目的:研究细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法在孕晚期B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)筛查中的应用价值。方法:选取2021年3月至2023年5月在我院接受产检的孕晚期孕妇154例。以病理活检为金标准,分析GBS筛查结果;对比细...目的:研究细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法在孕晚期B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)筛查中的应用价值。方法:选取2021年3月至2023年5月在我院接受产检的孕晚期孕妇154例。以病理活检为金标准,分析GBS筛查结果;对比细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法单独及联合诊断孕晚期GBS的效能;分析细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法单独及联合筛查与病理筛查结果的一致性。结果:154例孕晚期孕妇中,经病理活检检出39例孕妇GBS为阳性;三者联合诊断GBS的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值以及阴性预测值均高于细菌培养法、免疫层析法与实时荧光定量PCR法单独检测(P<0.05);三者联合检测与病理结果的Kappa值为0.936,均高于细菌培养法、免疫层析法、实时荧光定量PCR法单独检测。结论:在筛查孕晚期孕妇GBS中,实时荧光定量PCR法联合细菌培养法、免疫层析法诊断效能高于单独检测,可通过三者联合检测为早期诊断孕妇是否感染GBS提供依据。展开更多
根据Gen Bank中公布的虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)(EHP)SSU r DNA序列设计1对特异性引物,建立并优化了EHP的SYBR Green I实时荧光定量PCR(q PCR)检测方法。结果显示,该方法在60℃的退火温度时扩增效果最好,产物的熔解曲线...根据Gen Bank中公布的虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)(EHP)SSU r DNA序列设计1对特异性引物,建立并优化了EHP的SYBR Green I实时荧光定量PCR(q PCR)检测方法。结果显示,该方法在60℃的退火温度时扩增效果最好,产物的熔解曲线为1个单峰,构建的方法对8.3×101–8.3×108 copies/μl的EHP SSU r DNA片段的检测响应具有良好的线性关系,扩增产物阈值循环数(Ct)与模板起始量的对数[log(Sq)]的关系为Ct=–3.369 log(Sq)+39.364(R2=0.992),扩增效率为98.1%,检测灵敏度下限为8.3×101 copies/μl,在线性范围内具有良好的组内和组间重复性。对实际样品的检测表明该方法比已报道的套式PCR的检测灵敏度约高4倍。利用本方法对采集自江苏、海南和山东的3批凡纳滨对虾样品的肝胰腺组织DNA(Hp DNA)中的EHP SSU r DNA进行了q PCR检测,结果显示,EHP的载量指数与对虾生长速率呈负相关关系,肝胰腺中EHP载量在103 copies/(ng Hp DNA)时代表了较高的风险水平。本研究建立的q PCR方法具有特异、灵敏、快速、定量的优点,所建立的方法及检测数据可为EHP的防控提供技术参考。展开更多
文摘目的:研究细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法在孕晚期B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)筛查中的应用价值。方法:选取2021年3月至2023年5月在我院接受产检的孕晚期孕妇154例。以病理活检为金标准,分析GBS筛查结果;对比细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法单独及联合诊断孕晚期GBS的效能;分析细菌培养法、免疫层析法及实时荧光定量PCR法单独及联合筛查与病理筛查结果的一致性。结果:154例孕晚期孕妇中,经病理活检检出39例孕妇GBS为阳性;三者联合诊断GBS的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值以及阴性预测值均高于细菌培养法、免疫层析法与实时荧光定量PCR法单独检测(P<0.05);三者联合检测与病理结果的Kappa值为0.936,均高于细菌培养法、免疫层析法、实时荧光定量PCR法单独检测。结论:在筛查孕晚期孕妇GBS中,实时荧光定量PCR法联合细菌培养法、免疫层析法诊断效能高于单独检测,可通过三者联合检测为早期诊断孕妇是否感染GBS提供依据。
文摘根据Gen Bank中公布的虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)(EHP)SSU r DNA序列设计1对特异性引物,建立并优化了EHP的SYBR Green I实时荧光定量PCR(q PCR)检测方法。结果显示,该方法在60℃的退火温度时扩增效果最好,产物的熔解曲线为1个单峰,构建的方法对8.3×101–8.3×108 copies/μl的EHP SSU r DNA片段的检测响应具有良好的线性关系,扩增产物阈值循环数(Ct)与模板起始量的对数[log(Sq)]的关系为Ct=–3.369 log(Sq)+39.364(R2=0.992),扩增效率为98.1%,检测灵敏度下限为8.3×101 copies/μl,在线性范围内具有良好的组内和组间重复性。对实际样品的检测表明该方法比已报道的套式PCR的检测灵敏度约高4倍。利用本方法对采集自江苏、海南和山东的3批凡纳滨对虾样品的肝胰腺组织DNA(Hp DNA)中的EHP SSU r DNA进行了q PCR检测,结果显示,EHP的载量指数与对虾生长速率呈负相关关系,肝胰腺中EHP载量在103 copies/(ng Hp DNA)时代表了较高的风险水平。本研究建立的q PCR方法具有特异、灵敏、快速、定量的优点,所建立的方法及检测数据可为EHP的防控提供技术参考。
