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减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsseK1Δasd宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究被引量：2: 1; 作者杨亚东丁轲 +3 位作者张春杰程相朝贾艳艳何雷《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1521-1526,共6页; 目的:为构建减毒鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株平衡致死系统,并将其开发为能够稳定携带外源基因的活疫苗载体。方法:利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的等位基因交换技术,以减毒鼠伤寒沙门菌株SL1344Δsse K1为亲本株,运用二步法筛选... 展开更多; 关键词鼠伤寒沙门菌自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统活疫苗载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasdC78-1(pYA3493)宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究被引量：4: 2; 作者尚珂张俊峰 +6 位作者程相朝张春杰李银聚陈桂华颜云飞翟崇凯赵战勤《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期358-363,共6页; 目的:开发应用于猪的稳定携带异源基因的口服活疫苗载体。方法:本研究在减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcya C78-1的基础上,运用自杀性质粒pREasd介导的细菌同源重组技术,构建缺失株ΔcrpΔcyaΔasd C78-1,再将携带asd基因的互补质粒p YA3493... 展开更多; 关键词自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统 ΔcrpΔcyaΔasdC78-1(PYA3493) 口服活疫苗载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究被引量：1: 3; 作者张俊峰张春杰 +7 位作者程相朝尚珂李银聚吴庭才刘一尘颜云飞陈桂华赵战勤《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期366-370,共5页; 为研制能够稳定携带外源基因的猪霍乱沙门菌口服活疫苗载体,本研究在减毒猪霍乱沙门菌△cyaC78-1基础上,利用自杀性质粒介导的等位交换技术,构建了△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统,并对其生物学特性进行了鉴定。PCR及测序结果表明... 展开更多; 关键词自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统 △cya△asdC78-1(pYA3493) 口服活疫苗载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株asd平衡致死系统的构建及特性的研究被引量：2: 4; 作者张春杰陈松彪 +8 位作者程相朝廖成水李静何雷张明亮郁川余祖华贾艳艳赵战勤《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期210-213,共4页; 目的:为研究用于能够稳定携带外源基因的口服活疫苗载体。方法:本研究以减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipB为研究对象,利用自杀性质粒pREΔasd介导的细菌同源重组技术,构建SL1344ΔsipBΔasd宿主-载体平衡致死系统,并进一步研究其生物学特... 展开更多; 关键词自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统 SL1344ΔsipBΔasd(pYA3493) 口服活疫苗载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用: 5; 作者耿士忠陈晓娟 +1 位作者潘志明焦新安《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2243-2250,共8页; 敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97Aasd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,... 展开更多; 关键词鸡伤寒沙门菌 asd基因宿主载体平衡致死系统 NDV-F蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

干扰素及其基因工程被引量：5: 6; 作者余顺惠《生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期62-63,共2页; 关键词干扰素作用机制基因工程宿主载体系统合成; 在线阅读下载PDF 职称材料

肠毒素大肠杆菌定居因子CS6抗原基因在痢疾杆菌中的表达被引量：1: 7; 作者罗刚李淑琴 +4 位作者王令春赵莹郑继平段海清张兆山《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期154-158,共5页; 通过体外重组的方法 ,将asd基因插入重组表达质粒 ,使抗生素抗性失活 ,并与弗氏志贺氏菌FWL0 1构成宿主载体平衡致死系统 .通过蛋白质印迹结果表明 ,在没有抗生素条件选择的情况下 ,可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6 .重组菌... 展开更多; 关键词肠毒素大肠杆菌痢疾杆菌宿主-载体平衡致死系统活载体疫苗基因表达 CS6抗原基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp^-/asd^-缺失株中的表达及小鼠免疫试验被引量：1: 8; 作者徐引弟王治方 +1 位作者朱文豪郭成留《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第7期70-73,共4页; 为研制仔猪副伤寒—猪水肿病新型二联疫苗,从pMDSLT-Ⅱ中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因,将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接。阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株,进行SDS-PAGE电泳和Western blotting,重组菌C500crp-/asd-(pYA2B)口服... 展开更多; 关键词猪霍乱沙门氏菌C500crp-/asd-缺失株宿主载体平衡致死系统 2拷贝SLT-ⅡvB 基因表达免疫反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsseK1Δasd宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究被引量：2: 1; 作者杨亚东丁轲张春杰程相朝贾艳艳何雷; 机构河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1521-1526,共6页; 基金河南省科技攻关项目(112102110019)资助; 文摘目的:为构建减毒鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株平衡致死系统,并将其开发为能够稳定携带外源基因的活疫苗载体。方法:利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的等位基因交换技术,以减毒鼠伤寒沙门菌株SL1344Δsse K1为亲本株,运用二步法筛选asd基因缺失株SL1344Δsse K1Δasd。将携带有asd基因的无抗性p YA3493质粒电转至上述缺失菌株SL1344Δsse K1Δasd,构建SL1344Δsse K1Δasd(p YA3493)重组菌株。结果:PCR及测序结果表明SL1344Δsse K1Δasd(p YA3493)构建成功。进一步研究表明重组菌株SL1344Δsse K1Δasd(p YA3493)血清型和强毒株SL1344及亲本株SL1344Δsse K1相同,且能稳定遗传缺失后的asd基因;其生化特性和生长速度与强毒株SL1344及亲本株SL1344Δsse K1相比均无明显差异。小鼠毒力试验表明,SL1344Δsse K1Δasd(p YA3493)口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为5.24×108CFU,毒力较强毒株SL1344约下降至0.048%;免疫保护效力试验显示,运用鼠伤寒沙门菌野生毒株对免疫后第17天的小鼠攻毒有62.5%的保护率,与亲本株SL1344Δsse K1基本一致。结论:以上结果表明,鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株宿主-载体平衡致死系统构建成功,且遗传稳定,毒力明显降低,具有较好的免疫原性,为深入研究以鼠伤寒沙门菌为载体的口服多价疫苗奠定基础。; 关键词鼠伤寒沙门菌自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统活疫苗载体; Keywords Salmonella typhimurium Suicide plasmid Host-vector balanced lethal system Live vaccine vector; 分类号 S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasdC78-1(pYA3493)宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究被引量：4: 2; 作者尚珂张俊峰程相朝张春杰李银聚陈桂华颜云飞翟崇凯赵战勤; 机构河南省动物疫病与公共安全院士工作站/河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期358-363,共6页; 基金河南省科技攻关项目(112102110019); 文摘目的:开发应用于猪的稳定携带异源基因的口服活疫苗载体。方法:本研究在减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcya C78-1的基础上,运用自杀性质粒pREasd介导的细菌同源重组技术,构建缺失株ΔcrpΔcyaΔasd C78-1,再将携带asd基因的互补质粒p YA3493电转至上述菌株,构建ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)宿主-载体平衡致死系统,并进一步研究其生物学特性。结果:PCR及测序结果共同表明ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)构建成功。生物学特性检测结果表明ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)的血清型与亲本株ΔcrpΔcya C78-1和疫苗株C500相同,并能够稳定遗传缺失型asd基因片段;其生长速度略慢于ΔcrpΔcya C78-1,且二者均明显慢于疫苗株C500;其生化特性结果也与ΔcrpΔcya C78-1基本相同。小鼠口服攻毒试验表明ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)的毒力与ΔcrpΔcya C78-1基本相当,但其半数致死量约为疫苗株C500的412倍。结论:上述结果表明,减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasd C78-1(p YA3493)有潜力作为高效表达外源基因的口服活疫苗载体。; 关键词自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统 ΔcrpΔcyaΔasdC78-1(PYA3493) 口服活疫苗载体; Keywords Suicide plasmid Host-vector balanced lethal system AcrpAcyaAasdC78-1,（ pYA3493 ） Oral live vaccine vector; 分类号 R378.21 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究被引量：1: 3; 作者张俊峰张春杰程相朝尚珂李银聚吴庭才刘一尘颜云飞陈桂华赵战勤; 机构河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室河南省动物疫病与公共安全院士工作站; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期366-370,共5页; 基金河南省科技攻关项目(112102110019); 文摘为研制能够稳定携带外源基因的猪霍乱沙门菌口服活疫苗载体,本研究在减毒猪霍乱沙门菌△cyaC78-1基础上,利用自杀性质粒介导的等位交换技术,构建了△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统,并对其生物学特性进行了鉴定。PCR及测序结果表明△cya△asdC78-1构建正确,其生物学特性检测结果显示△cya△asdC78-1生化特性与△cyaC78-1完全相同,血清型与△cyaC78-1和疫苗株C500相同,并且具有稳定的遗传特性;其生长速度与△cya C78-1基本相同,均明显慢于疫苗株C500。动物试验表明△cya△asdC78-1电转化携带asd基因的互补质粒pYA3493后,其毒力比△crp△asdC78-1(p YA3493)降低1.14倍,比△asdC500(pYA3493)降低了5.1倍。以上结果表明,减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1同样可以作为口服活疫苗载体用于高效表达外源基因,为开发以C78-1为基础的口服多价疫苗载体奠定了基础。; 关键词自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统 △cya△asdC78-1(pYA3493) 口服活疫苗载体; Keywords suicide plasmid host-vector balanced lethal system △ cyaA asdC78-1 （pYA3493） oral live vaccine vector; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株asd平衡致死系统的构建及特性的研究被引量：2: 4; 作者张春杰陈松彪程相朝廖成水李静何雷张明亮郁川余祖华贾艳艳赵战勤; 机构河南省动物疫病与公共安全院士工作站/河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期210-213,共4页; 基金河南省科技攻关项目(152102110078)资助; 文摘目的:为研究用于能够稳定携带外源基因的口服活疫苗载体。方法:本研究以减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipB为研究对象,利用自杀性质粒pREΔasd介导的细菌同源重组技术,构建SL1344ΔsipBΔasd宿主-载体平衡致死系统,并进一步研究其生物学特性。结果:PCR及测序结果表明SL1344ΔsipBΔasd构建成功。生物学特性结果表明SL1344ΔsipBΔasd的血清型与SL1344ΔsipB相同,并能够稳定遗传缺失后的asd基因;其生长速度和生化特性与亲本株SL1344基本相同,并且该缺失株仍然具有运动性的能力,小鼠攻毒试验表明SL1344ΔsipBΔasd电转了携带asd基因的互补质粒pYA3493后,其毒力较亲本菌株SL1344约降低至1.4%。结论:以上结果证明,减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipBΔasd菌株构建成功,为深入研究以鼠伤寒沙门菌为载体的口服多价疫苗奠定基础。; 关键词自杀性质粒宿主-载体平衡致死系统 SL1344ΔsipBΔasd(pYA3493) 口服活疫苗载体; Keywords Suicide plasmid Host-vector balanced lethal system SL134gAsipB△asd（ pYA3493 ） Oral live vaccine vector; 分类号 S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用: 5; 作者耿士忠陈晓娟潘志明焦新安; 机构扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2243-2250,共8页; 基金公益性行业(农业)项目(201403054) "863"项目(2011AA10A212) +3 种基金中国博士后基金(2014M551670) 江苏省博士后基金(1302067C) 扬州大学创新培育基金(2013CXJ070); 文摘敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97Aasd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,通过E.coliχ7213与SG97A固相杂交,将质粒转入SG97A,反向筛选获得SG97AΔasd::CmR,利用质粒pCP20去除CmR后,DAP的依赖菌株命名为SG97AΔasd。将含asd基因的质粒pYA3334转入SG97AΔasd中构建宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白。结果表明,通过等位基因重组方法,成功构建SG97AΔasd及宿主载体平衡致死系统,重组菌能够表达NDV-F蛋白,并能在鸡体内诱导产生特异性抗体。本研究成功构建SG97AΔasd宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白及其诱导宿主产生抗体,为应用该系统构建二价活菌苗的研究奠定了基础。; 关键词鸡伤寒沙门菌 asd基因宿主载体平衡致死系统 NDV-F蛋白; Keywords Salmonella gallinarum(SG) asd gene vector-host balanced lethal system NDV-F protein; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名干扰素及其基因工程被引量：5: 6; 作者余顺惠; 机构重庆三峡学院生物系; 出处《生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期62-63,共2页; 关键词干扰素作用机制基因工程宿主载体系统合成; 分类号 R978.7 [医药卫生—药品] TQ460.38 [化学工程—制药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肠毒素大肠杆菌定居因子CS6抗原基因在痢疾杆菌中的表达被引量：1: 7; 作者罗刚李淑琴王令春赵莹郑继平段海清张兆山; 机构吉林大学生命科学学院北京生物工程研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期154-158,共5页; 基金国家高技术"863"计划 ( 2 0 0 1AA2 15 2 11) 全军科研基金重点课题资助项目 ( 0 1Z0 2 6)~~; 文摘通过体外重组的方法 ,将asd基因插入重组表达质粒 ,使抗生素抗性失活 ,并与弗氏志贺氏菌FWL0 1构成宿主载体平衡致死系统 .通过蛋白质印迹结果表明 ,在没有抗生素条件选择的情况下 ,可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6 .重组菌通过口服和鼻饲免疫小鼠后 ,可以诱生CS6血清IgG抗体 ;同时可以检测到分泌型IgA产生 ,表明重组菌可以诱导相应的黏膜免疫反应 .; 关键词肠毒素大肠杆菌痢疾杆菌宿主-载体平衡致死系统活载体疫苗基因表达 CS6抗原基因; Keywords enterotoxigenic Escherichia coli , CS6, Shigella flexner , host plasmid letlhal balancing system, live vector vaccine; 分类号 R378.21 [医药卫生—病原生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp^-/asd^-缺失株中的表达及小鼠免疫试验被引量：1: 8; 作者徐引弟王治方朱文豪郭成留; 机构河南省农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第7期70-73,共4页; 基金河南省科技攻关计划项目(072102140004) 河南省农科院高技术产品孵化项目(200712); 文摘为研制仔猪副伤寒—猪水肿病新型二联疫苗,从pMDSLT-Ⅱ中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因,将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接。阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株,进行SDS-PAGE电泳和Western blotting,重组菌C500crp-/asd-(pYA2B)口服免疫小鼠,腹腔攻10 LD50的猪霍乱沙门氏菌强毒C78-1和2 LD50的猪水肿大肠杆菌强毒ED3株,计算攻毒保护率。结果显示,2 SLT-ⅡvB在C500crp-/asd-缺失株中获得了表达。C500crp-/asd-(pYA2B)免疫组对ED3的攻击能提供60%保护,而对照组不能提供任何保护。2组对C78-1攻击均提供100%保护,为研制仔猪副伤寒—猪水肿病二联疫苗及进一步提高免疫效果提供依据。; 关键词猪霍乱沙门氏菌C500crp-/asd-缺失株宿主载体平衡致死系统 2拷贝SLT-ⅡvB 基因表达免疫反应; Keywords S.choleraesuis C500crp-/asd-mutant balanced lethal host-vector system 2 copies SLT-ⅡvB gene expression immune test; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsseK1Δasd宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究	杨亚东丁轲张春杰程相朝贾艳艳何雷	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaΔasdC78-1(pYA3493)宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究	尚珂张俊峰程相朝张春杰李银聚陈桂华颜云飞翟崇凯赵战勤	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究	张俊峰张春杰程相朝尚珂李银聚吴庭才刘一尘颜云飞陈桂华赵战勤	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鼠伤寒沙门菌SL1344株侵袭性蛋白B缺失株asd平衡致死系统的构建及特性的研究	张春杰陈松彪程相朝廖成水李静何雷张明亮郁川余祖华贾艳艳赵战勤	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用	耿士忠陈晓娟潘志明焦新安	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	干扰素及其基因工程	余顺惠	《生物学杂志》 CAS CSCD	2003	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	肠毒素大肠杆菌定居因子CS6抗原基因在痢疾杆菌中的表达	罗刚李淑琴王令春赵莹郑继平段海清张兆山	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp^-/asd^-缺失株中的表达及小鼠免疫试验	徐引弟王治方朱文豪郭成留	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料