产蛇孢菌素A禾长蠕孢REMI突变体的制备及其筛选 被引量：1

1

作者 张建萍 朱凯 余柳青 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期424-430,共7页

蛇孢菌素A具有除草、抗菌等广泛的生物活性,在农业领域具有重要的应用价值。本研究采用限制酶介导整合法(REMI)将外源质粒pSH75转化产蛇孢菌素A真菌禾长蠕孢菌获得一系列转化子,进一步采用发酵液抑菌法和稗苗生测法筛选弱毒力菌株,最后... 蛇孢菌素A具有除草、抗菌等广泛的生物活性,在农业领域具有重要的应用价值。本研究采用限制酶介导整合法(REMI)将外源质粒pSH75转化产蛇孢菌素A真菌禾长蠕孢菌获得一系列转化子,进一步采用发酵液抑菌法和稗苗生测法筛选弱毒力菌株,最后用HPLC方法探测弱毒力菌株中蛇孢菌素A产量。试验共获得6株弱毒力菌株,其中B014和B016为蛇孢菌素A合成缺失菌株,H002和B018为蛇孢菌素A毒素合成降低的突变株。为下一步蛇孢菌素A毒素合成相关基因的克隆和蛇孢菌素A基因调控奠定基础。 展开更多

关键词 禾长蠕孢菌 弱毒力菌株 蛇孢菌素a毒素缺失突变株 插入诱变

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十全大补丸对环孢菌素A肝毒性的作用

2

作者 张黎明 朱丽青 吴秀华 《中国临床药理学与治疗学杂志》 CSCD 1998年第3期192-194,共3页

目的观察十全大补丸对环孢菌素A(CsA)所致大鼠肝毒性的作用。方法大鼠分为4组 :ⅠCsA组(50mg/kg) ,ⅡCsA +十全大补丸高剂量组(50mg/kg +0.6g/kg) ,ⅢCsA +大补丸低剂量组(50mg/kg+0.3g/kg) ,Ⅳ空白对照组(等量2 %羧甲基纤维素CMC)。灌... 目的观察十全大补丸对环孢菌素A(CsA)所致大鼠肝毒性的作用。方法大鼠分为4组 :ⅠCsA组(50mg/kg) ,ⅡCsA +十全大补丸高剂量组(50mg/kg +0.6g/kg) ,ⅢCsA +大补丸低剂量组(50mg/kg+0.3g/kg) ,Ⅳ空白对照组(等量2 %羧甲基纤维素CMC)。灌胃给药 ,每日1次 ,连续7天后取血 ,测定血清谷丙转氨酶(GPT)、硷性磷酸酶(AKP)及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽s_转移酶(GST)。取肝组织作病理检查。结果用药7天后 ,CsA +十全大补丸高、低剂量组 ,均有明显降低血清GPT、AKP的作用 ,与单用CsA相比 ,有显著性差异。各用药组SOD活力与对照组比都有所下降 ,差异显著 :但合并用药组与单用CsA组比 ,无显著性差异。各用药组GST活力与对照组比也有所下降 ,但无显著性差异 ;合并用药组MDA均高于对照组 ,单用CsA组低于对照组。结论十全大补丸对CsA所致大鼠肝毒性有保肝降酶作用 ,其抗氧化清除自由基作用不明显。 展开更多

关键词 十全大补丸 孢菌素a 肝素性 动物实验 保肝降酶

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星孢菌素产生菌Streptomyces sp.FIM18-327基因组的测序与遗传操作体系的建立

3

作者 方志锴 谢立君 +3 位作者 林鹏辉 林如 周剑 江红 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1004-1012,共9页

目的通过基因组测序明确星孢菌素高产菌株Streptomyces sp.FIM18-327遗传背景,并建立该菌的遗传操作体系。方法通过第二代和第三代DNA测序技术相结合的策略对Streptomyces sp.FIM18-327进行全基因组测序并组装,利用antiSMASH软件预测该... 目的通过基因组测序明确星孢菌素高产菌株Streptomyces sp.FIM18-327遗传背景,并建立该菌的遗传操作体系。方法通过第二代和第三代DNA测序技术相结合的策略对Streptomyces sp.FIM18-327进行全基因组测序并组装,利用antiSMASH软件预测该菌的次级代谢产物生物合成基因簇分布。通过优化接合转移载体、培养基种类及镁离子浓度,建立了Streptomyces sp.FIM18-327的遗传操作体系。结果Streptomyces sp.FIM18-327基因组大小为9.73 Mb,由一条染色体、两个线性质粒及一个环状质粒组成。其中染色体大小为9.48 Mb,GC含量70.12%,包含了8431个蛋白编码基因与34个次级代谢产物生物合成基因簇;以pFIM4123为载体,MS为接合转移培养基,在MS中添加MgCl2至终浓度为20 mmol/L时,接合转移的效率达3.2×10^(-6)。结论Streptomycessp.FIM18-327基因组信息的解析及遗传操作体系的建立,为该菌的进一步开发与应用奠定了基础。 展开更多

关键词 星孢菌素 全基因组测序 代谢途径 接合转移

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冷诱导液液萃取-分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸡蛋中白僵菌素和4种恩镰孢菌素残留 被引量：12

4

作者 刘柏林 倪曼 +3 位作者 单晓梅 谢继安 戴雁羽 张程 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1331-1339,共9页

新型生物毒素白僵菌素(BEA)和恩镰孢菌素(ENNs)是由镰刀菌种产生的有毒代谢产物,主要污染谷物及其制品,会威胁人类健康,因此受到人们越来越多的关注。该工作建立了冷诱导液液萃取-分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法(CI-LLE-DS... 新型生物毒素白僵菌素(BEA)和恩镰孢菌素(ENNs)是由镰刀菌种产生的有毒代谢产物,主要污染谷物及其制品,会威胁人类健康,因此受到人们越来越多的关注。该工作建立了冷诱导液液萃取-分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法(CI-LLE-DSPE-UPLC-MS/MS)同时测定鸡蛋中白僵菌素和4种恩镰孢菌素残留的分析方法。以乙腈-水-乙酸(79∶20∶1,v/v/v)为提取溶剂,采用冷诱导液液萃取与分散固相萃取净化相结合的方法进行样品处理,同时,对影响待测物提取与净化效率的提取溶剂、冷冻萃取温度与时间、净化剂用量等因素和色谱条件进行了优化。样品经20 mL提取液涡旋提取20 min,放入-40℃冰箱静置30 min后,取2 mL上层溶液经70 mg C18粉末净化,离心,上清液于40℃浓缩至近干,残留物用1 mL 80%(v/v)乙腈水溶液溶解,进样分析。以乙腈与5 mmol/L甲酸铵溶液作为流动相进行梯度洗脱,经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,采用ESI^(+)电离,在多反应监测模式下采集,白僵菌素采用稳定同位素内标法定量,4种恩镰孢菌素采用基质匹配曲线外标法定量。结果表明,5种待测物在0.1~50.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))为0.9983~0.9997,该方法的检出限(LOD)为0.05~0.15μg/kg,定量限(LOQ)为0.20~0.50μg/kg。以阴性鸡蛋样品为基质,在低、中、高3个浓度水平(0.5、5.0、25.0μg/kg)下进行加标试验考察方法的准确度与精密度,各待测物的平均回收率为81.1%~106%,相对标准偏差(RSD)为0.27%~9.79%。采用所建立的方法对农村散养鸡蛋与市售鸡蛋进行检测,结果表明,BEA在散养鸡蛋的检出率为30.4%,4种ENNs均未被检出。该方法灵敏度高,稳定性好,回收率高,定量准确,简单易操作,适用于禽蛋食品中白僵菌素与恩镰孢菌素的同时快速测定。 展开更多

关键词 分散固相萃取 超高效液相色谱-串联质谱 冷诱导液-液萃取技术 白僵菌素 恩镰孢菌素 鸡蛋

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海洋链霉菌M518产的新星形孢菌素衍生物的生物活性 被引量：4

5

作者 吴少杰 李富超 +5 位作者 秦松 赵方庆 侯艳华 Serge Fotso Heinz H.Fiebig Hartmurt Laatsch 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期874-879,共6页

从海洋放线菌M518中分离到1个新结构化合物N-甲酰胺基-星形孢菌素（N-carboxamido-staurosporine） （1c）,以及两个同类型已知化合物星形孢菌素（staurosporine）（1a）和N-甲酰基-星形孢菌素（N-formyl-staurosporine）（1b）.为了解... 从海洋放线菌M518中分离到1个新结构化合物N-甲酰胺基-星形孢菌素（N-carboxamido-staurosporine） （1c）,以及两个同类型已知化合物星形孢菌素（staurosporine）（1a）和N-甲酰基-星形孢菌素（N-formyl-staurosporine）（1b）.为了解新化合物的生物活性,对37株人类肿瘤细胞和9种受试微生物细胞株进行了抑制活性筛选,发现化合物1c具有强烈的抗肿瘤活性,对37株肿瘤细胞的平均抑制浓度IC50,IC70和IC90分别为0.016、0.171和2.352μg·mL-1.其活性强于专利化合物1b.通过测定发现,分离到的三种孢菌素类化合物都具有较好的抗微藻活性.菌株M518经16S rRNA系统进化学分析,属于链霉菌属（Streptomyces sp.）. 展开更多

关键词 星形孢菌素 生物活性 海洋链霉菌 16SrRNA

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单端孢菌素对几种作物病原菌的室内毒力及田间防效 被引量：4

6

作者 杨佩文 番华彩 +5 位作者 郭志祥 白亭亭 金桂梅 文孟良 李元广 曾莉 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期202-206,共5页

为明确单端孢菌素对主要作物病原菌的抑菌活性和田间防效,采用孢子萌发抑制测定法、菌丝生长速率法和田间药效常规试验方法,测定了单端孢菌素在不同质量浓度下对作物病原菌的室内毒力及田间药效。结果表明：单端孢菌素对供试16个病原菌... 为明确单端孢菌素对主要作物病原菌的抑菌活性和田间防效,采用孢子萌发抑制测定法、菌丝生长速率法和田间药效常规试验方法,测定了单端孢菌素在不同质量浓度下对作物病原菌的室内毒力及田间药效。结果表明：单端孢菌素对供试16个病原菌的 MIC 为1.9～15.5 mg/L,对辣椒炭疽病菌、番茄早疫病菌、水稻恶苗病菌、水稻稻瘟病菌、番茄灰霉病菌、玉米小斑病菌和马铃薯晚疫病菌等7个病原菌的 EC50分别为5.93、7.90、9.27、10.78、13.34、14.95和16.50 mg/L,500 mg/L 质量浓度对番茄灰霉病、番茄早疫病、辣椒炭疽病、马铃薯晚疫病、玉米小斑病和水稻稻瘟病的防治效果分别为78.98%、81.29%、85.28%、72.42%、78.99%和72.74%。单端孢菌素具有较强的抑菌活性和较广的抑菌谱,对几种主要作物真菌和卵菌病害具有较好的田间防治效果,应用前景广。 展开更多

关键词 单端孢菌素 作物病原真菌 毒力测定 田间药效

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紫外分光光度法和HPLC法测定角毛壳菌CH-1发酵液中卵孢菌素含量的比较研究 被引量：4

7

作者 何海清 杨莉娜 +1 位作者 周金燕 谭红 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期593-598,共6页

目的 比较紫外分光光度法和高效液相色谱法测定角毛壳菌CH-1发酵液卵孢菌素的差异，建立可靠的定量分析发酵液中卵孢菌素含量的方法。方法 建立标准液梯度，紫外分光光度法在302nm处测量吸光度，高效液相色谱法采用梯度洗脱，检测波长... 目的 比较紫外分光光度法和高效液相色谱法测定角毛壳菌CH-1发酵液卵孢菌素的差异，建立可靠的定量分析发酵液中卵孢菌素含量的方法。方法 建立标准液梯度，紫外分光光度法在302nm处测量吸光度，高效液相色谱法采用梯度洗脱，检测波长290nm，测定峰面积。运用2种方法分别测量发酵液中卵孢菌素的含量。结果 紫外分光光度法在10～100μg／mL范围内线性关系良好（R2=O．9988），回收率95．13％，测得发酵液中卵孢菌素含量为838．50μg／mL；高效液相色谱法在100～600μg／mL范围内线性关系良好（R2=0．9967），回收率97．62％，测得含量为788．81μg／mL。结论 紫外分光光度法和高效液相色谱法测得发酵液中卵孢菌素含量差异显著，高效液相色谱法测量结果更准确。 展开更多

关键词 卵孢菌素 紫外分光光度法 高效液相色谱法 比较

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他克林和双他克林抗星形孢菌素致凋亡作用的比较 被引量：2

8

作者 彭芳芳 张百芳 +1 位作者 章江洲 武栋成 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期615-620,共6页

用星形孢菌素 (STS)诱导NG10 8 15细胞和HeLa细胞凋亡 ,观察他克林和双他克林是否具有抗凋亡作用 .相差显微镜和Hoechst 33342染色观察细胞及胞核形态 ;噻唑蓝 (MTT)测定分析细胞损伤状况 ;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯带 ... 用星形孢菌素 (STS)诱导NG10 8 15细胞和HeLa细胞凋亡 ,观察他克林和双他克林是否具有抗凋亡作用 .相差显微镜和Hoechst 33342染色观察细胞及胞核形态 ;噻唑蓝 (MTT)测定分析细胞损伤状况 ;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯带 ;蛋白质印迹分析Bcl 2和Bax的表达水平 .结果表明 ,经 0 1mmol/L他克林预处理后 ,由STS诱导的NG10 8 15细胞凋亡受到明显抑制 .双他克林预处理无保护作用 .蛋白质印迹分析表明他克林可显著抑制Bax的表达 ,同时还可促进Bcl 2的表达 .他克林和双他克林预处理对STS诱导的HeLa细胞损伤无明显的保护作用 .结论为 :a 他克林对STS诱导的神经细胞损伤有显著的保护作用 ,但这种保护作用与其AChE抑制作用似乎没有明显关联 .b 他克林对STS损伤的保护作用有细胞选择性 . 展开更多

关键词 他克林 双他克林 星形孢菌素 AChE抑制剂 细胞凋亡 阿尔茨海默病 神经细胞损伤 抑制作用 抗凋亡

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他克林对星形孢菌素诱导NG108-15细胞凋亡的保护作用 被引量：2

9

作者 彭芳芳 张百芳 +1 位作者 章江洲 武栋成 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期344-347,共4页

目的　用星形孢菌素诱导 NG1 0 8-1 5细胞损伤建立凋亡模型 ,观察乙酰胆碱酯酶 (ACh E)抑制剂他克林是否具有抗凋亡作用。方法　 LDH活性测定判断细胞损伤状况 ,DNA染料 Hoechst3 3 3 42染色观察细胞核形态 ,SDS-PAGE和 Western blot印... 目的　用星形孢菌素诱导 NG1 0 8-1 5细胞损伤建立凋亡模型 ,观察乙酰胆碱酯酶 (ACh E)抑制剂他克林是否具有抗凋亡作用。方法　 LDH活性测定判断细胞损伤状况 ,DNA染料 Hoechst3 3 3 42染色观察细胞核形态 ,SDS-PAGE和 Western blot印迹分析 Bax及 Bcl-2的蛋白表达水平。结果　 NG1 0 8-1 5细胞经 0 .1μmol/ L星形孢菌素处理 2 4h,细胞内大量 LDH释放至培养液中 ,用 0 .1 mmol/ L 他克林预处理 2 h可使 LDH释放量由 45 %减至 3 2 % (P<0 .0 1 )。他克林预处理能延迟和减少星形孢菌素诱导的 Bax表达的上调 ,同时增加了星形孢菌素诱导 1 2～ 2 4h后 Bcl-2的表达水平。结论　他克林预处理对星形孢菌素诱导的凋亡性损伤有显著保护作用 ,可能通过抑制或延迟 Bax表达及促进 展开更多

关键词 NG108-15细胞 他克林 星形孢菌素 乙酰胆碱酯酶抑制剂 阿尔茨海默病 细胞凋亡

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暗双孢菌AGR0073产生的单端孢菌素的分离纯化、结构解析及其抗植物病原真菌活性 被引量：2

10

作者 杨佩文 文孟良 +5 位作者 李元广 番华彩 郭志祥 金桂梅 刘树芳 曾莉 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期142-146,共5页

在开展云南山地香蕉根际和内生真菌分离及其次生代谢产物生物活性筛选过程中,获得一株对香蕉枯萎病菌具有强拮抗作用的真菌(Cordana musae,AGR0073)。分别用乙酸乙酯和石油醚对菌株发酵液进行活性物质的提取分离,并分别通过正相硅胶柱... 在开展云南山地香蕉根际和内生真菌分离及其次生代谢产物生物活性筛选过程中,获得一株对香蕉枯萎病菌具有强拮抗作用的真菌(Cordana musae,AGR0073)。分别用乙酸乙酯和石油醚对菌株发酵液进行活性物质的提取分离,并分别通过正相硅胶柱层析、反相C18硅胶柱层析、凝胶(Sephadex LH-20)柱层析和制备HPLC纯化,从菌株发酵液中分离获得具有抗真菌活性的化合物FM 9-1。通过1H-NMR和13C-NMR波谱分析以及结合相关文献对比,将该化合物鉴定为单端孢菌素(Trichothecin,TCN),这是首次从Cordana musae代谢产物中分离出该化合物。抑菌活性测定表明,化合物FM 9-1具有抗植物病原真菌活性,对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)、香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)、香蕉小窦氏叶斑病菌(Deightoniella torulosa)、香蕉弯孢霉叶斑病菌(Curvularia lunata)、香蕉角斑梨孢病菌(Pyricularia angulata)等5个病原真菌最低抑制浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)分别为1.4、1.1、6.5、2.3和5.2μg/mL。 展开更多

关键词 暗双孢菌(Cordana musae) 单端孢菌素 抗植物病原真菌活性

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蛇孢菌素的生物活性 被引量：3

11

作者 赵杏利 胡镇杰 +1 位作者 宋鹏 侯典云 《湖北农业科学》 2016年第15期3813-3818,共6页

蛇孢菌素是一类来源于真菌的具有多种生物活性的化合物。对蛇孢菌素的发现、来源及特点进行了介绍,并重点对蛇孢菌素的植物毒性、抗菌、抗线虫、尤其是抗癌等生物活性的研究现状进行了综述,探讨了现有研究存在的不足以及今后深入研究的... 蛇孢菌素是一类来源于真菌的具有多种生物活性的化合物。对蛇孢菌素的发现、来源及特点进行了介绍,并重点对蛇孢菌素的植物毒性、抗菌、抗线虫、尤其是抗癌等生物活性的研究现状进行了综述,探讨了现有研究存在的不足以及今后深入研究的方向。 展开更多

关键词 蛇孢菌素 生物活性 植物毒性 抗菌活性 抗线虫活性 抗癌活性

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菌株H41-38中星形孢菌素浸提条件优化 被引量：1

12

作者 蒲小明 林壁润 沈会芳 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期163-164,170,共3页

星形孢菌素存在于菌株H41-38的菌体中,采用二次回归旋转组合设计法对菌体浸提获得星形孢菌素的4个因素(乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度)进行了优化,优化后的浸提参数为:乙醇浓度80%、料液比1∶6、提取时间5 h和提取温度50℃,浸... 星形孢菌素存在于菌株H41-38的菌体中,采用二次回归旋转组合设计法对菌体浸提获得星形孢菌素的4个因素(乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度)进行了优化,优化后的浸提参数为:乙醇浓度80%、料液比1∶6、提取时间5 h和提取温度50℃,浸提效果达到2 879.53μg/g。 展开更多

关键词 星形孢菌素 二次回归旋转组合设计法 浸提条件

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环孢菌素产生菌的诱变选育

13

作者 李兆兰 邓明明 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1989年第3期146-152,共7页

中国弯颈霉Tolypocladium sincnse Li与雪白弯颈霉Tplypocladium niveum(Rostrup)Bisset的孢子悬浮液经γ-射线Co^(60)辐射诱变后,产环孢菌素的得率及抑菌活性均明显提高.用黑曲霉Aspcrgillus niger和弯孢霉Curvularia lunata作为致敏菌... 中国弯颈霉Tolypocladium sincnse Li与雪白弯颈霉Tplypocladium niveum(Rostrup)Bisset的孢子悬浮液经γ-射线Co^(60)辐射诱变后,产环孢菌素的得率及抑菌活性均明显提高.用黑曲霉Aspcrgillus niger和弯孢霉Curvularia lunata作为致敏菌,检测提取物中环孢菌素的抗菌活性,提取物抑制了致敏菌的菌丝生长和孢子形成.环孢菌素产生菌深层发酵培养基是蛋白胨—葡萄糖培养基,发酵周期12天.尔后发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取,减压浓缩,每升发酵液获环孢菌素粗制品35—87mg. 展开更多

关键词 球孢菌素 菌种选育 辐射诱变

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具有杀镰孢菌素合成功能基因菌株的筛选与鉴定 被引量：2

14

作者 于晓溪 吴慧玲 +3 位作者 刘铭 董丹 张殿朋 刘伟成 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期217-222,共6页

在NCBI数据库中搜索已知多黏类芽孢杆菌基因组中分别编码Fusaricidin合成酶3个NRPS功能区段的核苷酸保守序列,利用Primer5.0软件设计3对引物,对供试的95个细菌菌株进行PCR检测,筛选到1株阳性菌株T99,其3对引物扩增产物的测序结果表明,所... 在NCBI数据库中搜索已知多黏类芽孢杆菌基因组中分别编码Fusaricidin合成酶3个NRPS功能区段的核苷酸保守序列,利用Primer5.0软件设计3对引物,对供试的95个细菌菌株进行PCR检测,筛选到1株阳性菌株T99,其3对引物扩增产物的测序结果表明,所得3个功能片段核苷酸序列与多黏类芽孢杆菌SC2和M1的Fusaricidin合成酶基因序列的一致性分别为99%、97%和99%,说明菌株T99基因组中具有Fusaricidin合成相关功能基因。结合形态特征及培养性状、生理生化特性和16SrDNA序列同源性分析的结果,将菌株T99鉴定为多黏类芽孢杆菌。 展开更多

关键词 杀镰孢菌素 合成相关基因 菌株筛选 分类鉴定 多黏类芽孢杆菌

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星型孢菌素(STS)对蚕豆气孔运动的调控效应 被引量：1

15

作者 张广斌 佘小平 +3 位作者 郭林英 孟朝妮 宋喜贵 黄爱霞 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期699-704,共6页

用激光扫描共聚焦显微技术,初步研究广谱性蛋白激酶抑制剂星型孢菌素(STS)对蚕豆气孔运动的调控效应.结果表明:(1)光下STS对气孔开度无影响但暗中显著促进气孔开放,表明蛋白激酶参与光/暗对气孔运动的调控,光下蛋白激酶活性低而暗中高;... 用激光扫描共聚焦显微技术,初步研究广谱性蛋白激酶抑制剂星型孢菌素(STS)对蚕豆气孔运动的调控效应.结果表明:(1)光下STS对气孔开度无影响但暗中显著促进气孔开放,表明蛋白激酶参与光/暗对气孔运动的调控,光下蛋白激酶活性低而暗中高;(2)与H2O2清除剂抗坏血酸(ASA)和NO清除剂羧基-2-苯-4,4,5,5-四甲基咪唑-1-氧-3-氧化物(cPTIO)一样,STS既降低暗处理和光下外源H2O2、硝普钠(SNP)处理保卫细胞H2O2、NO水平,也促进气孔开放,表明暗中蛋白激酶通过抑制H2O2、NO清除机制提高保卫细胞内源H2O2、NO水平并促进气孔关闭. 展开更多

关键词 星型孢菌素 蚕豆 气孔运动

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星形孢菌素产生菌电转化条件的优化及其高产菌株的构建 被引量：1

16

作者 黄浩龙 田勋 +2 位作者 刘佳乐 张梦莹 胡海峰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1024-1030,共7页

目的提高星形孢菌素的产量。方法本研究以星形孢菌素产生菌(Streptomyces sp.ST-07)为出发菌株,采用电转化方法和应用PCR扩增星形孢菌素生物合成的调控基因staR,成功构建含不同启动子(kasO*p和ermE*p)的加强表达staR基因的重组工程菌,... 目的提高星形孢菌素的产量。方法本研究以星形孢菌素产生菌(Streptomyces sp.ST-07)为出发菌株,采用电转化方法和应用PCR扩增星形孢菌素生物合成的调控基因staR,成功构建含不同启动子(kasO*p和ermE*p)的加强表达staR基因的重组工程菌,分别命名为ST-D-5和ST-H-23。结果通过对电转化条件的甘氨酸浓度、电场强度、菌丝体浓度、质粒浓度、孵育时间和孵育温度等关键参数优化,使电转化的效率从4×10^(6)提高至9.6×10^(8)(CFU/μg DNA);工程菌摇瓶发酵结果表明,与星孢菌素原始菌株ST-07相比,采用kasO*p启动子构建的工程菌ST-D-5星形孢菌素的产量提高了17%,最高单位可达923 mg/L。结论本文系统摸索了星形孢菌素产生菌的电转化条件,显著提高了电转化效率,不但为该菌株的高产遗传改造奠定了基础,而且对其他放线菌的遗传操作体系建立提供了有益借鉴。 展开更多

关键词 星形孢菌素 电转化 staR基因 kasO*p 启动子 高产菌

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响应面法优化链霉菌HY6-S36产星孢菌素的发酵条件 被引量：8

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作者 项仁鑫 杨小虎 +3 位作者 方佳双 应灵萍 姜南 张灵坚 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期749-755,共7页

目的优化链霉菌HY6-S36产星孢菌素的发酵条件,以提高星孢菌素的产量。方法在单因素试验的基础上通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、Box-benhnken(BB)响应面法优化发酵条件。结果优化后,最佳培养条件为麦芽糊精69.8g/L,豆粉49.6g/L... 目的优化链霉菌HY6-S36产星孢菌素的发酵条件,以提高星孢菌素的产量。方法在单因素试验的基础上通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、Box-benhnken(BB)响应面法优化发酵条件。结果优化后,最佳培养条件为麦芽糊精69.8g/L,豆粉49.6g/L,烟酸0.5g/L,碳酸钙4.0g/L,转速200r/min,pH7.2,装液量30mL/250mL,接种量5%,温度28℃,发酵时间7d,摇瓶产量为996mg/L。经50L发酵罐放大培养,发酵效价达1063mg/L。结论在此优化条件下,星孢菌素的摇瓶产量提高了177%。 展开更多

关键词 链霉菌 发酵条件 星孢菌素 响应面分析法

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星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩的影响

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作者 保善英 包广洁 +2 位作者 唐玉尧 刘琳 康宏 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期275-279,共5页

目的探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ^6个细胞在不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1)星孢菌素的完全培养基中... 目的探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ^6个细胞在不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1)星孢菌素的完全培养基中分别接种于三维柱状琼脂糖井;每天每井换液,培养1周后观察自组装基体的形态变化;冰冻切片染色显示自组装基体细胞外基质及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的分布;酶联免疫吸附测定(ELISA)和Blyscan试剂盒检测基体细胞外基质含量的变化。结果山羊颞下颌关节盘细胞接种4 h后,星孢菌素组和对照组细胞均在琼脂糖井内自组装,形成一圆盘状基体,之后变成球形。各组自组装基体在1周时天狼星红染色可见基体内大量胶原纤维分布;番红染色显示基体内纤维软骨样细胞明显分泌糖胺多糖(GAGs);Ⅰ型胶原(ColⅠ)在免疫组织化学染色中呈强阳性;α-SMA免疫组织化学染色为弱阳性。星孢菌素组自组装基体内ColⅠ和GAGs较高,其中10 nmol·L^-1组最明显(P<0.01)。结论星孢菌素对自组装基体的收缩有一定干预效果,但不是非常突出;它更有利于细胞外基质的合成。 展开更多

关键词 星孢菌素 自组装基体 颞下颌关节盘

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海洋链霉菌Streptomyces sp. SCSIO1667产星形孢菌素的初步研究

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作者 曾文峰 王菊芳 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第5期70-74,共5页

星形孢菌素(Staurosporine,STS)是蛋白激酶C抑制剂,具有很强的抗肿瘤活性。该研究对来自中国南海的链霉菌Strep-tomyces sp.SCSIO1667发酵产物星形孢菌素进行发酵工艺优化。结果表明,30℃、60h是星形孢菌素最佳收获温度和时间;木薯淀粉... 星形孢菌素(Staurosporine,STS)是蛋白激酶C抑制剂,具有很强的抗肿瘤活性。该研究对来自中国南海的链霉菌Strep-tomyces sp.SCSIO1667发酵产物星形孢菌素进行发酵工艺优化。结果表明,30℃、60h是星形孢菌素最佳收获温度和时间;木薯淀粉和酵母粉是最适碳、氮源;木薯淀粉和海盐是培养基成分的重要影响因子。利用爬坡路径试验和响应面分析法进行优化显示当培养基中木薯淀粉和海盐含量分别为48.64g/L和1.13g/L时STS最大理论值为(50.53±0.52)μg/mL,摇瓶实测值为(50.89±0.24)μg/mL,其发酵水平比优化前提高了2.76倍。 展开更多

关键词 星形孢菌素 发酵优化 部分因子实验 响应面试验

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一株新的星孢菌素产生菌的鉴定及其诱变选育 被引量：1

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作者 方佳双 杨小虎 +4 位作者 项仁鑫 张灵坚 姜南 朱文明 张辉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期557-563,共7页

目的对自主分离得到的星孢菌素产生菌HY1进行分类鉴定和诱变选育。方法通过16S rDNA基因序列同源性比对分析,结合其形态特征、培养特征、生理生化特性对菌株HY1进行分类研究;以HY1为出发菌株,通过紫外-氯化锂(UVLiCl)、常压室温等离子体... 目的对自主分离得到的星孢菌素产生菌HY1进行分类鉴定和诱变选育。方法通过16S rDNA基因序列同源性比对分析,结合其形态特征、培养特征、生理生化特性对菌株HY1进行分类研究;以HY1为出发菌株,通过紫外-氯化锂(UVLiCl)、常压室温等离子体(ARTP)及亚硝基胍(NTG)诱变,结合含色氨酸、甲硫氨酸的抗性平板进行筛选。结果菌株HY1为链霉菌属的菌株,通过多次诱变得到突变高产菌株HY6-S36,且遗传性能稳定,发酵效价达360mg/L,比原始菌株提高了80%。结论获得一株高产稳定的星孢菌素生产菌株,为星孢菌素产业化提供优良的菌种。 展开更多

关键词 链霉菌HY1 分类鉴定 星孢菌素 诱变选育

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