微丝骨架结合蛋白在未成熟树突状细胞抗原吞噬过程中的差异表达分析

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作者 李道红 罗代琴 +8 位作者 曾宪琳 张帅 徐朴 吴翠芳 王赟 叶远浓 胡祖权 龙金华 曾柱 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期814-822,共9页

目的探讨未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)发挥抗原吞噬功能时关键微丝骨架结合蛋白(microfilament cytoskeleton-binding proteins,MCBPs)的差异表达情况。方法从健康人外周血中分离单核细胞(monocytes,MOs),经重组人... 目的探讨未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)发挥抗原吞噬功能时关键微丝骨架结合蛋白(microfilament cytoskeleton-binding proteins,MCBPs)的差异表达情况。方法从健康人外周血中分离单核细胞(monocytes,MOs),经重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF)、重组人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导培养6天获得imDCs;将imDCs与低分子量(40 kDa)和高分子量(150 kDa)的右旋糖酐分别孵育1、3和6 h,流式细胞仪检测imDCs吞噬右旋糖酐的比率及免疫表型分子的表达;免疫荧光检测丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)及PFN1、WASP、α-actinin在细胞中的定位情况;qPCR和Western blotting分别检测MCBPs在mRNA和蛋白水平的表达差异;最后,基于系统生物学算法中的逐步回归和主成分分析方法筛选成分系数最大的MCBPs。结果在吞噬抗原的过程中,imDCs对低分子量抗原的吞噬速度更快,吞噬时长可维持约3 h,其细胞表型和细胞形态逐渐向mDCs分化,且F-actin发生明显的重塑,PFN1、CDM、WASP、CAPZB、Filamin A、α-actinin等MCBPs的表达下调,WAVE1、Arp2/3复合体、Fascin的表达上调;信号蛋白Rac1的mRNA表达上调,CDC42和RhoA的mRNA表达下调;免疫荧光结果显示,PFN1、WASP、α-actinin在imDCs吞噬抗原过程中发生转位;逐步回归和主成分分析结果显示PFN1的成分系数最大。结论PFN1可能是imDCs吞噬抗原过程中的关键MCBPs,这对于深入理解imDCs细胞骨架结构变化与免疫学功能之间的关系具有重要意义。 展开更多

关键词 未成熟树突状细胞 吞噬 微丝骨架 微丝骨架结合蛋白 系统生物学

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抗肿瘤纳米药物多尺度递送过程中微丝骨架的功能与调控机制研究

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作者 吴昊 严然 +3 位作者 李苹 陈世桓 李亭亭 刘贻尧 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期240-240,共1页

目的纳米药物递送是一个以靶细胞为终点,细胞外基质(ECM)参与密切调控的跨尺度力学-生物学耦合过程。肿瘤ECM作为肿瘤进展过程中特化的结构支撑,其高密度、高固体应力、高刚度的力学微环境已成为阻碍纳米药物递送的严峻挑战。因此,本研... 目的纳米药物递送是一个以靶细胞为终点,细胞外基质(ECM)参与密切调控的跨尺度力学-生物学耦合过程。肿瘤ECM作为肿瘤进展过程中特化的结构支撑,其高密度、高固体应力、高刚度的力学微环境已成为阻碍纳米药物递送的严峻挑战。因此,本研究期望通过理解基质力学如何影响纳米药物的递送,来探索能够克服肿瘤力学微环境障碍的纳米递送策略。方法通过构建刚度可调的PAA水凝胶和多细胞微图案模拟肝癌恶性进展中异质性的力学微环境,并通过BAPN腹腔注射建立刚度可调的皮下及原位肝癌移植瘤小鼠模型,从体内外水平开展研究。结果本研究明确了不同力学微环境中,肿瘤细胞微丝骨架的机械响应特性,阐明了基质刚度对纳米药物渗透及摄取的影响。软化肿瘤基质不仅创造了有利于纳米药物递送的ECM,还可抑制细胞微丝骨架的聚合,这些转变形成了有助于纳米药物穿透和内化到癌细胞中的跨尺度力学-生物学耦合条件,将纳米药物体内治疗效果提高了2.7倍。结论这些发现揭示了微丝骨架在ECM力学调控下的生物学响应对于优化纳米药物递送、提高肿瘤治疗效果中的重要意义。而“力-纳米”协同靶向的抗肿瘤药物递送策略,有望为克服肿瘤特异性力学微环境、促进纳米药物渗透和靶细胞摄取提供新的思路。 展开更多

关键词 药物递送 肿瘤治疗效果 纳米药物 肿瘤特异性 抑制细胞 抗肿瘤药物 微丝骨架 靶细胞

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反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架的影响 被引量：9

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作者 林珏龙 许丽艳 +6 位作者 李恩民 蔡唯佳 牛永东 方昆阳 熊华淇 沈忠英 曾毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期409-415,共7页

为了研究反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架以及肿瘤细胞生物学行为的影响 ,以不同长度NGAL基因片段反义表达载体和硫代修饰反义寡核苷酸单链片段转染SHEEC食管癌细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立一系列旨在封闭SHEEC食管癌细胞N... 为了研究反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架以及肿瘤细胞生物学行为的影响 ,以不同长度NGAL基因片段反义表达载体和硫代修饰反义寡核苷酸单链片段转染SHEEC食管癌细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立一系列旨在封闭SHEEC食管癌细胞NGAL基因表达的亚细胞克隆 .在细胞内F 肌动蛋白 (F actin)及DNA荧光双标记基础上 ,通过流式细胞术、激光共聚焦显微镜扫描术等技术手段检测封闭反义NGAL基因表达后 ,SHEEC食管癌细胞中F actin和DNA含量、F actin形态结构以及肿瘤细胞生物学行为的变化特征 .结果显示 ,反义封闭NGAL基因表达后 ,SHEEC食管癌细胞F actin的含量明显降低 ,与永生化食管上皮细胞SHEE相近 ,但细胞分裂增殖指数未见明显变化 .表明反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞的微丝骨架有明显影响 ,而对SHEEC食管癌细胞的分裂增殖影响不明显 .激光共聚焦显微镜扫描观测显示 ,反义封闭NGAL基因表达可使SHEEC食管癌细胞F actin分布均匀 ,F actin小体减少 ,细胞间连接重新建立 ,结构较紧密 ,主要形态结构特征与SHEE细胞趋于一致 .提示反义封闭NGAL基因表达可对SHEEC食管癌细胞的微丝骨架F actin产生明显影响 ,推测癌细胞的微丝骨架F 展开更多

关键词 微丝骨架 F-肌动蛋白 NGAL基因 SHEEC细胞 细胞周期

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微丝骨架与信号转导研究进展 被引量：11

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作者 雷宇华 闫芝芬 +1 位作者 严玉平 魏建昆 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2000年第1期37-41,共5页

微丝骨架作为细胞骨架的一种 ,它在细胞的许多功能活动中起重要作用。近年来 ,研究证明微丝骨架受信号转导的调节。动物细胞中存在着细胞外基质 (ECM ) 质膜 (PM ) 细胞骨架(CTK)连续体 ,胞内、外信号可以通过此连续体进行双向传递。... 微丝骨架作为细胞骨架的一种 ,它在细胞的许多功能活动中起重要作用。近年来 ,研究证明微丝骨架受信号转导的调节。动物细胞中存在着细胞外基质 (ECM ) 质膜 (PM ) 细胞骨架(CTK)连续体 ,胞内、外信号可以通过此连续体进行双向传递。研究还证明 ,植物细胞中存在细胞壁 (CW ) 质膜 (PM ) 细胞骨架 (CTK)连续体 ,并认为它类似于动物细胞中的ECM PM CTK连续体 ,有着相同的功能。 展开更多

关键词 微丝骨架 信号转导 肌动蛋白 连续性 又向传递

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EBP50影响HeLa细胞微丝骨架的分布和定位 被引量：4

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作者 郑君芳 王瑛 +1 位作者 陈鹏 贺俊崎 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期1192-1195,共4页

目的:通过研究与膜-细胞骨架连接蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)家族相结合的磷酸化蛋白50(ERM-binding phospho-protein-50,EBP50)对HeLa细胞微丝骨架含量、分布的影响及受血小板源性生长因子PDGF(platelet-derived growth factor)刺... 目的:通过研究与膜-细胞骨架连接蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)家族相结合的磷酸化蛋白50(ERM-binding phospho-protein-50,EBP50)对HeLa细胞微丝骨架含量、分布的影响及受血小板源性生长因子PDGF(platelet-derived growth factor)刺激后,微丝骨架在细胞中定位的变化及微丝骨架定位变化与EBP50的关系,阐明EBP50蛋白影响肿瘤细胞生长迁移的分子机制。方法:将pBK-CMV-HA空载体和pBK-CMV-HA-EBP50wt重组质粒分别转染HeLa细胞系,G418进行稳定表达细胞系的筛选,并用Western免疫印迹方法进行蛋白表达的鉴定;利用Western免疫印迹、免疫荧光细胞化学染色等方法结合光镜和激光共聚焦扫描显微镜分别观察和分析HA-HeLa与HA-EBP50-HeLa微丝骨架的含量及分布的异同;然后使用10ng/ml和20ng/mlPDGF37℃刺激细胞15min后,分别观察及分析两组细胞微丝骨架的分布情况及EBP50在细胞中定位的变化。结果:Western免疫印迹鉴定证实转染的外源性EBP50cDNA片段可在HeLa细胞系中成功表达EBP50蛋白,证明获得稳定表达EBP50蛋白的HeLa细胞系。Western免疫印迹及免疫荧光结果证实,转染空载pBK-CMV-HA的HeLa细胞微丝骨架粗大疏松,方向不一,交错排列;与其相比,EBP50虽然对HeLa细胞微丝骨架的含量没有明显影响,但能够促使细胞微丝骨架呈致密细丝状,平行规则排列,并沿细胞极性分布;并且在PDGF刺激下,EBP50能够与微丝骨架一起自胞浆迁移至膜上,并共定位。结论:EBP50能改变HeLa细胞微丝骨架的分布。在受到PDGF刺激时,EBP50还能使HeLa细胞系的微丝骨架定位于膜表面。EPB50可能通过影响微丝骨架的分布和定位来发挥其影响肿瘤细胞生长迁移的功能。 展开更多

关键词 微丝骨架 HELA细胞 EBP50

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软骨细胞微丝骨架的研究进展 被引量：3

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作者 王艳娉 杨俊龙 +1 位作者 张小梅 张源 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期376-379,共4页

微丝骨架是细胞骨架的主要成分之一,在细胞的多种生理活动中发挥着重要作用,包括细胞形态的改变、细胞器的转运、细胞迁移和粘附、细胞分泌和吞饮、细胞收缩环的形成、细胞外基质的形成等。相比其他细胞,软骨细胞的微丝骨架有很多独特之... 微丝骨架是细胞骨架的主要成分之一,在细胞的多种生理活动中发挥着重要作用,包括细胞形态的改变、细胞器的转运、细胞迁移和粘附、细胞分泌和吞饮、细胞收缩环的形成、细胞外基质的形成等。相比其他细胞,软骨细胞的微丝骨架有很多独特之处,但针对该方面的研究,国内缺乏系统与全面的总结。本文就软骨细胞微丝骨架的结构与分布、功能、影响因素及其与骨关节炎的关系作一综述。 展开更多

关键词 软骨细胞 微丝骨架 功能 影响因素 骨关节炎

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油松离体花粉管的生长及微丝骨架分布 被引量：2

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作者 尚峰男 宋少宇 +1 位作者 田菊 王君 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期34-38,共5页

采用离体培养结合荧光定位技术对油松花粉管生长特征和微丝骨架分布规律进行研究。结果表明:油松花粉离体萌发过程,除大量呈单一花粉管形态外,还存在异形花粉管,如具2条花粉管及分枝花粉管等;在适宜培养条件下,培养60h后萌发率趋于稳定(... 采用离体培养结合荧光定位技术对油松花粉管生长特征和微丝骨架分布规律进行研究。结果表明:油松花粉离体萌发过程,除大量呈单一花粉管形态外,还存在异形花粉管,如具2条花粉管及分枝花粉管等;在适宜培养条件下,培养60h后萌发率趋于稳定(91%以上),培养96h后花粉管长度逐渐趋于稳定(173μm以上);异形花粉管发生频率与花粉萌发率呈极显著正相关(r=0.7867,P=0.0041),花粉管分枝发生于管伸长至89.73(±3.44)μm处;在不同形态的花粉管中均有微丝骨架正常分布,并且推动花粉管细胞核和造粉体向花粉管顶端移动;在花粉管的透明区,微丝束呈现平行于花粉管的浓密网状结构,当花粉管生长较长时,微丝束有变得稀疏的趋势。 展开更多

关键词 油松 离体 花粉管生长 微丝骨架

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梨自交不亲和性反应S-RNase新靶点——微丝骨架 被引量：4

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作者 吴巨友 李启明 +1 位作者 王鹏 张绍铃 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期775-777,共3页

S-RNase是梨等配子体型自交不亲和性的雌蕊决定因子,属于RNase T2家族核糖核酸酶,其经典的功能是降解RNA。我们研究证实了S-RNase可以与微丝骨架蛋白Pbr Act1互作,解聚花粉管微丝骨架。同时,S-RNase诱导花粉管产生磷脂酸,抑制微丝骨架... S-RNase是梨等配子体型自交不亲和性的雌蕊决定因子,属于RNase T2家族核糖核酸酶,其经典的功能是降解RNA。我们研究证实了S-RNase可以与微丝骨架蛋白Pbr Act1互作,解聚花粉管微丝骨架。同时,S-RNase诱导花粉管产生磷脂酸,抑制微丝骨架的解聚,减缓自交不亲和花粉管细胞程序性死亡的进程。 展开更多

关键词 梨 自交不亲和 花粉管 微丝骨架

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微丝骨架动态参与花粉萌发的研究 被引量：4

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作者 徐霞 任海云 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2005年第3期7-11,共5页

利用改进的Alexphalloidin活细胞染色方法和激光共聚焦显微镜技术,观察川百合(LiliumdavidiiDuch)花粉原生质体极性形成及萌发过程中微丝骨架的列阵变化。结果表明,花粉原生质体从贮存状态,经过水合、极性形成至萌发花粉管,其微丝结构... 利用改进的Alexphalloidin活细胞染色方法和激光共聚焦显微镜技术,观察川百合(LiliumdavidiiDuch)花粉原生质体极性形成及萌发过程中微丝骨架的列阵变化。结果表明,花粉原生质体从贮存状态,经过水合、极性形成至萌发花粉管,其微丝结构从短小的梭形体,经过形成均匀的网状结构、向细胞边缘汇集的平行排列的束状结构,逐渐变成多层连续环绕细胞的微丝束结构。用酪氨酸磷酸酶抑制剂苯胂化氧(PAO)处理花粉原生质体,在微丝的汇合处,肌动蛋白聚集成小的团块,花粉的萌发受到抑制;而利用酪氨酸磷酸激酶抑制剂genistein处理细胞,微丝结构的列阵变化与对照相似。结果说明,在川百合花粉萌发过程中,有某种酪氨酸磷酸酶参与了反应。 展开更多

关键词 微丝骨架 花粉原生质体 PAO 酪氨酸磷酸化

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膨压对拟南芥悬浮细胞微丝骨架排布影响的初步研究 被引量：1

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作者 时兰春 王伯初 +1 位作者 朱蠡庆 龚伟 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第S1期97-97,共1页

关键词 微丝骨架 悬浮细胞 细胞壁 拟南芥 植物细胞骨架 膨压 原生质体 连续体 质壁分离 排布

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线粒体钙单向转运体相关钙超载调控钙调蛋白对雨蛙肽诱导胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响

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作者 雷宇 罗尹翔 +4 位作者 吴润泽 苏尚华 吴家实 苏明佳 杨慧莹 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第11期1121-1126,共6页

目的 通过体外细胞研究探讨线粒体钙单向转运体(MCU)相关钙超载通过调控钙调蛋白(CaM)对雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响。方法 使用10^(-7)mol/L雨蛙肽及10^(-5)mol/L MCU抑制剂钌红(RR)干预人胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)2... 目的 通过体外细胞研究探讨线粒体钙单向转运体(MCU)相关钙超载通过调控钙调蛋白(CaM)对雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响。方法 使用10^(-7)mol/L雨蛙肽及10^(-5)mol/L MCU抑制剂钌红(RR)干预人胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)24 h,将细胞分为:Control组、雨蛙肽组、RR组、雨蛙肽+RR组。Western blot法检测细胞内MCU及CaM蛋白表达,荧光探针法检测细胞内游离Ca^(2+),免疫荧光双标法检测细胞内线粒体Ca^(2+),微丝染色法观察细胞微丝骨架结构。结果 雨蛙肽组与Control组比较,MCU及CaM蛋白表达、细胞质及线粒体内Ca^(2+)含量升高(P<0.05),细胞微丝骨架破坏;雨蛙肽+RR组与雨蛙肽组比较,MCU及CaM蛋白表达、胞质Ca^(2+)及线粒体内Ca^(2+)含量降低(P<0.05),细胞微丝骨架破坏减轻。结论 MCU相关钙超载可能通过激活CaM促进雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的破坏。 展开更多

关键词 线粒体钙单向转运体相关钙超载 钙调蛋白 雨蛙肽 胰腺导管上皮细胞 微丝骨架

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杜仲花粉离体萌发特征及花粉管微丝骨架分布 被引量：5

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作者 游韩莉 贾婷婷 +2 位作者 田菊 王君 康向阳 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期495-501,共7页

以干燥的杜仲成熟花粉为材料,对杜仲花粉离体萌发的适宜液体培养基配方进行了筛选,并对花粉萌发特征及花粉管微丝骨架分布规律进行了研究。结果表明:(1)适宜杜仲花粉离体萌发的液体培养基组成为200g/L蔗糖+30mg/L硼酸+10mg/L Ca(NO3)2,... 以干燥的杜仲成熟花粉为材料,对杜仲花粉离体萌发的适宜液体培养基配方进行了筛选,并对花粉萌发特征及花粉管微丝骨架分布规律进行了研究。结果表明:(1)适宜杜仲花粉离体萌发的液体培养基组成为200g/L蔗糖+30mg/L硼酸+10mg/L Ca(NO3)2,于26℃条件下离体培养18h的花粉萌发率可达46.29%±3.75%。(2)在适宜液体培养条件下,杜仲花粉萌发率在培养6h内急剧增长,随后趋于平稳;而花粉管在培养8h内伸长较快,之后有放缓趋势,至培养48h时,花粉管长度可达363.14±30.51μm。(3)杜仲花粉属于2胞花粉,花粉萌发过程中,营养核和生殖核的移动存在一定的时序性,通常营养核先于生殖核进入到花粉管;杜仲花粉生殖核的有丝分裂发生在花粉管中,离体培养12h可逐渐观察到有丝分裂行为。(4)花粉萌发过程,微丝骨架形成束状,与花粉管伸长方向平行排布,与较为稀疏的网状微丝阵列组成连续系统,引导细胞核的运动。 展开更多

关键词 杜仲 离体 液体培养基 花粉萌发 微丝骨架

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烟草BY-2细胞和蚕豆叶肉细胞原生质体微丝骨架及latrunculin B处理对其分布的影响 被引量：2

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作者 叶露飞 刘成科 +1 位作者 孟春梅 洪健 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期497-502,共6页

用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后... 用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀网络结构;共聚焦显微成像显示了随latrunculin B处理时间的延长微丝解聚和微丝骨架分布的动态过程.建立原生质体制备、微丝骨架荧光染色、latrunculin B处理及激光共聚焦显微观察的实验体系为进一步研究植物微丝骨架的功能奠定了基础. 展开更多

关键词 原生质体 微丝骨架 LATRUNCULIN B 激光共聚焦显微镜

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细胞微丝骨架在玉米抗纹枯病菌Rhizoctonia solani侵染中的作用 被引量：2

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作者 王伟 裴艳刚 +4 位作者 王宇霜 孙霞 戴浩 龚国淑 常小丽 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期181-188,共8页

为探究细胞微丝骨架在玉米抗纹枯病侵染过程中的作用,采用微丝骨架解聚剂LatB预处理玉米离体叶片后接种立枯丝核菌Rhizoctonia solani AG1-IA,显微观察病原菌的侵染过程,并检测活性氧(ROS)、细胞坏死及抗病基因(PR1、ZmDREB2A)表达等抗... 为探究细胞微丝骨架在玉米抗纹枯病侵染过程中的作用,采用微丝骨架解聚剂LatB预处理玉米离体叶片后接种立枯丝核菌Rhizoctonia solani AG1-IA,显微观察病原菌的侵染过程,并检测活性氧(ROS)、细胞坏死及抗病基因(PR1、ZmDREB2A)表达等抗病反应情况。结果显示,与未经LatB预处理相比,LatB预处理加快了R.solani侵染后玉米病斑的形成,并影响了侵染结构的发育;在侵染后期,LatB促进了R.solani诱导的玉米叶片中ROS积累、细胞坏死反应和PR1基因表达;溶剂DMSO预处理与未经LatB预处理的结果类似,表明DMSO对本试验的影响较小。研究表明,细胞微丝骨架不仅参与玉米抗R.solani的侵入,而且通过调控ROS、PR1基因表达,细胞死亡等抗病信号提高玉米抗病防御能力。本研究为进一步研究细胞微丝骨架在玉米对纹枯病的抗病机理中的作用提供了重要参考。 展开更多

关键词 玉米 立枯丝核菌 细胞微丝骨架 活性氧 抗病基因

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‘秦冠’苹果花粉培养及微丝骨架的变化 被引量：1

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作者 高赛 王金金 +3 位作者 张伟伟 曹庆芹 秦岭 房克凤 《电子显微学报》 CAS CSCD 2016年第2期146-151,共6页

以‘秦冠’苹果花粉为试材,采用花粉离体培养法,研究了不同培养基组分以及温度对苹果花粉萌发的影响。结果表明:(1)蔗糖和硼酸在一定质量浓度范围内,对苹果花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定质量浓度时则起抑制作用。秦冠苹果... 以‘秦冠’苹果花粉为试材,采用花粉离体培养法,研究了不同培养基组分以及温度对苹果花粉萌发的影响。结果表明:(1)蔗糖和硼酸在一定质量浓度范围内,对苹果花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定质量浓度时则起抑制作用。秦冠苹果花粉最适的培养基为20%蔗糖和0.01%硼酸,花粉的萌发率可以达到60%。在此基础上,以Alexa Fluor 488phalloidin作为肌动蛋白微丝的探针,运用激光共聚焦显微镜技术,观察了苹果花粉萌发过程中微丝骨架的分布变化动态;(2)在未水合的苹果花粉粒中,均匀分布着短小弯曲、颗粒环形微丝。在水合而未萌发的的花粉中,微丝呈网状分布在胞质中,萌发沟部分肌动蛋白束网络较致密,中央胞质部分较疏松。花粉萌发后,微丝转变为平行排列,向花粉管伸长的方向延伸聚集,与花粉管纵向平行排列;(3)生长异常的花粉管内其微丝状态也异常。 展开更多

关键词 苹果 离体培养 花粉萌发 花粉管生长 微丝骨架

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肺腺癌A549细胞中TNIK通过Rho/ROCK/LIMK1调控微丝骨架形态 被引量：1

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作者 孙雪花 张莲 +1 位作者 张春冬 陈全 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期659-666,共8页

目的探讨肺腺癌A549细胞中TNIK调节微丝骨架形态的分子机制及其联合靶向有丝分裂化疗药物处理对癌细胞增殖与凋亡的影响。方法利用RNA-seq筛选稳定敲减TNIK表达后A549细胞差异表达基因,并分析微丝骨架组装相关基因的表达情况;通过RT-PC... 目的探讨肺腺癌A549细胞中TNIK调节微丝骨架形态的分子机制及其联合靶向有丝分裂化疗药物处理对癌细胞增殖与凋亡的影响。方法利用RNA-seq筛选稳定敲减TNIK表达后A549细胞差异表达基因,并分析微丝骨架组装相关基因的表达情况;通过RT-PCR、免疫印迹和双重免疫荧光染色分析TNIK调控微丝-微管骨架系统组装的分子机制,并联用靶向有丝分裂化疗药物紫杉醇处理癌细胞后,检测癌细胞的生长及凋亡情况。结果RNA-seq结果显示,敲减TNIK表达后的差异表达基因与有丝分裂进程密切相关;进一步分析发现TNIK表达可在转录水平显著抑制Rho通路相关基因RhoA/B、ROCK1/2和LIMK1表达(P<0.01),但对Rac与CDC42通路相关基因表达无显著影响。免疫荧光检测发现,敲减TNIK表达导致微丝骨架系统形态紊乱及有丝分裂异常。与对照细胞相比,联合紫杉醇处理的TNIK敲减组细胞增殖下调(P<0.01),而凋亡率显著增加(P<0.01)。结论肺腺癌A549细胞中TNIK通过Rho/ROCK/LIMK1调控细胞微丝-微管骨架系统形态,敲减TNIK可增强化疗药物对癌细胞增殖的抑制作用。 展开更多

关键词 肺腺癌细胞 微丝骨架 微管骨架 化疗 TNIK

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拟南芥微丝加帽蛋白β亚基参与壳梭孢素诱导的气孔开放过程

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作者 王攀 李昭 +3 位作者 赵盖晴 武玥冉 豆丽茹 于荣 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期648-657,共10页

气孔是植物响应外源信号,与环境进行水分和气体交换的门户。由外源信号引起的保卫细胞微丝骨架动态变化在气孔运动中发挥重要作用,但是具体的精确调节机制仍不清楚。微丝结合蛋白家族(ABPs)是微丝动态组装最直接的调控者,它们的作用不... 气孔是植物响应外源信号,与环境进行水分和气体交换的门户。由外源信号引起的保卫细胞微丝骨架动态变化在气孔运动中发挥重要作用,但是具体的精确调节机制仍不清楚。微丝结合蛋白家族(ABPs)是微丝动态组装最直接的调控者,它们的作用不容忽视。本文运用反向遗传学,以微丝结合蛋白—加帽蛋白(CP)β-亚基(CPB)突变体cpb-3为实验材料,探究其在壳梭孢素(FC)诱导气孔开放中的作用。结果发现:离体叶片干燥3 h,cpb-3突变体的叶片失水率为63.45%,明显高于野生型的48.99%。气孔开度测量及激光共聚焦显微镜观察发现,cpb-3突变体的气孔开放程度以及微丝动态重排对FC分子更敏感。气孔开度相比野生型增大了20%(P<0.05),含辐射状微丝排布的保卫细胞数量比例增幅达到58.3%,比对照组高出18.5%。此外,非损伤微测技术记录保卫细胞Ca^(2+)、K^(+)等跨膜运输动态,FC处理下,cpb-3突变体保卫细胞中Ca^(2+)外流速度升至212.86 pmol cm^(-2)s^(-1),野生型仅为68.76 pmol cm^(-2)s^(-1),明显快于野生型。且K^(+)内流也有相同表现。综上表明,微丝加帽蛋白CP的β亚基CPB可能通过调节保卫细胞微丝骨架动态重排以及离子流动,在FC诱导的气孔运动中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 气孔运动 微丝骨架动态 加帽蛋白 壳梭孢素

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激光扫描共聚焦显微镜的原理及其在植物学中的应用概况 被引量：3

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作者 樊慧梅 仇建飞 +3 位作者 宋志峰 杨建 马虹 魏春雁 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第2期9-11,53,共4页

激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术是先进的分子和细胞生物学研究技术。LSCM具有高分辨率,可以实现无损伤连续光学切片,对活体或固定的组织细胞进行定性定量检测和定时定位分析。为进一步了解并应用L... 激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术是先进的分子和细胞生物学研究技术。LSCM具有高分辨率,可以实现无损伤连续光学切片,对活体或固定的组织细胞进行定性定量检测和定时定位分析。为进一步了解并应用LSCM技术,对LSCM的基本原理及LSCM技术在植物学研究中的应用及展望进行了综述。 展开更多

关键词 激光扫描共聚焦显微镜 荧光 植物学 光学切片 CA2+ 微丝骨架

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层粘连蛋白作用下角膜内皮细胞增殖与细胞骨架的相关性 被引量：2

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作者 李姝燕 吴静 +2 位作者 郝念 徐锦堂 赵松滨 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期29-29,共1页

关键词 角膜内皮细胞 层粘连蛋白 相关性 细胞骨架 增殖性 体外生长 LN 微丝骨架 变化

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细胞松弛素B和鬼笔环肽对梨花粉萌发和花粉管生长的影响 被引量：2

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作者 刘珠琴 姜雪婷 +1 位作者 徐国华 张绍铃 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2393-2399,共7页

以砂梨(Pyrus pyrifoliaNakai)品种今村秋(Imamuraaki)和丰水(Hosui)为材料,分别用光学显微镜和荧光显微镜观察了离体和半活体条件下微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)和稳定剂鬼笔环肽(phalloidin)对梨花粉萌发和花粉管生... 以砂梨(Pyrus pyrifoliaNakai)品种今村秋(Imamuraaki)和丰水(Hosui)为材料,分别用光学显微镜和荧光显微镜观察了离体和半活体条件下微丝骨架解聚剂细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)和稳定剂鬼笔环肽(phalloidin)对梨花粉萌发和花粉管生长的影响.结果表明:(1)低浓度(10μg/mL)鬼笔环肽能促进花粉萌发和花粉管生长,但高浓度对花粉萌发和花粉管的生长具有抑制作用;CB抑制花粉萌发和花粉管生长,且抑制效应随其浓度的增加而增强.(2)鬼笔环肽处理柱头后进行自花授粉,可明显促进自花花粉萌发和花粉管的生长,而CB处理柱头后异花授粉则抑制异花花粉萌发及其花粉管生长.可见,微丝骨架参与了梨花粉萌发和花粉管生长过程,并参与了梨自交不亲和反应的调节. 展开更多

关键词 梨 微丝骨架 鬼笔环肽 细胞松弛素B 花粉 花粉管

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