干扰素诱导的跨膜蛋白-1对诊断结直肠癌的临床价值 被引量：6

1

作者 刘宇虎 柳娟 +7 位作者 郭健 游志坚 王在国 钟东 杨兴龙 张振书 肖冰 郭文英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1950-1953,共4页

目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)基因在肿瘤组织中的表达,血清抗IFITM1的抗体反应以及对临床诊断结直肠癌的意义。方法应用半定量RT-PCR方法检测IFITM1基因mRNA在正常大肠粘膜、结直肠癌组织、大肠炎性息肉、腺瘤性息肉、胃癌... 目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)基因在肿瘤组织中的表达,血清抗IFITM1的抗体反应以及对临床诊断结直肠癌的意义。方法应用半定量RT-PCR方法检测IFITM1基因mRNA在正常大肠粘膜、结直肠癌组织、大肠炎性息肉、腺瘤性息肉、胃癌、食管癌和肝癌组织中的表达。采用Western印迹法检测患者血清抗IFITM1的抗体反应。分析有IFITM1基因表达癌肿的病理特点。结果结直肠癌组织中IFITM1基因mRNA表达率为47.4%(18/38),显著高于大肠腺瘤性息肉的15%(3/20)和胃癌组织的4.8%(1/21)(P<0.05),而正常大肠粘膜、大肠炎性息肉、食管癌和肝癌组织均无表达。结直肠癌组织IFITM1基因mRNA呈强表达,其表达水平(0.8048±0.2273)显著高于大肠腺瘤性息肉(0.4447±0.0989)(P<0.001)。结直肠癌血清相应的抗体反应率为36.8%(14/38),明显高于胃癌的9.5%(2/21)(P<0.05),而在食管癌、肝癌、大肠炎性息肉和大肠腺瘤性息肉以及健康人血清则未检测出相应的抗体反应。有IFITM1基因表达的结直肠癌多数直径大于5cm,侵及浆膜,有淋巴结和远处转移,多属DukesC期和D期,以高分化腺癌为主。结论IFITM1基因可能在结直肠癌的发生、发展和转移过程中起重要作用,有望成为临床诊断结直肠癌的一个良好标志物。 展开更多

关键词 结直肠癌 干扰素诱导的跨膜蛋白-1 基因表达 抗体反应

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干扰素诱导的跨膜蛋白1在Peutz-Jeghers综合征的表达及意义 被引量：15

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作者 马娅梅 吴保平 夏欧东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期541-543,547,共4页

目的检测干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)mRNA及其蛋白在Peutz-Jeghers(P-J)息肉中的表达,探讨其在P-J息肉发生及恶变中的作用。方法采用反转录聚合酶链反应技术分别检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各16例组织中... 目的检测干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)mRNA及其蛋白在Peutz-Jeghers(P-J)息肉中的表达,探讨其在P-J息肉发生及恶变中的作用。方法采用反转录聚合酶链反应技术分别检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各16例组织中IFITM1 mRNA的表达;免疫组织化学方法检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各32例组织中IFITM1蛋白的表达和分布,并比较表达程度的差异。结果IFITM1 mRNA及其蛋白在上述组织中均有表达;IFITM1 mRNA在正常肠黏膜组织、P-J息肉、腺瘤性息肉及腺癌组织中的表达水平呈表达增高趋势,组间差异有统计学意义(F=92.704,P=0.000)。免疫组织化学检测IFITM1蛋白的阳性着色分布于胞膜和/或胞浆,IFITM1蛋白在正常肠黏膜组织、P-J息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中的阳性表达率和表达强度依次增高,经多组等级资料的秩和检验(Kruskal-WallisH),差异具有显著性(χ2=36.705,P=0.000)。结论IFITM1在正常肠黏膜组织、P-J息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有表达,且表达水平依次增高,提示IFITM1可能与P-J息肉的发生及恶变有关,且有可能成为P-J恶变风险的良好标志物。 展开更多

关键词 干扰素 跨膜蛋白-1 PEUTZ-JEGHERS综合征 大肠腺瘤性息肉 大肠腺癌

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干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因的扩增、克隆及蛋白表达 被引量：5

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作者 刘宇虎 钟东 +5 位作者 柳娟 张振书 陈村龙 武金宝 肖冰 郭文英 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第10期1221-1224,共4页

目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-inducibletransmembraneprotein-1,IFITMP-1)基因的扩增、克隆及蛋白表达。方法以含IFITMP-1基因的cDNA为模板,用Pfu酶做PCR扩增,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,将目的基因克隆到pUCm-T质粒测序。... 目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-inducibletransmembraneprotein-1,IFITMP-1)基因的扩增、克隆及蛋白表达。方法以含IFITMP-1基因的cDNA为模板,用Pfu酶做PCR扩增,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,将目的基因克隆到pUCm-T质粒测序。进一步克隆到pET-Trx蛋白表达载体质粒,优化蛋白表达条件。结果含有IFITMP-1基因的PCR产物约1000bp。重组pUCm-T质粒经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,有相应大小的cDNA片段插入,测序结果显示其序列正确,证实目的基因的扩增、克隆成功,并成功克隆进pET-Trx蛋白表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)plysS中有融合蛋白表达。结论成功扩增克隆IFITMP-1基因,并成功表达该基因编码的蛋白,为进一步研究IFITMP-1基因在大肠癌中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 干扰素 跨膜蛋白-1基因 大肠肿瘤 PCR 克隆 蛋白表达

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干扰素诱导的跨膜蛋白家族及其抗病毒机制的研究进展

4

作者 叶传涛 贾战生 张颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1707-1710,共4页

病毒一直严重威胁着人类健康。机体固有免疫系统是抵御病毒入侵的第一条防线,而干扰素(IFN)通过激活多种IFN诱导基因(ISG)在其中发挥重要作用。IFN诱导的跨膜蛋白(IFITM)分子作为ISG家族的重要成员在多物种广泛表达,其结构及重要氨基酸... 病毒一直严重威胁着人类健康。机体固有免疫系统是抵御病毒入侵的第一条防线,而干扰素(IFN)通过激活多种IFN诱导基因(ISG)在其中发挥重要作用。IFN诱导的跨膜蛋白(IFITM)分子作为ISG家族的重要成员在多物种广泛表达,其结构及重要氨基酸位点对其功能的发挥至关重要,IFITM分子在多种病毒感染过程中发挥防御作用。同时IFITM分子单核苷酸多态性(SNP)也与疾病的严重程度及预后相关。本文综述了IFITM家族的演化、拓扑结构及细胞定位、抗病毒作用和基因变异与多种病毒性疾病的关系。 展开更多

关键词 干扰素诱导的跨膜蛋白 演化 拓扑结构 抗病毒 单核苷酸多态性 综述

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鸭干扰素诱导的跨膜蛋白抑制基因3型鸭甲型肝炎病毒的增殖 被引量：1

5

作者 王一丹 陈弟诗 +2 位作者 向华 张焕容 任玉鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期822-833,共12页

旨在研究鸭干扰素诱导的跨膜蛋白(duck interferon-induced transmembrane proteins,duIFITMs)和相关细胞因子在鸭甲型肝炎病毒3型(duck hepatitis A virus genotype 3,DHAV-3)感染早期的变化规律,以及duIFITMs对DHAV-3的抑制作用,本研... 旨在研究鸭干扰素诱导的跨膜蛋白(duck interferon-induced transmembrane proteins,duIFITMs)和相关细胞因子在鸭甲型肝炎病毒3型(duck hepatitis A virus genotype 3,DHAV-3)感染早期的变化规律,以及duIFITMs对DHAV-3的抑制作用,本研究对DHAV-3感染早期雏鸭肝中mRNA进行高通量测序分析,通过Real-time PCR验证duIFITMs及其相关细胞因子的变化;分别用pEGFP-duIFITM1和duIFITM1-siRNA构建duIFITM1过表达和敲减的鸭胚肝原代细胞(duck embryo liver cell,DELC)模型,通过该模型评价了duIFITM1对DHAV-3增殖的影响。结果显示:转录组测序分析及验证结果均表明,DHAV-3感染雏鸭后24和36 h duIFITM1显著上调(P<0.01),IFITM5无明显变化。进一步用DHAV-3感染duIFITM1过表达和敲减的DELC细胞,与对照组和敲减组相比在过表达细胞中,在48、60 h DHAV-3拷贝数和病毒滴度均明显下降(P<0.01)。此外,经转录组测序分析共筛选出211个与抗DHAV-3免疫反应相关分子和74条显著富集的信号通路。经Real-time PCR检测,在攻毒后12和24 h肝中RIG-I和MDA5的表达水平与对照组差异不显著,但在36 h上调到对照组的4.23倍(P<0.01)和3.61倍(P<0.05),这与IFN-α/IFN-β早期表达滞后的趋势也恰好一致。同时,感染早期IRF1和IRF3的表达水平也显著上调。本研究首次探明duIFITM1对DHAV-3具有抑制作用,为以此开发新型抗病毒药物奠定了基础。对抗病毒感染早期的多个关键免疫分子表达变化规律的系统研究分析,可为DHAV-3感染与免疫的分子机制研究提供重要参考。 展开更多

关键词 干扰素诱导跨膜蛋白 鸭甲型肝炎病毒 转录组学 细胞因子 过表达 RNA干扰

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沉默干扰素诱导跨膜蛋白3可抑制肝癌细胞HepG2增殖和侵袭 被引量：3

6

作者 吴荣寿 邬林泉 +3 位作者 李科浩 李恩亮 冯潜 张惊玲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期244-249,共6页

目的研究干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的异常表达,探讨沉默IFITM3表达对肝癌细胞系Hep G2生物学特征的影响。方法通过Western blot和免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3的表达情况及相关性;构建IF... 目的研究干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的异常表达,探讨沉默IFITM3表达对肝癌细胞系Hep G2生物学特征的影响。方法通过Western blot和免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3的表达情况及相关性;构建IFITM3小干扰RNA片段(IFITM3 si-RNA),采用脂质体介导转染肝癌细胞(Hep G2细胞系),同时设置无义序列组和空白对照组,实时荧光定量PCR检测转染后IFITM3 m RNA的表达;CCK8(cell counting kit 8)检测转染后细胞增殖能力;Western blot检测IFITM3在蛋白水平的表达;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果和癌旁组织相比,IFITM3在肝癌组织中的明显高表达。与无义序列组和空白对照组比较,IFITM3 si-RNA转染组细胞IFITM3表达和细胞增值率降低,穿膜细胞数也明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。划痕实验也表明迁移能力降低。结论 IFITM3在原发性肝癌中高表达;IFITM3在肝癌细胞增殖和侵袭过程中发挥重要作用,有望成为原发性肝癌基因治疗的侯选靶点。 展开更多

关键词 肝癌 沉默 细胞增殖 干扰素诱导跨膜蛋白3 侵袭

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拉米夫定联合α干扰素序贯处理增强干扰素诱导跨膜蛋白表达的研究 被引量：2

7

作者 杨凯 管世鹤 +3 位作者 王爱华 潘颖 吴园园 孙蓓蓓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1568-1572,共5页

目的了解α干扰素(IFN-α)单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理对人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15表达干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM1、IFITM2、IFITM3)的影响,探讨拉米夫定与IFN-α序贯处理抗病毒机制。方法以0～1 000 kU·L-1IFN-α连续... 目的了解α干扰素(IFN-α)单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理对人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15表达干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM1、IFITM2、IFITM3)的影响,探讨拉米夫定与IFN-α序贯处理抗病毒机制。方法以0～1 000 kU·L-1IFN-α连续处理的HepG2.2.15细胞为α干扰素单独处理组,以20μmol·L-1拉米夫定联合0～1 000kU·L-1IFN-α处理的HepG2.2.15细胞为序贯处理组;分别用免疫印迹法和Southern blot法检测不同组别细胞内干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3的表达和细胞内HBV复制水平,再将表达抗病毒蛋白IFITM1的真核表达质粒pEGFP-IFITM1转染入HepG2.2.15细胞,以ELISA和荧光定量PCR法分别分析细胞外HBV抗原分泌和HBV-DNA水平。结果免疫印迹分析提示IFN-α单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理均能诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3,并且拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够明显增强干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1的表达;Southern blot法分析表明IFN-α单独处理HepG2.2.15细胞不能有效抑制细胞内HBV复制,而拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够完全抑制细胞内HBV复制。进一步研究发现,拉米夫定联合IFN-α序贯处理诱导的干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1具有一定抗HBV活性。结论在体外细胞模型中,IFN-α能够诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3;拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够增强HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1,这可能是拉米夫定联合IFN-α序贯治疗慢性乙型肝炎重要机制之一。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 拉米夫定 干扰素 序贯治疗 干扰 素诱导跨膜蛋白

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猪干扰素诱导跨膜蛋白3的克隆表达及多克隆抗体制备

8

作者 王慧 郑丹阳 +4 位作者 高洁 姜博 臧冉 徐飞飞 穆杨 《动物医学进展》 北大核心 2023年第11期14-19,共6页

为原核表达猪干扰素诱导跨膜蛋白3(swine interferon-induced transmembrane protein 3,SwIFITM3)并制备其多克隆抗体(polyclonal antibody,pAb),从干扰素刺激的猪外周血淋巴细胞中克隆到SwIFITM3编码基因,然后采用大肠埃希氏菌表达系... 为原核表达猪干扰素诱导跨膜蛋白3(swine interferon-induced transmembrane protein 3,SwIFITM3)并制备其多克隆抗体(polyclonal antibody,pAb),从干扰素刺激的猪外周血淋巴细胞中克隆到SwIFITM3编码基因,然后采用大肠埃希氏菌表达系统表达并纯化目的蛋白免疫小鼠制备其pAb;并以制备的pAb为一抗用Western blot检测了猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAMs)中SwIFITM3表达情况。结果显示,获得了438 bp的SwIFITM3基因,将获得的目的基因插入pColdⅠ载体构建重组质粒转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用0.2 mmol/L IPTG在16℃诱导24 h后获得了大小约19 ku可溶性表达的目的蛋白,以Anti-His单克隆抗体为一抗进行Western blot检测,获得了与预期大小一致的印迹条带;用纯化的目的蛋白腹腔注射免疫小鼠3次,采用间接ELISA方法检测,小鼠血清中SwIFITM3抗体效价最高达1∶1024000;以制备的pAb为一抗的Western blot检测显示PRRSV感染导致PAMs中SwIFITM3蛋白表达显著降低。试验结果为猪IFITM3的生物学功能及相关研究积累了材料。 展开更多

关键词 猪 干扰素诱导跨膜蛋白3 原核表达 多克隆抗体 猪繁殖与呼吸综合征病毒

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干扰素诱导跨膜蛋白3诱导上皮细胞间质转化促进肝癌侵袭转移 被引量：5

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作者 闵家祺 邬林泉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第15期2485-2490,共6页

目的探讨干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)通过诱导上皮细胞间质转化对肝癌侵袭转移的影响。方法采用Western Blot对比105例肝癌患者癌与癌旁组织的IFITM3表达水平,并结合病理资料分析预后。利... 目的探讨干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)通过诱导上皮细胞间质转化对肝癌侵袭转移的影响。方法采用Western Blot对比105例肝癌患者癌与癌旁组织的IFITM3表达水平,并结合病理资料分析预后。利用Western blot和q RT-PCR观察肝癌细胞株中IFITM3的表达,选取IFITM3表达较高和较低的细胞株进行沉默和过表达,检测EMT标记物的表达,通过划痕和Transwell实验检测转染后细胞株侵袭和转移能力。结果 IFITM3在肝癌中的高表达。IFITM3的高表达与卫星灶、包膜、血管侵袭和TNM分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析发现IFITM3高表达的患者的总体生存率和无病生存率都要更低(P<0.001)。在体外试验中,IFITM3与细胞的侵袭、迁移能力以及上皮细胞间质化水平正相关。结论 IFITM3可以通过诱导上皮细胞间质转化促进肝癌侵袭转移。 展开更多

关键词 肝癌 干扰素诱导跨膜蛋白3 上皮细胞间质转化 侵袭 转移

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干扰素诱导跨膜蛋白1对猪源冠状病毒吸附宿主细胞的影响 被引量：5

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作者 颜可欣 邓治邦 +3 位作者 贺佳怡 袁琦超 王教顺 袁晓民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第4期1370-1380,共11页

为探索干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1)对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常... 为探索干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1)对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验(IFA)及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1) 冠状病毒 传染性胃肠炎病毒(TGEV)

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干扰素诱导表达跨膜蛋白基因家族的功能研究

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作者 王凯 孙亭亭 +1 位作者 高杰锋 史洪亮 《饲料工业》 北大核心 2014年第13期10-12,共3页

干扰素在调控哺乳动物的固有性免疫系统抗病毒感染早期起着关键的作用,通过干扰素表达量和调控方改变来精密协调固有性免疫系统发现感染病毒并加强对早期感染病毒的抵抗力。固有性免疫反应中的干扰素诱导跨膜蛋白家族被认为通过调节机... 干扰素在调控哺乳动物的固有性免疫系统抗病毒感染早期起着关键的作用,通过干扰素表达量和调控方改变来精密协调固有性免疫系统发现感染病毒并加强对早期感染病毒的抵抗力。固有性免疫反应中的干扰素诱导跨膜蛋白家族被认为通过调节机体细胞的增殖、信息传导复合物的形成来限制病毒感染。大多数病毒病可能取决于病毒和宿主的干扰素系统的相互作用。干扰素诱导表达的跨膜蛋白3(IFITM3)基因在机体大多数组织中转录并且被固有性免疫反应产生的干扰素强烈诱导,被认为在细胞增殖,信号传递和限制病毒感染过程中起着关键作用。 展开更多

关键词 固有免疫 干扰素 干扰素诱导跨膜蛋白 病毒感染

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干扰素诱导的穿膜蛋白家族在肿瘤中的作用及其临床意义 被引量：4

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作者 王雪(综述) 朱珊 陈京涛(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期378-383,共6页

基因表达异常是肿瘤发生发展的重要原因之一,其可导致肿瘤细胞恶性增殖、抵抗凋亡、浸润甚至转移,基因及其编码蛋白的研究有助于加深对肿瘤发生发展的分子机制的认识以及相关基因诊断和治疗的开展。近年来研究显示,干扰素诱导的穿膜蛋白... 基因表达异常是肿瘤发生发展的重要原因之一,其可导致肿瘤细胞恶性增殖、抵抗凋亡、浸润甚至转移,基因及其编码蛋白的研究有助于加深对肿瘤发生发展的分子机制的认识以及相关基因诊断和治疗的开展。近年来研究显示,干扰素诱导的穿膜蛋白(interferon-induced transmembrane protein,IFITM)家族异常表达与肿瘤的发生发展有关,其中IFITM1、IFITM2和IFITM3已被证实在胃癌、乳腺癌、肺癌和肝癌等多种实体肿瘤中高表达,通过调控细胞周期和凋亡相关蛋白的水平,促进肿瘤细胞增殖并抑制凋亡;通过上调基质金属蛋白酶的表达和活性,加速上皮间质转化进程,促进肿瘤细胞的侵袭和转移。IFITM高表达也与患者预后不良显著相关。本综述将围绕IFITM1、IFITM2和IFITM3讨论IFITM在肿瘤发生发展中的作用,阐述其调控机制及在肿瘤诊断和预后预测等方面的临床价值,为寻找新的肿瘤诊断标志物和治疗靶点提供帮助。 展开更多

关键词 干扰素诱导的穿膜蛋白(IFITM) 肿瘤 增殖 侵袭 预后 标志物

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干扰素膜蛋白Tet-on系统稳定细胞系的建立及对CA16病毒的抑制作用 被引量：4

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作者 张磊 钟理 +1 位作者 张玮 武智勇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期489-495,共7页

通过Tet-on调控系统,构建受多西环素诱导表达干扰素诱导的跨膜蛋白(interferon-induced transmembrane proteins 1/2/3,IFITM1/2/3)基因的HeLa细胞系,并初步探索了IFITM蛋白对柯萨奇病毒A16(CA16)的抑制作用.首先将调控质粒pTet-on转染... 通过Tet-on调控系统,构建受多西环素诱导表达干扰素诱导的跨膜蛋白(interferon-induced transmembrane proteins 1/2/3,IFITM1/2/3)基因的HeLa细胞系,并初步探索了IFITM蛋白对柯萨奇病毒A16(CA16)的抑制作用.首先将调控质粒pTet-on转染进入HeLa细胞,通过G418筛选出阳性克隆细胞系,在此细胞系基础上共同转染反应质粒pTRE2-IFITM1/2/3和伴侣质粒pTK-Hyg,通过潮霉素筛选出单克隆细胞系,加入多西环素后利用Western印迹筛选出可诱导表达IFITM1/2/3蛋白的单克隆细胞系.使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测发现,多西环素诱导表达的IFITM蛋白对不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)的CA16具有明显的抑制作用,其中IFITM 3对CA16的抑制效果最为明显.Tet调控IFITM1/2/3基因表达HeLa细胞系的成功建立,为进一步研究IFITM基因的功能及其抗病毒机理提供了一个理想的细胞模型. 展开更多

关键词 干扰素诱导膜蛋白 细胞系 柯萨奇病毒A16

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慢性乙型肝炎患者肝组织干扰素刺激基因(STING/TMEM173)蛋白表达及其与肝脏炎症等级的相关性 被引量：1

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作者 潘颖 杨凯 +2 位作者 王传博 田平平 闫波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期446-451,共6页

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织干扰素刺激基因/跨膜蛋白173(STING/TMEM173)的表达及分布与肝脏炎症等级相关性,并在体外细胞初步探讨可能存在的机制。方法采用免疫组织化学染色法检测62例未经过抗病毒治疗的CHB患者肝组织STING/T... 目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织干扰素刺激基因/跨膜蛋白173(STING/TMEM173)的表达及分布与肝脏炎症等级相关性,并在体外细胞初步探讨可能存在的机制。方法采用免疫组织化学染色法检测62例未经过抗病毒治疗的CHB患者肝组织STING/TMEM173蛋白表达,显微镜下观察STING/TMEM173蛋白在肝组织表达情况,同时采用秩和检验和Spearman相关系数分析STING/TMEM173表达与肝脏炎症等级及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的相关性。Western blot法分析细胞内瞬时和稳定转染HBV全基因组质粒前后HepG2细胞中STING/TMEM173蛋白的变化;以含有完整的HBV病毒颗粒的HepG2.2.15细胞上清液刺激健康人群外周血单个核细胞,实时荧光定量PCR技术检测STING/TMEM173基因表达。结果STING/TMEM173蛋白在CHB患者肝组织高表达,且主要表达于肝组织炎症细胞,而肝细胞却未见表达。患者肝组织STING/TMEM173蛋白表达与肝脏炎症等级呈显著正相关,且在ALT升高的患者的肝组织STING/TMEM173表达升高。瞬时和稳定转染HBV全基因组质粒后,HepG2细胞中STING/TMEM173蛋白显著下降。此外,含有完整的HBV病毒颗粒的HepG2.2.15细胞上清液呈剂量依赖性促进外周血单个核细胞表达STING/TMEM173。结论HBV可上调肝组织炎症细胞STING/TMEM173蛋白的表达,而表达STING/TMEM173蛋白的肝脏炎症细胞数量可反应肝脏炎症的严重程度。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒(HBV) 干扰素刺激基因/跨膜蛋白173(STING/TMEM173) 肝脏炎症

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TLR4、IFITM3水平与RSV感染毛细支气管炎患儿Th17/Tregs平衡及病情程度的关系

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作者 赵申 钱丹 王薇 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2025年第2期214-221,共8页

目的:分析呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)毛细支气管炎感染患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)、Toll样受体4(... 目的:分析呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)毛细支气管炎感染患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的mRNA表达水平与辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)平衡及病情程度的关系。方法:将纳入的108例RSV感染毛细支气管炎患儿设为RSV感染组,依据病情严重程度将患儿分为轻度组(n=45)、中度组(n=40)、重度组(n=23);另择取同期体检健康儿童105例为正常对照组,比较RSV感染组与正常对照组外周血IFITM3、TLR4 mRNA表达水平、Th17、Tregs细胞计数及Th17/Tregs比值,并采用Pearson相关性分析上述指标与Th17/Tregs平衡的关系,用Spearman相关性分析上述指标与病情程度之间的关系,以及对病情程度的评估价值。结果:相较于正常对照组,RSV感染组外周血IFITM3、TLR4 mRNA表达水平、Th17细胞计数及Th17/Tregs比值更高,Tregs细胞计数更低(P<0.05);Pearson相关性分析显示,IFITM3、TLR4 mRNA表达水平与Th17/Tregs比值呈正相关(P<0.05);轻度组外周血IFITM3、TLR4 mRNA表达水平及Th17/Tregs比值低于中、重度组(P<0.001),中度组低于重度组(P<0.001);以上外周血指标水平与患儿病情程度呈正相关(r=0.505、0.517,P<0.05);受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析显示,三者联合评估病情程度的AUC、敏感度分别为0.927、91.30%,均高于单一检测(P<0.05)。结论:RSV感染毛细支气管炎患儿外周血IFITM3、TLR4 mRNA表达水平显著升高,且存在Th17/Tregs比值失衡的情况;检测外周血IFITM3、TLR4 mRNA表达水平可在一定程度上反映患儿Th17/Tregs比值平衡及病情严重程度。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 毛细支气管炎 单个核细胞干扰素诱导跨膜蛋白3 Toll样受体4 辅助性T细胞17/调节性T细胞

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基于Tet-On 3G的IFITM3诱导表达MDCK细胞系的建立及功能分析 被引量：1

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作者 曹婷婷 杜寿文 +11 位作者 许汪 邢彬 赵飞 王茂鹏 朱羿龙 白杰英 田宇飞 刘立明 赵翠青 周义发 李昌 金宁一 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期770-777,共8页

利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒pTRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒pLVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行Dox敏感性分析、IFI... 利用Tet-On 3G系统构建了含人IFITM3基因的真核表达质粒pTRE3G-IFITM3,并将其与调控质粒pLVX-Tet3G共转染犬肾细胞(MDCK),转染后48 h用G418和嘌呤霉素进行筛选,用多西环素(Dox)对获得的细胞系进行诱导表达鉴定,并进行Dox敏感性分析、IFITM3^+细胞百分数及定位分析.用含萤光素酶(Luciferase)报告基因的禽流感病毒H5/H7蛋白或VSV G蛋白包裹的假型慢病毒颗粒进行感染实验,检测萤光素酶活性.结果表明,筛选获得了携带人IFITM3的MDCK诱导表达细胞系,且IFITM3表达量与Dox剂量和诱导时间相关;确定Dox工作浓度为2.5μg/mL,诱导12 h时IFITM3^+细胞数达75%以上,且IFITM3在晚期内体/溶酶体存在分布;假型病毒感染及萤光素酶活性分析表明,IFITM3可显著抑制禽流感病毒H5,H7和VSV G蛋白介导的病毒进入,为深入探究其具体的抑制机制奠定了基础. 展开更多

关键词 干扰素诱导跨膜蛋白3 干扰素刺激基因 诱导表达 病毒进入 抑制

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稳定表达人IFITM3的猪IPEC-J2细胞系的构建及其对PEDV增殖的影响

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作者 唐金梦 余澍楠 +4 位作者 袁一心 马雨辰 杜文娟 于林洋 李永涛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5180-5189,共10页

前期研究通过全基因组CRISPR文库筛选人肝癌细胞中调控猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的宿主因子,鉴定出人干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)参与PEDV感染进程,但其在猪源细胞中的功能尚未明确。本研究旨在构建稳定表达人IFITM3(hIFITM3)的猪肠... 前期研究通过全基因组CRISPR文库筛选人肝癌细胞中调控猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的宿主因子,鉴定出人干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)参与PEDV感染进程,但其在猪源细胞中的功能尚未明确。本研究旨在构建稳定表达人IFITM3(hIFITM3)的猪肠上皮IPEC-J2细胞系,并系统评估其对PEDV复制的影响。首先,构建携带hIFITM3基因的重组慢病毒载体,与包装质粒pMD2.G/psPAX2共转染HEK293T细胞制备病毒颗粒。随后,通过慢病毒感染IPEC-J2细胞,经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得单克隆稳转细胞株(IPEC-J2^(hIFITM3))。Western blot、间接免疫荧光法(IFA)及RT-qPCR验证显示hIFITM3在靶细胞中高效表达。CCK-8试验证实hIFITM3过表达未显著影响细胞活力。功能验证表明,IPEC-J2^(hIFITM3)细胞可有效抑制水泡性口炎病毒(VSV-GFP)的早期复制,与其已知抗病毒特性一致。然而,感染PEDV DR13-GFP毒株后,IPEC-J2^(hIFITM3)细胞表现出显著的促病毒增殖效应:24 h时病毒滴度(TCID50·mL^(-1))较野生型细胞提高约1000倍。本研究成功建立hIFITM3稳转猪肠上皮细胞模型,其反常促进PEDV复制的特性为解析病毒种属特异性感染机制、开发抗病毒策略及优化病毒分离培养体系提供了重要工具。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 IPEC-J2细胞 干扰素诱导跨膜蛋白3 细胞系

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内质网介导脂滴发生:成核、出芽、扩张的协同调控

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作者 余越 季维克 熊娟 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第9期2189-2204,共16页

脂滴(LD)是大多数生物中广泛存在的动态细胞器。其典型结构是以中性脂质为核心,外覆单层磷脂构成的膜结构。作为细胞内重要的代谢调控枢纽,LD在生理稳态维持与病理进程演变中均发挥关键作用。近年来,LD生物发生机制研究取得重要突破:研... 脂滴(LD)是大多数生物中广泛存在的动态细胞器。其典型结构是以中性脂质为核心,外覆单层磷脂构成的膜结构。作为细胞内重要的代谢调控枢纽,LD在生理稳态维持与病理进程演变中均发挥关键作用。近年来,LD生物发生机制研究取得重要突破:研究者建立了一个更为完善的LD生物发生框架,系统阐释了LD如何从内质网(ER)中产生;通过生物化学与生物物理学手段,研究者系统解析了LD形成的关键特征,特别是揭示了ER膜生物物理特性及特异性磷脂组分在其中的核心调控作用;借助结构生物学与蛋白质组学技术,塞厄平蛋白(Seipinprotein)、脂肪储存诱导跨膜蛋白2(FIT2)等关键调控因子及其分子作用网络得以阐明。本文从分子机制层面系统综述该领域最新进展,重点关注真核细胞LD成核、膜出芽及扩张过程中的分子调控细节,特别是塞厄平蛋白、FIT2等核心因子动态调控LD形态的分子机制以及I类蛋白和II类蛋白靶向LD的机制与途径,并系统比较不同中性脂质核心LD的生物发生机制差异,最后指出LD发生的关键未解决问题,为未来研究提供了明确方向。 展开更多

关键词 脂滴 生物发生 磷脂 塞厄平蛋白 脂肪储存诱导跨膜蛋白2

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番茄中受TYLCV诱导上调表达基因tetraspanin3的功能分析 被引量：2

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作者 裴延飞 刘廷利 +5 位作者 连梓伊 杨郁文 陈天子 王金彦 张保龙 柳李旺 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期896-900,共5页

[目的]本文旨在研究tetraspanin3基因在抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)病中的作用及对番茄生长发育的影响。[方法]通过MEG 5.0软件构建进化树,分析tetraspanin3基因的进化;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测tetraspanin3在番茄各个器官中... [目的]本文旨在研究tetraspanin3基因在抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)病中的作用及对番茄生长发育的影响。[方法]通过MEG 5.0软件构建进化树,分析tetraspanin3基因的进化;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测tetraspanin3在番茄各个器官中的表达量及对TYLCV诱导的响应;通过病毒诱导基因沉默技术(VIGS)将番茄中的tetraspanin3沉默,测定基因沉默后番茄的抗病性并观测沉默植株表型。[结果]构建的进化树显示:番茄的tetraspanin3基因与葡萄同源基因在一个独立的进化分支上。tetraspanin3基因在各器官中均有表达,在茎、老叶、花中表达量较高,在根、果实中表达量较低,在新叶中的表达量处于中间水平。tetraspanin3受TYLCV诱导后上调表达。沉默tetraspanin3后的植株出现了叶片扭曲,并且在接种TYLCV后,TYLCV病毒量降低50%以上。[结论]tetraspanin3与番茄叶片的生长发育有关,并且对TYLCV侵染番茄植株起正调控作用。 展开更多

关键词 番茄黄化曲叶病毒 跨膜蛋白 病毒诱导的转基因沉默 功能分析

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Ifitm3敲除抑制小鼠神经干细胞增殖和分化

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作者 王凯瑜 雷雪裴 +6 位作者 黄艺滢 石桂英 乐涵薇 王杰 林羿凡 汤家鸣 白琳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期691-701,共11页

目的建立干扰素诱导跨膜蛋白3基因(Ifitm3)敲除小鼠模型,探究Ifitm3对小鼠神经干细胞增殖和分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术,建立Ifitm3敲除小鼠模型,通过基因型鉴定和Western Blot检测IFITM3的敲除效果;利用苏木素-伊红(HE)染色... 目的建立干扰素诱导跨膜蛋白3基因(Ifitm3)敲除小鼠模型,探究Ifitm3对小鼠神经干细胞增殖和分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术,建立Ifitm3敲除小鼠模型,通过基因型鉴定和Western Blot检测IFITM3的敲除效果;利用苏木素-伊红(HE)染色和流式细胞术等方法分析Ifitm3敲除小鼠和野生型小鼠的表型差异。分离并培养野生型和Ifitm3敲除小鼠成体神经干细胞,统计神经球数量和大小,qRT-PCR、Western Blot、免疫荧光技术检测神经干细胞增殖和分化的能力。结果成功建立Ifitm3敲除小鼠模型,Ifitm3敲除小鼠发育正常,组织病理学及免疫系统未见明显异常。体外实验显示Ifitm3敲除抑制小鼠神经干细胞的自我更新潜能,导致神经干细胞增殖能力下降,并且抑制神经干细胞向未成熟神经元和星形胶质细胞分化。结论IFITM3缺失导致神经干细胞增殖和分化能力下降,IFITM3可能参与了神经干细胞的功能调节。 展开更多

关键词 干扰素诱导跨膜蛋白3 基因敲除 神经干细胞 增殖 神经分化

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