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1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析
1
作者
周艳喜
李靖
+4 位作者
敖威华
刘霄卉
于立新
幺宏强
马学恩
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期838-842,共5页
参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结...
参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结果分析显示测定序列全长7 480bp,获得的序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-18(EF680301.1)的核苷酸相似性为93.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS-7(AF357971.1)的核苷酸相似性为88.1%。根据pro基因序列构建系统进化树,结果显示扩增序列与内源性绵羊反转录病毒株en-JSRV-5(EF680305.1)的亲缘关系最近。本研究有助于内源性肺腺瘤反转录病毒感染性克隆的构建和内源性肺腺瘤反转录病毒功能的研究。
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关键词
山羊内源性肺腺瘤反转录病毒
全基因序列
PCR扩增
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职称材料
表达绵羊肺腺瘤病毒跨膜蛋白HepG2细胞系的建立
2
作者
刘霄卉
罗军荣
+2 位作者
斯日古楞
周建华
马学恩
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期323-326,共4页
为深入研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)与绵羊肺腺瘤病(OPA)发病关系,本研究采用PCR方法从pGEX-4T-1-TM重组质粒中扩增编码JSRV跨膜蛋白(TM)的基因序列,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了...
为深入研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)与绵羊肺腺瘤病(OPA)发病关系,本研究采用PCR方法从pGEX-4T-1-TM重组质粒中扩增编码JSRV跨膜蛋白(TM)的基因序列,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-TM-HA。通过转染HepG2细胞并用G418筛选,对稳定表达TM的阳性细胞进行纯化,获得了稳定表达JSRV tm基因的HepG2细胞系。间接免疫荧光及western blot检测结果表明,重组蛋白TM-HA在HepG2细胞中得到正确表达。JSRV TM蛋白稳定表达细胞系的建立为进一步研究该蛋白与JSRV诱导OPA发病关系提供了重要的实验平台。
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关键词
绵羊
肺
腺瘤
反
转录
病毒
跨膜蛋白
真核表达
HEPG2细胞系
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职称材料
绵羊肺腺瘤病毒检测方法的研究进展
被引量:
5
3
作者
朱福余
于立新
+1 位作者
么宏强
马学恩
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第4期236-241,共6页
绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危...
绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危害养羊业健康发展。所以,对OPA的早期精确诊断是防制本病的前提,尤其是在出入境检验检疫过程中对进出口羊的JSRV检测尤为重要。随着分子生物学技术的不断发展,JSRV分子生物学检测方法也得到不断的创新和改进。作者就近年来针对检测JSRV的聚合酶链式反应(PCR)、核酸探针杂交技术、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环介导等温扩增技术(LAMP)等方法的研究概况作一综述,为寻找快速准确并适用于出入境检疫的JSRV检测方法和进一步发展研究新型JSRV检测方法提供参考。
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关键词
绵羊
肺
腺瘤
绵羊
肺
腺瘤
反
转录
病毒
检测方法
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职称材料
绵羊肺腺瘤病研究进展
被引量:
30
4
作者
刘淑英
马学恩
《动物医学进展》
CSCD
2003年第1期19-22,共4页
绵羊肺腺瘤病 ( OPA)是由外源性的 D型和 B型绵羊肺腺瘤反转录病毒 ( JSRV)引起的肺脏肿瘤性疾病 ,该病毒主要在肺肿瘤上皮细胞内高水平表达 ,病毒基因组内 L TR的活化和病毒囊膜蛋白的表达是引起体外细胞转化癌变的主要因素 ,其致瘤的...
绵羊肺腺瘤病 ( OPA)是由外源性的 D型和 B型绵羊肺腺瘤反转录病毒 ( JSRV)引起的肺脏肿瘤性疾病 ,该病毒主要在肺肿瘤上皮细胞内高水平表达 ,病毒基因组内 L TR的活化和病毒囊膜蛋白的表达是引起体外细胞转化癌变的主要因素 ,其致瘤的可能机制是通过激活磷酯酰肌醇 3 -激酶 ( PI-3 K)和蛋白酶 K( AKT)信号通路来启动细胞内抑制细胞凋亡和刺激细胞增生的信号转导系统 ,从而引起细胞增生癌变。该病与人的细支气管 -肺泡癌 ( BAC)极相似 ,通过对 OPA的研究 ,不仅为早期诊断及预防该病提出新方法 ,而且为揭示 BAC的分子发病机制及探索其基因治疗提供新思路。
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关键词
绵羊
肺
腺瘤
病
分子发病机制
基因治疗
绵羊
肺
腺瘤
反
转录
病毒
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职称材料
绵羊肺腺瘤病
被引量:
4
5
作者
宋卓
《畜牧兽医科技信息》
2006年第4期8-9,共2页
关键词
肺
腺瘤
病
绵羊
反
转录
病毒
呼吸困难
19世纪
传染病
局限性
原发性
南美洲
内蒙古
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职称材料
绵羊肺腺瘤病及其防治
被引量:
2
6
作者
罗浩
普明金
《当代畜禽养殖业》
2016年第2期33-33,共1页
绵羊肺腺瘤病是绵羊的一种慢性、接触传染性的肺脏肿瘤性疾病。该病临床表现为患病羊潜伏期长,虚弱、消瘦和咳嗽,呼吸困难,伴发呼吸湿啰音,流出大量浆液性鼻漏,病理特征主要为Ⅱ型肺泡上皮细胞和无纤毛细支气管上皮细胞肿瘤性增生[1]。...
绵羊肺腺瘤病是绵羊的一种慢性、接触传染性的肺脏肿瘤性疾病。该病临床表现为患病羊潜伏期长,虚弱、消瘦和咳嗽,呼吸困难,伴发呼吸湿啰音,流出大量浆液性鼻漏,病理特征主要为Ⅱ型肺泡上皮细胞和无纤毛细支气管上皮细胞肿瘤性增生[1]。1病原绵羊肺腺瘤病病毒是反转录病毒科β-反转录病毒属的成员之一,是有囊膜的线性单股负链RNA,基因组为RNA全长7400kb。绵羊肺腺瘤病病毒感染后,
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关键词
绵羊
肺
腺瘤
病
支气管上皮细胞
反
转录
病毒
科
肿瘤性疾病
防治
接触传染性
临床表现
呼吸困难
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职称材料
enJSRV囊膜蛋白及其受体的瞬时表达与绵羊绒毛膜滋养层细胞融合的诱导研究
被引量:
7
7
作者
张宇飞
石晶
刘淑英
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期1924-1933,共10页
旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒...
旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒毛膜滋养层细胞电转染条件和测定电转效率。将构建好的真核表达质粒分别电转染到绒毛膜滋养层细胞中,在荧光显微镜下观察enJSRV囊膜蛋白及其受体Hyal2的瞬时表达情况。并研究高表达enJSRV-env基因及通过RNA干扰沉默enJSRV-env基因对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合活性的影响。结果显示,真核表达质粒构建成功,分别命名为pEGFP-C1/enJSRV-env及pEGFP-C1/Hyal2。研究表明,绵羊绒毛膜滋养层细胞最佳电转染条件为脉冲电压150 V,脉冲时间5.0 ms,电击2次,间隔50 ms。转染pEGFP-C1/enJSRV-env质粒及pEGFP-C1/enJSRV-env与pEGFP-C1/Hyal2共转染的绵羊绒毛膜滋养层细胞中多核细胞数目明显增加,平均每个视野分别可以观察到1.8和2.3个多核细胞。说明enJSRV-env对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合有一定的促进作用。本研究为进一步探究enJSRV囊膜蛋白的结构和功能及绒毛膜滋养层细胞融合机理提供试验基础。
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关键词
内源性
绵羊
肺
腺瘤
病毒
内源性
逆
转录
病毒
囊膜蛋白
绒毛膜滋养层细胞
细胞融合
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职称材料
题名
1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析
1
作者
周艳喜
李靖
敖威华
刘霄卉
于立新
幺宏强
马学恩
机构
内蒙古农业大学兽医学院
内蒙古出入境检验检疫局
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期838-842,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31060332)
文摘
参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结果分析显示测定序列全长7 480bp,获得的序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-18(EF680301.1)的核苷酸相似性为93.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS-7(AF357971.1)的核苷酸相似性为88.1%。根据pro基因序列构建系统进化树,结果显示扩增序列与内源性绵羊反转录病毒株en-JSRV-5(EF680305.1)的亲缘关系最近。本研究有助于内源性肺腺瘤反转录病毒感染性克隆的构建和内源性肺腺瘤反转录病毒功能的研究。
关键词
山羊内源性肺腺瘤反转录病毒
全基因序列
PCR扩增
Keywords
goat's enJSRV
full-length genome sequence
PCR amplification
分类号
S852.659.3 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
表达绵羊肺腺瘤病毒跨膜蛋白HepG2细胞系的建立
2
作者
刘霄卉
罗军荣
斯日古楞
周建华
马学恩
机构
内蒙古农业大学兽医学院
江西农业大学动物科学技术学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期323-326,共4页
基金
国家自然科学基金(31060332)
兽医生物技术国家重点实验室开放课题基金(SKLVBF2008)
文摘
为深入研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)与绵羊肺腺瘤病(OPA)发病关系,本研究采用PCR方法从pGEX-4T-1-TM重组质粒中扩增编码JSRV跨膜蛋白(TM)的基因序列,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-TM-HA。通过转染HepG2细胞并用G418筛选,对稳定表达TM的阳性细胞进行纯化,获得了稳定表达JSRV tm基因的HepG2细胞系。间接免疫荧光及western blot检测结果表明,重组蛋白TM-HA在HepG2细胞中得到正确表达。JSRV TM蛋白稳定表达细胞系的建立为进一步研究该蛋白与JSRV诱导OPA发病关系提供了重要的实验平台。
关键词
绵羊
肺
腺瘤
反
转录
病毒
跨膜蛋白
真核表达
HEPG2细胞系
Keywords
jaagsiekte sheep retrovirus
transmambrane protein
eukaryotic expression
HepG2 cell line
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
绵羊肺腺瘤病毒检测方法的研究进展
被引量:
5
3
作者
朱福余
于立新
么宏强
马学恩
机构
内蒙古农业大学兽医学院
农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第4期236-241,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31101788
31260593)
文摘
绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危害养羊业健康发展。所以,对OPA的早期精确诊断是防制本病的前提,尤其是在出入境检验检疫过程中对进出口羊的JSRV检测尤为重要。随着分子生物学技术的不断发展,JSRV分子生物学检测方法也得到不断的创新和改进。作者就近年来针对检测JSRV的聚合酶链式反应(PCR)、核酸探针杂交技术、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环介导等温扩增技术(LAMP)等方法的研究概况作一综述,为寻找快速准确并适用于出入境检疫的JSRV检测方法和进一步发展研究新型JSRV检测方法提供参考。
关键词
绵羊
肺
腺瘤
绵羊
肺
腺瘤
反
转录
病毒
检测方法
Keywords
ovine pulmonary adenomatosis
jaagsiekte sheep retrovirus
detection method
分类号
S858.26 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
绵羊肺腺瘤病研究进展
被引量:
30
4
作者
刘淑英
马学恩
机构
内蒙古农业大学动物科学与医学学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
2003年第1期19-22,共4页
基金
内蒙古自治区重点领域研究资助项目(ZL9903)
文摘
绵羊肺腺瘤病 ( OPA)是由外源性的 D型和 B型绵羊肺腺瘤反转录病毒 ( JSRV)引起的肺脏肿瘤性疾病 ,该病毒主要在肺肿瘤上皮细胞内高水平表达 ,病毒基因组内 L TR的活化和病毒囊膜蛋白的表达是引起体外细胞转化癌变的主要因素 ,其致瘤的可能机制是通过激活磷酯酰肌醇 3 -激酶 ( PI-3 K)和蛋白酶 K( AKT)信号通路来启动细胞内抑制细胞凋亡和刺激细胞增生的信号转导系统 ,从而引起细胞增生癌变。该病与人的细支气管 -肺泡癌 ( BAC)极相似 ,通过对 OPA的研究 ,不仅为早期诊断及预防该病提出新方法 ,而且为揭示 BAC的分子发病机制及探索其基因治疗提供新思路。
关键词
绵羊
肺
腺瘤
病
分子发病机制
基因治疗
绵羊
肺
腺瘤
反
转录
病毒
Keywords
Ovine pulmonary adenomatosis
Jaagsiekte sheep retrovirus
oncogenesis.
分类号
S858.26 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
绵羊肺腺瘤病
被引量:
4
5
作者
宋卓
机构
黑龙江省大庆市畜牧水产局动物卫生检疫站
出处
《畜牧兽医科技信息》
2006年第4期8-9,共2页
关键词
肺
腺瘤
病
绵羊
反
转录
病毒
呼吸困难
19世纪
传染病
局限性
原发性
南美洲
内蒙古
分类号
S858.26 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
绵羊肺腺瘤病及其防治
被引量:
2
6
作者
罗浩
普明金
机构
云南省普洱市景东彝族自治县林街乡农业服务中心
出处
《当代畜禽养殖业》
2016年第2期33-33,共1页
文摘
绵羊肺腺瘤病是绵羊的一种慢性、接触传染性的肺脏肿瘤性疾病。该病临床表现为患病羊潜伏期长,虚弱、消瘦和咳嗽,呼吸困难,伴发呼吸湿啰音,流出大量浆液性鼻漏,病理特征主要为Ⅱ型肺泡上皮细胞和无纤毛细支气管上皮细胞肿瘤性增生[1]。1病原绵羊肺腺瘤病病毒是反转录病毒科β-反转录病毒属的成员之一,是有囊膜的线性单股负链RNA,基因组为RNA全长7400kb。绵羊肺腺瘤病病毒感染后,
关键词
绵羊
肺
腺瘤
病
支气管上皮细胞
反
转录
病毒
科
肿瘤性疾病
防治
接触传染性
临床表现
呼吸困难
分类号
S852.659.3 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
enJSRV囊膜蛋白及其受体的瞬时表达与绵羊绒毛膜滋养层细胞融合的诱导研究
被引量:
7
7
作者
张宇飞
石晶
刘淑英
机构
内蒙古农业大学兽医学院
农业部动物临床诊疗技术重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期1924-1933,共10页
基金
国家自然科学基金(31160493
31360597)
+1 种基金
内蒙古科技创新引导基金项目(20130224)
教育部博士点基金博导类项目(20111515110008)
文摘
旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒毛膜滋养层细胞电转染条件和测定电转效率。将构建好的真核表达质粒分别电转染到绒毛膜滋养层细胞中,在荧光显微镜下观察enJSRV囊膜蛋白及其受体Hyal2的瞬时表达情况。并研究高表达enJSRV-env基因及通过RNA干扰沉默enJSRV-env基因对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合活性的影响。结果显示,真核表达质粒构建成功,分别命名为pEGFP-C1/enJSRV-env及pEGFP-C1/Hyal2。研究表明,绵羊绒毛膜滋养层细胞最佳电转染条件为脉冲电压150 V,脉冲时间5.0 ms,电击2次,间隔50 ms。转染pEGFP-C1/enJSRV-env质粒及pEGFP-C1/enJSRV-env与pEGFP-C1/Hyal2共转染的绵羊绒毛膜滋养层细胞中多核细胞数目明显增加,平均每个视野分别可以观察到1.8和2.3个多核细胞。说明enJSRV-env对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合有一定的促进作用。本研究为进一步探究enJSRV囊膜蛋白的结构和功能及绒毛膜滋养层细胞融合机理提供试验基础。
关键词
内源性
绵羊
肺
腺瘤
病毒
内源性
逆
转录
病毒
囊膜蛋白
绒毛膜滋养层细胞
细胞融合
Keywords
enJSRV
endogenous retroviruses
envelope protein
trophoblast cells
cell fusion
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析
周艳喜
李靖
敖威华
刘霄卉
于立新
幺宏强
马学恩
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
2
表达绵羊肺腺瘤病毒跨膜蛋白HepG2细胞系的建立
刘霄卉
罗军荣
斯日古楞
周建华
马学恩
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
3
绵羊肺腺瘤病毒检测方法的研究进展
朱福余
于立新
么宏强
马学恩
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
5
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职称材料
4
绵羊肺腺瘤病研究进展
刘淑英
马学恩
《动物医学进展》
CSCD
2003
30
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职称材料
5
绵羊肺腺瘤病
宋卓
《畜牧兽医科技信息》
2006
4
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职称材料
6
绵羊肺腺瘤病及其防治
罗浩
普明金
《当代畜禽养殖业》
2016
2
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职称材料
7
enJSRV囊膜蛋白及其受体的瞬时表达与绵羊绒毛膜滋养层细胞融合的诱导研究
张宇飞
石晶
刘淑英
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
7
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