目的 探讨CD137通路参与老年血管慢性炎症的机制。方法 选择C57/B6小鼠40只,CD137小鼠20只,将小鼠分为对照组、衰老组、衰老CD137组,每组20只。通过Luminex液相芯片多因子检测技术检测各组血浆炎性因子表达。通过qPCR技术及免疫荧光技...目的 探讨CD137通路参与老年血管慢性炎症的机制。方法 选择C57/B6小鼠40只,CD137小鼠20只,将小鼠分为对照组、衰老组、衰老CD137组,每组20只。通过Luminex液相芯片多因子检测技术检测各组血浆炎性因子表达。通过qPCR技术及免疫荧光技术对各组血管中白细胞介素(IL)-1β进行定量和定位。分别从C57/B6和CD137^(-/-)小鼠主动脉中提取并原代培养血管平滑肌细胞(VSMC)。通过博来霉素体外诱导细胞衰老,采用Western blot、qPCR分别检测各组细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、IL-βmRNA和蛋白表达,采用ELISA检测细胞分泌IL-1β水平。结果 对照组、衰老组、衰老CD137组血浆IL-1β水平分别为(10.86±0.89)pg/ml、(61.40±3.88)pg/ml和(18.20±1.25)pg/ml。衰老组血浆趋化因子配体5、IL-3、IL-13、TNF-α、IL-1β水平较对照组明显升高,衰老CD137^(-/-)组血浆趋化因子配体5、IL-3、IL-13、TNF-α、IL-1β水平较衰老组明显降低(P<0.01)。衰老组血管NLRP3和IL-1βmRNA表达较对照组和衰老CD137组明显升高(3.45±0.62 vs 1.00±0.00,1.57±0.17,P<0.05;5.89±0.82 vs 1.00±0.00,2.64±0.34,P<0.05)。体外实验中,衰老组VSMC中NLRP3和IL-1β蛋白表达较对照组和衰老CD137^(-/-)组明显升高(1.65±0.05 vs 1.00±0.00,0.85±0.05,P<0.05;1.45±0.05 vs 1.00±0.00,1.35±0.05,P<0.05)。衰老组VSMC上清中IL-1β水平较对照组和衰老CD137^(-/-)组明显升高(27.50±4.32 vs 14.20±3.52,16.50±2.72,P<0.05)。结论 CD137通过调控VSMC中NLRP3、IL-1β表达参与老年血管慢性炎症。展开更多
基金Supported by National Natural Science Foundation of China(No.81872372 and No.81902469)2020 Li Ka Shing Foundation Cross-Disciplinary Research Grant(No.2020LKSFG07B)。
文摘目的 探讨CD137通路参与老年血管慢性炎症的机制。方法 选择C57/B6小鼠40只,CD137小鼠20只,将小鼠分为对照组、衰老组、衰老CD137组,每组20只。通过Luminex液相芯片多因子检测技术检测各组血浆炎性因子表达。通过qPCR技术及免疫荧光技术对各组血管中白细胞介素(IL)-1β进行定量和定位。分别从C57/B6和CD137^(-/-)小鼠主动脉中提取并原代培养血管平滑肌细胞(VSMC)。通过博来霉素体外诱导细胞衰老,采用Western blot、qPCR分别检测各组细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、IL-βmRNA和蛋白表达,采用ELISA检测细胞分泌IL-1β水平。结果 对照组、衰老组、衰老CD137组血浆IL-1β水平分别为(10.86±0.89)pg/ml、(61.40±3.88)pg/ml和(18.20±1.25)pg/ml。衰老组血浆趋化因子配体5、IL-3、IL-13、TNF-α、IL-1β水平较对照组明显升高,衰老CD137^(-/-)组血浆趋化因子配体5、IL-3、IL-13、TNF-α、IL-1β水平较衰老组明显降低(P<0.01)。衰老组血管NLRP3和IL-1βmRNA表达较对照组和衰老CD137组明显升高(3.45±0.62 vs 1.00±0.00,1.57±0.17,P<0.05;5.89±0.82 vs 1.00±0.00,2.64±0.34,P<0.05)。体外实验中,衰老组VSMC中NLRP3和IL-1β蛋白表达较对照组和衰老CD137^(-/-)组明显升高(1.65±0.05 vs 1.00±0.00,0.85±0.05,P<0.05;1.45±0.05 vs 1.00±0.00,1.35±0.05,P<0.05)。衰老组VSMC上清中IL-1β水平较对照组和衰老CD137^(-/-)组明显升高(27.50±4.32 vs 14.20±3.52,16.50±2.72,P<0.05)。结论 CD137通过调控VSMC中NLRP3、IL-1β表达参与老年血管慢性炎症。
