4 位作者 林亮 杨湘云 帅甜 丁宁 吴之坤 《种子》 北大核心 2025年第5期16-25,35,共11页
为了建立米槁胚性愈伤组织超低温保存体系,解决米槁种质资源长期保存困难的问题,以米槁胚性愈伤组织为材料,采用玻璃化法对其进行超低温保存,研究冷冻保护剂种类和脱水时间对米槁胚性愈伤组织存活率、再生率和恢复能力的影响,并测试了... 为了建立米槁胚性愈伤组织超低温保存体系,解决米槁种质资源长期保存困难的问题,以米槁胚性愈伤组织为材料,采用玻璃化法对其进行超低温保存,研究冷冻保护剂种类和脱水时间对米槁胚性愈伤组织存活率、再生率和恢复能力的影响,并测试了恢复生长的愈伤组织体胚发生能力。结果表明,适宜米槁胚性愈伤组织的冷冻保护剂为PVS_(2),PVS_(2)处理70 min细胞存活率最高,为80.21%;适合米槁胚性愈伤组织超低温保存方法为Loading(WPM+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖)25℃处理20 min, PVS_(2)(WPM+30%甘油+0.4 mol/L蔗糖+15%乙二醇+15%二甲基亚砜)0℃处理10 min, 40℃水浴解冻2 min, Unloading(WPM+1.2 mol/L蔗糖)25℃处理20 min。除PVS_(2)脱水处理0 min外,其余处理下均可以获得100%再生率。冻存后的子叶胚和成熟胚分化比例均高于未冻存的胚性愈伤组织,经冻存后的胚性愈伤组织与未冻存的胚性愈伤组织分化出的体胚形态上并没有差异,说明胚性愈伤组织可以作为米槁种质资源的超低温冻存材料进行超低温长期冻存。 展开更多
关键词 米槁 胚性愈伤组织 超低温保存 玻璃化法
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二倍体青钱柳愈伤组织诱导及次生代谢物积累
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作者 李卓穗 高一琳 +1 位作者 刘寒 尚旭岚 《植物研究》 北大核心 2025年第4期533-545,共13页
为探索激素组合对二倍体青钱柳(Cyclocarya paliurus)愈伤组织诱导和增殖的影响,以及继代增殖过程中主要次生代谢产物的积累规律,该研究以二倍体青钱柳叶片为外植体材料,采用正交试验设计,研究不同激素组合对愈伤组织诱导和继代增殖过... 为探索激素组合对二倍体青钱柳(Cyclocarya paliurus)愈伤组织诱导和增殖的影响,以及继代增殖过程中主要次生代谢产物的积累规律,该研究以二倍体青钱柳叶片为外植体材料,采用正交试验设计,研究不同激素组合对愈伤组织诱导和继代增殖过程中次生代谢物积累的影响,以总三萜、总多酚、总黄酮、粗多糖产量为指标,采用熵权法筛选优良继代配方。处理2(0.5 mg·L^(-1)6-BA+1 mg·L^(-1)2,4-D+0.2 mg·L^(-1)NAA)下二倍体青钱柳愈伤组织诱导率最高,为100%,其次是处理9(2.5 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)2,4-D+0.2 mg·L^(-1)NAA)和处理5(1.5 mg·L^(-1)6-BA+1 mg·L^(-1)2,4-D+0.4 mg·L^(-1)NAA),愈伤组织诱导率分别为96.67%、93.64%。影响诱导率的因素主次顺序为2,4-D>NAA>6-BA,2,4-D最佳质量浓度为1.0 mg·L^(-1),NAA最佳质量浓度为0.2 mg·L^(-1),6-BA无显著影响;诱导出的愈伤组织颜色有嫩绿色、黄绿色,愈伤组织形态均呈现疏松质地。采用不同激素组合配方进行继代增殖,各处理的愈伤组织生长及代谢产物积累存在差异,同一处理下不同继代增殖过程中愈伤组织生长性状变化也较大;按综合得分排序第1的配方为处理4(0.2 mg·L^(-1)KT+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.75 mg·L^(-1)NAA+0.4 mg·L^(-1)2,4-D),得分为0.44,其次是处理2(0.75 mg·L^(-1)6-BA+0.75 mg·L^(-1)NAA+0.2 mg·L^(-1)2,4-D)和处理6(0.2 mg·L^(-1)KT+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)NAA+0.2 mg·L^(-1)2,4-D),综合得分分别为0.31、0.26。处理4下愈伤组织继代培养至第8代时,主要次生代谢物产量普遍达到较高水平,总三萜产量为28.91 mg·瓶-1,总多酚产量为6.89 mg·瓶-1,总黄酮产量为1.77 mg·瓶-1,粗多糖产量为57.45 mg·瓶-1。综上,最佳的二倍体青钱柳愈伤组织诱导配方为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)2,4-D+0.2 mg·L^(-1)NAA,继代增殖配方为MS+0.2 mg·L^(-1)KT+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.75 mg·L^(-1)NAA+0.4 mg·L^(-1)2,4-D。该研究可为利用青钱柳愈伤组织培养及进一步的细胞悬浮培养生产次生代谢物提供参考。 展开更多
关键词 青钱柳 愈伤组织诱导 植物激素 继代增殖 次生代谢物
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不同来源外植体及培养条件对中国沙棘愈伤组织诱导的影响
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作者 刘若琪 马光花 +1 位作者 冯菊英 马玉花 《种子》 北大核心 2025年第6期246-252,共7页
为探讨3种不同来源的中国沙棘(Hippophae rhamnoides subsp.sinensis)外植体及多种培养条件对愈伤组织诱导的影响,选取无菌实生苗、浸种实生苗及野外带芽茎段作为外植体,通过对外植体的不同处理和培养,筛选诱导中国沙棘愈伤组织的最佳... 为探讨3种不同来源的中国沙棘(Hippophae rhamnoides subsp.sinensis)外植体及多种培养条件对愈伤组织诱导的影响,选取无菌实生苗、浸种实生苗及野外带芽茎段作为外植体,通过对外植体的不同处理和培养,筛选诱导中国沙棘愈伤组织的最佳外植体来源及培养条件。结果表明,不同来源外植体在愈伤组织诱导上存在显著差异,其中无菌实生苗诱导率最高,达76.11%,而野外带芽茎段的效果最差。培养条件对植株的生长及愈伤组织的诱导效果也有显著影响,1/2 MS培养基作为基本培养基植株生长表现最佳,适当的消毒时间和暗培养时间能够显著提高愈伤组织的诱导率,而活性炭的影响不显著。研究表明,无菌实生苗是中国沙棘愈伤组织诱导的最佳外植体来源。通过优化消毒时间、选择合适的培养基以及调整暗培养时间等,可显著提高愈伤组织的诱导率。 展开更多
关键词 中国沙棘 外植体 愈伤组织 组织培养
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东北道地药材党参愈伤组织培养条件的优化及多糖的抗肿瘤活性研究 被引量:1
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作者 高铭泽 田海燕 +3 位作者 王祺瑶 徐贵国 凌娜 汲晨锋 《特产研究》 2025年第1期129-135,共7页
本研究旨在筛选出适于党参愈伤组织培养的影响因素,为党参组织培养体系的建立提供理论依据。通过对党参的不同部位诱导产生愈伤组织,采用正交试验法筛选获得诱导率最高的外植体、最佳外植体龄、最适培养基、最佳激素配比、最适温度、最... 本研究旨在筛选出适于党参愈伤组织培养的影响因素,为党参组织培养体系的建立提供理论依据。通过对党参的不同部位诱导产生愈伤组织,采用正交试验法筛选获得诱导率最高的外植体、最佳外植体龄、最适培养基、最佳激素配比、最适温度、最适光照周期等影响因素,并对不同培养条件下党参愈伤组织多糖含量进行测定以及MTT法对党参多糖抗肿瘤活性进行研究。结果表明,叶片和茎段为外植体产生的愈伤组织最多,诱导率分别为90.67%和88%;多糖含量分别为127.54 mg/g和108.39 mg/g;28 d时叶片和茎段的诱导率达到最大值,分别为88.67%和84.67%,多糖含量为125.04 mg/g和104.22 mg/g;MS培养基明显优于其他几种培养基,诱导率达到92%,多糖含量为127.54 mg/g;在15~25℃时,诱导率急剧增加,并在25℃时诱导率达到最大值90.67%,多糖含量为162.45 mg/g;光照周期为6 h/d,愈伤组织诱导率为85.33%,多糖含量为102.45 mg/g。当激素组合为2,4-D 1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1 mg/L,诱导率为98.67%,多糖含量最高为172.95 mg/g。此外,愈伤组织多糖对人乳腺癌MCF-7细胞和人宫颈癌HeLa细胞具有显著的生长抑制活性,作用48 h的IC50值分别为84.39 mg/L和164.78 mg/L。党参愈伤组织诱导的最佳外植体为叶片和茎段,最佳外植体龄为28 d,最佳培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1mg/L;25℃和6 h/d的光周期为其最适培养温度与光照条件。党参愈伤组织中提取的多糖具有显著的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 党参 组织培养 愈伤组织 多糖 抗肿瘤
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不同光照强度对葡萄果皮愈伤组织的影响
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作者 强晓禾 向薪安 +1 位作者 童娟 代红军 《宁夏农林科技》 2025年第2期44-48,共5页
以葡萄果皮为外植体,研究不同光照强度对葡萄果皮愈伤组织的影响,筛选出最适宜葡萄愈伤组织生长的光照强度,为后续遗传转化等研究提供技术参考。结果表明:在低光照强度5000 lx和强光照强度20000 lx下,葡萄果皮愈伤组织生长不良或呈松散... 以葡萄果皮为外植体,研究不同光照强度对葡萄果皮愈伤组织的影响,筛选出最适宜葡萄愈伤组织生长的光照强度,为后续遗传转化等研究提供技术参考。结果表明:在低光照强度5000 lx和强光照强度20000 lx下,葡萄果皮愈伤组织生长不良或呈松散雪花状,生长状况差,SOD、POD、CAT活性、花色苷含量均较低,MDA含量均较高。在光照强度15000 lx下,愈伤组织呈黄绿色颗粒状,生长状况好且褐化率低,SOD、POD、CAT活性、花色苷含量均较高,MDA含量最低。综上所述,说明过高或过低的光照都不利于葡萄果皮愈伤组织生长,本试验条件下葡萄果皮愈伤组织生长适宜光照强度为15000 lx。 展开更多
关键词 葡萄 愈伤组织 光照强度 花色苷 酶活性
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云南金花茶叶片愈伤组织诱导研究
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作者 田自能 陈思慧 +1 位作者 王何泽 唐军荣 《福建农业科技》 2025年第5期41-47,共7页
为筛选云南金花茶叶片愈伤组织诱导培养基配方,以云南金花茶组培苗的叶片为材料,探讨激素、光照、放置方式对叶片愈伤组织诱导的影响,通过正交试验优化愈伤组织诱导培养基配方。结果表明:叶片背面与培养基接触、全程暗培养的方式最有利... 为筛选云南金花茶叶片愈伤组织诱导培养基配方,以云南金花茶组培苗的叶片为材料,探讨激素、光照、放置方式对叶片愈伤组织诱导的影响,通过正交试验优化愈伤组织诱导培养基配方。结果表明:叶片背面与培养基接触、全程暗培养的方式最有利于云南金花茶叶片愈伤组织的诱导,叶片愈伤组织诱导最佳培养基配方为1/2MS+45 g·L^(-1)蔗糖+3.0 mg·L^(-1)NAA。研究建立了云南金花茶叶片愈伤组织诱导技术体系,为下一步开发愈伤组织遗传转化体系奠定了前期基础。 展开更多
关键词 云南金花茶 愈伤组织 诱导 植物生长调节剂
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