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罗氏沼虾源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析 被引量：1
1
作者 赵梦瑶 陈静 +4 位作者 姚嘉赟 袁雪梅 黄雷 彭先启 张海琪 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第2期137-143,共7页
为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freund... 为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。采用PCR分别扩增分离菌的16S r RNA和gyr B基因序列,测序后经BLAST检索与这两种基因同源性均最高的菌株;通过MEGA 7.0软件中的Clustal W方法将分离菌与从Gen Bank中获得的同源性较高的菌株序列进行多序列比对,采用MEGA 7.0软件中的邻接法构建分离菌与上述菌株16S r RNA和gyr B基因的系统发育树。BLAST检索结果显示,分离菌与弗氏柠檬酸杆菌(KC210829.1)16S r RNA基因序列的同源性高达99.93%;与弗氏柠檬酸杆菌(KF156750.1)gyr B基因序列的同源性达98.76%。16S r RNA和gyr B基因的进化树结果显示,分离菌均与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支,且支持率高达99%。进一步表明引起罗氏沼虾发病的病原为弗氏柠檬酸杆菌。将分离菌分别以1.02×10^(9)cfu/m L~1.02×10^(4)cfu/m L 6种浓度感染健康罗氏沼虾,每日观察并记录罗氏沼虾的发病症状及死亡率,根据Probit回归法计算分离菌对罗氏沼虾的半数致死量(LD50)。结果显示,1.02×10^(6)cfu/m L以上浓度的弗氏柠檬酸杆菌均能够导致罗氏沼虾出现体型消瘦、行动迟缓无活力的症状,1.02×10^(5)cfu/m L以下浓度的弗氏柠檬酸杆菌并不致罗氏沼虾出现症状。经统计该菌株对罗氏沼虾的LD50为1.01×10^(7)cfu/m L,表明该菌株对罗氏沼虾的致病性较强。采用PCR分别检测该分离菌株的定居因子基因(cfa)、尿素酶基因簇(ure G、ure F、ure E、ure D)、Vi抗原基因(via B)、外膜蛋白基因(omp X)等7种毒力相关基因,结果显示该菌株分别扩增到375 bp(cfa)、119 bp(ure G)、300 bp(ure F)、247 bp(ure E)、243 bp(ure D)、875 bp(via B)及250 bp(oomp X)的7种毒力基因。采用K-B纸片扩散法测定分离菌对10类共35种药物的敏感性,结果显示该分离菌对β-内酰胺类的头孢他啶和头孢曲松、多肽素类的多黏菌素B、氨基糖苷类的庆大霉素以及拉氧头孢这5种药物敏感,对β-内酰胺类的青霉素、氯霉素类的氟苯尼考、多肽类的万古霉素及苯唑醂、克林霉素和新生霉素等27种药物呈不同程度的耐药性,且为多重耐药菌。综上所述,本研究从患病罗氏沼虾中分离到了一株弗氏柠檬酸杆菌,该菌携带多种毒力基因,对罗氏沼虾的致病性较强,为进一步研究弗氏柠檬酸杆菌对水产动物的致病性及对罗氏沼虾弗氏柠檬酸杆菌病的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 弗氏柠檬酸杆菌 致病性 毒力基因 药敏分析
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弗氏柠檬酸杆菌噬菌体NM4.3生物学特性及全基因组分析
2
作者 陈煜裕 刘畅 +2 位作者 魏永谦 刘春 姜敬哲 《南方水产科学》 北大核心 2025年第4期35-43,共9页
弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)是近年来牛蛙(Rana catesbeiana)养殖中新出现的高致病性病原菌,其多重耐药性增加了防控难度。从牛蛙养殖尾水中分离出1株裂解弗氏柠檬酸杆菌的噬菌体NM4.3,通过全基因组测序、生物学特性和系统发... 弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)是近年来牛蛙(Rana catesbeiana)养殖中新出现的高致病性病原菌,其多重耐药性增加了防控难度。从牛蛙养殖尾水中分离出1株裂解弗氏柠檬酸杆菌的噬菌体NM4.3,通过全基因组测序、生物学特性和系统发育分析,评估其潜在应用价值。结果显示,NM4.3为圆环dsDNA噬菌体,基因组大小为174351 bp,GC含量为38.74%,编码310个开放阅读框(ORF),包含病毒粒子结构、宿主裂解及DNA代谢相关功能基因,还额外编码13个tRNA。生物学特性结果表明,NM4.3潜伏期短(10 min),裂解效率高(爆发量76 PFU·细胞−1),在60℃和pH 3~12处理1 h后仍可维持一定活性。基于基因组的核酸序列和保守基因末端酶大亚基(Ter-L)的氨基酸序列分析,鉴定NM4.3属于Straboviridae、Tevenvirinae、Moonvirus,与已知成员的平均核苷酸一致性(ANI)低于95%,定义为该属下的一个新种。基因组注释发现其长尾纤维蛋白存在变异,这可能是影响宿主特异性的因素。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 噬菌体 生物学特性 基因组测序及分析 系统发育分析
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头孢噻肟钠对鲟源嗜水气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌的体外药效学研究
3
作者 周天琦 徐嘉楠 +3 位作者 范厚勇 王姝然 许丹 郑跃平 《水产科技情报》 2025年第5期317-323,共7页
为筛选出针对中华鲟细菌性疾病的治疗药物,并为其使用提供参考,针对鲟源嗜水气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌进行了药物敏感性试验,并测定了头孢噻肟钠对2种菌株的最小抑菌浓度(MIC),建立了1、2、4、8倍MIC下头孢噻肟钠对2种菌株的杀菌动力学... 为筛选出针对中华鲟细菌性疾病的治疗药物,并为其使用提供参考,针对鲟源嗜水气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌进行了药物敏感性试验,并测定了头孢噻肟钠对2种菌株的最小抑菌浓度(MIC),建立了1、2、4、8倍MIC下头孢噻肟钠对2种菌株的杀菌动力学曲线,测定了该药对2种细菌的抗菌后效应(PAE)。药敏试验结果显示,2种菌株对4种头孢菌素(头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟和头孢哌酮)敏感或中度敏感,对多黏菌素B、复方新诺明、庆大霉素、红霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等9种药物存在不同程度的耐药。头孢噻肟钠对2种菌株的MIC均为1 mg/L。杀菌动力学曲线显示,头孢噻肟钠对2种菌株的抑菌效果表现出强时间依赖性及浓度依赖性。PAE结果显示,2、4、8倍MIC的头孢噻肟钠对弗氏柠檬酸杆菌的体外PAE分别为(0.22±0.12)、(0.39±0.09)、(0.67±0.20)h,对嗜水气单胞菌的体外PAE分别为(1.24±0.17)、(2.64±0.31)、(2.96±0.28)h。研究结果表明,头孢噻肟钠对鲟源嗜水气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌具有较好的体外抑制效果。 展开更多
关键词 头孢噻肟钠 弗氏柠檬酸杆菌 嗜水气单胞菌 中华鲟
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弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法的建立 被引量：1
4
作者 公翠萍 娄剑锋 +3 位作者 孙威 郭梦雅 胡大雁 刘晓丹 《水产学杂志》 2025年第1期76-81,共6页
为了建立一种快速鉴别诊断弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)的环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,根据OmpA基因保守序列设计1套LAMP特异性检测引物,以弗氏柠檬酸杆菌DNA为模板、羟基萘酚蓝为... 为了建立一种快速鉴别诊断弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)的环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,根据OmpA基因保守序列设计1套LAMP特异性检测引物,以弗氏柠檬酸杆菌DNA为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,建立弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法,并优化反应体系和反应条件,检测该方法的特异性及灵敏度。结果显示:所建立的弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法与大肠杆菌(Escherichia coli)、鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffi)、鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)、蜂房哈夫尼亚菌(Hafnia alvei)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)均无交叉反应,最低检测量为1.43×10^(2) copies。为了进一步缩短检测该菌的过程,将HNB染料添加到LAMP反应体系中建立可视化弗氏柠檬酸杆菌LAMP检测方法,55 min内在可见光下通过肉眼直接观察颜色变化来判断结果。本研究建立的弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法操作简便、快速、特异性及灵敏性高,对弗氏柠檬酸杆菌引起的水产动物疾病的快速诊断具有重要的实践意义。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 环介导恒温扩增技术 快速检测
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1株奶牛乳源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及耐药性分析
5
作者 昭日格图 林鑫 +4 位作者 毛冉 李清泉 合希格白音 韩晓华 于辰龙 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期194-199,共6页
确定内蒙古赤峰市某养殖场奶牛乳房炎的潜在致病菌,本试验从该养殖场牛奶中分离获得1株致病菌(X-3),采用形态学观察、生化鉴定、基于16S rDNA序列构建系统进化树、人工感染小鼠、毒力基因检测和Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法对分离菌株进... 确定内蒙古赤峰市某养殖场奶牛乳房炎的潜在致病菌,本试验从该养殖场牛奶中分离获得1株致病菌(X-3),采用形态学观察、生化鉴定、基于16S rDNA序列构建系统进化树、人工感染小鼠、毒力基因检测和Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法对分离菌株进行鉴定和分析。结果显示:分离菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),具有较强的致病性,小鼠腹腔注射0.2 mL浓度为1.5×10~7 CFU/mL弗氏柠檬酸杆菌,96 h内致死率为57.14%,剖检发现小鼠肺部出现出血斑,呈花斑样,肝脏淤血,肠道黏膜出血。经毒力基因检测该病菌携带cfa、ureD、ureE、ureF、ureG、viaB和ompX 7种毒力基因。药敏试验结果显示,分离菌株仅对15种抗生素中的3种敏感,包括头孢噻肟、左氧氟沙星和氟苯尼考。本研究结果为弗氏柠檬酸杆菌分离、鉴定、治疗和诊治提供科学依据,也为潜在细菌性奶牛乳腺炎的防治提供了参考数据。 展开更多
关键词 牛乳 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 进化树分析
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克氏原螯虾源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及ERIC-PCR指纹分析
6
作者 卢冰霞 陈婷婷 +10 位作者 许艺兰 周英宁 梁家幸 黄广杰 江新华 李斌 秦毅斌 赵硕 曾家家 陈忠伟 何颖 《水产学杂志》 2025年第3期14-23,71,共11页
为了解广西壮族自治区淡水养殖克氏原螯虾体内弗氏柠檬酸杆菌的感染情况,从广西各地养殖场采集克氏原螯虾,取肝胰腺进行细菌分离,利用形态学观察、生理生化试验、细菌16S rRNA和gyrB基因序列分析对分离到的菌株进行鉴定,并进行耐药性试... 为了解广西壮族自治区淡水养殖克氏原螯虾体内弗氏柠檬酸杆菌的感染情况,从广西各地养殖场采集克氏原螯虾,取肝胰腺进行细菌分离,利用形态学观察、生理生化试验、细菌16S rRNA和gyrB基因序列分析对分离到的菌株进行鉴定,并进行耐药性试验和ERIC-PCR指纹分析。分离获得40株弗氏柠檬酸杆菌。耐药性试验结果表明:40株弗氏柠檬酸杆菌对β-内酰胺类的抗菌药物青霉素、阿莫西林和头孢拉定等具有较强的耐药性,对四环素类抗菌药物已呈现不同程度的耐药性,而对氟喹诺酮类的氧氟沙星(禁用兽药)、环丙沙星,磺胺类的复方新诺明,林可霉素类的林可霉素、多磷类的磷霉素和氯霉素类的氟苯尼考均具有较高的敏感性。ERIC-PCR指纹分析结果表明,这40株弗氏柠檬酸杆菌共分为16个基因型,不同基因型空间分布存在一定差异,同一地区克氏原螯虾源弗氏柠檬酸杆菌也具有显著的遗传多样性。本研究结果可为克氏原螯虾弗氏柠檬酸杆菌病的有效防控提供理论依据。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 耐药性分析 ERIC-PCR
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弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及其药敏试验 被引量：1
7
作者 许国洋 付文贵 +6 位作者 付利芝 闫志强 高广亮 邓娟 戴玉娇 庞丽霞 翟少钦 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期92-96,共5页
为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。... 为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。结果显示,分离到的弗氏柠檬酸杆菌在血平板上生长时导致溶血现象。生化试验中,硝酸盐还原、山梨醇和葡萄糖发酵等9个检测指标为阳性;且该菌对氧氟沙星、诺氧沙星、万古霉素、青霉素和链霉素耐药,并携带aacA-aphD、ileS和vanA3种耐药基因。该菌对小鼠的致死率为60%,剖检发现小鼠肝脏、肺脏、肠道、肾脏和脾脏组织发生不同程度病理变化,其中,小鼠肝脏和肺脏组织的出血症状最为明显;组织病理学观察发现,肝脏组织可见多量中央静脉淤血,肝窦内可见淤血;肺脏组织可见大量血管淤血,大面积肺泡壁间质淤血;肠绒毛黏膜上皮与固有层轻度分离。试验结果可为弗氏柠檬酸杆菌致病机理的进一步研究提供参考,也可为仔猪潜在细菌性疫病防治提供了数据支撑。 展开更多
关键词 猪 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 耐药基因 致病性
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弗氏柠檬酸杆菌RPA-LFD快速检测方法的建立及应用 被引量：6
8
作者 王姝然 范厚勇 +3 位作者 徐嘉楠 周天琦 许丹 郑跃平 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期241-249,共9页
为建立一种针对弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)敏感性高、特异性强的临床快速检测方法,根据该菌定居因子基因cfa的保守序列,设计特异性引物,采用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),并结合琼脂糖... 为建立一种针对弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)敏感性高、特异性强的临床快速检测方法,根据该菌定居因子基因cfa的保守序列,设计特异性引物,采用重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA),并结合琼脂糖凝胶电泳(AGE)和侧流层析试纸条(LFD)方法进行反应条件的优化及特异性与灵敏度的检测。结果表明:本研究中所建立的弗氏柠檬酸杆菌重组酶聚合酶扩增结合侧向流动试纸条(RPA-LFD)快速检测方法,在38℃条件下扩增20 min后,能特异性地检测到弗氏柠檬酸杆菌,对弗氏柠檬酸杆菌纯培养物和基因组DNA的最小检出限分别为1.5×102 CFU/mL和200 fg/μL,是常规PCR(cfa引物)检测灵敏度(20 pg/μL)的100倍;利用所建立的RPA-LFD法与常规PCR同时检测杂交鲟攻毒试验样本,两种方法的检测结果一致。研究表明,本研究中建立的弗氏柠檬酸杆菌RPA-LFD方法,操作简便、反应迅速、特异性好、灵敏度高,并且不需要昂贵的仪器,该方法可为未来弗氏柠檬酸杆菌细菌性疾病的早期诊断提供更有效的技术支持。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 快速检测 重组酶聚合酶扩增技术 侧向流动试纸条
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丹顶鹤源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏结果分析 被引量：3
9
作者 张关岷辉 《现代农业科技》 2024年第6期149-151,156,共4页
为查明一例源于安徽省某动物园的丹顶鹤死因,从该丹顶鹤肝部组织坏死灶采集病料,进行细菌分离与鉴定,并对其药敏结果进行分析。结果表明:该菌落在血琼脂平板上生长呈白色不透明菌落,革兰氏阴性菌;生理生化试验显示,该菌在葡萄糖、甘露... 为查明一例源于安徽省某动物园的丹顶鹤死因,从该丹顶鹤肝部组织坏死灶采集病料,进行细菌分离与鉴定,并对其药敏结果进行分析。结果表明:该菌落在血琼脂平板上生长呈白色不透明菌落,革兰氏阴性菌;生理生化试验显示,该菌在葡萄糖、甘露醇、乳糖、山梨醇、硫化氢中均呈阳性;PCR扩增其16S rDNA基因,其大小约1500 bp,经系统进化树分析,与已报道的弗氏柠檬酸杆菌NBRC 12681菌株(NR 114345.1)在同一分支;药敏结果显示,其对氧氟沙星和庆大霉素高度敏感,对丁胺卡那、多粘霉素B中敏;对青霉素、阿莫西林、恩诺沙星、头孢噻肟、氨苄西林、复方新诺明、氟苯尼考耐药。综上所述,本次从患病丹顶鹤肝部分离的病原是弗氏柠檬酸杆菌,其对多种抗菌药具有一定的耐药性。 展开更多
关键词 丹顶鹤 弗氏柠檬酸杆菌 鉴定 耐药性
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一起番鸭感染弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏结果
10
作者 范冰洁 肖开提·阿布都克力木 +1 位作者 李爽 夏合娜孜·肖开提 《新疆畜牧业》 2024年第1期18-21,共4页
为确定乌鲁木齐市米东区某番鸭养殖场因饲喂冷冻海鱼有番鸭死亡的情况,无菌取死亡番鸭实质脏器、胃内容物,冷冻海鱼脏器开展细菌培养,从死亡番鸭胃内容物及喂食鱼中分离到一株细菌。经形态学特征分析和细菌鉴定仪测定,分离的菌株为弗氏... 为确定乌鲁木齐市米东区某番鸭养殖场因饲喂冷冻海鱼有番鸭死亡的情况,无菌取死亡番鸭实质脏器、胃内容物,冷冻海鱼脏器开展细菌培养,从死亡番鸭胃内容物及喂食鱼中分离到一株细菌。经形态学特征分析和细菌鉴定仪测定,分离的菌株为弗氏柠檬酸杆菌。药敏试验结果表明,分离菌株对头孢类抗生素环丙沙星和恩诺沙星高度敏感,对氧氟沙星中度敏感,对本次试验检测的其他24种抗菌药具有耐药性。 展开更多
关键词 番鸭 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定
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克氏原螯虾弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定与药敏试验 被引量：27
11
作者 陈红莲 宋光同 +2 位作者 何吉祥 侯冠军 王永杰 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第1期73-77,共5页
为确定引起养殖克氏原螯虾(Procambarus clarkii)患病的病原种类及耐药情况,从患病克氏原螯虾肝胰腺取样进行常规细菌学检查,对分离株进行回归感染试验、形态观察、生理生化特性检测、16S rRNA和gyrB基因分析及药敏试验。结果显示:从患... 为确定引起养殖克氏原螯虾(Procambarus clarkii)患病的病原种类及耐药情况,从患病克氏原螯虾肝胰腺取样进行常规细菌学检查,对分离株进行回归感染试验、形态观察、生理生化特性检测、16S rRNA和gyrB基因分析及药敏试验。结果显示:从患病克氏原螯虾肝胰腺分离到大量菌落形态和色泽一致的细菌,代表菌株X120523为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),具有较强致病性,对20种抗生素中的喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素敏感。 展开更多
关键词 克氏原螯虾(Procambarus clarkii) 弗氏柠檬酸杆菌(citrobacter freundii) 分离鉴定 16S RRNA基因 gyrB基因 药敏试验
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中华鳖弗氏柠檬酸杆菌败血症病原分离鉴定与药敏试验 被引量：42
12
作者 林启存 朱丽敏 +2 位作者 李忠全 许宝青 谢楠 《水产科学》 CAS 北大核心 2008年第1期42-43,共2页
利用常规分离方法对病鳖肝、肾、肠组织进行细菌性病原分离,并对所获得的纯培养物进行VITEK-32鉴定、药敏及人工感染试验。试验结果表明,弗氏柠檬酸杆菌是该败血症的一种主要病原菌,它对左旋氧氟沙星、庆大霉素等多种药物敏感。
关键词 中华鳖 败血症 药敏试验 弗氏柠檬酸杆菌
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鲟源弗氏柠檬酸杆菌分离鉴定及药敏特性研究 被引量：33
13
作者 杨移斌 夏永涛 +5 位作者 赵蕾 郑卫东 邱军强 曹海鹏 胡鲲 杨先乐 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期766-771,共6页
鲟隶属于鲟形目（Acipenseriformes）,是中国近年来养殖发展较快的淡水养殖品种。虽然养殖技术及条件要求较高,但是由于养殖鲟鱼具有很高的经济价值,而且生长快、肉质好、全身是宝,因而受到广大养殖户推崇[1]。但是近年来随着养殖量的... 鲟隶属于鲟形目（Acipenseriformes）,是中国近年来养殖发展较快的淡水养殖品种。虽然养殖技术及条件要求较高,但是由于养殖鲟鱼具有很高的经济价值,而且生长快、肉质好、全身是宝,因而受到广大养殖户推崇[1]。但是近年来随着养殖量的迅速增大,养殖集约化程度不断提高,造成鲟养殖环境不断恶化,使得鲟体质普遍下降,发病率大增。鲟鱼多发细菌性疾病,暴发性强。 展开更多
关键词 施氏鲟 弗氏柠檬酸杆菌 鉴定 药敏特性
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中华绒螯蟹病原弗氏柠檬酸杆菌的鉴定 被引量：35
14
作者 陈翠珍 张晓君 +2 位作者 房海 巩元芳 葛慕湘 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期136-141,共6页
目的对从一起自然发病的病(死)中华绒螯蟹(Eriocheir sinensisH.Milne-Edwards)肝胰腺中,所分离做纯培养的6株(HQ010516B-1至HQ010516B-6)菌,进行在主要生物学性状、感染试验的致病作用、对抗菌类药物的敏感性等方面的检验,旨在明确分... 目的对从一起自然发病的病(死)中华绒螯蟹(Eriocheir sinensisH.Milne-Edwards)肝胰腺中,所分离做纯培养的6株(HQ010516B-1至HQ010516B-6)菌,进行在主要生物学性状、感染试验的致病作用、对抗菌类药物的敏感性等方面的检验,旨在明确分离菌的种类、病原学意义及耐药特征等。方法在发病情况及主要病变检验的基础上,以6只病(死)蟹的肝胰腺为材料做细菌分离与纯培养,对纯培养菌做形态特征、理化特性、16S rRNA基因序列测定及系统发育学分析等方面较系统的鉴定,主要依据《Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology.9th ed》(1994)并结合系统发育特征做菌种归类判定;以3×108CFU/ml的菌悬液,对健康蟹做感染试验,测定相应的致病作用;用琼脂扩散(K-B)法做对常用抗菌类药物的敏感性测定,以抑菌圈直径作为敏感与耐药的判定指标。结果分离做纯培养的6株菌为同种的弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundi-i),对供试健康蟹有致病性,对供试37种抗菌类药物中的头孢噻肟等22种药物呈敏感或高度敏感、对四环素等5种呈低度敏感、对青霉素G等10种耐药。结论所检出的弗氏柠檬酸杆菌,构成了所检中华绒螯蟹病例的病原菌之一,对供试抗菌类药物未表现出敏感与耐药的明显株间差异性。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 弗氏柠檬酸杆菌 鉴定
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羊源致病性弗氏柠檬酸杆菌的分离与鉴定 被引量：13
15
作者 刘会胜 赵战勤 +4 位作者 薛云 薛巧 汪洋 常世恺 刘媛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1593-1599,共7页
旨在确定导致河南省某养殖场小尾寒羊细菌性感染死亡的病原。从3只不同时间发病死亡的小尾寒羊各组织脏器的病料中分离到3株细菌——LK-1、LK-2和LK-3株。经微生物自动鉴定仪鉴定和细菌16SrRNA基因序列分析,确定该致病菌为弗氏柠檬酸杆... 旨在确定导致河南省某养殖场小尾寒羊细菌性感染死亡的病原。从3只不同时间发病死亡的小尾寒羊各组织脏器的病料中分离到3株细菌——LK-1、LK-2和LK-3株。经微生物自动鉴定仪鉴定和细菌16SrRNA基因序列分析,确定该致病菌为弗氏柠檬酸杆菌。小鼠毒力试验结果表明:3株细菌的LD50分别为5.0×107、6.0×107和5.8×107 CFU。回归试验结果表明,经人工感染健康小尾寒羊,可复制与自然发病羊相似的症状和病理变化,且从其各组织脏器内再次分离到相同的病原菌。药敏试验结果表明,3株弗氏柠檬酸杆菌对大部分药物的抗药谱相同(17/21),且均对头孢噻肟等11种药物高度敏感。这些研究结果表明弗氏柠檬酸杆菌是该小尾寒羊致死性病例的病原菌。本文在国内外首次报道了弗氏柠檬酸杆菌对小尾寒羊具有致病性。 展开更多
关键词 羊 弗氏柠檬酸杆菌 分离 药敏试验 回归试验
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弗氏柠檬酸杆菌对动物和人致病性研究进展 被引量：57
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作者 薛巧 赵战勤 +2 位作者 刘会胜 薛云 董发明 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期81-85,共5页
弗氏柠檬酸杆菌在自然界广泛分布,是一种典型的人-畜-鱼共患病条件性致病菌,一般情况下不引起动物和人发病。近年来,陆续有报道弗氏柠檬酸杆菌强毒株也能引起动物败血症甚至急性死亡,且对水产动物的致病报道较多。人类可因弗氏柠檬酸杆... 弗氏柠檬酸杆菌在自然界广泛分布,是一种典型的人-畜-鱼共患病条件性致病菌,一般情况下不引起动物和人发病。近年来,陆续有报道弗氏柠檬酸杆菌强毒株也能引起动物败血症甚至急性死亡,且对水产动物的致病报道较多。人类可因弗氏柠檬酸杆菌感染而发生腹泻、食物中毒和继发感染。弗氏柠檬酸杆菌引起动物和人感染时有携带如β-内酰胺酶等新型耐药基因的可能,且发现有cfa、ST和SLT等多种毒力因子。综合研究表明弗氏柠檬酸杆菌可能是一种尚未被人们充分认识的病原菌,且有危害加重的趋势。因此,在动物和人类疾病防治中不能忽视弗氏柠檬酸杆菌。论文主要阐述了弗氏柠檬酸杆菌对动物和人的致病性方面取得的进展,旨在引起研究者对弗氏柠檬酸杆菌致病性的重视,并展望了弗氏柠檬酸杆菌未来研究的方向。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 动物 人 致病性 耐药
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弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定与PCR-SSCP分析 被引量：15
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作者 胡秀彩 王艺 吕爱军 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期12-18,共7页
利用营养琼脂、MaC培养基从草鱼肠道中分离到3株细菌,暂时编号为TC-1、TC-2和TC-3,通过形态学观察、生理生化特征、药敏试验、动物试验、构建系统发育进化树及PCR-SSCP分析等系统鉴定,结果表明3株菌株均为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter fr... 利用营养琼脂、MaC培养基从草鱼肠道中分离到3株细菌,暂时编号为TC-1、TC-2和TC-3,通过形态学观察、生理生化特征、药敏试验、动物试验、构建系统发育进化树及PCR-SSCP分析等系统鉴定,结果表明3株菌株均为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),其中TC-2菌株对小鼠、斑马鱼有致病性;3株杆菌均对头孢噻肟、头孢曲松、洛美沙星、诺氟沙星等多种药物敏感;系统发育分析表明,3株弗氏柠檬酸杆菌16S rDNA序列与DSM30039模式株同源性分别为99.59%、99.47%和99.53%,且位于系统发育树的同一分支;进一步采用V3区PCR-SSCP分析结果显示弗氏柠檬酸杆菌SSCP图谱中菌株间带型存在差异。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 鉴定 16S RDNA PCR-SSCP
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一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究 被引量：19
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作者 石征宇 易弋 +4 位作者 黄德生 罗福广 黄杰 鲁晶娣 黎娅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第2期479-485,共7页
为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16SrDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多... 为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16SrDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多重耐药性,测试的20种药物中,该菌株对恩诺沙星、青霉素等13种药物具有完全耐药性,仅对头孢曲松、头孢他啶、头孢拉定、哌拉西林、舒巴坦5种药物敏感。人工感染试验结果显示,该菌对草鱼、黄颡鱼、罗非鱼、禾花鲤具有较强的致病性。本试验结果阐明了罗非鱼患病的原因,同时在养殖过程中可指导养殖户合理用药。 展开更多
关键词 罗非鱼 弗氏柠檬酸杆菌 16SrDNA 耐药性
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大鲵源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及胞外酶活性研究 被引量：7
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作者 曹朕娇 丁诗华 +2 位作者 凌空 金娟 吴兴镇 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期13-18,共6页
为了确定重庆武隆大鲵养殖场患病大鲵的病原菌,并进行菌种鉴定及胞外酶活性研究,从具有典型症状的病鲵肝脏分离出一株菌株TNL12,根据形态学特征、生理生化特性及16SrDNA分析对菌株进行种类鉴定,通过人工感染试验确定病原菌株的致病性,... 为了确定重庆武隆大鲵养殖场患病大鲵的病原菌,并进行菌种鉴定及胞外酶活性研究,从具有典型症状的病鲵肝脏分离出一株菌株TNL12,根据形态学特征、生理生化特性及16SrDNA分析对菌株进行种类鉴定,通过人工感染试验确定病原菌株的致病性,利用平板法检测胞外酶活性.结果显示,所获菌株为革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,其生理生化特性与弗氏柠檬酸杆菌一致.16SrDNA分析表明,TNL12与弗氏柠檬酸杆菌的同源性为99%,在系统发育树上与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支.该病原菌可引起健康青蛙、大鲵出现感染症状,且感染症状与自然发病症状相似.胞外酶活性检测发现该菌可产卵磷脂酶、淀粉酶,但不产脂酶、蛋白酶、明胶酶、脲酶等胞外酶.这些研究结果表明,从患病大鲵中分离出的病原菌为弗氏柠檬酸杆菌,且对大鲵有较强的致病性. 展开更多
关键词 大鲵 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 胞外酶活性
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129株弗氏柠檬酸杆菌临床分离株的耐药性(英文) 被引量：5
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作者 宗志勇 吕晓菊 +1 位作者 过孝静 高燕渝 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期86-89,123,共5页
探讨弗氏柠檬酸杆菌临床分离株对抗菌药物的体外敏感性。研究我院1998年1月～2001年6月从临床标本中分离出的129株弗氏柠檬酸杆菌,测定其对17种抗菌药物的敏感性,分析药敏结果。从痰、尿、脓液、伤口分泌物、血、胆汁、胸水、腹水和静... 探讨弗氏柠檬酸杆菌临床分离株对抗菌药物的体外敏感性。研究我院1998年1月～2001年6月从临床标本中分离出的129株弗氏柠檬酸杆菌,测定其对17种抗菌药物的敏感性,分析药敏结果。从痰、尿、脓液、伤口分泌物、血、胆汁、胸水、腹水和静脉导管的临床标本中共分离出129株弗氏柠檬酸杆菌。这129株对17种抗菌药物的耐药率分别为:亚胺培南7.75%,阿米卡星14.72%,头孢吡肟27.91%,哌拉西林/三唑巴坦34.89%,氨曲南46.51%,头孢噻肟46.51%,头孢曲松49.61%,头孢他啶50.4%,环丙沙星50.4%,妥布霉素53.49%,庆大霉素60.46%,复方磺胺甲唑61.24%,头孢呋辛69.77%,氨苄西林/舒巴坦72.89%,哌拉西林78.29%,头孢西丁89.15%,头孢唑林94.34%。结论对我院弗氏柠檬酸杆菌临床分离株对亚胺培南和阿米卡星耐药率较低,但对包括第三代头孢菌素在内的其它抗菌药物的耐药率高,且存在多重耐药菌株,对其耐药性和耐药机制应加强监测和研究。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 药敏试验 抗生素 耐药性 抗菌药物
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