67kD层粘连蛋白受体的克隆、表达及其对肝癌细胞侵袭能力的影响 被引量：5

1

作者 郑大利 黄清玲 +2 位作者 蒋雪梅 彭碧文 林建银 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期335-340,共6页

探讨细胞膜表面 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7kDlamininreceptor ,6 7LR)在肝癌细胞侵袭转移中的作用 ,从肝癌细胞中提取RNA ,通过RT PCR扩增 6 7LR的前体——— 37kD层粘连蛋白受体前体(37kDlamininreceptorprecursor,37LRP)基因并定向克... 探讨细胞膜表面 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7kDlamininreceptor ,6 7LR)在肝癌细胞侵袭转移中的作用 ,从肝癌细胞中提取RNA ,通过RT PCR扩增 6 7LR的前体——— 37kD层粘连蛋白受体前体(37kDlamininreceptorprecursor,37LRP)基因并定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1 myc His(- )A ,采用脂质体将重组质粒转染到HepG2肝癌细胞中 ,通过G4 1 8筛选和RT PCR、流式细胞术鉴定 ,获得了细胞膜表面 6 7LR高表达 (阳性率为 6 9.2 % )和低表达 (阳性率为 1 1 .7% )的细胞克隆 ,采用体外细胞侵袭实验测定不同细胞的侵袭能力 ,发现膜表面 6 7LR高表达的细胞侵袭能力明显高于低表达及不表达细胞 ,说明 6 展开更多

关键词 层粘连蛋白受体 肝癌细胞 克隆 表达 侵袭

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乳腺癌组织层粘连蛋白受体表达的预后意义 被引量：2

2

作者 皋岚湘 陈乐真 +4 位作者 丁华野 吴霞 邓永江 田玉旺 黄晓楠 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期107-109,I011,共4页

目的：为了观察层粘连蛋白受体与乳腺癌临床和病理参数之间的关系，以及对患者生存的影响。方法：用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测了１０９例乳腺癌原位灶组织和其中３７例淋巴结转移灶组织中层粘连蛋白受体（ＬＲ）的表达情况。结果：在... 目的：为了观察层粘连蛋白受体与乳腺癌临床和病理参数之间的关系，以及对患者生存的影响。方法：用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测了１０９例乳腺癌原位灶组织和其中３７例淋巴结转移灶组织中层粘连蛋白受体（ＬＲ）的表达情况。结果：在乳腺癌原发灶中有６０例（５５．０４％）阳性，淋巴结转移灶中有３１例（８３．７８％）阳性，两者表达率之间的差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。ＬＲ表达与患者年龄、组织分级、肿瘤坏死和核分裂无显著关系。有淋巴结转移者ＬＲ表达率（６３．６３％）高于无淋巴结转移者（４６．２９％）。在３年以上随访材料中，８０％的死亡病例有ＬＲ表达，而生存者中仅有３５．１７％表达ＬＲ，其差异有极其显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结论：ＬＲ与癌细胞的浸润和转移潜能关系密切，是推测患者预后差异的生物学参数之一。 展开更多

关键词 乳腺癌 层粘连蛋白受体 LR 预后

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SMMC-7721肝癌细胞67kD层粘连蛋白受体的分离纯化 被引量：4

3

作者 郑大利 林建银 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期624-628,共5页

分离纯化肝癌细胞的 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7LR) ,以便进一步研究 6 7LR的结构、功能及其在肝癌浸润、转移过程中的作用 .以SMMC 772 1肝癌细胞和L 0 2正常肝细胞为材料 ,采用13 1I标记的层粘连蛋白测定其与细胞的结合能力 ;亲和层析... 分离纯化肝癌细胞的 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7LR) ,以便进一步研究 6 7LR的结构、功能及其在肝癌浸润、转移过程中的作用 .以SMMC 772 1肝癌细胞和L 0 2正常肝细胞为材料 ,采用13 1I标记的层粘连蛋白测定其与细胞的结合能力 ;亲和层析法分离纯化层粘连蛋白受体 ,用SDS PAGE、放射自显影及体外竞争结合实验进行鉴定 .在相同条件下SMMC 772 1肝癌细胞与层粘连蛋白特异结合量为 17 5 4± 0 4 9ng 10 5细胞 ,而L 0 2正常肝细胞与层粘连蛋白的特异结合量为 8 36± 0 4 8ng 10 5细胞 .经过亲和层析 ,从SMMC 772 1肝癌细胞和L 0 2正常肝细胞均可获得纯化受体 ,SDS PAGE显示为单一条带 ,分子量为 6 7kD ,放射自显影及体外竞争结合实验表明其具有较强的与层粘连蛋白结合的活性 .体外竞争结合实验表明 ,SMMC 772 1肝癌细胞层粘连蛋白受体 (772 1LnR)的抑制率可达到 96 2 7± 2 2 9% ,而L 0 2正常肝细胞层粘连蛋白受体 (L 0 2LnR)的抑制率为 4 8 71± 3 79% ,这说明 772 1LnR与层粘连蛋白的亲和力明显高于L 0 2LnR(P <0 0 0 1) .结果表明 ,与L 0 2肝细胞比较 ,SMMC 772 1肝癌细胞具有与层粘连蛋白较强结合能力的特异受体 ,并从肝癌细胞膜上分离纯化到与层粘连蛋白有较强亲和力的 6 展开更多

关键词 SMMC-7721 肝癌细胞 67kD层粘连蛋白受体 分离纯化

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肝癌细胞67kD层粘连蛋白受体N-糖链结构与功能的变化 被引量：1

4

作者 郑大利 阎平 +1 位作者 黄清玲 林建银 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期518-522,共5页

探讨肝癌细胞与正常肝细胞 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7LR)N 糖链结构与功能的差异 .采用流式细胞术检测SMMC 772 1肝癌细胞和L 0 2正常肝细胞膜表面 6 7LR的表达 ,并分别从这 2株细胞分离纯化到高亲和力的 6 7LR ,利用凝集素结合分析其... 探讨肝癌细胞与正常肝细胞 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7LR)N 糖链结构与功能的差异 .采用流式细胞术检测SMMC 772 1肝癌细胞和L 0 2正常肝细胞膜表面 6 7LR的表达 ,并分别从这 2株细胞分离纯化到高亲和力的 6 7LR ,利用凝集素结合分析其糖链结构 ,并用肽 N 糖苷酶水解N 糖链 ,观察糖链在与层粘连蛋白结合过程中的作用 .结果发现 ,L 0 2细胞膜表面 6 7LR表达的阳性率为5 5 3% ,而SMMC 772 1细胞为 34.7% ,这两株细胞 6 7LR与伴刀豆素 (ConA)的结合能力无显著差异 ,但SMMC 772 1细胞的 6 7LR与麦胚凝集素的结合能力明显高于L 0 2细胞的 6 7LR ,说明 2株细胞 6 7LR的糖链结构存在显著差异 .当N 糖链被切除后 ,SMMC 772 1细胞的 6 7LR与层粘连蛋白的结合能力明显下降 ,而L 0 2细胞则没有变化 .这些资料表明 ,SMMC 772 1肝癌细胞和L 0 2正常肝细胞与层粘连蛋白结合能力的差别 ,以及两株细胞的 6 7LR与层粘连蛋白结合能力的不同 ,很可能是由于这两株细胞的层粘连蛋白受体的N 展开更多

关键词 肝癌细胞 层粘连蛋白受体 N-糖链 结构 功能

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层粘连蛋白受体、Ⅳ型胶原的表达及微血管密度与乳腺癌转移的关系 被引量：1

5

作者 李艳春 钟仁华 +5 位作者 陆爱平 喻宏 贾晓敏 蒋亚湘 刘建成 成志诚 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期276-278,共3页

目的 :探讨乳腺癌组织层粘连蛋白受体 (LN R)、Ⅳ型胶原 (ColⅣ )、间质微血管密度与乳腺癌淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组织化学S P方法标记 82例乳腺癌组织中LN R、ColⅣ、FⅧRAg ,并在第Ⅷ因子相关抗原 (FⅧRAg)标记切片上计算... 目的 :探讨乳腺癌组织层粘连蛋白受体 (LN R)、Ⅳ型胶原 (ColⅣ )、间质微血管密度与乳腺癌淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组织化学S P方法标记 82例乳腺癌组织中LN R、ColⅣ、FⅧRAg ,并在第Ⅷ因子相关抗原 (FⅧRAg)标记切片上计算微血管密度 (MVD)。结果 :LN R表达强度及MVD的高低在乳腺癌有淋巴结转移组和无淋巴结转移组间有差异 ;ColⅣ在两组间无差异。结论 :乳腺癌间质微血管密度增加及LN 展开更多

关键词 层粘连蛋白受体 Ⅳ型胶原 微血管密度 乳腺癌

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层粘连蛋白受体与胆管癌细胞不同转移性亚群的关系研究

6

作者 陈长宏 王曙光 +1 位作者 李大江 刘利 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期509-511,T003,共4页

探讨胆管癌细胞不同转移性亚群层粘连蛋白受体的表达差异。以腹膜浸润筛选模型筛选胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验验证筛选结果 ,流式细胞仪比较两亚群间层粘连蛋白受体的表达差异。结果显示 ,本研究成功地以腹膜浸润筛选模... 探讨胆管癌细胞不同转移性亚群层粘连蛋白受体的表达差异。以腹膜浸润筛选模型筛选胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验验证筛选结果 ,流式细胞仪比较两亚群间层粘连蛋白受体的表达差异。结果显示 ,本研究成功地以腹膜浸润筛选模型筛选出胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验进一步验证了两亚群间存在着侵袭能力上的显著差异。高、低转移性亚群层粘连蛋白受体的阳性细胞百分数分别为 (36 36± 9 2 2 ) %和 (13 17±3 4 3) % ,两者间差异显著 (P <0 0 5 )。提示层粘连蛋白受体的表达与体外胆管癌细胞的不同转移倾向密切相关。 展开更多

关键词 层粘连蛋白受体 胆管细胞 转移性亚群 研究 肿瘤转移

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乳腺癌层粘连蛋白受体表达与微血管密度和转移及复发的关系

7

作者 寇伯君 李玉林 +2 位作者 朱桂彬 吴珊 张丽红 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期294-297,共4页

目的 :探讨乳腺癌层粘连蛋白受体 (LN R)与间质微血管密度和肿瘤转移、复发的关系及意义。方法 :应用免疫组化LSAB法检测 73例乳腺癌LN R、FⅧAg的表达 ,并对 2 8例病人进行随访分析。结果 :LN R的表达程度与乳腺癌淋巴结转移存在正相关... 目的 :探讨乳腺癌层粘连蛋白受体 (LN R)与间质微血管密度和肿瘤转移、复发的关系及意义。方法 :应用免疫组化LSAB法检测 73例乳腺癌LN R、FⅧAg的表达 ,并对 2 8例病人进行随访分析。结果 :LN R的表达程度与乳腺癌淋巴结转移存在正相关 (P <0 0 0 0 1) ,与病理分级无关 (P >0 0 5 ) ,与乳腺癌间质微血管密度 (MVD)存在正相关 (P <0 0 0 0 1)。淋巴结转移阳性组其MVD值明显高于阴性组 (P <0 0 0 1)。随访 2 8例病人中 ,复发组的LN R表达增强比率及MVD值明显高于未复发组 (P <0 0 5 )。结论 :LN 展开更多

关键词 层粘连蛋白受体 微血管密度 乳腺癌 肿瘤转移

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层粘连蛋白受体单克隆抗体对人肺癌细胞生长状态的影响

8

作者 吴珊 高绪兰 +1 位作者 王勇 李玉林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期82-84,共3页

观察了层粘连蛋白受体单克隆抗体（ＭｃＢ＿１）对高转移能力的人肺巨细胞癌系（ＰＧ瘤）体外培养细胞生长状态的影响。结果显示ＭｃＢ＿１能明显降低ＰＧ瘤细胞的生长速度。提示肿瘤细胞体外生长的调控与层粘连蛋白（ＬＮ）及层粘连蛋... 观察了层粘连蛋白受体单克隆抗体（ＭｃＢ＿１）对高转移能力的人肺巨细胞癌系（ＰＧ瘤）体外培养细胞生长状态的影响。结果显示ＭｃＢ＿１能明显降低ＰＧ瘤细胞的生长速度。提示肿瘤细胞体外生长的调控与层粘连蛋白（ＬＮ）及层粘连蛋白受体（ＬＮ－Ｒ）的作用密切相关。 展开更多

关键词 单克隆抗体 细胞培养 层粘连蛋白受体 肺肿瘤

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涎腺腺样囊性癌中层粘连蛋白受体表达及其意义

9

作者 李萍 宋琦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期380-380,384,共2页

关键词 涎腺肿瘤 层粘连蛋白受体 免疫组化

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人喉鳞癌细胞67-KD层粘连蛋白受体的表达 被引量：2

10

作者 谢明 周梁 金西铭 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第5期415-417,共3页

目的观察 6 7-KD层粘连蛋白受体 (6 7-KDlamininreceptor,6 7-KDLN -R)在人喉鳞癌细胞中的表达情况 ,并分析其表达与临床病理特征间的关系。　方法采用免疫组化SP方法检测 30例喉鳞癌原发灶和其中的 3例颈淋巴结转移灶石蜡标本中 6 7-KD... 目的观察 6 7-KD层粘连蛋白受体 (6 7-KDlamininreceptor,6 7-KDLN -R)在人喉鳞癌细胞中的表达情况 ,并分析其表达与临床病理特征间的关系。　方法采用免疫组化SP方法检测 30例喉鳞癌原发灶和其中的 3例颈淋巴结转移灶石蜡标本中 6 7-KDLN -R的表达。　结果 6 7-KDLN -R在喉鳞癌原发灶中的阳性率为5 6 .7% (1 7/ 30 )。转移淋巴结的免疫反应结果与原发部位的免疫反应结果相一致。 6 7-KDLN -R的表达与肿瘤的分化程度密切相关 ,分化差者其表达水平更高 (P <0 .0 5 )。与无颈淋巴结转移的喉鳞癌细胞相比 ,有颈淋巴结转移喉鳞癌细胞 6 7-KDLN -R的表达水平更高 (P <0 .0 5 )。　结论 6 7-KDLN -R在喉鳞癌分化、增殖、浸润及转移中起重要作用。 展开更多

关键词 喉肿瘤 层粘连蛋白受体 肿瘤转移 67-KD 喉鳞癌

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金属蛋白酶类及层粘连蛋白受体与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系

11

作者 闫素云 杨廷桐 《河南医科大学学报》 2000年第5期424-426,共3页

目的：揭示金属蛋白酶类（ＭＭＰｓ）及层粘连蛋白受体（ＬＮ－Ｒ）与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系，并探讨 ＭＭＰｓ及ＬＮ－Ｒ用以判断肿瘤细胞侵袭转移的可能性。方法：通过流式细胞术（ＦＣＭ）定量研究和蛋白酶活性分析 （Ｚｙｍ... 目的：揭示金属蛋白酶类（ＭＭＰｓ）及层粘连蛋白受体（ＬＮ－Ｒ）与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系，并探讨 ＭＭＰｓ及ＬＮ－Ｒ用以判断肿瘤细胞侵袭转移的可能性。方法：通过流式细胞术（ＦＣＭ）定量研究和蛋白酶活性分析 （Ｚｙｍｏｇｒａｐｈｙ），对具有不同潜在转移能力的人黑色素瘤细胞系（ＷＭ３５，ＷＭ１３４１ｂ，ＷＭ９８３ａ，ＷＭ４５１）进行 ＭＭＰｓ及瘤 细胞表面６７ ０００ ＬＮ－Ｒ的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度测定。结果：早期 ＷＭ３５不产生 ＭＭＰｓ；ＷＭ１３４１ｂ 仅产生ＭＭＰ－２，不产生ＭＭＰ－９；进展期ＷＭ９８３ ａ和远处转移瘤株ＷＭ４５１既产生ＭＭＰ－２又产生 ＭＭＰ－９。瘤细胞表面 ６７ ０００ ＬＮ－Ｒ的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为：ＷＭ４５１＞ＷＭ９８３ａ＞ＷＭ １３４１ｂ＞ＷＭ３ ５。结论： ＭＭＰｓ和ＬＮ－Ｒ与人黑色素瘤细胞侵袭转移能力的获得之间关系密切，并可作为较特异的肿瘤侵袭转移标记物应用 于肿瘤研究与治疗中。 展开更多

关键词 金属蛋白酶类 层粘连蛋白受体 黑色素瘤

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层粘连蛋白及其受体在人正常绒毛、葡萄胎组织中的表达及意义 被引量：3

12

作者 安瑞芳 刘惠喜 +1 位作者 张晨 李芬 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期458-460,共3页

目的　探讨层粘连蛋白 (LN) ,层粘连蛋白受体 (LN R)与葡萄胎发生的关系。方法　采用免疫组织化学方法 ,观察正常人胚胎早期绒毛、葡萄胎组织中LN、LN R的表达情况。结果　LN在正常绒毛组织、葡萄胎组织基底膜着色呈连续线状 ,其表达与... 目的　探讨层粘连蛋白 (LN) ,层粘连蛋白受体 (LN R)与葡萄胎发生的关系。方法　采用免疫组织化学方法 ,观察正常人胚胎早期绒毛、葡萄胎组织中LN、LN R的表达情况。结果　LN在正常绒毛组织、葡萄胎组织基底膜着色呈连续线状 ,其表达与妊娠周数有关 ,随着妊娠周数的增加LN的表达呈下降趋势。正常绒毛组织、葡萄胎组织中LN R的表达位于上皮组织细胞膜上 ,呈阳性包绕状 ,且在偏离基底膜细胞表面着色较深。结论　推测LN R在细胞膜表面的分布可反映细胞的生长、浸润的方向 ,葡萄胎组织中LN、LN R的表达在研究葡萄胎发病机制上有一定的参考价值。 展开更多

关键词 层粘连蛋白 绒毛 葡萄胎 层粘连蛋白受体 免疫组织化学 临床意义

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层粘连蛋白及其受体在涎腺腺样囊性癌表达的意义 被引量：2

13

作者 李萍 宋琦 +1 位作者 谢文扬 陈志芳 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期11-13,共3页

目的 :研究涎腺腺样囊性癌中层粘连蛋白 (laminin ,LN)及其受体 (lamininreceptor ,LN R)表达特征及其与腺样囊性癌的某些临床病理指标的关系。方法 :用超敏S P免疫组化方法检测 3 4例涎腺腺样囊性癌LN和LN R的表达。结果 :LN R的表达... 目的 :研究涎腺腺样囊性癌中层粘连蛋白 (laminin ,LN)及其受体 (lamininreceptor ,LN R)表达特征及其与腺样囊性癌的某些临床病理指标的关系。方法 :用超敏S P免疫组化方法检测 3 4例涎腺腺样囊性癌LN和LN R的表达。结果 :LN R的表达与涎腺腺样囊性癌组织分型、临床分期有关 (P <0 .0 5 ) ,LN的表达仅与腺样囊性癌的组织分型有关 (P <0 .0 5 ) ,而与临床分期无关 (P >0 .0 5 )。结论 :LN及其受体LN R的表达可作为涎腺腺样囊性癌恶性程度的一个指标。 展开更多

关键词 涎腺肿瘤 层粘连蛋白 层粘连蛋白受体 免疫组化

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层粘连蛋白特异性受体——整合素α6亚单位胞外区单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1

14

作者 吕天敬 张青云 周柔丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期183-186,共4页

目的 :制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性。方法 :利用整合素α6cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达GST———整合素α6胞外区融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb C小鼠 ... 目的 :制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性。方法 :利用整合素α6cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达GST———整合素α6胞外区融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb C小鼠 ,取其脾细胞 ,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后 ,分析其亚类及进行免疫细胞化学鉴定。结果 :经ELISA双筛 ,获得了一株能稳定分泌针对整合素α6胞外区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,其分泌抗体亚类为IgG1。免疫细胞化学显示此单抗在人肝癌细胞系BEL 74 0 2呈强阳性反应。结论 :通过原核表达产物制备并纯化了针对整合素α6胞外区的单克隆抗体 ,对分离纯化α6亚单位、研究其生物学作用及鉴定正常和疾病状态下是否表达整合素α6及其水平具有重要意义。 展开更多

关键词 整合素 层粘连蛋白受体 杂交瘤 单克隆抗体

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层粘连蛋白及其受体在葡萄胎中表达与预后的相关研究

15

作者 周玮 安瑞芳 +1 位作者 刘建 孙江川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第3期373-376,共4页

目的:探讨层粘连蛋白(Laminin,LN)和受体(LamininReceptor,LN-R)的表达在葡萄胎预后中的意义。方法:应用免疫组化方法对41例葡萄胎组织(经随访13例发生恶变)和20例正常早孕绒毛组织中LN及LN-R进行检测。结果:LN在正常绒毛、葡萄胎未恶... 目的:探讨层粘连蛋白(Laminin,LN)和受体(LamininReceptor,LN-R)的表达在葡萄胎预后中的意义。方法:应用免疫组化方法对41例葡萄胎组织(经随访13例发生恶变)和20例正常早孕绒毛组织中LN及LN-R进行检测。结果:LN在正常绒毛、葡萄胎未恶变组和恶变组中的强表达率分别为,90.0%(18/20)、71.4%(20/28)、38.5%(5/13);LN-R分别为70.0%(14/20)、71.4%(20/28)、84.6%(11/13)。LN表达葡萄胎预后恶变组显著高于其他两组。结论:LN和LN-R在葡萄胎中的表达可能在葡萄胎恶变过程中起重要作用,有望作为判断葡萄胎预后的参考指标之一。 展开更多

关键词 层粘连蛋白 层粘连蛋白受体 葡萄胎 预后

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利用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化的微量蛋白制备抗血清 被引量：9

16

作者 时永全 韩者艺 +4 位作者 王新 张宇梅 宁晓暄 翟惠虹 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期621-623,共3页

目的　以SDS PAGE纯化的微量蛋白制备抗人层粘连蛋白受体前体蛋白 (LRP)的血清。方法　以SDS PAGE分离纯化原核表达的人LRP与 6×组氨酸的融合蛋白 ,切下并粉碎融合蛋白所在凝胶块。将含 10 μg融合蛋白的凝胶颗粒与弗氏佐剂混匀后 ... 目的　以SDS PAGE纯化的微量蛋白制备抗人层粘连蛋白受体前体蛋白 (LRP)的血清。方法　以SDS PAGE分离纯化原核表达的人LRP与 6×组氨酸的融合蛋白 ,切下并粉碎融合蛋白所在凝胶块。将含 10 μg融合蛋白的凝胶颗粒与弗氏佐剂混匀后 ,免疫BALB/c小鼠。以Westernblot检测所获抗血清的滴度和特异性。结果　以胃癌细胞总蛋白为靶抗原时 ,Westernblot显示 ,所获抗血清仅识别 1条Mr 约 4 2 0 0 0的蛋白带 ,将抗血清做 1∶2 0 0 0稀释后 ,仍能清晰地显示其靶抗原所在位置。结论　以聚丙烯酰胺凝胶颗粒为载体 。 展开更多

关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 纯化 微量蛋白 抗血清 人层粘连蛋白受体前体蛋白

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细胞角蛋白7和19在肝细胞癌细胞系中的异常表达及其机制 被引量：1

17

作者 付勇 张伟 +2 位作者 刘彦仿 刘节 苏勤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期58-59,共2页

关键词 肝癌细胞 细胞角蛋白 层粘连蛋白 层粘连蛋白受体 表达

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67LR和MMP-7蛋白在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤浸润、转移的关系 被引量：1

18

作者 王晓兰 华新宇 陈奎生 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第17期2887-2889,共3页

目的:检测67kD层粘连蛋白受体(67LR)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白在食管鳞癌组织中的表达,并探讨其临床病理学意义。方法:应用免疫组化SP法检测56例食管鳞癌组织和26例非典型增生食管黏膜组织、23例正常食管黏膜组织中67LR和MMP-7的表... 目的:检测67kD层粘连蛋白受体(67LR)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白在食管鳞癌组织中的表达,并探讨其临床病理学意义。方法:应用免疫组化SP法检测56例食管鳞癌组织和26例非典型增生食管黏膜组织、23例正常食管黏膜组织中67LR和MMP-7的表达,分析其与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移的关系及其相关性。结果:(1)正常食管黏膜上皮组织、癌旁非典型组织和癌组织中,67LR、MMP-7蛋白阳性表达率均依次增高,组间差异有显著性(P<0.01)。(2)不同浸润深度的食管鳞癌组织中,67LR蛋白阳性表达率组间差异均无显著性(P>0.05),MMP-7蛋白阳性率组间差异有显著性(P<0.05)。(3)伴有淋巴结转移的食管鳞癌组织中67LR、MMP-7蛋白阳性表达率均高于无淋巴结转移,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。(4)67LR蛋白的表达与MMP-7呈正相关(P<0.05)。结论:67LR、MMP-7蛋白异常表达可能参与食管鳞癌的发生发展过程;MMP-7蛋白异常表达与食管鳞癌浸润有关,而67LR蛋白异常表达与食管鳞癌浸润无关;67LR、MMP-7蛋白异常表达与食管鳞癌淋巴结转移有关。 展开更多

关键词 食管肿瘤 鳞癌 67 kD层粘连蛋白受体 基质金属蛋白酶-7 免疫组化

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小鼠FAAP蛋白对细胞黏附的影响 被引量：2

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作者 胡劲松 丁乃峥 +1 位作者 滕俊林 陈建国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第1期88-94,共7页

黏着斑相关蛋白(focal adhesion associated protein,FAAP)由小鼠D10Wsu52e基因编码,在进化上十分保守,但该蛋白质的生物学功能并不清楚.为此,首先通过细胞组分分离的方法研究了FAAP蛋白分布的细胞组分,结果表明FAAP主要存在于细胞质和... 黏着斑相关蛋白(focal adhesion associated protein,FAAP)由小鼠D10Wsu52e基因编码,在进化上十分保守,但该蛋白质的生物学功能并不清楚.为此,首先通过细胞组分分离的方法研究了FAAP蛋白分布的细胞组分,结果表明FAAP主要存在于细胞质和细胞膜中.细胞蛋白表达量分析表明,细胞中FAAP与黏连蛋白受体(LR)表达量呈现正相关性.同时,细胞黏附实验表明,FAAP与LR对细胞黏附影响类似,也能够抑制细胞的黏附.这些实验结果为深入研究FAAP蛋白功能提供了依据. 展开更多

关键词 小鼠 D10Wsu52e基因 FAAP 67ku层粘连蛋白受体 细胞黏附

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恶性纤维组织细胞瘤LN-R与Cath-D的表达及临床意义 被引量：3

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作者 王玉学 刘贵秋 +3 位作者 郝克强 郝玢 李正民 高峥嵘 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1164-1167,共4页

目的:研究层粘连蛋白受体(laminin receptor,LN-R)和组织蛋白酶D(Cathepsin D,Cath-D)在恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma,MFH)组织中的表达情况,探讨它们之间的关系及临床意义。方法:65例MFH组织标本来自1999年4月至... 目的:研究层粘连蛋白受体(laminin receptor,LN-R)和组织蛋白酶D(Cathepsin D,Cath-D)在恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma,MFH)组织中的表达情况,探讨它们之间的关系及临床意义。方法:65例MFH组织标本来自1999年4月至2001年12月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院骨科手术患者,其中男40例,女25例;年龄23～78岁(平均年龄54岁)。应用免疫组化方法检测65例MFH组织与10例正常纤维组织中LN-R和Cath-D的蛋白表达情况,分析LN-R与Cath-D在MFH中的表达与MFH临床病理学特征之间的关系,以及二者表达的相关性。结果:光学显微镜下LN-R阳性反应物着色部位主要定位于细胞膜和细胞浆,Cath-D阳性反应物主要定位于细胞浆;65例MFH组织中LN-R和Cath-D蛋白表达阳性率分别为66.2%和75.4%;LN-R和Cath-D在Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率低于Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率,二者统计学差异有显著性(P<0.05);LN-R和Cath-D的阳性表达率在高分化明显低于中分化和低分化,表明随着肿瘤病理分化程度的降低,LN-R和Cath-D的阳性表达率也有升高的趋势;10例正常纤维组织中两蛋白均不表达;LN-R和Cath-D的表达与MFH患者的性别、年龄和组织学类型无关;所有病例经过半年至7年随访,平均随访时间为5年,LN-R与Cath-D在术后生存期小于5年的患者中的阳性表达率明显高于生存期大于5年的患者,二者统计学差异有显著性(P<0.005);LN-R和Cath-D表达呈显著正相关(P﹤0.01)。结论:LN-R和Cath-D在MFH发生、发展中起重要作用,是判断MFH侵袭力和恶性进展、转移和预后的重要指标。 展开更多

关键词 层粘连蛋白受体 组织蛋白酶D 免疫组化 恶性纤维组织细胞瘤

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