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山楂过氧化物酶基因的克隆及在烟草中异位表达分析 被引量:8
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作者 代红艳 闫玉娇 +2 位作者 李晓明 李贺 张志宏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1070-1076,F0004,共8页
【目的】从山楂(Crataegus pinnatifida)中克隆过氧化物酶(POD)编码基因,通过转基因验证其在木质素合成中的作用,为揭示山楂内果皮形成分子机制奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从山楂克隆基因,以p RI 101-AN为构建基因过量表达载体的... 【目的】从山楂(Crataegus pinnatifida)中克隆过氧化物酶(POD)编码基因,通过转基因验证其在木质素合成中的作用,为揭示山楂内果皮形成分子机制奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从山楂克隆基因,以p RI 101-AN为构建基因过量表达载体的基础载体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将目的基因导入烟草。【结果】从山楂中克隆出编码序列长度为996 bp的POD72基因,命名为Cp POD72。山楂POD72与木本和草本植物POD72的氨基酸序列一致性均较高。构建了Cp POD72基因的过量表达载体,通过农杆菌介导的转化获得了66个烟草转化植株。RT-PCR检测结果显示Cp POD72基因在烟草转基因植物中异位表达,组织化学染色分析表明转Cp POD72基因烟草植株中木质素含量增加。【结论】Cp POD72基因可能参与木质素合成。 展开更多
关键词 山楂 过氧化物酶基因 木质素 转基因烟草 异位表达
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含异位表达花生AhNCED1基因的拟南芥提高耐渗透胁迫能力 被引量:4
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作者 万小荣 莫爱琼 +3 位作者 郭小建 杨妙贤 余土元 曹锦萍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1440-1449,共10页
AhNCED1是干旱胁迫下调控花生ABA生物合成的关键基因。以pCAMBIA1301为基本双元表达载体,分别构建CaMV35S启动子和拟南芥AtNCED3基因启动子(AtNCED3p)驱动花生AhNCED1基因的2个植物双元表达载体p35S::ORF和pAtNCED3p::ORF,通过根癌农杆... AhNCED1是干旱胁迫下调控花生ABA生物合成的关键基因。以pCAMBIA1301为基本双元表达载体,分别构建CaMV35S启动子和拟南芥AtNCED3基因启动子(AtNCED3p)驱动花生AhNCED1基因的2个植物双元表达载体p35S::ORF和pAtNCED3p::ORF,通过根癌农杆菌介导法将上述两个表达载体分别转化野生型和129B08/nced3突变体拟南芥,经潮霉素筛选和PCR鉴定分别获得35S::ORF-WT和A3p::ORF-B08转基因植株,RT-PCR证实花生AhNCED1基因已在转基因植株中稳定表达,并对野生型、129B08/nced3突变体和转基因拟南芥进行外源ABA敏感性和耐渗透胁迫能力分析。结果表明,129B08/nced3突变体对外源ABA的敏感性下降,而花生AhNCED1基因在拟南芥中的异位表达提高了对外源ABA的敏感性。在山梨醇胁迫下,129B08/nced3突变体种子的相对萌发率明显低于野生型的,而A3p::ORF-B08转基因拟南芥种子的相对萌发率与野生型的相当,显著高于129B08/nced3突变体的,且300mmolL–1山梨醇胁迫下,35S::ORF-WT转基因拟南芥种子的相对萌发率明显高于野生型的。在300mmolL–1山梨醇胁迫下,129B08/nced3突变体幼苗叶片高度黄化,根的形成和幼苗生长受到严重抑制,而A3p::ORF-B08转基因突变体与野生型相似,叶片仅轻度黄化,幼苗生长势良好;35S::ORF-WT转基因植株幼苗生长未受明显影响。这些结果说明,拟南芥129B08/nced3突变体对山梨醇诱导的非离子渗透胁迫有超敏性,异位表达花生AhNCED1基因能恢复该突变体对山梨醇的超敏性,提高拟南芥的耐渗透胁迫能力。 展开更多
关键词 AhNCED1基因 异位表达 转基因拟南芥 渗透胁迫 ABA敏感性
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陆地棉GhBI-1基因在拟南芥中的异位表达及耐盐性研究 被引量:2
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作者 霍雪寒 张景霞 +2 位作者 高阳 张传云 张军 《山东农业科学》 2013年第4期1-3,20,共4页
前期工作中,我们从陆地棉基因组中分离了GhBI-1基因全长cDNA,构建了GhBI-1过量表达载体并转化拟南芥。本研究在此基础上,利用卡那初步筛选获得转基因拟南芥,通过PCR进一步验证,得到具有卡那抗性并且遗传稳定的T3代纯合株系。利用不同浓... 前期工作中,我们从陆地棉基因组中分离了GhBI-1基因全长cDNA,构建了GhBI-1过量表达载体并转化拟南芥。本研究在此基础上,利用卡那初步筛选获得转基因拟南芥,通过PCR进一步验证,得到具有卡那抗性并且遗传稳定的T3代纯合株系。利用不同浓度NaCl处理野生型和转GhBI-1基因拟南芥,结果表明,转基因拟南芥在200 mmol/L NaCl胁迫后,萌发率和生长情况要好于野生型拟南芥,过量表达GhBI-1基因能够提高拟南芥耐受盐胁迫的能力。 展开更多
关键词 陆地棉 GhBI-1基因 异位表达 耐盐性
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异位表达Dichaete对果蝇足部发育的影响及其作用机制
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作者 董玮 孔悦 +3 位作者 马恩波 张建珍 张敏 张徐波 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期149-155,共7页
【目的】果蝇Dichaete基因是Sox家族B亚家族基因,其表达贯穿整个胚胎发育阶段,在个体发育过程中发挥重要作用。Dichaete在野生型果蝇幼虫足芽上也有微弱表达,然而其在足发育过程中的作用少有报道。本研究旨在研究异位表达Dichaete对果... 【目的】果蝇Dichaete基因是Sox家族B亚家族基因,其表达贯穿整个胚胎发育阶段,在个体发育过程中发挥重要作用。Dichaete在野生型果蝇幼虫足芽上也有微弱表达,然而其在足发育过程中的作用少有报道。本研究旨在研究异位表达Dichaete对果蝇足部形态构成的影响,探索相关的作用机制。【方法】黑腹果蝇Drosophila melanogaster en-Gal4品系雄性成虫与UAS-Dichaete转基因品系处女蝇杂交,驱动Dichaete异位表达,解剖子一代成虫足,在显微镜下观察异位表达的Dichaete对成虫足形态结构的影响;同时采用免疫组化技术检测异位表达Dichaete对果蝇足芽细胞凋亡和Distal-less(Dll)表达的影响。【结果】异位表达Dichaete导致黑腹果蝇成虫足末端结构缺陷,引起3龄幼虫足芽细胞凋亡增加,上调了Distal-less基因的表达,但对Wg和Dpp信号均无影响;抑制细胞凋亡也无法拯救该缺陷。【结论】异位表达Dichaete导致黑腹果蝇成虫足末端结构缺陷,Dichaete可能通过上调Distal-less基因影响足部发育。 展开更多
关键词 黑腹果蝇 Dichaete 异位表达 细胞凋亡 DISTAL-LESS
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活性型粒酶B基因的异位表达导致多核巨细胞产生
5
作者 赵晶 陈蕾 +4 位作者 许彦鸣 张淼丽 温伟红 王成济 杨安钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期470-475,共6页
粒酶B (granzymeB ,GrB)是一种重要的丝氨酸蛋白酶参与细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)和自然杀伤细胞(NK)介导的细胞杀伤过程 .为研究粒酶B在肿瘤细胞中异位表达后能否诱导细胞死亡 ,将构建的活性型粒酶B(GrBa)基因及其酶活性中心突变型 (mGr... 粒酶B (granzymeB ,GrB)是一种重要的丝氨酸蛋白酶参与细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)和自然杀伤细胞(NK)介导的细胞杀伤过程 .为研究粒酶B在肿瘤细胞中异位表达后能否诱导细胞死亡 ,将构建的活性型粒酶B(GrBa)基因及其酶活性中心突变型 (mGrBa)基因的真核表达载体 ,以脂质体法瞬时转染HeLa细胞 ,通过绿色荧光蛋白 (GFP)共表达、间接免疫荧光、细胞计数、MTT等方法 ,观察到GrBa蛋白的异位表达引起多核巨细胞形态异常 ,并且表达细胞的生长受到抑制 .Percoll分离多核巨细胞后 ,观察到其生长状态较差 ,是导致生长抑制的直接原因 .细胞骨架破坏和具有多极纺锤体的异常有丝分裂 ,推测是多核巨细胞不断产生的根源 . 展开更多
关键词 粒酶B 异位表达 多核巨细胞
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单纯疱疹病毒扩增子载体转导的ATM基因在活体的异位表达(英文)
6
作者 齐建国 王苏鸣 Charles J.Link Jr 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期319-327,T054-T055,共11页
小脑性共济失调与血管扩张症 (A-T)是一种常染色体隐性遗传性疾病 ,具多效表型。此病的特征是小脑变性、免疫缺陷、生长迟缓、早熟性衰老、染色体不稳定、肿瘤易患体质和对辐射的过度敏感。目前尚未发现有效的方法阻断此病的进行性发展... 小脑性共济失调与血管扩张症 (A-T)是一种常染色体隐性遗传性疾病 ,具多效表型。此病的特征是小脑变性、免疫缺陷、生长迟缓、早熟性衰老、染色体不稳定、肿瘤易患体质和对辐射的过度敏感。目前尚未发现有效的方法阻断此病的进行性发展。基因治疗是此病的潜在希望。ATM是此病的致病基因 ,编码 ATM蛋白激酶。本研究将 ATM c DNA完整的读码框架克隆进 1型单纯疱疹病毒 (HSV-1)扩增子载体 (p TO-ATM)。培养的 A-T细胞经 p TO-ATM病毒载体转导后 ,用免疫组织化学方法证明了 ATM在这些细胞的异位表达。为了进一步研究在活体应用此载体系统的可能性 ,选择大鼠脑作为实验靶区。先用免疫组织化学方法观察了内源性 ATM在成年大鼠前脑和小脑的正常分布 ,发现在尾壳核有低水平的 ATM出现 ,而在其余脑区 ,ATM水平则显著地高于尾壳核区。将 p TO-ATM病毒载体注射到成年大鼠的一侧尾壳核 ,3 d后在注射区 (包括针道周围的区域 )观察到密集的 ATM免疫反应阳性神经元。本研究结果证明 ,HSV扩增子病毒载体可以稳定地运载相当大的 c DNA片段 ,转基因在离体和活体均能有效地表达。本研究为使用基因治疗的方法治疗 展开更多
关键词 小脑性共济失调与血管扩张症 ATM基因 HSV-1扩增子载体 基因转移 免疫组织化学 大鼠脑 致病基因 异位表达
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麻竹转录因子DlSCL6的基因克隆及在拟南芥中异位表达 被引量:8
7
作者 杨丽 陈东亮 +2 位作者 彭镇华 赵韩生 高志民 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第11期52-57,共6页
GRAS家族HAM(Hairy Meristem)亚家族是一类转录因子,对植物的生长发育和形态建成具有重要作用。利用RT-PCR和RACE技术从麻竹中得到一个HAM同源基因,命名为DlSCL6。该基因全长2 006 bp,含有5'非编码区129 bp,3'非编码区266 bp,... GRAS家族HAM(Hairy Meristem)亚家族是一类转录因子,对植物的生长发育和形态建成具有重要作用。利用RT-PCR和RACE技术从麻竹中得到一个HAM同源基因,命名为DlSCL6。该基因全长2 006 bp,含有5'非编码区129 bp,3'非编码区266 bp,编码区1 611 bp。DlSCL6蛋白具有LHRⅠ,VHIID,LHRⅡ,PFYRE,SAM 5个保守域,且与某些单子叶植物的SCL6蛋白有较高的一致性,与拟南芥有部分一致性,为43%。DlSCL6基因在大肠杆菌中表达,获得分子量约为60 kDa的重组蛋白。在拟南芥中正义表达DlSCL6基因的植株营养期延长,开花延迟,植株粗壮,莲座叶数量增加;而转反义基因的植株开花提前,植株瘦弱,且莲座叶数量明显减少。由此表明,DlSCL6基因能影响转基因植株茎端分生组织的分生状态,从而导致形态建成的变化。 展开更多
关键词 麻竹 转录因子 拟南芥 异位表达
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花生AhMYB113异位表达促进烟草花青素积累
8
作者 李明 曹慧 许瑞瑞 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期845-851,共7页
为进一步探索MYB转录因子在花生花青素积累过程中的调控机理,以花生常规品种鲁花11(绿色叶片)和紫色叶片花生种质056杂交后代为材料,基于绿色和紫色杂交群体数字基因表达谱克隆了AhMYB113基因,利用生物信息学手段进行保守结构域、系统... 为进一步探索MYB转录因子在花生花青素积累过程中的调控机理,以花生常规品种鲁花11(绿色叶片)和紫色叶片花生种质056杂交后代为材料,基于绿色和紫色杂交群体数字基因表达谱克隆了AhMYB113基因,利用生物信息学手段进行保守结构域、系统进化树等分析,通过实时荧光定量PCR技术检测在花生中的表达模式,在转基因烟草中进行功能鉴定。结果表明,花生AhMYB113基因的开放阅读框全长864 bp,编码287个氨基酸残基;编码蛋白的N端包含2个高度保守的MYB结构域,属于R2R3-MYB转录因子;与拟南芥、金鱼草、矮牵牛、苹果、葡萄中调控花青素积累的R2R3-MYB聚成一大类;通过荧光定量PCR分析发现,AhMYB113在花生紫色杂交后代(PH、PS)中的表达水平要显著高于绿色杂交后代(GH、GS);在烟草NC89中异位表达AhMYB113,能够促进花青素积累,使得转基因烟草叶片转变为紫色,随着叶龄增长叶片紫色逐渐加深,花瓣、雄蕊(花丝、花药)、雌蕊(柱头、花柱)、萼片等组织也分别呈现为紫红色或紫黑色。 展开更多
关键词 花生 AhMYB113 转基因烟草 异位表达 花青素积累
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SIAH1核异位表达抑制乳腺癌细胞凋亡的作用机制
9
作者 蔡存伟 温媛媛 +1 位作者 李晓燕 张丽娜 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期328-332,337,共6页
目的探讨SIAH1核异位表达抑制乳腺癌细胞凋亡的分子机制。方法应用免疫组织化学染色及Western blotting方法检测乳腺癌细胞中SIAH1的表达。构建SIAH1核异位表达的乳腺癌细胞模型,应用免疫荧光及共聚焦实验分析乳腺癌细胞中SIAH1的表达... 目的探讨SIAH1核异位表达抑制乳腺癌细胞凋亡的分子机制。方法应用免疫组织化学染色及Western blotting方法检测乳腺癌细胞中SIAH1的表达。构建SIAH1核异位表达的乳腺癌细胞模型,应用免疫荧光及共聚焦实验分析乳腺癌细胞中SIAH1的表达定位情况,并采用流式细胞术、siRNA干扰技术分析乳腺癌细胞的凋亡情况。结果 SIAH1在部分乳腺癌组织中存在核表达;乳腺癌组织中SIAH1核表达高于对应的癌旁正常组织(P <0.05)。S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)刺激乳腺癌细胞诱导SIAH1入核,从而抑制乳腺癌细胞凋亡。结论 GSNO诱导SIAH1核异位表达后可能通过下调E2F1/Bim的表达抑制乳腺癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 SIAH1 S-亚硝基谷胱甘肽 异位表达 乳腺癌 凋亡
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哺乳动物细胞中异位表达线粒体基因MT-ND3
10
作者 张长发 罗世明 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2019年第4期267-274,共8页
线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变是导致线粒体疾病的重要因素,目前针对这一类疾病还没有有效的治疗方案。在细胞质中表达线粒体基因称为线粒体基因的异位表达,被认为是一种潜在的治疗mtDNA疾病的方法,但并没有一种统一的信号肽... 线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变是导致线粒体疾病的重要因素,目前针对这一类疾病还没有有效的治疗方案。在细胞质中表达线粒体基因称为线粒体基因的异位表达,被认为是一种潜在的治疗mtDNA疾病的方法,但并没有一种统一的信号肽能够将所有线粒体基因导入至线粒体中。本研究探讨了利用异位表达将线粒体蛋白ND3定位至线粒体的可行性,主要发现:(1)在无信号肽的情况下,ND3蛋白自身并不能定位至线粒体,而是定位在内质网上;(2)Rg9mtd1的信号肽可以将ND3蛋白成功导入线粒体中;(3)定位至线粒体的ND3蛋白对线粒体膜电位、活性氧的产生以及细胞增殖均无显著影响,但对线粒体基因的表达方式有调整作用。以上结果表明,异位表达ND3质粒能正确表达和定位,并具有一定的功能性,这为MT-ND3异位表达治疗相关疾病提供了理论支持和技术方案。 展开更多
关键词 线粒体 MT-ND3 线粒体疾病 异位表达
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绿竹BoGPIAP基因克隆与异位表达研究
11
作者 董丽莉 孙化雨 +3 位作者 赵韩生 娄永峰 王丽丽 高志民 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2015年第5期627-633,共7页
糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPIAP)因其结构和功能的多样性,决定了它在各种生物学过程中都发挥着重要作用。采用同源克隆的方法从绿竹(Bambusa oldhamii)中获得一个GPIAP同源基因,命名为BoGPIAP,c DNA全长1 772 bp,其中包括1 356 bp的开... 糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPIAP)因其结构和功能的多样性,决定了它在各种生物学过程中都发挥着重要作用。采用同源克隆的方法从绿竹(Bambusa oldhamii)中获得一个GPIAP同源基因,命名为BoGPIAP,c DNA全长1 772 bp,其中包括1 356 bp的开放阅读框,编码一个451 aa的的蛋白。蛋白结构分析表明,该蛋白包含1个典型的GPIAP家族保守区域(47-211)和1个CCVS结构域,在N-端和C-端分别具有1个跨膜信号肽和1个GPI锚定信号肽,属于GPIAP家族。构建BoGPIAP与GFP融合的表达载体,在洋葱表皮细胞中瞬时表达,结果显示BoCOBL::GFP融合蛋白定位于细胞膜上,证明BoGPIAP基因编码的蛋白为膜蛋白。分别构建BoGPIAP的正义、反义表达载体并转化烟草(Nicotiana tabacum)。PCR检测结果表明,BoGPIAP已转入烟草。与野生型相比,转反义基因植株细弱,纤维细胞壁明显变薄;而转正义基因植株粗壮,纤维细胞壁明显变厚。表明BoGPIAP可能对竹子纤维细胞壁的发育具有调控作用。 展开更多
关键词 绿竹 糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白基因 亚细胞定 异位表达 纤维细胞
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异位嗅觉受体的功能及其作为药物靶点的研究进展
12
作者 刘畅 赵永馨 +2 位作者 葛蓓蓓 卫彬 高勇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期412-419,共8页
嗅觉受体(olfactory receptors,ORs)是一类主要在鼻上皮嗅觉感觉神经元中分布的跨膜蛋白,介导气味向大脑传递实时感觉信号而产生嗅觉。近年来研究发现,ORs也可在鼻腔外组织或器官中表达,且与多种生物过程密切相关,如精子趋化性、伤口愈... 嗅觉受体(olfactory receptors,ORs)是一类主要在鼻上皮嗅觉感觉神经元中分布的跨膜蛋白,介导气味向大脑传递实时感觉信号而产生嗅觉。近年来研究发现,ORs也可在鼻腔外组织或器官中表达,且与多种生物过程密切相关,如精子趋化性、伤口愈合、糖脂代谢及肠道分泌等。此外,ORs还与前列腺癌、乳腺癌及结直肠癌等多种恶性肿瘤关系密切,通过调节细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等过程影响肿瘤的发生发展。本文概述了异位ORs对人体组织器官功能的影响,并评估它们作为治疗疾病的药物靶点的潜在价值。 展开更多
关键词 嗅觉受体 G蛋白偶联受体 异位表达 生物学功能 恶性肿瘤 药物靶点
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麻竹同源异型盒基因DlKNOX1的克隆及功能初步分析 被引量:7
13
作者 刘青 汪玉凤 +2 位作者 赵韩生 陈颖 高志民 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期56-62,共7页
同源异型盒基因在决定植物的形态建成中发挥着重要作用。采用RT-PCR和RACE技术,从麻竹中分离到1个同源异型盒基因,其cDNA全长1 452 bp,编码1个330个氨基酸的蛋白,包含1个KNOX1区、1个KNOX2区、1个ELK区和1个Homeobox区,属于KNOX蛋白,该... 同源异型盒基因在决定植物的形态建成中发挥着重要作用。采用RT-PCR和RACE技术,从麻竹中分离到1个同源异型盒基因,其cDNA全长1 452 bp,编码1个330个氨基酸的蛋白,包含1个KNOX1区、1个KNOX2区、1个ELK区和1个Homeobox区,属于KNOX蛋白,该基因命名为DlKNOX1(GenBank No.KF709955)。组织表达特异性分析表明,DlKNOX1在节中的表达量最高,茎和鞘中次之,而在叶片中最低。将DlKNOX1置于35S启动子控制下,构建到载体pPZP的多克隆位点并转化拟南芥。RT-PCR分析表明,DlKNOX1已在转基因植株中表达。转基因植株表型变化明显,花期比野生型延迟,果荚着生部位明显发生变化,这意味着DlKNOX1基因可能参与麻竹形态建成的调控。 展开更多
关键词 麻竹 同源型盒基因 组织特表达 异位表达 形态建成
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中国水仙NtMADS3基因全长的克隆与表达分析 被引量:4
14
作者 高志民 陈段芬 彭镇华 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期96-101,共6页
MADS-box基因在植物花发育中具有重要作用。采用RT-PCR和RACE技术,从中国水仙幼嫩花蕾中分离到了一个MADS-box同源基因,命名为NtMADS3(GenBank登记号:EU081900)。该基因cDNA全长980 bp;编码区编码241个氨基酸,具有典型的植物MADS-box基... MADS-box基因在植物花发育中具有重要作用。采用RT-PCR和RACE技术,从中国水仙幼嫩花蕾中分离到了一个MADS-box同源基因,命名为NtMADS3(GenBank登记号:EU081900)。该基因cDNA全长980 bp;编码区编码241个氨基酸,具有典型的植物MADS-box基因结构。序列分析表明,NtMADS3编码的蛋白与其他植物的MADS-box蛋白有着较高的一致性,其中与石刁柏的AOM3一致性高达89.2%,与拟南芥的AGL6一致性为60.0%。系统进化树分析表明NtMADS3基因属于E类功能基因。组织表达模式分析显示,NtMADS3基因在中国水仙的开花期各器官及花的各部位均有表达。将该基因置于CaMV 35S启动子控制下,构建到载体pBI121的多克隆位点,在拟南芥中异位表达,转基因植株花期提前,但花型无显著变化。 展开更多
关键词 中国水仙 MADS-BOX基因 克隆 组织特表达 异位表达
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过表达BnFUL基因对拟南芥花和角果发育的影响 被引量:1
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作者 彭鹏飞 胡琼 +5 位作者 付丽 陈玉峰 刘佳 王会 桑世飞 梅德圣 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期13-18,共6页
为适应油菜机械化生产,提高油菜生产效益,挖掘甘蓝型油菜的抗裂角基因资源,基于候选基因途径,根据拟南芥FUL基因的序列设计引物,在甘蓝型油菜抗裂角品系R1-1中扩增Bn FUL基因。序列分析结果表明,Bn FUL基因的ORF长度为726 bp,编码241个... 为适应油菜机械化生产,提高油菜生产效益,挖掘甘蓝型油菜的抗裂角基因资源,基于候选基因途径,根据拟南芥FUL基因的序列设计引物,在甘蓝型油菜抗裂角品系R1-1中扩增Bn FUL基因。序列分析结果表明,Bn FUL基因的ORF长度为726 bp,编码241个氨基酸,具有典型的MADS转录因子结构域。氨基酸序列的比对结果显示十字花科植物FUL蛋白的功能域MADS-box和K-box的氨基酸序列变异较小,多数变异集中在3'末端的非domain区。在拟南芥中过表达Bn FUL基因后发现Bn FUL基因具有一因多效作用,其不仅能增强拟南芥角果的裂角抗性,还能促进拟南芥提前开花,并产生复果现象,在一些转基因拟南芥植株中三个角果同时着生在一个果柄上。这些结果表明Bn FUL可能与甘蓝型油菜花和角果的发育相关。 展开更多
关键词 油菜 BnFUL基因 异位表达 抗裂角性 一因多效
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中国水仙FT基因的表达及功能分析 被引量:2
16
作者 李婷婷 潘秋宇 吴菁华 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1420-1427,共8页
【目的】开花基因座T(Flowering Locus T,FT)基因广泛参与植物的生长发育,在调控开花、地下茎发育、种子萌发和逆境胁迫等过程中发挥重要作用。揭示FT基因在中国水仙(Narcissus tazetta var. chinensis Roem)中的表达模式和功能可为中... 【目的】开花基因座T(Flowering Locus T,FT)基因广泛参与植物的生长发育,在调控开花、地下茎发育、种子萌发和逆境胁迫等过程中发挥重要作用。揭示FT基因在中国水仙(Narcissus tazetta var. chinensis Roem)中的表达模式和功能可为中国水仙花期调控提供理论依据。【方法】基于中国水仙转录组数据,对FT基因进行筛选,获得4个中国水仙FT基因。利用荧光定量PCR技术分析它们在中国水仙不同组织和花芽分化不同时期的表达模式,并在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中超量表达。利用荧光定量PCR技术分析转NtFT1和NtFT4基因拟南芥中SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO 1(SOC1)、 LEAFY(LFY)和APETALA 1(AP1)基因表达水平。【结果】克隆了4个中国水仙FT同源基因Nt FT1、NtFT2、NtFT3和NtFT4,除NtFT3外,中国水仙NtFT都具有FT的保守基序;系统进化分析显示,NtFT1属于FT-like I进化枝,NtFT2、NtFT3和NtFT4同属于FT-like II类进化枝。不同的NtFT基因在中国水仙组织器官和花芽分化不同时期的表达模式存在差异:NtFT1和NtFT3在花中表达量最高,NtFT2在叶片中表达量最高,NtFT4在鳞片中的表达量最高;NtFT1在花芽分化过程中均呈先上升后下降的趋势,NtFT2整个主芽分化过程中变化幅度不大,NtFT3和NtFT4在整个花芽分化期表达量都较低。异位转化拟南芥结果显示,与野生型拟南芥相比,过表达NtFT1和NtFT2的拟南芥提早开花,过表达NtFT3拟南芥开花时间与野生型植株无明显差异,转Nt FT4基因的拟南芥植株推迟开花。过表达NtFT1拟南芥中SOC1、LFY和AP1基因表达量上升。【结论】在中国水仙中存在多个FT基因,在调控开花的功能上存在差异,NtFT1促进开花,NtFT4抑制开花。 展开更多
关键词 中国水仙 FT同源基因 花期调控 异位表达
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免疫球蛋白样分子在非淋巴细胞肿瘤中的表达
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作者 汪泱 张叔人 +1 位作者 何祖根 张友会 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第3期227-228,共2页
Ig基因由三组不连锁的基因群编码 :Igκ ,Igλ和IgH基因群。传统免疫学理论认为Ig基因只有在B淋巴细胞中表达。然而 ,近几年的研究发现在非B细胞来源的恶性肿瘤细胞中也有可能存在Ig基因的转录与表达。
关键词 非淋巴细胞肿瘤 异位表达 免疫球蛋白样分子
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毛竹PeMADS1基因的克隆及转化拟南芥初步研究 被引量:11
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作者 高志民 郑波 彭镇华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期37-41,共5页
采用RT-PCR和RACE技术,从毛竹中分离到1个含完整的编码区和5′端非翻译区的cDNA,长776bp,编码240个氨基酸,命名为PeMADS1(GenBank登记号:EU327784)。序列分析表明,该基因具有典型的植物MADS-box基因结构,与拟南芥的E类功能基因AGL6编码... 采用RT-PCR和RACE技术,从毛竹中分离到1个含完整的编码区和5′端非翻译区的cDNA,长776bp,编码240个氨基酸,命名为PeMADS1(GenBank登记号:EU327784)。序列分析表明,该基因具有典型的植物MADS-box基因结构,与拟南芥的E类功能基因AGL6编码蛋白的一致性为57.2%。将PeMADS1基因置于CaMV35S启动子控制下,构建PeMADS1基因植物表达载体。应用农杆菌介导将目的基因转入拟南芥,RT-PCR证实PeMADS1基因得到异位表达。转基因拟南芥呈现开花提早、莲座叶卷曲、发育迟缓等表型,表明PeMADS1可能参与毛竹由营养生长转向生殖生长的发育调控。 展开更多
关键词 毛竹 MADS-BOX基因 异位表达
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Mer功能研究进展 被引量:1
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作者 范磊 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期892-895,共4页
Mer是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员,其受体Gas6和Mer结合后可以激活Mer的酪氨酸激酶活性,并激活下游信号传导途径,在细胞炎症、凋亡、血液肿瘤发生发展以及血栓于止血等方面发挥作用。本文主要就近年来Mer的功能研究进展以及Mer的抗... Mer是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员,其受体Gas6和Mer结合后可以激活Mer的酪氨酸激酶活性,并激活下游信号传导途径,在细胞炎症、凋亡、血液肿瘤发生发展以及血栓于止血等方面发挥作用。本文主要就近年来Mer的功能研究进展以及Mer的抗血栓和抗血液肿瘤潜在治疗前景进行综述。 展开更多
关键词 MER 受体酪氨酸激酶 GAS6 血栓 异位表达
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线粒体病的基因治疗 被引量:3
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作者 曹佐武 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期122-125,共4页
线粒体基因突变导致的线粒体病仍是不治之症,目前只有针对症状的支持性疗法。根治线粒体病只能寄希望于基因治疗。基因治疗的主要目标是修补特定基因突变导致的功能缺陷,或促使异质性的转变,以降低突变型与野生型基因组的比例。所探讨... 线粒体基因突变导致的线粒体病仍是不治之症,目前只有针对症状的支持性疗法。根治线粒体病只能寄希望于基因治疗。基因治疗的主要目标是修补特定基因突变导致的功能缺陷,或促使异质性的转变,以降低突变型与野生型基因组的比例。所探讨的途径主要包括:①在肽核酸和锌指肽的引导下选择性抑制突变基因组的复制;②利用特定的限制性内切酶去除突变的线粒体基因组;③把特定的tRNAs输入线粒体;④把异位表达的线粒体多肽输入线粒体。但临床上基因治疗线粒体病还需更多的研究。 展开更多
关键词 线粒体病 质性 基因治疗 异位表达
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