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转录因子NeyR调控弗氏链霉菌新霉素的生物合成
1
作者 程一晗 李翔飞 +2 位作者 韩如梦 刘艳 薛正莲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第24期84-90,共7页
新霉素主要是由弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵生产的一种氨基糖苷类抗生素,广泛应用于医药、畜牧等领域,能够有效地控制和治疗细菌引起的疾病,提高畜禽的生长速度和生产性能。为了提高新霉素产量,该研究通过比较转录组学分析原... 新霉素主要是由弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵生产的一种氨基糖苷类抗生素,广泛应用于医药、畜牧等领域,能够有效地控制和治疗细菌引起的疾病,提高畜禽的生长速度和生产性能。为了提高新霉素产量,该研究通过比较转录组学分析原始弗氏链霉菌SF-1和诱变高产菌SF-2的转录组数据,挖掘出转录水平差异显著的转录因子,然后过表达构建重组质粒,再通过接合转移构建出工程菌株。经摇瓶发酵验证筛选出对新霉素合成影响显著的工程菌株,进行启动子优化最终得到高产的生产新霉素工程菌株SF-2/pP-NeyR。随后对发酵培养基组分进行正交优化,最终新霉素B效价为11843 U/mL。综合优化后新霉素B的效价较初始提高了29.6%。该实验结果为新霉素后续代谢机理研究、其和弗氏链霉菌新霉素合成基因簇的相互作用研究、解析调控新霉素合成机理奠定了基础,为进一步提高新霉素效价提供了思路。 展开更多
关键词 弗氏链霉菌 新霉素 比较转录组学 转录因子 启动子优化 发酵优化
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弗氏链霉菌S-221变种发酵液的抗菌活性及稳定性研究 被引量：2
2
作者 倪国荣 涂晓嵘 +1 位作者 张智平 涂国全 《中国酿造》 CAS 北大核心 2009年第2期37-39,共3页
采用管碟法和抑制菌丝生长法测定了弗氏链霉菌S-221发酵液对细菌和10种植物病原菌的抑菌活性。结果表明,发酵液对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌都有很强的抑菌活性,同时对10种植物病原菌、真菌也具有很强的抑菌活性。通过对发酵液稳... 采用管碟法和抑制菌丝生长法测定了弗氏链霉菌S-221发酵液对细菌和10种植物病原菌的抑菌活性。结果表明,发酵液对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌都有很强的抑菌活性,同时对10种植物病原菌、真菌也具有很强的抑菌活性。通过对发酵液稳定性的初步研究,结果表明发酵液中的抑菌活性物质对温度、紫外光和pH值稳定。 展开更多
关键词 弗氏链霉菌S-221变种 抗菌活性 稳定性
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弗氏链霉菌tylF基因的克隆及其生物信息学分析 被引量：1
3
作者 闫明亮 《安徽农业科学》 CAS 2016年第12期126-129,149,共5页
[目的]研究弗氏链霉菌tylF基因的克隆及其生物信息学分析。[方法]利用RT-PCR技术、巢式PCR技术和RACE技术从弗氏链霉菌B-62169菌株中克隆获得tyl F基因的全长c DNA序列,并对其生物信息学进行分析。[结果]经Vector NTI 11.0软件拼接获得t... [目的]研究弗氏链霉菌tylF基因的克隆及其生物信息学分析。[方法]利用RT-PCR技术、巢式PCR技术和RACE技术从弗氏链霉菌B-62169菌株中克隆获得tyl F基因的全长c DNA序列,并对其生物信息学进行分析。[结果]经Vector NTI 11.0软件拼接获得tyl F基因全长c DNA序列长度为1 245 bp,并带有19 bp长的Poly(A)尾巴,包含927 bp的开放读码框(ORF),编码一个含309个氨基酸残基的蛋白质。生物信息学分析结果表明,tyl F基因编码的酶是大菌素-O-甲基转移酶,参与分子功能中甲基转移酶活性和生物学途径中甲基化过程。对tyl F基因全长c DNA序列进行蛋白质结构域分析,证实该基因编码Tyl F蛋白,并具有223个氨基酸蛋白结构域。[结论]该研究为阐明泰乐菌素生物合成过程中甲基化反应机理,更进一步研究大环内酯类抗生素生物合成代谢途径提供生物信息学数据支持。 展开更多
关键词 tylF 泰乐菌素 弗氏链霉菌 基因克隆
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弗氏链霉菌产硫酸新霉素高通量选育模型的建立及优化 被引量：9
4
作者 余飞 孙俊峰 +3 位作者 刘鹏飞 刘艳 王洲 薛正莲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期162-167,177,共7页
建立基于多孔板发酵及酶标仪检测的高通量选育模型,提高诱变后硫酸新霉素高产菌株的筛选效率。对影响酶标仪检测的主要影响因素1.0×10^(-4)mol/L曲利本蓝的添加量(μL/m L)进行优化,并建立相应的分光光度法,对适用高通量筛选模型... 建立基于多孔板发酵及酶标仪检测的高通量选育模型,提高诱变后硫酸新霉素高产菌株的筛选效率。对影响酶标仪检测的主要影响因素1.0×10^(-4)mol/L曲利本蓝的添加量(μL/m L)进行优化,并建立相应的分光光度法,对适用高通量筛选模型的微孔板进行选择,并对其发酵条件进行正交优化。结果表明,曲利本蓝的添加量为500μL/m L,硫酸新霉素在1.284～10.272 U/m L,吸光度与样品浓度呈良好的线性关系(R^2=0.998 8),平均回收率为98.468 4%,重复性RSD为3.270 0%;24孔板适用于高通量筛选模型,优化后发酵条件:转速、装液量和接种量分别为220 r/min、2 m L和8%,在此基础上,实际发酵效价达到(6 825±77)U/m L,较原发酵条件提高了27.40%。基于多孔板发酵及酶标仪检测建立高通量选育模型,能够达到诱变后快速筛选硫酸新霉素高产菌株的目的,也为后续高通量选育其他抗生素高产菌株奠定了基础。 展开更多
关键词 弗氏链霉菌 硫酸新霉素 高通量
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等离子技术在弗氏链霉菌和侧耳属诱变选育中的应用 被引量：1
5
作者 王忠中 张萍 石彦鹏 《中国兽药杂志》 2014年第6期15-18,共4页
在室温常压条件下利用等离子射流对抗生素生产菌种弗氏链霉菌和侧耳属进行诱变，通过对菌落观察和死亡率、变异率、发酵能力的筛选统计，确定针对该两种微生物诱变的最佳照射时间分别为240—270s和25—30S，并分别从中筛选出高于出发株1... 在室温常压条件下利用等离子射流对抗生素生产菌种弗氏链霉菌和侧耳属进行诱变，通过对菌落观察和死亡率、变异率、发酵能力的筛选统计，确定针对该两种微生物诱变的最佳照射时间分别为240—270s和25—30S，并分别从中筛选出高于出发株10．4％和9．6％的菌株。本实验可为菌种的诱变选育提供参考。 展开更多
关键词 弗氏链霉菌 侧耳属 室温常压等离子 诱变选育
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弗氏链霉菌双拷贝串联基因tylF、tylE和tylCV工程菌的构建
6
作者 陈亚兰 牛春 张萍 《中国兽药杂志》 2022年第8期16-23,共8页
为提高弗氏链霉菌对泰乐菌素的产素能力,构建了弗氏链霉菌双拷贝串联基因tylF、tylE和tylCV基因工程菌。本研究以弗氏链霉菌作为出发菌株,并以其全基因组DNA为模板分别扩增tylF和tylE以及tylCV基因、以质粒pSET152为模板扩增强启动子基... 为提高弗氏链霉菌对泰乐菌素的产素能力,构建了弗氏链霉菌双拷贝串联基因tylF、tylE和tylCV基因工程菌。本研究以弗氏链霉菌作为出发菌株,并以其全基因组DNA为模板分别扩增tylF和tylE以及tylCV基因、以质粒pSET152为模板扩增强启动子基因permE,采用重叠延伸PCR技术和EcoRV、XbaI双酶切结合的连接方法,构建弗氏链霉菌表达载体pSET152-permE-tylF-tylE-tylCV,并转化至大肠杆菌ET12567,利用大肠-链霉菌属间接合转移技术获得工程菌株。研究结果表明,工程菌株摇瓶效价(14580 u/mL)比出发菌株(11318 u/mL)提高了29%;液相色谱结果显示,工程菌株的泰乐菌素A和泰乐菌素C相对峰面积显著(P≤0.05)高于出发菌株。增加弗氏链霉菌tylF、tylE和tylCV的拷贝数可有效提高泰乐菌素的产量,以及优化组分,为泰乐菌素生产菌的遗传改造提供参考。 展开更多
关键词 泰乐菌素 弗氏链霉菌 tylE基因 tylF基因 tylCV基因
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培养基成分对泰乐菌素产量的影响 被引量：8
7
作者 彭海萍 王兰 +1 位作者 曹健 贾士儒 《粮食与饲料工业》 CAS 2002年第4期26-28,共3页
首先利用单因素法选出了最佳碳源和最佳氮源 ,然后采用Plackett-Burman设计方法 ,筛选出了影响泰乐菌素产量的重要因素。最终对这些影响泰乐菌素产量的重要因素通过均匀设计进行优化 ,确定出各因素的最佳水平。研究结果表明 :在最佳条件... 首先利用单因素法选出了最佳碳源和最佳氮源 ,然后采用Plackett-Burman设计方法 ,筛选出了影响泰乐菌素产量的重要因素。最终对这些影响泰乐菌素产量的重要因素通过均匀设计进行优化 ,确定出各因素的最佳水平。研究结果表明 :在最佳条件下 ,弗氏链霉菌的发酵单位为 7.0g/L ,接近原培养基发酵单位 ,原料成本有所下降。同时 。 展开更多
关键词 泰乐菌素 弗氏链霉菌 PLACKETT-BURMAN设计 均匀设计 饲料添加剂 产量 培养基成分
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正确安全使用泰乐菌素 被引量：1
8
作者 洪学 《猪业科学》 2009年第1期110-110,共1页
泰乐菌素属于大环内酯类抗生素，抗菌谱与红霉素相仿。系由放线菌属弗氏链霉菌经发酵提取而得到的一种大环内酯类动物专用抗生素，有泰乐菌素碱、磷酸盐和酒石酸盐3种形态。磷酸泰乐菌素作为饲料添加剂，广泛用于猪的饲料中，可以缩短... 泰乐菌素属于大环内酯类抗生素，抗菌谱与红霉素相仿。系由放线菌属弗氏链霉菌经发酵提取而得到的一种大环内酯类动物专用抗生素，有泰乐菌素碱、磷酸盐和酒石酸盐3种形态。磷酸泰乐菌素作为饲料添加剂，广泛用于猪的饲料中，可以缩短饲养周期，提高饲料报酬，有效防治呼吸道及消化道感染；酒石酸泰乐菌素，可防治支原体病。 展开更多
关键词 磷酸泰乐菌素 安全使用 大环内酯类抗生素 酒石酸泰乐菌素 饲料添加剂 有效防治 弗氏链霉菌 消化道感染
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泰乐菌素基因工程菌的构建 被引量：4
9
作者 范亮 杜宝华 +2 位作者 陈光 田威 何建勇 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期398-401,共4页
目的构建具有双拷贝tylF基因的泰乐菌素基因工程菌,以解决泰乐菌素基因生物合成的限速环节,提高泰乐菌素的发酵产量。方法通过SOE-PCR获得PermE-tylF基因,构建随机整合型重组质粒pBH05,通过接合转移将PermE-tylF基因及其载体随机整合到... 目的构建具有双拷贝tylF基因的泰乐菌素基因工程菌,以解决泰乐菌素基因生物合成的限速环节,提高泰乐菌素的发酵产量。方法通过SOE-PCR获得PermE-tylF基因,构建随机整合型重组质粒pBH05,通过接合转移将PermE-tylF基因及其载体随机整合到弗氏链霉菌的基因组中,并通过抗性筛选获得重组菌株D-120。将重组菌株D-120进行摇瓶发酵,采用生物效价测定的二剂量法测定泰乐菌素的发酵单位。结果在相同的发酵条件下,重组菌株泰乐菌素的发酵单位较出发菌株提高32.7%。结论该基因工程菌的构建改善了泰乐菌素生物合成的限速环节,大幅度提高了泰乐菌素的发酵效价。 展开更多
关键词 弗氏链霉菌 tylF基因 泰乐菌素 基因工程菌
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泰乐菌素的特点及应用 被引量：7
10
作者 曹明志 《养殖技术顾问》 2011年第5期227-227,共1页
泰乐菌素是美国于1959年从弗氏链霉菌的培养液中获得的大环内酯类抗生素。该药为白色板状结晶，微溶于水，呈碱性。其产品有酒石酸盐、磷酸盐、盐酸盐、硫酸盐及乳酸盐，易溶于水。水溶液在25℃、pH值5．5-7．5时可保留3个月，但是若水... 泰乐菌素是美国于1959年从弗氏链霉菌的培养液中获得的大环内酯类抗生素。该药为白色板状结晶，微溶于水，呈碱性。其产品有酒石酸盐、磷酸盐、盐酸盐、硫酸盐及乳酸盐，易溶于水。水溶液在25℃、pH值5．5-7．5时可保留3个月，但是若水溶液中含有铁、铜金属离子时，会使本品失效。我国于1994年建成工业化泰乐菌素生产线，其产品酒石酸泰乐菌素、 展开更多
关键词 酒石酸泰乐菌素 大环内酯类抗生素 应用 弗氏链霉菌 水溶液 酒石酸盐 金属离子 培养液
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