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弗氏柠檬酸杆菌RPA-LFD快速检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 王姝然 范厚勇 +3 位作者 徐嘉楠 周天琦 许丹 郑跃平 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期241-249,共9页
为建立一种针对弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)敏感性高、特异性强的临床快速检测方法,根据该菌定居因子基因cfa的保守序列,设计特异性引物,采用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),并结合琼脂糖... 为建立一种针对弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)敏感性高、特异性强的临床快速检测方法,根据该菌定居因子基因cfa的保守序列,设计特异性引物,采用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),并结合琼脂糖凝胶电泳(AGE)和侧流层析试纸条(LFD)方法进行反应条件的优化及特异性与灵敏度的检测。结果表明:本研究中所建立的弗氏柠檬酸杆菌重组酶聚合酶扩增结合侧向流动试纸条(RPA-LFD)快速检测方法,在38℃条件下扩增20 min后,能特异性地检测到弗氏柠檬酸杆菌,对弗氏柠檬酸杆菌纯培养物和基因组DNA的最小检出限分别为1.5×102 CFU/mL和200 fg/μL,是常规PCR(cfa引物)检测灵敏度(20 pg/μL)的100倍;利用所建立的RPA-LFD法与常规PCR同时检测杂交鲟攻毒试验样本,两种方法的检测结果一致。研究表明,本研究中建立的弗氏柠檬酸杆菌RPA-LFD方法,操作简便、反应迅速、特异性好、灵敏度高,并且不需要昂贵的仪器,该方法可为未来弗氏柠檬酸杆菌细菌性疾病的早期诊断提供更有效的技术支持。 展开更多
关键词 柠檬酸杆菌 快速检测 重组酶聚合酶扩增技术 侧向流动试纸条
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弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及其药敏试验
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作者 许国洋 付文贵 +6 位作者 付利芝 闫志强 高广亮 邓娟 戴玉娇 庞丽霞 翟少钦 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期92-96,共5页
为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。... 为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。结果显示,分离到的弗氏柠檬酸杆菌在血平板上生长时导致溶血现象。生化试验中,硝酸盐还原、山梨醇和葡萄糖发酵等9个检测指标为阳性;且该菌对氧氟沙星、诺氧沙星、万古霉素、青霉素和链霉素耐药,并携带aacA-aphD、ileS和vanA3种耐药基因。该菌对小鼠的致死率为60%,剖检发现小鼠肝脏、肺脏、肠道、肾脏和脾脏组织发生不同程度病理变化,其中,小鼠肝脏和肺脏组织的出血症状最为明显;组织病理学观察发现,肝脏组织可见多量中央静脉淤血,肝窦内可见淤血;肺脏组织可见大量血管淤血,大面积肺泡壁间质淤血;肠绒毛黏膜上皮与固有层轻度分离。试验结果可为弗氏柠檬酸杆菌致病机理的进一步研究提供参考,也可为仔猪潜在细菌性疫病防治提供了数据支撑。 展开更多
关键词 柠檬酸杆菌 分离鉴定 耐药基因 致病性
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丹顶鹤源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏结果分析
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作者 张关岷辉 《现代农业科技》 2024年第6期149-151,156,共4页
为查明一例源于安徽省某动物园的丹顶鹤死因,从该丹顶鹤肝部组织坏死灶采集病料,进行细菌分离与鉴定,并对其药敏结果进行分析。结果表明:该菌落在血琼脂平板上生长呈白色不透明菌落,革兰氏阴性菌;生理生化试验显示,该菌在葡萄糖、甘露... 为查明一例源于安徽省某动物园的丹顶鹤死因,从该丹顶鹤肝部组织坏死灶采集病料,进行细菌分离与鉴定,并对其药敏结果进行分析。结果表明:该菌落在血琼脂平板上生长呈白色不透明菌落,革兰氏阴性菌;生理生化试验显示,该菌在葡萄糖、甘露醇、乳糖、山梨醇、硫化氢中均呈阳性;PCR扩增其16S rDNA基因,其大小约1500 bp,经系统进化树分析,与已报道的弗氏柠檬酸杆菌NBRC 12681菌株(NR 114345.1)在同一分支;药敏结果显示,其对氧氟沙星和庆大霉素高度敏感,对丁胺卡那、多粘霉素B中敏;对青霉素、阿莫西林、恩诺沙星、头孢噻肟、氨苄西林、复方新诺明、氟苯尼考耐药。综上所述,本次从患病丹顶鹤肝部分离的病原是弗氏柠檬酸杆菌,其对多种抗菌药具有一定的耐药性。 展开更多
关键词 丹顶鹤 柠檬酸杆菌 鉴定 耐药性
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克氏原螯虾弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定与药敏试验 被引量:24
4
作者 陈红莲 宋光同 +2 位作者 何吉祥 侯冠军 王永杰 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第1期73-77,共5页
为确定引起养殖克氏原螯虾(Procambarus clarkii)患病的病原种类及耐药情况,从患病克氏原螯虾肝胰腺取样进行常规细菌学检查,对分离株进行回归感染试验、形态观察、生理生化特性检测、16S rRNA和gyrB基因分析及药敏试验。结果显示:从患... 为确定引起养殖克氏原螯虾(Procambarus clarkii)患病的病原种类及耐药情况,从患病克氏原螯虾肝胰腺取样进行常规细菌学检查,对分离株进行回归感染试验、形态观察、生理生化特性检测、16S rRNA和gyrB基因分析及药敏试验。结果显示:从患病克氏原螯虾肝胰腺分离到大量菌落形态和色泽一致的细菌,代表菌株X120523为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),具有较强致病性,对20种抗生素中的喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素敏感。 展开更多
关键词 原螯虾(Procambarus clarkii) 柠檬酸杆菌(citrobacter freundii) 分离鉴定 16S RRNA基因 gyrB基因 药敏试验
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弗氏柠檬酸杆菌对动物和人致病性研究进展 被引量:51
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作者 薛巧 赵战勤 +2 位作者 刘会胜 薛云 董发明 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期81-85,共5页
弗氏柠檬酸杆菌在自然界广泛分布,是一种典型的人-畜-鱼共患病条件性致病菌,一般情况下不引起动物和人发病。近年来,陆续有报道弗氏柠檬酸杆菌强毒株也能引起动物败血症甚至急性死亡,且对水产动物的致病报道较多。人类可因弗氏柠檬酸杆... 弗氏柠檬酸杆菌在自然界广泛分布,是一种典型的人-畜-鱼共患病条件性致病菌,一般情况下不引起动物和人发病。近年来,陆续有报道弗氏柠檬酸杆菌强毒株也能引起动物败血症甚至急性死亡,且对水产动物的致病报道较多。人类可因弗氏柠檬酸杆菌感染而发生腹泻、食物中毒和继发感染。弗氏柠檬酸杆菌引起动物和人感染时有携带如β-内酰胺酶等新型耐药基因的可能,且发现有cfa、ST和SLT等多种毒力因子。综合研究表明弗氏柠檬酸杆菌可能是一种尚未被人们充分认识的病原菌,且有危害加重的趋势。因此,在动物和人类疾病防治中不能忽视弗氏柠檬酸杆菌。论文主要阐述了弗氏柠檬酸杆菌对动物和人的致病性方面取得的进展,旨在引起研究者对弗氏柠檬酸杆菌致病性的重视,并展望了弗氏柠檬酸杆菌未来研究的方向。 展开更多
关键词 柠檬酸杆菌 动物 致病性 耐药
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羊源致病性弗氏柠檬酸杆菌的分离与鉴定 被引量:11
6
作者 刘会胜 赵战勤 +4 位作者 薛云 薛巧 汪洋 常世恺 刘媛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1593-1599,共7页
旨在确定导致河南省某养殖场小尾寒羊细菌性感染死亡的病原。从3只不同时间发病死亡的小尾寒羊各组织脏器的病料中分离到3株细菌——LK-1、LK-2和LK-3株。经微生物自动鉴定仪鉴定和细菌16SrRNA基因序列分析,确定该致病菌为弗氏柠檬酸杆... 旨在确定导致河南省某养殖场小尾寒羊细菌性感染死亡的病原。从3只不同时间发病死亡的小尾寒羊各组织脏器的病料中分离到3株细菌——LK-1、LK-2和LK-3株。经微生物自动鉴定仪鉴定和细菌16SrRNA基因序列分析,确定该致病菌为弗氏柠檬酸杆菌。小鼠毒力试验结果表明:3株细菌的LD50分别为5.0×107、6.0×107和5.8×107 CFU。回归试验结果表明,经人工感染健康小尾寒羊,可复制与自然发病羊相似的症状和病理变化,且从其各组织脏器内再次分离到相同的病原菌。药敏试验结果表明,3株弗氏柠檬酸杆菌对大部分药物的抗药谱相同(17/21),且均对头孢噻肟等11种药物高度敏感。这些研究结果表明弗氏柠檬酸杆菌是该小尾寒羊致死性病例的病原菌。本文在国内外首次报道了弗氏柠檬酸杆菌对小尾寒羊具有致病性。 展开更多
关键词 柠檬酸杆菌 分离 药敏试验 回归试验
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一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究 被引量:17
7
作者 石征宇 易弋 +4 位作者 黄德生 罗福广 黄杰 鲁晶娣 黎娅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第2期479-485,共7页
为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16SrDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多... 为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16SrDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多重耐药性,测试的20种药物中,该菌株对恩诺沙星、青霉素等13种药物具有完全耐药性,仅对头孢曲松、头孢他啶、头孢拉定、哌拉西林、舒巴坦5种药物敏感。人工感染试验结果显示,该菌对草鱼、黄颡鱼、罗非鱼、禾花鲤具有较强的致病性。本试验结果阐明了罗非鱼患病的原因,同时在养殖过程中可指导养殖户合理用药。 展开更多
关键词 罗非鱼 柠檬酸杆菌 16SrDNA 耐药性
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一株大凉疣螈肠道弗氏柠檬酸杆菌的分离及其药敏试验
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作者 李蓓 邹立扣 罗燕 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第18期11078-11080,共3页
首次从大凉疣螈(Tylototriton taliangensis)肠道分离获得弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),利用分子生物学方法对其16S rD-NA进行了扩增测序,并与GenBank中已有的有关序列进行比较,进行了系统发育分析。测序结果表明,16S rDNA与Ge... 首次从大凉疣螈(Tylototriton taliangensis)肠道分离获得弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),利用分子生物学方法对其16S rD-NA进行了扩增测序,并与GenBank中已有的有关序列进行比较,进行了系统发育分析。测序结果表明,16S rDNA与GenBank中序列同源率在98%~99%,分离的菌株与GU126681(C.freundii MRB0903)处于同一分支中;序列同源性及系统发育树表明,此菌为弗氏柠檬酸杆菌;药敏试验表明,弗氏柠檬酸杆菌对氨苄西林及头孢噻吩中介,对其余药物均敏感。 展开更多
关键词 大凉疣螈 肠道 柠檬酸杆菌 药敏试验
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大鲵源致病性弗氏柠檬酸杆菌的分离、鉴定和药物敏感性 被引量:10
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作者 苏英 吴荣华 +4 位作者 申君宇 李伟平 何滔 李云 丁诗华 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第4期56-61,共6页
为鉴定患病大鲵(Andrias davidianus)病原菌,从大鲵肠、胃、脾脏中分离得到菌株int1705,分离菌株经形态特征观察、生理生化特性测定、16S rRNA和aspC管家基因序列测定及系统发育学分析,鉴定为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。经... 为鉴定患病大鲵(Andrias davidianus)病原菌,从大鲵肠、胃、脾脏中分离得到菌株int1705,分离菌株经形态特征观察、生理生化特性测定、16S rRNA和aspC管家基因序列测定及系统发育学分析,鉴定为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。经人工感染,结果显示:菌株int1705能使健康大鲵发病并致死,半致死浓度(LD50)为3.16×10 6 CFU/mL,且发病症状与自然发病相似。药敏试验结果显示,菌株int1705对多粘菌素B、头孢他啶、诺氟沙星、氧氟沙星、复方新诺明等10种药物敏感。 展开更多
关键词 大鲵(Andrias davidianus) 柠檬酸杆菌(citrobacter freundii) 致病性 药敏试验
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一株多重耐药中华鳖源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定 被引量:12
10
作者 毛烁君 斯广杰 +4 位作者 任晓金 石婷婷 章烨 王卓瑞 章晓栋 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2015年第2期102-106,共5页
从患典型鳃腺炎病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏和腹水处进行细菌接种,分离获得一株细菌。综合菌落形态,16 S rRNA序列进化分析和API细菌生化鉴定系统判定,所得菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)(SX43)。动物回归实验显示... 从患典型鳃腺炎病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏和腹水处进行细菌接种,分离获得一株细菌。综合菌落形态,16 S rRNA序列进化分析和API细菌生化鉴定系统判定,所得菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)(SX43)。动物回归实验显示,分离株对小鼠的半数致死量(LD50)为106.5CFU,显示该菌株具有较强的致病性,可从实验幼鳖体内再次分离到相同的病原菌。常用药物的抗菌敏感性测定显示,菌株SX43对头孢哌酮、头孢曲松、头孢呋辛、复方新诺明、氯霉素高度敏感。 展开更多
关键词 中华鳖(Pelodiscus sinensis) 柠檬酸杆菌(citrobacter freundii) 16 S RRNA
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中华鳖弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及病理组织观察 被引量:9
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作者 黄莉萍 安莉丽 +7 位作者 李芳 杨成年 李虹 吕光俊 向枭 孙翰昌 翟旭亮 朱成科 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第7期1176-1186,共11页
为了确定重庆地区仿生态养殖中华鳖(Pelodiscus sinensis)患病死亡的原因,从患病鳖的肠道分离得到一株优势菌PS01,对该菌进行了形态学观察、人工感染、生理生化特性测定、16S rRNA和gyrB基因序列分析、病理切片观察以及药敏试验。结果表... 为了确定重庆地区仿生态养殖中华鳖(Pelodiscus sinensis)患病死亡的原因,从患病鳖的肠道分离得到一株优势菌PS01,对该菌进行了形态学观察、人工感染、生理生化特性测定、16S rRNA和gyrB基因序列分析、病理切片观察以及药敏试验。结果表明:人工感染中华鳖患病症状同自然发病症状;16S rRNA和gyrB序列构建的进化树表明,该菌与弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)同为一枝,相似性分别为99.7%、98.7%;病理组织观察发现,患病中华鳖的肝、脾、肾、胰和肠均有不同程度病变,其中以肠、肝脏、脾脏3个组织病变最为严重,肠绒毛大部分坏死脱落、肝细胞肿胀、胞核空泡化、脾脏红白髓混合分布、胰脏和肾脏轻度病变、胰腺细胞与肾小管上皮细胞肿大,其余组织未观察到明显变化。药敏试验表明,菌株PS01对多西环素等18种抗菌药物高度敏感,对氟苯尼考等3种抗菌药物中度敏感,对复方新诺明等18种抗菌药物表现为耐药。研究结果表明,弗氏柠檬酸杆菌为中华鳖的致病菌,其对30 g左右的中华鳖半致死浓度为9.3×104 CPU·g-1,有较强的致病性,可造成中华鳖多个组织病变。 展开更多
关键词 中华鳖 柠檬酸杆菌 药敏试验 病理切片
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天鹅维氏气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌与大肠埃希氏菌混合感染的诊断 被引量:4
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作者 白新栋 王斌 +5 位作者 王晨骁 王小园 王娟 刘海金 杨增岐 党如意 《动物医学进展》 北大核心 2022年第6期139-144,共6页
为对饲养于某人工湖的1只病死天鹅进行病原诊断,在临床检查和病理剖检的基础上,无菌采集该天鹅病变组织进行细菌学检测,并对分离菌株进行小鼠致病性试验和药敏试验。经细菌分离培养、革兰氏染色、镜检、生化鉴定和分子生物学鉴定,成功... 为对饲养于某人工湖的1只病死天鹅进行病原诊断,在临床检查和病理剖检的基础上,无菌采集该天鹅病变组织进行细菌学检测,并对分离菌株进行小鼠致病性试验和药敏试验。经细菌分离培养、革兰氏染色、镜检、生化鉴定和分子生物学鉴定,成功分离到3种革兰氏阴性杆菌分别为维氏气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌和大肠埃希氏菌,小鼠致病性试验结果表明,3株分离菌株均有致病性。纸片扩散法药敏试验结果表明3株分离菌株均对链霉素、庆大霉素敏感,对阿莫西林、泰乐菌素等有耐药性。病例最终确诊该天鹅为维氏气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌和大肠埃希氏菌混合感染致死,能够为珍稀野生保护动物的相关病原研究和防治提供参考。 展开更多
关键词 天鹅 气单胞菌 柠檬酸杆菌 大肠埃希 混合感染
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氟苯尼考胁迫下弗氏柠檬酸杆菌转录组测序研究 被引量:1
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作者 韦盘秋 黄杰 +3 位作者 韩书煜 罗福广 黎娅 易弋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第11期3172-3180,共9页
为了探究弗氏柠檬酸杆菌的耐药机制,试验使用氟苯尼考为诱导药物,提取正常培养与400μg/mL氟苯尼考胁迫下的菌株RNA,利用转录组测序技术对菌株间基因表达水平与差异表达基因进行了分析。结果显示,每个样品平均产出1.31 Gb数据,与参考基... 为了探究弗氏柠檬酸杆菌的耐药机制,试验使用氟苯尼考为诱导药物,提取正常培养与400μg/mL氟苯尼考胁迫下的菌株RNA,利用转录组测序技术对菌株间基因表达水平与差异表达基因进行了分析。结果显示,每个样品平均产出1.31 Gb数据,与参考基因组的平均比对率为67.01%。对样品间差异表达基因进行检测,共筛选出2019个显著差异表达基因,其中上调963个,下调1056个,并发现emrA和emrB 2个基因。KEGG Pathway分析中,富集到代谢途径的显著差异表达基因最多,占全部的72%,碳水化合物代谢、能量代谢、氨基酸代谢、膜转运等通路明显富集。GO功能分析中,生物过程分布的显著差异基因最多,占全部的46%。显著差异表达基因主要涉及到代谢进程、催化活性、结合。本试验结果表明,弗氏柠檬酸杆菌耐药性的产生可能与细胞外排泵介导的主动外排作用、靶位改变、酶的水解作用、细胞膜通透性改变及生物膜的形成有关。 展开更多
关键词 柠檬酸杆菌 氟苯尼考 转录组测序 耐药性
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弗氏柠檬酸杆菌的筛选、鉴定及对分散蓝2BLN脱色性能 被引量:1
14
作者 芦银香 范晓丹 +1 位作者 胡宗玉 吴静 《天津城建大学学报》 2019年第4期290-294,共5页
通过控制染料浓度梯度驯化市政污泥,分离得到一株高效蒽醌分散蓝2BLN脱色菌,经16SrDNA基因序列分析,鉴定为弗氏柠檬酸杆菌.研究不同的温度、转速、接种量和pH对菌株弗氏柠檬酸杆菌生长条件及其对蒽醌分散蓝2BLN的降解.结果表明:在30~40... 通过控制染料浓度梯度驯化市政污泥,分离得到一株高效蒽醌分散蓝2BLN脱色菌,经16SrDNA基因序列分析,鉴定为弗氏柠檬酸杆菌.研究不同的温度、转速、接种量和pH对菌株弗氏柠檬酸杆菌生长条件及其对蒽醌分散蓝2BLN的降解.结果表明:在30~40℃、100~150r·min-1、10%~20%、pH=6~7范围内,菌株能很好地生长,该菌株最适生条件为30℃、150r·min-1、15%及pH=7;菌株在最适生长条件下,对蒽醌分散蓝2BLN(40mg·L-1)具有较高的脱色能力,最高脱色率可达86.10%. 展开更多
关键词 蒽醌染料 分散蓝2BLN 柠檬酸杆菌 脱色
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竹鼠源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析 被引量:12
15
作者 唐海波 陈凤莲 +4 位作者 饶桂波 姜佳佳 孟菲 白安斌 吴健敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期922-929,共8页
为确定桂林某竹鼠养殖场患病竹鼠的病原,从发病竹鼠肝组织分离到一株细菌。根据形态学特征及16S rRNA基因序列分析,确定分离菌株为弗氏柠檬酸杆菌。进化分析显示,该菌与来自棉花红蜘蛛的弗氏柠檬酸杆菌遗传关系最近,但处于独立的分支上... 为确定桂林某竹鼠养殖场患病竹鼠的病原,从发病竹鼠肝组织分离到一株细菌。根据形态学特征及16S rRNA基因序列分析,确定分离菌株为弗氏柠檬酸杆菌。进化分析显示,该菌与来自棉花红蜘蛛的弗氏柠檬酸杆菌遗传关系最近,但处于独立的分支上。毒力试验结果表明,该菌对成年小白鼠的LD_(50)为2.8×10~8 CFU,对10~20日龄的竹鼠LD_(50)为6.3×10~8 CFU。药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、庆大霉素、阿米卡星、氧氟沙星、左氧氟沙星药物高度敏感,对青霉素、头孢唑啉、氟苯尼考、林可霉素、强力霉素等有耐药性。病理组织学观察显示,发病竹鼠肺泡间隔增宽伴随炎性细胞浸润;肝组织血管扩张、淤血;脾被膜外大量坏死细胞;肾组织肾小管上皮细胞肿胀、颗粒变性。综上研究结果表明,弗氏柠檬酸杆菌是引起桂林竹鼠发病和致死的病原菌,分离菌株对竹鼠有较强的致病性。 展开更多
关键词 竹鼠 柠檬酸杆菌 分离鉴定 组织病理学观察
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龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究 被引量:7
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作者 白杰 周美红 +3 位作者 胡秀彩 吕爱军 叶明皓 孙敬锋 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期798-803,共6页
为探明患病巴西龟Trachemys scripta elegans的病原及其生物学特征,从病龟体内分离获得1株革兰氏阴性细菌,编号为TC-1,采用PCR方法扩增16S rDNA、gyrB基因序列,将其亚克隆到pMD18-T载体中测序获得片段大小分别为1503 bp、989 bp,与GenB... 为探明患病巴西龟Trachemys scripta elegans的病原及其生物学特征,从病龟体内分离获得1株革兰氏阴性细菌,编号为TC-1,采用PCR方法扩增16S rDNA、gyrB基因序列,将其亚克隆到pMD18-T载体中测序获得片段大小分别为1503 bp、989 bp,与GenBank中模式菌株弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii序列相似性分别为99.60%、98.80%;系统进化树分析显示,分离菌株与C.freundii自然聚为一支,最终鉴定分离菌株TC-1为弗氏柠檬酸杆菌;药敏试验显示,TC-1菌株对头孢哌酮、头孢他啶、萘啶酸、诺氟沙星、左氟沙星、四环素、氟苯尼考和亚胺培南等药物敏感,对阿莫西林、头孢氨苄、磺胺异恶唑和复方新诺明等耐药;人工回归感染试验显示,TC-1菌株对巴西龟有致病性,并与自然发病龟的临床症状基本一致。本研究结果可为龟类弗氏柠檬酸杆菌的分子诊断及防治提供参考依据。 展开更多
关键词 巴西龟 柠檬酸杆菌 16S RDNA gyrB基因 药敏试验
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基于MALDI-TOF MS技术对加州鲈病原弗氏柠檬酸杆菌的快速鉴定 被引量:2
17
作者 谢海平 喻佳俊 +7 位作者 黄清 黄木珍 廖凯儒 李绪鹏 黄泽彬 李佰通 刘平 李磊 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2020年第6期40-45,共6页
为快速确定广州某养殖水体加州鲈(Micropterus salmoides)暴发性死亡的病原体,本研究利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和基于生化法的微生物自动鉴定系统对患病鱼体上分离出的病原菌进行了鉴定,并对该病原菌进行了... 为快速确定广州某养殖水体加州鲈(Micropterus salmoides)暴发性死亡的病原体,本研究利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和基于生化法的微生物自动鉴定系统对患病鱼体上分离出的病原菌进行了鉴定,并对该病原菌进行了药物敏感测试。两种方法的检测结果均表明加州鲈患病致死的病原菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药物敏感检测发现该病原菌对氟苯尼考、新霉素、链霉素、诺氟沙星等药物较敏感,对强力霉素红霉素等有耐药性。利用氟苯尼考对水体进行治疗,用药后加州鲈的病情得到有效控制。结果表明,MALDI-TOF MS鉴定结果与生化法完全一致,且具有操作简单、经济快速的特点。 展开更多
关键词 MALDI-TOF MS 加州鲈(Micropterus salmoides) 柠檬酸杆菌(citrobacter freundii) 微生物鉴定
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奶粉中弗氏柠檬酸杆菌影响因素的研究 被引量:1
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作者 李卫华 张建军 +1 位作者 张敏爱 罗秀珍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第15期211-213,共3页
目的:对奶粉中弗氏柠檬酸杆菌的影响因素进行研究,提供奶粉安全保藏和消费的参考数据。方法:采用人工污染不含弗氏柠檬酸杆菌奶粉作为实验材料,对冷藏、冷冻温度、热水冲调、标准菌株D值、水活度(aw)、pH值影响因素进行实验。结果:D4℃... 目的:对奶粉中弗氏柠檬酸杆菌的影响因素进行研究,提供奶粉安全保藏和消费的参考数据。方法:采用人工污染不含弗氏柠檬酸杆菌奶粉作为实验材料,对冷藏、冷冻温度、热水冲调、标准菌株D值、水活度(aw)、pH值影响因素进行实验。结果:D4℃=15周,4℃时,第18周有霉菌生长。冷冻(-18℃)温度下,细菌数量下降不明显;用大于55℃的水冲调奶粉时,细菌数明显下降,D55℃=70s,D60℃=7s;当aw≤0.75时,aw越大,随奶粉保存时间的延长弗氏柠檬酸杆菌减少的数量越多,aw≥0.75时,则随保存时间延长,细菌减少的数量变缓;弗氏柠檬酸杆菌生长的pH值范围约为3.5~9.5。结论:对弗氏柠檬酸杆菌而言,刚加工后的奶粉适宜在室温下短期保存;开袋后的奶粉在冷藏状态下保存不宜超过18周;中心温度大于60℃为奶粉冲调的安全温度。 展开更多
关键词 奶粉 柠檬酸杆菌 影响因素
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犬源弗氏柠檬酸杆菌的分离与鉴定 被引量:3
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作者 张希墨 陆璐 +1 位作者 刘燕霏 杨建德 《天津农学院学报》 CAS 2019年第1期41-44,共4页
为了阐明影响伴侣性动物化脓性疾患的病原,本研究从学院附属动物医院无菌采集1份患子宫蓄脓犬的子宫分泌物进行病原分离与鉴定。通过菌落形态观察及革兰氏染色、生化试验和16SrRNA基因序列分析,结果鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。抗生素敏感性... 为了阐明影响伴侣性动物化脓性疾患的病原,本研究从学院附属动物医院无菌采集1份患子宫蓄脓犬的子宫分泌物进行病原分离与鉴定。通过菌落形态观察及革兰氏染色、生化试验和16SrRNA基因序列分析,结果鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。抗生素敏感性试验结果发现,该分离菌对麦迪霉素和氨卞西林耐药,对氨曲南、头孢唑林、头孢噻吩等抗生素中度敏感,对头孢哌酮、头孢曲松、头孢吡肟等抗生素高度敏感,为防治伴侣动物相关疾病提供参考依据。 展开更多
关键词 子宫蓄脓 柠檬酸杆菌 分离鉴定 药敏试验
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巴西龟弗氏柠檬酸杆菌病的临床症状及组织病理观察 被引量:3
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作者 罗福丽 牛宇宸 +3 位作者 胡秀彩 吕爱军 叶明皓 孙敬锋 《天津农学院学报》 CAS 2020年第2期44-47,共4页
为观察巴西龟弗氏柠檬酸杆菌病的临床症状及其组织病理学特征,采用人工感染试验、石蜡切片和HE染色方法进行组织病理研究。结果表明,感染发病龟主要表现为眼结膜发炎、口鼻皮肤溃烂,解剖可见肺部发黑,肠道淡黄色,无内容物、水样黏液增... 为观察巴西龟弗氏柠檬酸杆菌病的临床症状及其组织病理学特征,采用人工感染试验、石蜡切片和HE染色方法进行组织病理研究。结果表明,感染发病龟主要表现为眼结膜发炎、口鼻皮肤溃烂,解剖可见肺部发黑,肠道淡黄色,无内容物、水样黏液增多等临床症状;组织病理学观察显示眼睑上皮组织色素细胞增多,胃和肠上皮细胞变性、坏死、脱落,心脏心肌纤维间隙变宽、坏死且有大量炎性细胞浸润,肺脏肺泡细胞与血管内皮细胞界限不清、肺泡壁毛细血管淤血,肝脏肝细胞坏死、中央静脉淤血、肝细胞索紊乱,肾脏肾小管上皮细胞坏死,肾小球出血,肌肉肌纤维间隙有大量炎性细胞浸润。以上结果为阐明龟类弗氏柠檬酸杆菌病的致病机理提供一定参考。 展开更多
关键词 巴西龟 柠檬酸杆菌 组织病理
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