去除IgG的系统性红斑狼疮血小板减少血清对脐带血巨核细胞克隆形成单位生成的影响 被引量：1

1

作者 袁国龙 徐亮 +3 位作者 李志 陈兰芳 宣丹 陆进明 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第10期1163-1167,共5页

目的:研究去除IgG的系统性红斑狼疮(SLE)合并血小板减少患者的血清,对正常脐带血巨核细胞克隆形成单位(CFU-MK)生成的影响。方法:建立正常人脐带血单个核细胞在血小板生成素(TPO)等作用下,向CFU-MK分化的半固体培养体系;亲和层析去除SL... 目的:研究去除IgG的系统性红斑狼疮(SLE)合并血小板减少患者的血清,对正常脐带血巨核细胞克隆形成单位(CFU-MK)生成的影响。方法:建立正常人脐带血单个核细胞在血小板生成素(TPO)等作用下,向CFU-MK分化的半固体培养体系;亲和层析去除SLE血小板减少患者血清中的IgG组分并加入培养体系,研究干预前后CFU-MK集落形成的数量和形态学差异。结果:正常脐带血(n=10)CFU-MK集落数为(69.3±19.4)个/片,多为中～大集落;加入SLE血小板减少患者血清(n=4)后,集落数为(58.5±32.5)个/片,与正常相比变化相近(P>0.05),但其中一例患者减少为29个/片;去除血清IgG组分后(n=4),CFU-MK为(73.0±28.3)个/片,与正常相比变化相近(P>0.05);其中一例加入血清后减少为35个/片,去除IgG后仍为31个/片,CFU-MK生成抑制未解除。形态学上,加患者血清后大集落数由正常对照的(37.4±10.9)个/片显著减少为(9.0±8.8)个/片(P<0.05);去除IgG后,大集落数亦显著减少为(8.3±3.9)个/片(P<0.05)。而加入患者血清或去除IgG后,小集落相对数量比正常对照显著增多(P<0.05)。结论:SLE血小板减少患者血清中可能存在阻碍CFU-MK分化发育的抑制物,这种抑制物可能不依赖于血清IgG组分。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 血小板减少 巨核细胞克隆形成单位

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造血刺激因子对巨核细胞体外扩增的影响

2

作者 黄艳红 王绮如 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期204-207,共4页

目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响。方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-M eg),观察BMNC数与CFU-M eg生成数之间的关系;将B... 目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响。方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-M eg),观察BMNC数与CFU-M eg生成数之间的关系;将BMNC分别加入含rmSCF+rmTPO+rm IL-3(3HSFs),rmSCF+rm IL-3+rmTPO+rm IL-6(4HSFs)或骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)的液体培养体系中持续培养,从培养的第1 d开始每两天观察巨核系成熟细胞的生成情况。结果:当小鼠骨髓单个核细胞按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度种入CFU-M eg培养体系时,CFU-M eg生成数随细胞种入数增加而增多;种入细胞浓度对CFU-M eg产率有影响,种入细胞浓度为1×1 06个/mL时,与种入细胞浓度为2×1 05个/mL,每2×1 05个骨髓单个核细胞生成的CFU-M eg数相比,差异有统计学意义(P<0.0 5)。3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用。3HSFs和4HSFs的扩增作用明显优于F-CM,4HSFs的扩增效果优于3HSFs;3HSFs和4HSFs扩增体系扩增7 d效果最好,F-CM扩增体系扩增5 d效果最好。结论:3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用;4HSFs扩增成熟巨核细胞效果优于3HSFs和F-CM;不同扩增体系扩增巨核细胞的最佳效果所需的时间不同。 展开更多

关键词 巨核系集落形成单位 巨核细胞 造血 刺激因子

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PDGF-BB促粒细胞/巨核细胞生长及其作用机制的研究 被引量：7

3

作者 毛利靖 叶洁瑜 +1 位作者 梁恩瑜 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期555-561,共7页

目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF-BB)对体外粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的生成作用及其对人巨核细胞株CHRF抗凋亡作用的具体机制。方法:采用血浆凝固培养法培养小鼠和人骨髓细胞CFU-GM和CFU-MK,探... 目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF-BB)对体外粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的生成作用及其对人巨核细胞株CHRF抗凋亡作用的具体机制。方法:采用血浆凝固培养法培养小鼠和人骨髓细胞CFU-GM和CFU-MK,探讨PDGF-BB对两者CFU-GM、CFU-MK形成能力的影响。通过AnnexinV/PI双染、活性Caspase-3表达及JC-1线粒体膜势能流式细胞术检测研究PDGF-BB对人巨核细胞株CHRF的抗凋亡作用机制。结果:PDGF-BB 0-100 ng/ml能够促进小鼠/人CFU-GM和CFU-MK的增殖并呈剂量依赖性,其中50 ng/ml作用最为明显(P<0.01)。流式细胞术检测结果表明,PDGF-BB通过线粒体及Caspase-3通路对人巨核细胞株CHRF发挥抗凋亡作用(P<0.05)。结论:PDGF-BB能够促进体外小鼠和人粒-单核系及巨核系造血生成,且能通过线粒体途径和Caspase-3通路对巨核细胞发挥抗凋亡作用。 展开更多

关键词 血小板衍生生长因子 粒-单核细胞集落形成单位 巨核细胞集落形成单位 巨核细胞株 细胞凋亡

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四种重组造血生长因子对小鼠巨核细胞集落的影响

4

作者 万海英 阮长耿 韩朝忠 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第3期263-267,共5页

小鼠体外巨核系祖细胞培养表明,重组鼠白细胞介素-3(IL-3),粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、重组人白细胞介素-6(IL-6)及红细胞生成素(EPO)均有不同程度刺激巨核系祖细胞生长的活性。其最适浓度分别为100U/ml,5ng/ml,20ng/ml与1U/ml... 小鼠体外巨核系祖细胞培养表明,重组鼠白细胞介素-3(IL-3),粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、重组人白细胞介素-6(IL-6)及红细胞生成素(EPO)均有不同程度刺激巨核系祖细胞生长的活性。其最适浓度分别为100U/ml,5ng/ml,20ng/ml与1U/ml。对巨核细胞集落刺激作用最强的是IL-3,IL-6与GM-CSF次之,EPO最弱。在种植2×10~5骨髓单个核细胞中分别获得45±3,25±2,20±3及10±2个巨核细胞集落。 展开更多

关键词 巨核细胞 造血生长因子 造血细胞培养 区核细胞集落形成单位

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AMD3100对apoE^-/-小鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖、迁移和黏附的影响 被引量：3

5

作者 王佐 周晓峰 +3 位作者 王仁 童中艺 姜志胜 王贵学 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期807-813,共7页

探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小... 探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨髓细胞,免疫荧光鉴定CD133/VEGFR-2双阳性细胞为内皮祖细胞;MTT比色法、Transwell、黏附试验分别检测细胞的增殖、迁移和黏附能力;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位,观察次级集落单位的大小及细胞密度,检测各组内皮祖细胞的克隆形成能力;RT-PCR和Westernblot检测内皮祖细胞上CXCR4mRNA和蛋白质表达水平.与对照组比较,AMD3100组骨髓源性内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力均显著低于对照组,其CXCR4mRNA和蛋白质表达均显著低于对照组.结果表明:持续注射AMD3100可抑制骨髓源内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力,并下调CXCR4的表达. 展开更多

关键词 AMD3100 内皮祖细胞 微孔法 克隆形成单位 增殖 迁移 黏附

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胚胎干细胞微环境增强人角膜缘干细胞的干性和抑制凋亡的机制 被引量：3

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作者 刘志平 沙翔垠 +3 位作者 王智崇 李朝阳 刘颖 周瑾 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期389-399,共11页

背景 成体干细胞的命运与其生存的微环境密切相关.研究表明,胚胎干细胞（ESCs）微环境能增强人角膜缘干细胞（LSCs）的干性,其作用机制是研究热点. 目的 探讨干细胞微环境增强LSCs的干性及其抑制细胞凋亡的分子机制.方法将129小鼠ES细... 背景 成体干细胞的命运与其生存的微环境密切相关.研究表明,胚胎干细胞（ESCs）微环境能增强人角膜缘干细胞（LSCs）的干性,其作用机制是研究热点. 目的 探讨干细胞微环境增强LSCs的干性及其抑制细胞凋亡的分子机制.方法将129小鼠ES细胞株（E14细胞）分别用CnT-20培养液和CnT-20＋体积分数20％ ES（ESC-CM）培养液进行培养和传代.采用新鲜供体人角膜缘组织块培养法,分别用CnT-20培养液和ESC-CM培养液培养和传代LSCs,细胞经固定后于光学显微镜下观察细胞克隆形态并计算克隆形成率（CFE）.ESC-CM培养组细胞分别转染端粒酶逆转录酶（TERT） siRNA（19-25nt siRNA）或siRNA（sc37007）,流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡、线粒体膜电位的改变;采用免疫荧光技术和流式细胞技术检测siRNA转染前后细胞中端粒酶的表达和活性氧簇（ROS）的产生情况;采用RT-PCR、免疫荧光技术和Western blot法检测细胞中干细胞标志物p63、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）、整合素β1（integrin β1）和细胞分化标志物细胞角蛋白3（CK3） mRNA及其蛋白的表达;采用Western blot法检测细胞中黏着斑激酶（FAK）、Akt和糖原合成酶激酶3β（GSK3β）及其磷酸化蛋白以及p21蛋白的改变. 结果 ESC-CM培养组LSCs可传至第8代,CFE为（7.6±0.6）％,CnT-20培养组传至第6代,CFE为（5.6±0.6）％,差异有统计学意义（t=4.454,P=0.011）;ESC-CM培养组第2、3、4、5、6代LSCs的凋亡百分比均明显低于CnT-20培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;siRNA-F转染细胞的凋亡率为（7.7±1.3）％,明显低于siRNA-TERT转染细胞的（32.3±3.1）％,差异有统计学意义（t=-12.588,P=0.000）.ESC-CM培养组与CnT-20培养组的原代LSCs 中干细胞标志物mRNA及其蛋白、TERT蛋白的相对表达量差异均无统计学意义（均P＞0.05）,但ESC-CM培养组CK3 mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于CnT-20培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;ESCCM培养组第2代细胞中干细胞标志物蛋白及TERT蛋白表达量均明显高于CnT-20培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.siRNA-TERT转染组细胞端粒酶活性为（4.83±0.67）％,明显低于siRNA-F转染组的（46.71±1.22）％,差异有统计学意义（t=52.116,P=0.000）.ESC-CM培养组培养液中添加了FAK抑制剂和GSK3β抑制剂以及转染TERT-siRNA后,细胞中pFAK、pAkt、pGSK3β的表达明显减弱,而p21的表达增强.ESC-CM培养组第2代LSCs及siRNA-F转染组细胞的线粒体膜电位明显高于CnT-20培养组和siRNA-TERT 转染组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;ESC-CM培养组原代和第2代细胞中及siRNA-F转染组细胞中ROS表达比例均明显低于CnT-20培养组及siRNA-TERT转染组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）. 结论 ESC-CM培养体系可促进LSCs干性的维持,抑制细胞凋亡,其机制可能与端粒酶-p21-线粒体通路及FAK/Wnt 信号通路的激活有关. 展开更多

关键词 胚胎干细胞 微环境 端粒酶 角膜缘干细胞 信号通路 凋亡 克隆形成单位

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骨髓基质细胞成脂肪分化的研究进展 被引量：2

7

作者 范焕琼 崔燎 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第5期543-546,共4页

关键词 骨髓基质细胞 成脂肪分化 骨质疏松患者 干细胞数量 脂肪细胞 克隆形成单位 骨髓腔内 成纤维细胞

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再生障碍性贫血患者造血祖细胞对环孢菌素A反应性的研究

8

作者 贾志凌 何学鹏 +1 位作者 刘端祺 陈书长 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1696-1697,共2页

关键词 环孢菌素A 再生障碍性贫血 粒细胞/巨噬细胞 克隆形成单位 红系克隆形成单位

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BCL11B基因在T细胞分化和增殖中调节作用的研究

9

作者 陈思 黄欣 +3 位作者 陈少华 杨力建 郑海涛 李扬秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2003-2003,共1页

关键词 细胞分化 BCL11B 基因表达模式 克隆性 集落形成单位 淋巴瘤 基因扫描 细胞免疫表型 细胞体外增殖 流式细胞术

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Amgen的干细胞因子开始人体实验

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作者 孙雷心 《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第2期30-30,共1页

Amgen Inc.(Thousand Oaks,CA)发明的重组人干细胞因子(SCF)最近开始了乳腺癌Ⅰ期人体试验和两个独立的淋巴瘤和乳腺癌病人的Ⅰ/Ⅱ期试验。 Indiana大学医疗中心(Indianapolis,IN)的临床研究员说,当给晚期乳腺癌患者结合化疗施用该因子... Amgen Inc.(Thousand Oaks,CA)发明的重组人干细胞因子(SCF)最近开始了乳腺癌Ⅰ期人体试验和两个独立的淋巴瘤和乳腺癌病人的Ⅰ/Ⅱ期试验。 Indiana大学医疗中心(Indianapolis,IN)的临床研究员说,当给晚期乳腺癌患者结合化疗施用该因子时,增加了骨髓和外周血中的循环性中性白细胞和先祖细胞的数目。 在试验中,给8位病人皮下注射了10、25或50μg/kg/天的SCF,共14天。施用后,作为干细胞标志的CD34细胞数增加了2.4倍;集落形成单位提高了近9倍且突发形成单位巨核细胞增加了2.3倍。 展开更多

关键词 人干细胞因子 先祖细胞 集落形成单位 人体实验 淋巴瘤 AMGEN 干细胞标志 人体试验 巨核细胞 中性白细胞

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免疫抑制剂环胞素A对鼠骨代谢的生物学效应 被引量：3

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作者 吴学宾 陈建新 +2 位作者 周越 王轩 李佳 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第2期133-136,共4页

目的探讨实验条件下免疫抑制剂环胞素A(CsA)在骨代谢过程中对破骨细胞和成骨细胞克隆的生物作用及其机制。方法用不同浓度的环胞素A与鼠骨髓细胞共同培养,诱导产生破骨细胞和成骨细胞克隆。分别以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检查破骨... 目的探讨实验条件下免疫抑制剂环胞素A(CsA)在骨代谢过程中对破骨细胞和成骨细胞克隆的生物作用及其机制。方法用不同浓度的环胞素A与鼠骨髓细胞共同培养,诱导产生破骨细胞和成骨细胞克隆。分别以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检查破骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色检查CFU-F克隆和Von’Kassol染色检查CFU-OB克隆;光镜下计数破骨细胞数、CFU-F和CFU-OB成骨细胞克隆数。结果实验条件下环胞素A可诱导鼠破骨细胞的数量显著增加(F=16.496,P<0.001),且破骨细胞的数量与环胞素A剂量呈线性正相关(r=0.579,P<0.05);成骨细胞克隆CFU-F和CFU-OB的数量变化与环胞素A无相关性(F=1.380,F=0.305,P>0.05)。结论环胞素A在实验条件下可诱导鼠破骨细胞数量的增加,但对成骨细胞克隆无显著影响,环胞素A对骨代谢的生物作用可能是通过上调破骨细胞系统从而导致生物体发生骨质疏松。 展开更多

关键词 环胞素A 骨骼 破骨细胞 成骨细胞 纤维母细胞克隆形成单位 成骨细胞克隆形成单位

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人粒系集落刺激因子(hG-CSF)cDNA于P_RP_L启动子作用下在大肠杆菌中的表达

12

作者 贺福初 邢桂春 +3 位作者 瞿成奎 吴祖泽 薛惠华 刘福陆 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1993年第2期149-153,共5页

hG—CSF cDNA在天然状态下很难在大肠杆菌中表达。本文以作者克隆的高活性形式hG—CSF cDNA为模板,经PCR扩增出含hG—CSF信号肽中丙氨酸(Ala)及成熟型全部氨基酸编码序列的cDNA片段,于NcoⅠ、BamHⅠ位点克隆于原核表达载体PJLA602中,用... hG—CSF cDNA在天然状态下很难在大肠杆菌中表达。本文以作者克隆的高活性形式hG—CSF cDNA为模板,经PCR扩增出含hG—CSF信号肽中丙氨酸(Ala)及成熟型全部氨基酸编码序列的cDNA片段,于NcoⅠ、BamHⅠ位点克隆于原核表达载体PJLA602中,用高活性hG—CSF特异探针菌落原位杂交筛选出阳性克隆。此克隆hG—CSF cDNA在λ噬菌体 P_RP_L串联启动子和大肠杆菌atpE翻译起始区(TIR)共同作用下,阳性菌株热诱导表达后经小鼠骨髓细胞体外CFU-G测试表明,表达产物具明显的粒细胞集落刺激活性。 展开更多

关键词 人粒系集落刺激因子 聚合酶链反应 CDNA克隆 基因表达 粒系集落形成单位 P_RP_L启动子 翻译起始区

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实验性感染鸡lBV和E.Coli可诱发腹水症

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作者 徐辉 《畜牧兽医科技信息》 1997年第23期8-8,共1页

Tottri等报道,用0.3ml含10^3.7鸡胚感染量的传染性支气管炎病毒（IBV）液和7.5×10⁶克隆形成单位的埃希氏大肠杆菌（E.Coli）分别在14和18日龄经气管接种了100只雄性普通商品代肉鸡后... Tottri等报道,用0.3ml含10^3.7鸡胚感染量的传染性支气管炎病毒（IBV）液和7.5×10⁶克隆形成单位的埃希氏大肠杆菌（E.Coli）分别在14和18日龄经气管接种了100只雄性普通商品代肉鸡后,其中15只鸡诱发了腹水症。该结果明显高于出100只伪感染鸡组成的对照组（P【0.01）。实验感染组35日龄鸡或患腹水症病鸡剖解可见一些副支气管被大量含有异嗜白细胞和纤维蛋白的渗出物堵塞。 展开更多

关键词 实验性感染 腹水症 传染性支气管炎病毒 埃希氏大肠杆菌 克隆形成单位 经气管接种 异嗜白细胞 实验感染 商品代肉鸡 纤维蛋白

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