金纳米棒的温和光热效应对MC3T3-E1成骨性能的研究

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作者 闫佩博 宋文 +2 位作者 慕昭 刘金婵 马志伟 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第3期314-320,共7页

目的:探究金纳米棒(AuNRs)的温和光热效应对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化性能的影响。方法:采用牛血清白蛋白(BSA)涂层对AuNRs进行表面改性。采用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、近红外激光器等分别对AuNRs@CTAB和AuNRs@... 目的:探究金纳米棒(AuNRs)的温和光热效应对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化性能的影响。方法:采用牛血清白蛋白(BSA)涂层对AuNRs进行表面改性。采用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、近红外激光器等分别对AuNRs@CTAB和AuNRs@BSA进行表征分析并测定其光热效应和光热稳定性;活死染色和CCK-8实验分别检测了AuNRs@BSA的生物安全性;ALP染色、茜素红染色及半定量检测AuNRs@BSA的温和光热作用对MC3T3-E1成骨分化能力的影响。结果:成功制备了具有生物安全性且响应近红外光的AuNRs@BSA,体外实验结果表明,AuNRs@BSA的温和光热效应增强MC3T3-E1的ALP活性和矿化能力(P<0.0001)。结论:AuNRs@BSA的温和光热作用可以促进MC3T3-E1的成骨分化。 展开更多

关键词 金纳米棒 BSA 温和光热效应 mc3t3-E1 成骨性能

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蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒的制备、结构表征及其对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响

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作者 陈旭洁 梁慧嘉 +5 位作者 焦春伟 何春艳 陈少丹 陈秋颜 谢意珍 高雄 《食品工业科技》 北大核心 2025年第7期123-132,共10页

本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法... 本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法、高效凝胶渗透色谱法和高效阴离子交换色谱法分析PHPW的基本理化特性;以PHPW为模板,通过氧化还原法制备PHPW-SeNPs,采用纳米粒度仪、透射电子显微镜、X射线衍射仪、X射线光电子能谱仪、傅里叶变换红外光谱仪表征PHPW-SeNPs结构,并评价其稳定性;采用CCK-8法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒及实时定量PCR技术评价PHPW-SeNPs对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响。结果表明,PHPW是一种以葡萄糖为主的中性多糖,其多糖含量和重均分子量分别为99.1%和29.4 kDa。利用200μg/mL PHPW制备获得的PHPW-SeNPs粒径最小且分散性好,呈现零价态、无定形、球状的结构,分析测定的元素中含有碳(63.1%)、氧(3.5%)和硒(33.4%),PHPW中的羟基可通过类似氢键作用稳定SeNPs。PHPW-SeNPs溶液在pH6~8、4℃避光条件下具有较好的稳定性。PHPW-SeNPs在1.25~20μmol/L浓度范围内,MC3T3-E1细胞增殖率呈剂量、时间依赖性提高,当浓度为20μmol/L时,MC3T3-E1细胞ALP活力增强至对照组的1.8倍,骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、RUNT相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、osteorix(OSX)及ALP mRNA表达量分别上调至对照组的2.9、4.7、3.2和3.8倍。综上所述,以多糖组分PHPW为模板可成功制备稳定性较好的PHPW-SeNPs,其能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化,在预防骨质疏松方面具有良好的应用潜力,有望开发成促进骨健康的保健品。 展开更多

关键词 蝙蝠蛾拟青霉 菌丝体多糖 纳米硒 结构特性 mc3t3-E1细胞 成骨分化

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小鼠前成骨细胞MC3T3-E1在自组装多肽水凝胶支架中的成骨分化 被引量：1

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作者 林娟 周庆翰 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第5期676-679,F0002,共5页

目的研究MC3T3-E1细胞在自组装多肽水凝胶支架上的生长和成骨分化。方法在多肽水凝胶支架RA-DA16上接种MC3T3-E1细胞,荧光染色观察细胞形态和存活情况;组织化学染色检测MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶活性以及细胞外钙质沉积;RT-PCR分析成骨特... 目的研究MC3T3-E1细胞在自组装多肽水凝胶支架上的生长和成骨分化。方法在多肽水凝胶支架RA-DA16上接种MC3T3-E1细胞,荧光染色观察细胞形态和存活情况;组织化学染色检测MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶活性以及细胞外钙质沉积;RT-PCR分析成骨特异性基因的表达。结果MC3T3-E1细胞在水凝胶支架RADA16上粘附铺展良好,呈纺锤样形态。诱导培养后支架上的细胞有较高水平的碱性磷酸酶表达和矿化基质沉积。此外,骨分化特异性基因骨桥蛋白和骨涎蛋白也有表达,且表达量随培养时间的延长而增多。结论在自组装水凝胶内MC3T3-E1细胞可向成骨方向分化,并能在凝胶内产生矿化的细胞外基质。 展开更多

关键词 mc3t3-E1细胞 成骨分化 自组装多肽水凝胶 组织工程

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猪釉基质蛋白对MC3T3-E1成骨细胞增殖分化的影响 被引量：13

4

作者 束蓉 刘正 葛琳华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期226-228,共3页

目的 :探索釉基质蛋白 (EMPs)促进成骨细胞增殖分化的作用 ,为进一步研究提供基本数据。方法 :选择MC3T3 E1成骨细胞株 ,利用体外细胞培养方法 ,分别加入不同浓度的EMPsα MEM培养液 ,于培养 0、1、2、3、4,5、6d进行细胞计数 ,采用SAS... 目的 :探索釉基质蛋白 (EMPs)促进成骨细胞增殖分化的作用 ,为进一步研究提供基本数据。方法 :选择MC3T3 E1成骨细胞株 ,利用体外细胞培养方法 ,分别加入不同浓度的EMPsα MEM培养液 ,于培养 0、1、2、3、4,5、6d进行细胞计数 ,采用SAS软件对细胞计数数据作单因素方差分析。结果 :EMPs各组细胞计数均高于阴性对照 (C)组 (P <0 0 1)。第 2天 ,10 0 μg/ml和 15 0 μg/mlEMPs组的细胞计数高于阳性对照 (T)组 (P <0 0 1) ;第 5天 ,10 0μg/mlEMPs组的细胞计数不但高于C、T组 ,还明显高于其它EMPs浓度组。结论 :釉基质蛋白可明显促进成骨细胞的增殖分化。 展开更多

关键词 猪釉基质蛋白 mc3t3-E1 成骨细胞 牙槽骨再生

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克老素抑制地塞米松诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡 被引量：3

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作者 黄倩 李宝善 +2 位作者 梁霄 刘丹 马厚勋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期570-576,共7页

目的探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运... 目的探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型。运用荧光倒置显微镜观察重组腺病毒的转染效果,qPCR与Western blot法分析KL mRNA和蛋白表达情况;CCK-8法检测不同浓度DEX作用于MC3T3-E1细胞后的存活率及各研究组细胞的生存情况;流式细胞仪分析各研究组细胞的凋亡率;qPCR与Western blot分析凋亡标志物的mRNA、蛋白表达;免疫荧光分析caspase-9的荧光蛋白表达情况。结果重组腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨细胞,KL组和KL+DEX组的KL mRNA与蛋白表达量较非转染组明显升高。CCK-8法检测出DEX的适宜干预浓度为2.0 mmol·L^(-1)。DEX组、GFP+DEX组较其余组细胞存活率明显降低、凋亡率明显增加,Bax、Bcl-2的mRNA与蛋白表达分别表现出增加和降低趋势;KL组细胞存活率、凋亡率,以及Bcl-2、Bax mRNA与蛋白表达较DEX组及KL+DEX组均明显改善。结论大剂量DEX的运用能够诱发MC3T3-E1成骨细胞凋亡,上调KL表达具有抵抗DEX诱导成骨细胞凋亡的作用,提示上调KL表达可改善糖皮质激素诱导性骨质疏松,为大剂量使用糖皮质激素所致医源性骨质疏松的治疗提供新的靶点。 展开更多

关键词 克老素 地塞米松 mc3t3-E1成骨细胞 凋亡 Bcl-2 BAX CASPASE-9

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活化蛋白1在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用 被引量：4

6

作者 王小菊 冯正平 +2 位作者 邓华聪 姜蓉 杜佳 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2014年第3期258-262,共5页

目的观察活化蛋白1(AP-1)在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组和实验组,实验组包括22.0 mmol/L D-葡萄糖组(高糖组)、P38MAPK-shRNA慢病毒转染组、P38MAPK信号转导阻断剂组、无关shRN... 目的观察活化蛋白1(AP-1)在高糖诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组和实验组,实验组包括22.0 mmol/L D-葡萄糖组(高糖组)、P38MAPK-shRNA慢病毒转染组、P38MAPK信号转导阻断剂组、无关shRNA转染组、AP-1抑制剂SP600125组。采用TUNEL和流式细胞术检测细胞凋亡,用EMSA检测MC3T3-E1细胞AP-1的活性。结果与正常对照组相比,高糖组MC3T3-E1成骨细胞P38MAPK表达、AP-1活性、细胞凋亡显著增加。P38MAPK-shRNA慢病毒转染组和P38MAPK信号转导阻断剂组MC3T3-E1细胞AP-1活性较高糖组分别下降57.9%(P<0.01)和45.6%(P<0.05)。AP-1抑制剂组MC3T3-E1细胞凋亡率较高糖组下降39.7%(P<0.01)。结论高糖通过激活P38MAPK增加AP-1活性,诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡,抑制AP-1活性后高糖诱导的MC3T3-E1细胞凋亡显著下降。 展开更多

关键词 活化蛋白1 mc3t3-E1成骨细胞 RNA干扰 细胞凋亡

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三维多肽支架中前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的初步研究 被引量：1

7

作者 陈婷 卢婷利 +3 位作者 马玉樊 王韵晴 校月红 李昱辉 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第2期48-51,共4页

在多肽EAK16水凝胶支架上接种小鼠前成骨细胞MC3T3-E1,采用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8(细胞计数试剂盒)检测细胞增殖情况。细胞在诱导培养基中培养1周后,观察不同时间段细胞碱性磷酸酶的分泌活性。采用ALP染色和茜素红-S染色作为定... 在多肽EAK16水凝胶支架上接种小鼠前成骨细胞MC3T3-E1,采用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8(细胞计数试剂盒)检测细胞增殖情况。细胞在诱导培养基中培养1周后,观察不同时间段细胞碱性磷酸酶的分泌活性。采用ALP染色和茜素红-S染色作为定性实验研究MC3T3-E1向成骨方向的分化情况。结果表明,MC3T3-E1细胞在水凝胶支架EAK16上有较好的黏附和增殖能力,诱导培养后细胞有较高水平的碱性磷酸酶表达和矿化基质沉积。多肽水凝胶支架对前成骨细胞MC3T3-E1具有较好的生物相容性。 展开更多

关键词 自组装多肽水凝胶 mc3t3-E1细胞 成骨分化 组织工程

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新型根管封闭剂对MC3T3-E1成骨细胞的细胞毒性评估 被引量：1

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作者 孙燕 樊明文 +1 位作者 李宇红 陆瑶伽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期775-777,共3页

目的:评估新型根管封闭剂RealSeal sealer、GuttaFlow对MC3T3-E1成骨细胞的细胞毒性,并与传统的AH Plus比较。方法:制备RealSeal sealer、GuttaFlow和AH Plus(固化7d)的材料浸提液,倍比稀释为4种浓度:100%、50%、25%、12.5%;MC3T3-E1细... 目的:评估新型根管封闭剂RealSeal sealer、GuttaFlow对MC3T3-E1成骨细胞的细胞毒性,并与传统的AH Plus比较。方法:制备RealSeal sealer、GuttaFlow和AH Plus(固化7d)的材料浸提液,倍比稀释为4种浓度:100%、50%、25%、12.5%;MC3T3-E1细胞于其中分别培养24h和72h,CCK-8法检测细胞存活率,评价不同材料的细胞毒性。结果:在实验期内,RealSeal sealer组的细胞存活率显著低于AH Plus、GuttaFlow(P<0.05),AHPlus、GuttaFlow和阴性对照组间无显著差异。结论:在本实验条件下,RealSeal sealer对MC3T3-E1成骨细胞的毒性最强,而GuttaFlow和AH Plus几乎无细胞毒性。 展开更多

关键词 根管封闭剂 细胞毒性 mc3t3-E1成骨细胞

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刺老苞根皮黄酮对H2O2诱导的MC3T3-E1成骨细胞损伤改善 被引量：3

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作者 裴凌鹏 尹霞 +2 位作者 崔箭 李莉 朱嘉 《南京师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期107-111,共5页

在H2O2胁迫下,研究刺老苞根皮(Aralia echinocauIis)黄酮增强MC3T3-E1成骨细胞抗自由基损伤的作用.为此用H2O2作用MC3T3-E1成骨细胞,建立自由基损伤细胞模型.培养的成骨细胞分为对照组、模型组、刺老苞根皮黄酮低剂量组(1×10-8mol... 在H2O2胁迫下,研究刺老苞根皮(Aralia echinocauIis)黄酮增强MC3T3-E1成骨细胞抗自由基损伤的作用.为此用H2O2作用MC3T3-E1成骨细胞,建立自由基损伤细胞模型.培养的成骨细胞分为对照组、模型组、刺老苞根皮黄酮低剂量组(1×10-8mol/L)、刺老苞根皮黄酮中剂量组(1×10-7mol/L)和刺老苞根皮黄酮高剂量组(1×10-6mol/L).测定不同处理组细胞活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、活性自由氧(reactive oxygen species,ROS)含量、脂质过氧化物(lipid oxygen,LPO)含量,同时利用荧光偏振法测定细胞膜流动性.结果显示与模型组相比,刺老苞根皮黄酮组细胞活力、SOD活性、细胞膜流动性均显著升高(P<0.01),而ROS含量、LPO含量则显著降低(P<0.01),并呈现一定的量效关系.可以认为H2O2摄入会导致MC3T3-E1成骨细胞的氧化损伤,而刺老苞根皮黄酮可以预防或降低此类损伤对细胞的影响. 展开更多

关键词 mc3t3-E1成骨细胞 自由基 刺老苞根皮 黄酮类化合物

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比较浓缩生长因子提取液和富血小板纤维蛋白提取液对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响 被引量：7

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作者 魏中武 刘双喜 +1 位作者 陈灼庚 黄谢山 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期901-908,共8页

目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,2... 目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,20%,30%)的DMEM培养基培养MC3T3-E1。分别于培养的第1,3,5,7天,采用MTT法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法检测细胞中ALP的活性;采用定量RTPCR(quantitative RT-PCR,RT-qPCR)检测培养第3和7天细胞中核心结合蛋白因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix,Osx)mRNA表达水平。结果:在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe与PRFe均能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe与PRFe比较,CGFe组细胞的增殖活性高于PRFe组,差异有统计学差异(均P<0.05)。在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组的ALP活性均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组的ALP活性高于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在3,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组Osx和Runx2 mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组Osx mRNA表达水平明显高于PRFe组,Runx2 mRNA表达水平明显低于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:CGFe比PRFe更能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,这可能与其增加ALP活性及上调成骨相关基因Osx的表达有关。 展开更多

关键词 浓缩生长因子提取液 富血小板纤维蛋白提取液 mc3t3-E1 增殖 成骨细胞特异性转录因子 核心结合蛋白因子2

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精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸多肽层层自组装修饰钛片对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的影响 被引量：1

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作者 刘菲 张云涛 +2 位作者 马向瑞 张雅杰 王云浩 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期203-208,共6页

目的研究层层自组装精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)多肽修饰钛片对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的影响。方法将纯钛试件随机分为3组:纯钛组(PT组)、NaOH处理钛片组(NT组)、RGD修饰钛片组(RT组)。根据分组对纯钛试件进行相应表面处理,扫描电子... 目的研究层层自组装精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)多肽修饰钛片对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的影响。方法将纯钛试件随机分为3组:纯钛组(PT组)、NaOH处理钛片组(NT组)、RGD修饰钛片组(RT组)。根据分组对纯钛试件进行相应表面处理,扫描电子显微镜(SEM)观察试件表面形貌。将MC3T3-E1细胞在试件表面培养,采用SEM、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞的黏附和增殖能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测成骨细胞骨钙素、骨保护素mRNA的表达。结果 SEM观察到PT组试件表面存在均匀、较清晰的划痕结构,NT组试件表面出现微孔结构,RT组试件表面有类似小凸起结构,似网状。SEM观察到RT组细胞呈多边形且有大量丝状伪足,细胞伸展状态明显好于其余2组;MTT法显示RT组细胞的黏附率最高,无钛片对照组和PT组的细胞黏附率的差异无统计学意义,NT组细胞黏附率最低;RT组的细胞增殖率均高于其余3组(P<0.05),在1和3 d最为明显;RT-qPCR检测14 d时RT组骨钙素mRNA和骨保护素mRNA均高表达。结论 RGD多肽修饰钛片能促进小鼠成骨样细胞MC3T3-E1的黏附和增殖,并且能够上调骨钙素mRNA和骨保护素mRNA的表达。 展开更多

关键词 层层自组装 精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸多肽 小鼠成骨样细胞mc3t3-E1

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骨松汤含药血清对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞铁死亡的影响及机制

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作者 王莉莎 郭中华 +7 位作者 王上增 史栋梁 张仲博 任博文 王云飞 周晓宁 王俊杰 杨少祥 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第10期1405-1412,共8页

目的探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度。选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fe... 目的探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度。选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fer-1干预,荧光探针检测亚铁离子(Fe^(2+))和活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平及碱性磷酸酶(ALP)活性;比色法检测谷胱甘肽(GSH)水平;茜素红S染色检测钙结节吸光度(OD)值;免疫印迹检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰-Co A合成酶4(ACSL4)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)蛋白表达。细胞过表达NOX4,检测铁死亡相关指标(GPX4和ACSL4蛋白表达、GSH水平、MDA含量)和细胞成骨功能(ALP活性和钙结节OD值)。结果H_(2)O_(2)诱导MC3T3-E1细胞铁死亡。与H_(2)O_(2)组相比,骨松汤含药血清和Fer-1干预显著提高了细胞存活率、SOD和CAT活性、GSH水平以及GPX4蛋白表达(P<0.05),降低细胞MDA含量、Fe^(2+)和ROS水平以及NOX4与ACSL4蛋白表达(P<0.05)。NOX4过表达抑制了骨松汤含药血清对H_(2)O_(2)处理MC3T3-E1细胞铁死亡和成骨功能的保护作用。结论骨松汤含药血清能够抑制H_(2)O_(2)诱导的MC3T3-E1细胞铁死亡,这可能与其抑制NOX4/ROS信号通路活化有关。 展开更多

关键词 骨松汤含药血清 过氧化氢 mc3t3-E1细胞 铁死亡 NOX4 成骨细胞

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人重组骨形成蛋白-2诱导NIH3T3细胞向成骨细胞表型转化 被引量：6

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作者 王军琳 刘源 +2 位作者 金岩 王新文 李媛 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期420-422,共3页

目的 探讨人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对NIH3T3成纤维细胞生物学行为的影响。方法 培养NIH3T3细胞,加入外源性rhBMP-2,用生长曲线、噻唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪(FCM)分析、BrdU检测观察细胞的增殖和DNA合成,并检测碱性磷酸酶(AIP)活... 目的 探讨人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对NIH3T3成纤维细胞生物学行为的影响。方法 培养NIH3T3细胞,加入外源性rhBMP-2,用生长曲线、噻唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪(FCM)分析、BrdU检测观察细胞的增殖和DNA合成,并检测碱性磷酸酶(AIP)活性和骨钙素(OC)含量观察细胞是否有成骨趋向。结果 加药组细胞的增殖活性下降、DNA合成变慢,ALP活性和OC含量均增高。结论 rhBMP-2使NIH3T3细胞增殖活性变弱,表现成骨细胞表型。 展开更多

关键词 人重组骨形成蛋白-2 RHBMP-2 NIH3t3细胞增殖 成骨细胞 表型转化 OC DNA合成 生长曲线 碱性磷酸酶 成纤维细胞

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电磁脉冲辐射诱导小鼠成纤维细胞系NIH/3T3凋亡的研究 被引量：3

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作者 赵梅兰 曹晓哲 +2 位作者 王德文 刘杰 谷庆阳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期546-548,共3页

目的　研究电磁脉冲 (EMP)辐射对小鼠成纤维细胞系 (NIH/ 3T3)凋亡的影响 ,并探讨EMP对生物体损伤的可能机制。方法　利用场强为 6 0kV/m的EMP照射细胞后 ,采用细胞计数、MTT比色法、流式细胞术及免疫组化染色等方法 ,分别观察EMP对HIN/... 目的　研究电磁脉冲 (EMP)辐射对小鼠成纤维细胞系 (NIH/ 3T3)凋亡的影响 ,并探讨EMP对生物体损伤的可能机制。方法　利用场强为 6 0kV/m的EMP照射细胞后 ,采用细胞计数、MTT比色法、流式细胞术及免疫组化染色等方法 ,分别观察EMP对HIN/ 3T3细胞的活力、凋亡以及Bcl 2和 p5 3蛋白表达等的影响。对免疫组化染色阳性的细胞 ,在高倍镜下用CMIAS II图像 -分析系统进行图像分析 ,所有数据均经SPSS8.0软件进行分析。结果　EMP可明显抑制NIH/ 3T3细胞的增殖与活力 (P <0 .0 5 ) ;非贴壁细胞率在辐射后明显增加 ,6h达高峰 (33.9% ) ,并可诱导细胞明显凋亡 ,6h达高峰 (15 .0 7% )。图像分析结果表明 ,EMP辐射后 ,有不同程度的Bcl 2蛋白表达的下调及 p5 3蛋白表达的上调 (P <0 .0 5 )。结论　EMP可诱导NIH/ 3T3细胞凋亡及Bcl 2及p5 3蛋白异常表达 ,提示Bcl 2及p5 3可能参与了NIH/ 展开更多

关键词 小鼠 成纤维细胞 电磁辐射 BCL-2 P53 3t3细胞 细胞凋亡

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MC3T3-E1细胞在不同机械应力刺激下成骨表达机制的研究进展 被引量：5

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作者 宋志靖 王薇 +5 位作者 宋敏 董万涛 巩彦龙 王凯 范凯 张亚彬 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期289-292,307,共5页

机械应力是刺激骨组织生长的有效条件,它的加载和卸载通过影响成骨细胞的成骨进程和功能,以维持骨重建与动态平衡,从而对骨骼微环境和骨代谢产生重要影响。成骨样细胞系MC3T3-E1细胞作为力学刺激敏感细胞,常被用作应力环境下研究成骨机... 机械应力是刺激骨组织生长的有效条件,它的加载和卸载通过影响成骨细胞的成骨进程和功能,以维持骨重建与动态平衡,从而对骨骼微环境和骨代谢产生重要影响。成骨样细胞系MC3T3-E1细胞作为力学刺激敏感细胞,常被用作应力环境下研究成骨机制的经典细胞。本文主要综述了5种体外不同机械应力刺激下的MC3T3-E1细胞成骨表达机制最新进展,以期阐明成骨细胞接收和传导力学刺激的转导网络,并对研究不同机械应力刺激下保持骨骼稳定和损伤重建的机制有所指导。 展开更多

关键词 mc3t3-E1细胞 机械应力 成骨 机制

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辛伐他汀对成骨样细胞MC3T3-E1增殖功能的影响 被引量：3

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作者 刘铭 朱振安 汤亭亭 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第2期101-105,共5页

目的从细胞、蛋白及基因水平探讨辛伐他汀对成骨样细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法辛伐他汀选取10-6、10-7、10-8和10-9mol/L4个浓度组,同时设溶剂对照组。含血清细胞培养条件下,连续细胞计数8d,描绘生长曲线;无血清培养条件下,分别于24... 目的从细胞、蛋白及基因水平探讨辛伐他汀对成骨样细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法辛伐他汀选取10-6、10-7、10-8和10-9mol/L4个浓度组,同时设溶剂对照组。含血清细胞培养条件下,连续细胞计数8d,描绘生长曲线;无血清培养条件下,分别于24、48及72h进行细胞计数、四唑盐比色试验(MTT)、蛋白质含量测定和DNA含量荧光测定。结果含血清细胞培养条件下,辛伐他汀各浓度组与溶剂对照组的生长曲线相比较,无明显差异;无血清培养条件下,辛伐他汀各浓度组与溶剂对照组24、48及72h时细胞计数、MTT比色试验及DNA含量荧光测定各组间未见明显差异;蛋白质含量测定24及72h时各组间无明显差异,然而48h时10-6mol/L辛伐他汀组蛋白含量明显高于对照组并差异有显著性(P<0.05)。结论辛伐他汀促进了成骨样细胞MC3T3-E1细胞的蛋白合成功能,但对其增殖无明显影响。 展开更多

关键词 辛伐他汀 mc3t3-E1 成骨样细胞 细胞增殖

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微RNA-705对MC3T3-E1细胞成骨分化能力的影响 被引量：2

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作者 杨晓红 杨琨 +1 位作者 廖立 金岩 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期575-580,共6页

目的：观察微RNA（miR）-705对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）成骨分化能力的影响。方法：将转染了miR-705模拟物、抑制物、对照物的Mc3T3-E1细胞加入成骨诱导液，在其成骨诱导7d时采用碱性磷酸酶（ALP）染色检测ALP的活性；在... 目的：观察微RNA（miR）-705对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1）成骨分化能力的影响。方法：将转染了miR-705模拟物、抑制物、对照物的Mc3T3-E1细胞加入成骨诱导液，在其成骨诱导7d时采用碱性磷酸酶（ALP）染色检测ALP的活性；在成骨诱导14d时，用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测Runt相关转录因子2（Runx2）和骨钙素（OCN）的mRNA及蛋白表达水平；在成骨诱导21d时，以茜素红染色观察钙结节形成情况并作定量分析。结果：成骨诱导7d时，模拟物组ALP活性降低，而抑制物组ALP活性升高（均P〈0．05）；成骨诱导14d时，模拟物组Runx2和OCNmRNA及蛋白表达水平较对照物组降低，而抑制物组则相反（均P〈0．05）；成骨诱导21d时，模拟物组钙结节最小，结节形成量下降，抑制物纽钙结节较大且形成量较多（均P〈0．05）。结论：miR-705对Mc313-E1细胞成骨分化过程具有抑制作用。 展开更多

关键词 3t3细肜药物作用 成骨细胞/代谢 微RNAs/治疗应用 细胞转分化

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不同成骨诱导体系对MC3T3-E1成骨分化的影响

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作者 管馨 陈安琪 +4 位作者 赖颖真 吴勇敏 翁鑫泽 王伟新 雷奕宣 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期304-309,共6页

目的:明确前成骨细胞MC3T3-E1最佳体外成骨诱导体系。方法:构建不同成骨诱导体系,分别为A组地塞米松0.1μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;B组地塞米松0.01μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;C组地... 目的:明确前成骨细胞MC3T3-E1最佳体外成骨诱导体系。方法:构建不同成骨诱导体系,分别为A组地塞米松0.1μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;B组地塞米松0.01μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;C组地塞米松1μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;D组抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;E组抗坏血酸100μg/mL及β-甘油磷酸钠5 mmol/L。对MC3T3-E1进行为期7 d、14 d的体外成骨诱导,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色对在不同成骨诱导体系作用下MC3T3-E1成骨分化的影响进行分析,通过RT-qPCR检测成骨分化相关基因ALP、Runx2、COL-1、OCN、OPN表达水平,比较不同成骨诱导体系的诱导性能。结果:B、D和E组茜素红定量最优,差异具有统计学意义(P<0.05),诱导7 d的RT-qPCR结果显示C组ALP、Runx2、COL-1的基因表达量最高(P<0.05)。诱导14 d的RT-qPCR结果显示:OCND组表达最高(P<0.05)。结论:地塞米松和抗坏血酸的浓度均对MC3T3-E1的成骨分化产生影响,C组1μmol/L地塞米松、50μg/mL抗坏血酸与10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠早期成骨更佳,选择其作为早期成骨验证,D组50μg/mL抗坏血酸与10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠晚期成骨更佳,但综合考虑,建议B组0.01μmol/L地塞米松、50μg/mL抗坏血酸与10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠成骨诱导体系用于MC3T3-E1体外晚期成骨研究。 展开更多

关键词 mc3t3-E1 成骨分化 诱导体系

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聚乙烯亚胺介导miR-2861模拟物转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化 被引量：1

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作者 方滕姣子 刘杰 +4 位作者 顾中一 宫海环 布文奂 董悦 孙宏晨 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期848-854,I0001,共8页

目的:通过非病毒载体聚乙烯亚胺(PEI)介导miRNA-2861(miR-2861)模拟物转染MC3T3-E1细胞系,探讨miR-2861/PEI复合物在前成骨细胞中的转染效率及其对细胞增殖和成骨向分化的影响。方法:将适量的PEI分别与miR-2861和阴性对照(NC)以元素N/P... 目的:通过非病毒载体聚乙烯亚胺(PEI)介导miRNA-2861(miR-2861)模拟物转染MC3T3-E1细胞系,探讨miR-2861/PEI复合物在前成骨细胞中的转染效率及其对细胞增殖和成骨向分化的影响。方法:将适量的PEI分别与miR-2861和阴性对照(NC)以元素N/P=10的比例混合形成基因/载体复合物。将miR-2861/PEI复合物作为实验组,NC/PEI复合物作为阴性对照组以排除人工合成的双链基因对成骨作用的干扰。采用MTT法筛选PEI复合miR-2861模拟物的最佳使用浓度;应用荧光成像和茎环法RT-PCR技术分别检测10、30、50和100nmol·L^(-1) miR/PEI复合物对MC3T3细胞的瞬时转染效率和miR-2861的表达情况;采用qRT-PCR技术和茜素红染色检测用选定浓度瞬时转染miR-2861/PEI复合物作用下MC3T3细胞的成骨能力。结果:与空白对照组比较,100nmol·L^(-1) miR-2861/PEI复合物作用72h时MC3T3细胞增殖率明显下降(P<0.05)。随转染浓度增加,miR-2861/PEI复合物在MC3T3细胞中的转染效率逐渐升高。茜素红染色及定量分析,实验组诱导21d后出现较多的钙盐沉积结节,而空白对照组和阴性对照组均较少。结论:以PEI作为载体可使miR-2861模拟物有效转染MC3T3-E1细胞并在细胞中高表达,miR-2861模拟物具有一定的促MC3T3-E1细胞成骨向分化的作用。 展开更多

关键词 miRNA-2861模拟物 聚乙烯亚胺 mc3t3-E1细胞系 成骨分化 基因治疗

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紫草素对MC3T3-E1细胞增殖、分化、矿化及成骨相关基因表达的影响 被引量：4

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作者 王莉平 林静 +1 位作者 薄雨佳 赵今 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第5期583-588,共6页

目的探究紫草素对小鼠成骨前体细胞(MC3T3⁃E1 cells)增殖、成骨分化的影响及OPG/RANKL信号轴在其中的作用。方法MC3T3⁃E1细胞体外培养,实验分为对照组和不同浓度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L)紫草素实验组,给药24、48、72 h... 目的探究紫草素对小鼠成骨前体细胞(MC3T3⁃E1 cells)增殖、成骨分化的影响及OPG/RANKL信号轴在其中的作用。方法MC3T3⁃E1细胞体外培养,实验分为对照组和不同浓度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L)紫草素实验组,给药24、48、72 h后CCK⁃8法检测细胞增殖抑制率;使用碱性磷酸酶(ALP)活性试剂盒检测MC3T3⁃E1细胞ALP活性水平;运用NBT/BCIP试剂盒进行ALP染色鉴定;采用实时荧光定量PCR(RT⁃PCR)检测骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、Ⅰ型胶原(COL⁃I)基因表达水平;茜素红染色观察矿化结节的形成。结果0.0625、0.125、0.25、0.5μmol/L的紫草素组较对照组显著促进MC3T3⁃E1细胞增殖(P<0.05),高于0.5μmol/L的紫草素组显著抑制MC3T3⁃E1细胞生长(P<0.05);安全浓度下的紫草素组呈浓度依赖性促进成骨细胞增殖、分化和矿化;RT⁃PCR结果显示与对照组相比,安全浓度下的紫草素组显著促进OPG、RUNX2、COL⁃I表达,抑制RANKL表达(P<0.05)。结论紫草素能促进MC3T3⁃E1细胞增殖、分化及矿化,可能是通过调节OPG/RANKL信号轴及成骨相关基因实现的。 展开更多

关键词 紫草素 OPG/RANKL信号轴 mc3t3⁃E1细胞 成骨分化

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