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重组小鼠白细胞介素-27融合蛋白多克隆抗体的制备及鉴定
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作者 路晓红 付玉荣 伊正君 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期185-190,共6页
目的:制备重组小鼠白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)融合蛋白的多克隆抗体并鉴定其活性。方法:用反转录PCR从小鼠脾细胞扩增出EB病毒诱导基因3(EBI3)和p28成熟肽基因片段,采用重叠延伸PCR用(Gly4Ser)3接头将2个片段进行连接,将得到... 目的:制备重组小鼠白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)融合蛋白的多克隆抗体并鉴定其活性。方法:用反转录PCR从小鼠脾细胞扩增出EB病毒诱导基因3(EBI3)和p28成熟肽基因片段,采用重叠延伸PCR用(Gly4Ser)3接头将2个片段进行连接,将得到的小鼠IL-27单链融合基因片段克隆于p ET-32a(+)载体。阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达,利用SDS-PAGE与Western blot鉴定目的蛋白的表达。以纯化的IL-27融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗小鼠IL-27融合蛋白的多克隆抗体,利用Western blot和ELISA进行特异性及效价分析。结果:从小鼠脾细胞总RNA中扩增得到IL-27单链融合基因经测序与预期序列一致;在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,SDS-PAGE显示表达出的融合蛋白相对分子质量(molecular weight,Mr)约67 000;Western blot结果表明该融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体发生反应;该蛋白免疫新西兰大白兔后获得抗血清,Western blot结果显示该血清可以特异性地与IL-27融合蛋白结合,ELISA测定该多克隆抗体的效价可以达到1∶3 200。结论:在大肠杆菌中成功表达出小鼠IL-27融合蛋白,并制备出效价较高、特异性较好的兔抗小鼠IL-27多克隆抗体。 展开更多
关键词 小鼠白细胞介素-27 重叠延伸PCR 融合蛋白 原核表达 多克隆抗体
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脾气虚型免疫性血小板减少症小鼠模型与白细胞介素-27、白细胞介素-10的表达 被引量:2
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作者 赵倩 严香 张雅月 《世界中医药》 CAS 2023年第24期3508-3511,3517,共5页
目的:研究脾气虚型免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠血清与脾脏组织中白细胞介素-27(IL-27)、白细胞介素-10(IL-10)的表达水平及意义。方法:24只白变种实验小鼠以区间分组法随机分为对照组、模型组、泼尼松组、健脾益气摄血组。除对照组... 目的:研究脾气虚型免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠血清与脾脏组织中白细胞介素-27(IL-27)、白细胞介素-10(IL-10)的表达水平及意义。方法:24只白变种实验小鼠以区间分组法随机分为对照组、模型组、泼尼松组、健脾益气摄血组。除对照组外,其余组均以被动免疫造模法建立脾气虚型ITP小鼠模型。造模后,模型组、对照组用生理盐水灌胃,泼尼松组、健脾益气摄血组分别用泼尼松、健脾益气摄血颗粒灌胃。各组均灌胃1次/d,连续8 d。采用酶联免疫吸附试验检测外周血中血小板计数及血清与脾脏中IL-27、IL-10表达水平。结果:与对照组比较,模型组血清和脾脏IL-27、IL-10均显著降低(均P<0.01)。与模型组比较,泼尼松组、健脾益气摄血组血清和脾脏IL-10均明显升高(P<0.05);泼尼松组、健脾益气摄血组血清与脾脏IL-27均有所升高,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:IL-27、IL-10可能在脾气虚型ITP中发挥保护性作用,且发挥作用的主要场所在外周血而非脾脏;此外泼尼松与健脾益气摄血颗粒治疗ITP的机制可能与提高IL-10的含量有关,而与提高IL-27的含量关系不大。 展开更多
关键词 脾气虚 原发性免疫性血小板减少症 小鼠模型 白细胞介素-10 白细胞介素-27 血清 脾脏组织 健脾益气摄血颗粒
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白细胞介素-6及肿瘤坏死因子对受照小鼠造血恢复的影响 被引量:11
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作者 周华云 周剑影 +4 位作者 王国权 段莹莹 戴宏 郭晓葵 李元 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期232-237,共6页
采用 PHILIPS- SL18型电子直线加速器产生的 6 MV高能 X射线照射 Balb/c小鼠 (剂量为 6 .5Gy) ,照后不同时间皮下注射不同剂量的白细胞介素 - 6 (IL - 6 )和 /或肿瘤坏死因子 (TNF) ,观察外周血白细胞、血小板、骨髓有核细胞计数和脾集... 采用 PHILIPS- SL18型电子直线加速器产生的 6 MV高能 X射线照射 Balb/c小鼠 (剂量为 6 .5Gy) ,照后不同时间皮下注射不同剂量的白细胞介素 - 6 (IL - 6 )和 /或肿瘤坏死因子 (TNF) ,观察外周血白细胞、血小板、骨髓有核细胞计数和脾集落形成单位 (CFU- S)的变化 ,以探讨 IL - 6对放射损伤后造血恢复的影响。结果表明 ,照射后应用 IL- 6组较对照组外周血白细胞、血小板和骨髓有核细胞计数恢复快 ,且呈剂量依赖关系 ,CFU- S则在 TNF与 IL- 6协同作用时数量多、体积大 ,提示 IL- 6和 展开更多
关键词 白细胞介素-6 造血 小鼠 肿瘤坏死因子 辐射损伤 急性造血功能衰竭 治疗 X射线 放射损伤
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白细胞介素-2对小鼠神经病理性痛的镇痛作用 被引量:3
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作者 王军阳 曾晓艳 +2 位作者 袁育康 范桂香 唐敬师 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期391-393,407,共4页
目的探讨白细胞介素-2(IL-2)对神经病理性痛的镇痛作用及其可能的机制,为临床治疗神经病理性痛筛选新的镇痛药物奠定基础。方法通过结扎雄性C57BL/6小鼠单侧L5/L6脊神经建立神经病理性痛模型,然后利用机械刺激和冷刺激诱发的痛觉超敏实... 目的探讨白细胞介素-2(IL-2)对神经病理性痛的镇痛作用及其可能的机制,为临床治疗神经病理性痛筛选新的镇痛药物奠定基础。方法通过结扎雄性C57BL/6小鼠单侧L5/L6脊神经建立神经病理性痛模型,然后利用机械刺激和冷刺激诱发的痛觉超敏实验分别观察腹腔注射不同剂量(1.0×106、2.5×106、5.0×106u/kg)IL-2对疼痛模型小鼠患侧脚掌痛阈的影响;同时,通过5.0×106u/kg IL-2注射前30 min腹腔注射纳洛酮(1 mg/kg)以观察阿片受体拮抗剂对IL-2镇痛作用的影响。结果腹腔注射IL-2可产生剂量依赖性镇痛作用,其中5.0×106u/kg和2.5×106u/kg IL-2均可显著提高模型小鼠患侧脚掌的50%缩足阈值(P<0.01)和降低5 min抬足次数(P<0.05),镇痛效应分别维持30 min和15 min,而1.0×106u/kg IL-2无明显的镇痛作用。IL-2产生的镇痛效应不能被纳洛酮阻断。结论IL-2对小鼠神经病理性痛具有镇痛作用,其镇痛效应除受阿片受体介导外还可能有其他分子参与。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 镇痛 神经病理性痛 小鼠
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地塞米松抑制小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素-18的表达 被引量:3
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作者 潘建平 姚航平 余海 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2001年第5期201-204,共4页
目的 :研究糖皮质激素 (GC)对小鼠腹腔巨噬细胞 (Mφ) IL-1 8表达的调控作用。方法 :以半定量 RT-PCR法检测经不同浓度地塞米松 (Dex)处理的 Mφ脂多糖 (L PS)诱导的 IL -1 8m RNA的表达 ,以 EL ISA法检测 Mφ培养上清 IL-1 8的含量。结... 目的 :研究糖皮质激素 (GC)对小鼠腹腔巨噬细胞 (Mφ) IL-1 8表达的调控作用。方法 :以半定量 RT-PCR法检测经不同浓度地塞米松 (Dex)处理的 Mφ脂多糖 (L PS)诱导的 IL -1 8m RNA的表达 ,以 EL ISA法检测 Mφ培养上清 IL-1 8的含量。结果 :Dex剂量依赖性地抑制 MφL PS诱导的IL-1 8m RNA及其蛋白的表达 ,但 IL-1 8蛋白表达对 Dex抑制作用的敏感性低于其 m RNA的表达。 Dex的此等抑制作用可被糖皮质激素受体拮抗剂— RU486阻断。结论 :GC能抑制 MφL PS诱导的 IL-1 8的表达。 展开更多
关键词 地塞米松 腹腔巨噬细胞 白细胞介素-18 小鼠
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针灸对帕金森病小鼠黑质白细胞介素-17受体A/核因子κB信号通路的影响 被引量:7
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作者 高崚 陈王璐 +3 位作者 陈奕奕 张潇文 王照钦 刘慧荣 《世界中医药》 CAS 2022年第18期2580-2586,共7页
目的:观察针灸对帕金森病(PD)小鼠中脑黑质部白细胞介素-17受体A/核因子κB(IL-17RA/NF-κB)信号通路相关分子表达的影响,探讨针刺改善PD症状的可能机制。方法:无特定病原体(SPF)级8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组... 目的:观察针灸对帕金森病(PD)小鼠中脑黑质部白细胞介素-17受体A/核因子κB(IL-17RA/NF-κB)信号通路相关分子表达的影响,探讨针刺改善PD症状的可能机制。方法:无特定病原体(SPF)级8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、针刺艾灸组和雷沙吉兰组。1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射建立PD动物模型,模型组不治疗,仅作抓取固定;针刺组针刺百会、阳陵泉穴;针刺艾灸组在针刺组基础上艾灸关元穴;雷沙吉兰组给予雷沙吉兰溶液灌胃。观测各组小鼠总体转棒评分(ORP),采用免疫荧光染色技术检测各组小鼠中脑黑质部酪氨酸羟化酶(TH)和α-突触核蛋白表达,采用蛋白质免疫印迹法检测黑质致密部白细胞介素-17(IL-17)受体A及下游分子表达状况。结果:与空白组比较,模型组小鼠ORP评分和TH表达显著降低;与模型组比较,针刺组、针刺艾灸组ORP评分和TH表达量均显著升高(均P<0.05);与空白组比较,模型组小鼠黑质α-突触核蛋白荧光强度显著增高(P<0.05);模型组小鼠黑质p-核因子κB抑制剂α(IκBα)表达和p-IκBα/IκBα比值显著上升(P<0.05)。与模型组比较,针刺组、针刺艾灸组与雷沙吉兰组α-突触核蛋白免疫荧光强度明显降低(P<0.05);针刺艾灸组小鼠黑质IL-17受体A表达显著降低(P<0.05);针刺组、针刺艾灸组与雷沙吉兰组p-IκBα表达和p-IκBα/IκBα比值显著下调。结论:针刺组和针刺艾灸组均可改善PD模型小鼠转棒活动能力,可保护黑质TH阳性神经元,抑制α-突触核蛋白的表达,其机制可能与调节IL-17受体通路,尤其是IκBα的磷酸化有关。 展开更多
关键词 针刺 艾灸 帕金森病 小鼠 IL-17受体A/核因子κB信号通路 白细胞介素-17 黑质
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重组人白细胞介素-1β对冷冻后小鼠桑椹胚体内外发育率的影响 被引量:3
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作者 朱士恩 李玉欣 +1 位作者 曾申明 张忠诚 《中国实验动物学杂志》 1999年第2期65-68,共4页
本试验探讨了重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)对小鼠桑椹胚玻璃化冷冻后体内外发育的影响。结果表明:当rhIL-1β添加浓度为5、50、500IU/ml时,对解冻后的胚胎经体外培养,发育率(87%~100%)与对... 本试验探讨了重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)对小鼠桑椹胚玻璃化冷冻后体内外发育的影响。结果表明:当rhIL-1β添加浓度为5、50、500IU/ml时,对解冻后的胚胎经体外培养,发育率(87%~100%)与对照组(94%)相比无显著性差异(P>005)。而浓度提高到1000IU/ml时,胚胎的发育受到抑制。解冻后胚胎在含有5、50、500IU/ml浓度的rhIL-1β培养液中培养3~4h后移植于假妊娠3d的受体鼠,移植妊娠率(86%、100%、83%)高于对照组(56%),特别是50IU/ml处理组与对照组有极显著差异(P<001)。而浓度为1000IU/ml处理组的胚胎移植妊娠率(30%)低于对照组。试验证明,添加浓度为5~500IU/mlrhIL-1β的培养液,对解冻后胚胎的体外发育率无影响,而且能够显著提高移植妊娠率。 展开更多
关键词 对照组 IL- 体内 胚胎 小鼠 发育 白细胞介素- 桑椹胚 移植妊娠率 解冻
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白细胞介素-27促进CIK细胞的增殖及其对淋巴瘤细胞的杀伤能力
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作者 段玉青 王婷婷 +4 位作者 贾云泷 王郁 张璁 单保恩 刘丽华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期147-152,共6页
目的:初步探讨重组人白介素-27(interleukin-27,IL-27)体外对人外周血来源的细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞增殖及其对肿瘤细胞的杀伤能力的影响。方法:无菌条件下分离健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blo... 目的:初步探讨重组人白介素-27(interleukin-27,IL-27)体外对人外周血来源的细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞增殖及其对肿瘤细胞的杀伤能力的影响。方法:无菌条件下分离健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),第0天加入IFN-γ、CD3单抗,之后根据加入不同细胞因子剂量随机分为六组进行CIK细胞培养:A组(IL-2:1 000 U/ml,正常对照组),B组(IL-2:1 000 U/ml,IL-27:20 ng/ml),C组(IL-2:1 000 U/ml,IL-27:10 ng/ml),D组(IL-2:500 U/ml,IL-27:10 ng/ml),E组(IL-2:1 000 U/ml,IL-27:5 ng/ml),F组(IL-2:1 000 U/ml,IL-27:40 ng/ml)。倒置相差显微镜下观察各组CIK细胞生长情况,流式细胞术检测各组CIK细胞CD3+CD56+T、CD8+T细胞的表达,自动细胞计数仪计数各组CIK细胞增殖情况,MTS方法测定各组CIK细胞对淋巴瘤K562细胞的杀伤活性。结果:培养第11天,D组与A、B、C组比较,CIK细胞中CD3+CD56+T细胞的表达[(66.57±2.44)%vs(60.03±1.75)%,(55.51±0.03)%,(56.07±0.83)%;均P<0.05]、CD8+T细胞的表达[(81.67±1.97)%vs(70.30±2.67)%,(74.92±2.47)%,(74.43±1.90)%;均P<0.05]都明显增强;D组CIK细胞培养的扩增倍数明显高于A、B、C组[(4 811.87±23.07)vs(3 257.73±91.97),(3790.92±64.49),(4 009.85±43.08)倍;均P<0.05];效靶比40∶1时;D组CIK细胞培养第11天时杀伤力为(76.71±2.21)%,显著高于其他各组(均P<0.05)。结论:细胞因子IL-27体外可显著提高CIK细胞的增殖能力和杀伤能力,最佳培养周期为11 d。 展开更多
关键词 白细胞介素-27 细胞因子诱导的杀伤细胞 细胞增殖 杀伤能力 淋巴瘤 K562细胞
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不同给药条件下白细胞介素-8对受照小鼠作用特点的初步探讨
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作者 刘玉龙 周剑影 +4 位作者 王国权 戴宏 段莹莹 郭晓葵 姜忠 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期380-383,共4页
采用Phlips SL18型直线加速器发射的6 MV高能X射线照射BALB/c小鼠(吸收剂量分别为6.5和8.5 Gy),于照射前后不同时间(照前24 h、12 h6、h2、0 min和照后即刻)腹腔注射不同剂量(10、30μg/鼠)的人重组白细胞介素-8(rhIL-8),观察动物的存... 采用Phlips SL18型直线加速器发射的6 MV高能X射线照射BALB/c小鼠(吸收剂量分别为6.5和8.5 Gy),于照射前后不同时间(照前24 h、12 h6、h2、0 min和照后即刻)腹腔注射不同剂量(10、30μg/鼠)的人重组白细胞介素-8(rhIL-8),观察动物的存活情况及造血功能指标。结果表明:(1)8.5 Gy照后30 d内,rhIL-8 10μg给药各组的小鼠全部死亡,其中照前24 h给药小鼠的平均存活时间明显短于单纯照射组,照前6 h给药小鼠的平均存活时间明显延长;rhIL-8 30μg给药各组中,照前20 min给药组小鼠存活率达40%左右,其余各组均死亡,其中照前12 h给药小鼠的平均存活时间明显短于单纯照射组。(2)受6.5 Gy照后第6天,各组小鼠的外周血白细胞(WBC)计数均在正常对照组的10%以下,各组受照小鼠外周血WBC计数未见明显差别;骨髓细胞粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)计数与受8.5 Gy照射小鼠的平均存活时间在变化规律上有内在联系。以上结果说明,rhIL-8在一定的给药剂量和给药时间的条件下,对受到急性放射损伤的小鼠具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-8 BALB/C小鼠 放射损伤
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表达白细胞介素-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用
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作者 刘勇 胡大荣 +4 位作者 谭晓华 范公忍 胡学玲 韩聚强 吴忆贫 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第2期147-150,共4页
目的:探讨瘤内注射mIL-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法:构建真核表达质粒载体pDC511mIL-12,ELISA方法检测质粒载体在真核细胞中的表达,淋巴母细胞增殖法检测mIL-12的生物学活性;分别于小鼠肝癌H22皮下移植瘤内直接注射质粒D... 目的:探讨瘤内注射mIL-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法:构建真核表达质粒载体pDC511mIL-12,ELISA方法检测质粒载体在真核细胞中的表达,淋巴母细胞增殖法检测mIL-12的生物学活性;分别于小鼠肝癌H22皮下移植瘤内直接注射质粒DNA,观察各组小鼠存活时间、肿瘤体积变化及各组小鼠脾脏细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活性。注射质粒DNA后1月进行瘤体组织病理学观察。结果:mIL-12基因治疗组与空载体对照组相比,肿瘤生长显著受抑制(F=4.10,P=0.03),小鼠存活期显著延长(X2=4.48,P=0.03),并且小鼠脾细胞CTL杀伤活性增强。质粒DNA瘤内注射1月后,pDC511mIL-12组肿瘤病灶炎性细胞浸润明显,病灶内肿瘤细胞广泛坏死。结论:瘤内注射mIL-12表达质粒DNA可抑制小鼠肝癌皮下移植瘤生长,能提高机体抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 小鼠细胞 小鼠白细胞介素-12 免疫基因治疗 疾病模型
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不同电针法对APP/PS1小鼠海马高迁移率族蛋白B1和白细胞介素-10表达的影响 被引量:8
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作者 赵江豪 姚海江 +6 位作者 王远征 卢梦晗 李昱颉 宋萌 杨利娟 刘俊彤 李志刚 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第1期17-22,共6页
目的观察"通督启神"法脉冲电针与音乐电针对APP/PS1模型小鼠空间学习记忆能力及海马内炎症介质表达的影响。方法 APP/PS1双转基因雄性小鼠32只随机分为模型组(n=8)、药物组(n=8)、脉冲电针组(n=8)和音乐电针组(n=8),相同月龄C... 目的观察"通督启神"法脉冲电针与音乐电针对APP/PS1模型小鼠空间学习记忆能力及海马内炎症介质表达的影响。方法 APP/PS1双转基因雄性小鼠32只随机分为模型组(n=8)、药物组(n=8)、脉冲电针组(n=8)和音乐电针组(n=8),相同月龄C57BL/6雄性小鼠作为正常对照组(n=8)。脉冲电针组与音乐电针组以各自电针仪电针百会、印堂,留针20 min,取针后点刺人中。药物组予盐酸多奈哌齐0.92 mg/kg灌胃。正常对照组、模型组与药物组以相同方法抓取束缚20 min。治疗15 d后,行Morris水迷宫测试,免疫组化观察海马高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与白细胞介素-10(IL-10)表达,Western blotting检测海马HMGB1与IL-10的表达。结果两个电针组从训练第4天起,逃避潜伏较模型组缩短(P<0.05),音乐电针组最短;目标象限游泳比例升高(P<0.05),两个电针组之间无显著性差异(P>0.05);海马HMGB1的表达降低(P<0.05),IL-10蛋白表达增加(P<0.05),免疫组化法音乐电针组HMGB1的表达低于脉冲电针组(P<0.05),IL-10表达高于脉冲电针组(P<0.05),Western blotting检测两组无显著性差异(P>0.05)。结论 "通督启神"法脉冲电针与音乐电针均能改善APP/PS1小鼠学习记忆功能,音乐电针在抑制炎性因子表达、促进抗炎因子表达方面可能优于脉冲电针。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 电针 学习记忆 高迁移率族蛋白B1 白细胞介素-10 小鼠
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口腔扁平苔藓患者血清中白细胞介素-12和白细胞介素-27表达与免疫功能的相关性 被引量:15
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作者 黄韵颖 周塑 蔡扬 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期140-144,共5页
目的了解口腔扁平苔藓(OLP)患者血清中白细胞介素(IL)-12和IL-27的表达与患者免疫功能状况的相关性,探讨IL-12和IL-27在OLP免疫发病机制中的作用及意义。方法选取对照组健康者20例和OLP组患者30例(其中网纹型15例,糜烂型15例),通过流式... 目的了解口腔扁平苔藓(OLP)患者血清中白细胞介素(IL)-12和IL-27的表达与患者免疫功能状况的相关性,探讨IL-12和IL-27在OLP免疫发病机制中的作用及意义。方法选取对照组健康者20例和OLP组患者30例(其中网纹型15例,糜烂型15例),通过流式细胞术分析OLP患者外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+56[自然杀伤细胞(NK)]的表达情况,散射比浊法检测患者体液免疫指标免疫球蛋白(Ig)G、Ig A、Ig M、C3、C4的表达情况。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清中IL-12和IL-27的表达水平,分析IL-12和IL-27的表达与OLP患者免疫功能状况及临床特征的相关性。结果与实验室标准值相比,OLP患者细胞免疫中CD3+、CD4+、CD8+水平降低,CD19+水平增高(P<0.05);体液免疫中Ig M水平增高,C4水平降低(P<0.05)。OLP患者血清中IL-12与IL-27表达水平均高于对照组(P<0.05)。同时相关分析显示,OLP患者血清中IL-12和IL-27的表达水平呈正相关关系(r=0.912,P<0.01)。但是IL-12及IL-27表达水平与OLP体征计分、病程计分等临床特征无相关性(P>0.05)。OLP患者中IL-12和IL-27的表达与CD16+56(NK)存在负相关关系(r1=-0.416,P1=0.022;r2=-0.392,P2=0.032),与Ig G存在正相关关系(r1=0.445,P1=0.014;r2=0.549,P2=0.002)。结论 OLP患者主要以细胞免疫功能低下为主,同时伴有一定程度的体液免疫功能的紊乱。IL-12和IL-27的异常高表达可能协同引起且促进了OLP的炎症发生发展,并且通过机体代偿性负反馈作用参与了对炎症性免疫应答的调节,在OLP的发病机制中起到了一定作用。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 白细胞介素-12 白细胞介素-27 免疫 酶联免疫吸附试验
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小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒可控制慢性HBV感染 被引量:1
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作者 高雪萍 周扬 +4 位作者 郑新春 易璇 唐利波 侯金林 李咏茵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1436-1441,共6页
目的观察小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒(Ad-GFP-mIL-21)在慢性HBV感染小鼠中的表达以及其对病毒清除和HBV特异性抗体产生的作用。方法 Ad-GFP-mIL-21体外感染HepG2.2.15细胞后分别采用ELISA和Western blot检测上清和细胞mIL-21的表达... 目的观察小鼠白细胞介素-21基因重组腺病毒(Ad-GFP-mIL-21)在慢性HBV感染小鼠中的表达以及其对病毒清除和HBV特异性抗体产生的作用。方法 Ad-GFP-mIL-21体外感染HepG2.2.15细胞后分别采用ELISA和Western blot检测上清和细胞mIL-21的表达;尾静脉注射rAAV8-1.3HBV至野生型C57BL/6小鼠体内建立HBV持续表达模型,12周后实验组尾静脉注射Ad-GFP-mIL-21,以注射空载GFP重组腺病毒或PBS为对照组,荧光显微镜观察Ad-GFP-mIL-21在小鼠体内各器官的表达情况,ELISA检测各组小鼠血清HBsAg、HBsAb、HBcAb和mIL-21的水平。结果 Ad-GFP-mIL21可在体外感染HepG2.2.15细胞,且上清mIL-21水平与重组载体的滴度和感染时间相关。注射Ad-GFP-mIL21至HBV持续表达小鼠后第4天观察到绿色荧光主要在肝细胞表达;与处理前相比,注射第4天血清mIL-21水平显著升高(P<0.05),而HBsAg滴度则明显下降;实验组和对照组小鼠在注射第13天血清HBsAb均为阴性;与对照组相比,实验组小鼠血清HBcAb水平显著升高(P<0.05)。结论 AdGFP-mIL-21在HBV持续感染小鼠体内可表达mIL-21,并能下调血清HBsAg滴度和促进HBcAb产生,提示其在体内具有控制慢性HBV感染的作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 小鼠白细胞介素-21 重组腺病毒
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白细胞介素-27在顺铂所致急性肾损伤中的高表达及对细胞凋亡的抑制作用 被引量:2
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作者 周培慧 王丽 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期372-377,共6页
目的·探讨白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)在顺铂所致急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中的表达及在AKI中对细胞调亡的抑制作用。方法·将C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺铂组,于注射顺铂后24、48、72 h处死小鼠;取血... 目的·探讨白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)在顺铂所致急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中的表达及在AKI中对细胞调亡的抑制作用。方法·将C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺铂组,于注射顺铂后24、48、72 h处死小鼠;取血清样本,检测血尿素氮和血清肌酐水平;实时荧光定量PCR检测肾脏组织中IL-27亚单位p28和EBI3在mRNA水平的表达变化。将人近端肾小管上皮细胞系HK-2分为对照组、IL-27组、顺铂组及顺铂+IL-27组,实时荧光定量PCR分析顺铂处理0.5、1、6、12和24 h后IL-27受体GP130和WSX-1在mRNA水平的表达;CCK-8检测细胞活性;Hoechst染色观察细胞核形态;Western blotting检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和多聚ADP核糖聚合酶剪切体(cleaved poly ADP-ribose polymerase,cleaved PARP)的表达。结果·顺铂组小鼠血尿素氮、血清肌酐的水平呈时间依赖性升高,肾脏组织中p28和Ebi3 mRNA的表达水平增加并在顺铂注射48 h时出现峰值。顺铂处理1h内HK-2细胞GP130和WSX-1的表达增高,处理6、12、24 h后GP130和WSX-1的表达无明显变化。与顺铂组比较,顺铂+IL-27组细胞活力显著提升,细胞核浓缩、破裂减少,Bcl-2表达增加,Bax及cleaved PARP表达下降。结论·IL-27在顺铂所致AKI中高表达且可能通过抑制细胞凋亡发挥保护作用。 展开更多
关键词 急性肾损伤 顺铂 白细胞介素-27 凋亡
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猪白细胞介素-2和融合抗菌肽重组酵母菌构建及其对小鼠免疫和生长的协同效应
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作者 胡冰 吴雪颖 +7 位作者 马常俊 万小平 肖永乐 陈建林 李江淩 吕学斌 王泽洲 高荣 《四川动物》 北大核心 2018年第6期609-619,共11页
为了开发经济实用的新型免疫调节剂,以2A自剪切技术构建重组毕赤酵母Pichiapastoris共同表达猪白细胞介素-2(IL-2)和融合抗菌肽基因,然后以重组基因工程酵母菌饲喂ICR小鼠,以实时荧光定量PCR、ELISA和流式细胞计数评估其对小鼠免疫力和... 为了开发经济实用的新型免疫调节剂,以2A自剪切技术构建重组毕赤酵母Pichiapastoris共同表达猪白细胞介素-2(IL-2)和融合抗菌肽基因,然后以重组基因工程酵母菌饲喂ICR小鼠,以实时荧光定量PCR、ELISA和流式细胞计数评估其对小鼠免疫力和生长的影响。实验结果显示,处理组(融合抗菌肽重组酵母菌、IL-2和融合抗菌肽重组酵母菌)小鼠的生长明显优于对照组(空质粒酵母菌)(P <0. 05),且血清Ig G、Ig G1和Ig G2a含量显著升高(P <0. 05); TLR1、TLR4、TLR6、TLR9、IL-7、IL-15、IL-23、CD62L、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12、CRP4和CAMP基因的表达水平显著增加(P <0. 05)。同时,处理组小鼠血液白细胞Th和Tc细胞明显增多(P <0. 05),免疫力和存活率均明显高于对照组(P <0. 05)。重组酵母菌能有效增强小鼠的先天和获得性免疫力,促进生长,可进一步开发成安全有效的免疫调节生物制剂,改善动物的生长和免疫力。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 融合抗菌肽 重组毕赤酵母 小鼠 免疫
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中枢神经系统炎症对抗原递呈细胞白细胞介素-27表达影响
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作者 黄琦 秦新月 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期601-607,共7页
目的:探讨在炎症因子与凋亡细胞刺激下对中枢神经系统抗原递呈细胞白细胞介素(interleukin,IL)-27的表达调控。方法:用脂多糖(lipo-polysaccharide,LPS)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和X射线诱导凋亡细胞对小鼠小胶质细胞和骨髓源... 目的:探讨在炎症因子与凋亡细胞刺激下对中枢神经系统抗原递呈细胞白细胞介素(interleukin,IL)-27的表达调控。方法:用脂多糖(lipo-polysaccharide,LPS)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和X射线诱导凋亡细胞对小鼠小胶质细胞和骨髓源树突状细胞刺激。采用实时定量PCR法,检测不同刺激组小胶质细胞和树突状细胞p28基因mRNA的转录水平。Western blot法检测不同刺激组细胞IL-27蛋白表达水平。结果:LPS刺激和LPS与IFN-γ共刺激的小胶质细胞和树突状细胞p28 mRNA表达与空白组相比明显升高(小胶质细胞:PLPS 0.50μg/ml=0.029;PLPS+IFN-γ=4×10-7;树突状细胞:P0.50μg/ml=0.021;PLPS+IFN-γ=8×10-7),凋亡细胞预刺激组p28基因mRNA转录水平明显低于LPS和IFN-γ刺激组,差异有统计学意义(小胶质细胞:PLPS+凋亡细胞=1.2×10-4;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=1×10-7;树突状细胞:PLPS+凋亡细胞=3×10-4;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=2×10-7)。IL-27蛋白表达水平在LPS和IFN-γ刺激组明显增加(小胶质细胞:PLPS 0.25μg/ml=0.022;PLPS+IFN-γ=8×10-7;树突状细胞:PLPS 0.50μg/ml=0.021;PLPS+IFN-γ=2×10-7),在凋亡细胞预刺激组表达下降(小胶质细胞:PLPS+凋亡细胞=9.6×10-5;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=3×10-7;树突状细胞:PLPS+凋亡细胞=0.001;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=1.1×10-5)。结论:中枢抗原递呈细胞在LPS和IFN-γ刺激下IL-27 p28 mRNA和IL-27蛋白表达增加,吞噬凋亡细胞后IL-27 p28 mRNA和IL-27蛋白表达下降。 展开更多
关键词 小胶质细胞 树突状细胞 凋亡细胞 抗原递呈细胞 白细胞介素-27
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脂质体包裹猪白细胞介素6基因对猪带绦虫抗原基因免疫小鼠的影响 被引量:8
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作者 龙章富 高荣 +4 位作者 孟民杰 武梅 郑勇 刘昆 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第3期25-29,共5页
比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性... 比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性以及免疫细胞数量 ,均比注射VTS76的显著增强。经阳离子脂质体包裹的VTS76+VPIL 6在减少质粒用量 80 %时 ,免疫应答水平仍显著高于脂质体包裹VTS76,且明显高于VTS76+VPIL 6,证明VPIL 6能显著增强基因疫苗 (VTS76)免疫小鼠的免疫应答。 展开更多
关键词 小鼠 白细胞介素-6基因 阳离子脂质体 猪带绦虫抗原基因 免疫应答 免疫增强剂 疫苗
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聚乙烯吡咯烷酮介导的白细胞介素-12基因治疗小鼠肝癌微小病灶的实验研究
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作者 黎培员 林菊生 冯作化 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期381-381,共1页
关键词 聚乙烯吡咯烷酮 白细胞介素-12 基因治疗 小鼠 肝癌 微小病灶 实验研究
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鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达 被引量:3
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作者 陈玮 邵传森 +6 位作者 沈建根 鲍建芳 潘建平 韩伟 寿林 项哨 郑树 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第1期15-18,共4页
目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载... 目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL- 展开更多
关键词 白细胞介素-12 生物合成 质粒 基因表达 MIL-12 天然杀伤细胞 遗传载体 分子克隆 双亚基共表达 小鼠
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蛋氨酸脑啡肽联合白细胞介素-2抗肿瘤作用研究 被引量:6
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作者 孟静娟 单风平 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期64-67,共4页
观察蛋氨酸脑啡肽(MEK)和注射用白细胞介素-2(IL-2)单独和联合应用的抗肿瘤效应。应用动物移植性肿瘤的体内试验法,分别观察MEK、IL-2和(MEK+IL-2)对肿瘤的抑瘤作用及小鼠生命延长率情况。MEK组、IL-2组和(MEK+IL-2)组的抑瘤作用分别为1... 观察蛋氨酸脑啡肽(MEK)和注射用白细胞介素-2(IL-2)单独和联合应用的抗肿瘤效应。应用动物移植性肿瘤的体内试验法,分别观察MEK、IL-2和(MEK+IL-2)对肿瘤的抑瘤作用及小鼠生命延长率情况。MEK组、IL-2组和(MEK+IL-2)组的抑瘤作用分别为131.38%(P<0.01)、69.63%(P<0.01)、229.170%(P<0.01),都有显著差异;生命延长率为:MEK组18.27%(P<0.01),有显著差异;IL-2组9.31%(P>0.01),无显著差异;(MEK+IL-2)组32.07%(P<0.01),有显著差异。结果表明:MEK、IL-2和(MEK+IL-2)都对小鼠移植性瘤有一定的抑制作用,MEK和(MEK+IL-2)能够延长小鼠生命,而IL-2单独应用不能延长小鼠生命;MEK和IL-2联合应用时作用相加,而不良反应未相加。 展开更多
关键词 蛋氨酸脑啡肽 注射用白细胞介素-2 小鼠 抗肿瘤作用
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