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LT-B转基因烟草植株的建立
被引量：
4
1
作者
刘红莉
雷霆
+6 位作者
张铮
郑瑾
来宝长
孔令洪
王喆之
王一理
司履生
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期425-429,共5页
目的 构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LT B)基因的植物表达载体 ,并建立LT B转基因烟草植株。方法 用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因 ,将其克隆于 pUCmT和 pBI12 1载体 ,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启...
目的 构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LT B)基因的植物表达载体 ,并建立LT B转基因烟草植株。方法 用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因 ,将其克隆于 pUCmT和 pBI12 1载体 ,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启动子控制表达 ;将pBI LTB用电穿孔法导入根瘤农杆菌LBA4 4 0 4 ;采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 ,获得转基因烟草植株 ;用PCR、Southern、Westernblot和ELISA检测转基因植株。结果 经PCR及Southern杂交分析 ,共发现 12株烟草的基因组中有LT B基因整合 ;Westernblot和ELISA分析表明有 9株转基因烟草能有效表达LT B蛋白 ,其表达量为烟草叶片总可溶蛋白的 3.36～ 10 .5 6 μg·g-1TSP。结论 建立的LT B转基因烟草植株可成功表达LT B ,并具有五聚体结构 ,为进一步生产预防婴幼儿大肠杆菌腹泻可食用疫苗及黏膜免疫佐剂奠定了基础。
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关键词
大肠杆菌热不稳定肠毒素b亚单位
转基因烟草
植物疫苗
根瘤农
杆菌
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题名
LT-B转基因烟草植株的建立
被引量：
4
1
作者
刘红莉
雷霆
张铮
郑瑾
来宝长
孔令洪
王喆之
王一理
司履生
机构
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所
陕西师范大学生命科学院
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期425-429,共5页
基金
国家自然科学基金资助 (No .30 0 70 848)
文摘
目的 构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (LT B)基因的植物表达载体 ,并建立LT B转基因烟草植株。方法 用PCR从pMMB6 8扩增LT B编码基因 ,将其克隆于 pUCmT和 pBI12 1载体 ,进而构建植物表达双元载体pBI LTB ,LT B基因由CaMV 35S启动子控制表达 ;将pBI LTB用电穿孔法导入根瘤农杆菌LBA4 4 0 4 ;采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 ,获得转基因烟草植株 ;用PCR、Southern、Westernblot和ELISA检测转基因植株。结果 经PCR及Southern杂交分析 ,共发现 12株烟草的基因组中有LT B基因整合 ;Westernblot和ELISA分析表明有 9株转基因烟草能有效表达LT B蛋白 ,其表达量为烟草叶片总可溶蛋白的 3.36～ 10 .5 6 μg·g-1TSP。结论 建立的LT B转基因烟草植株可成功表达LT B ,并具有五聚体结构 ,为进一步生产预防婴幼儿大肠杆菌腹泻可食用疫苗及黏膜免疫佐剂奠定了基础。
关键词
大肠杆菌热不稳定肠毒素b亚单位
转基因烟草
植物疫苗
根瘤农
杆菌
Keywords
E.Coli heat-la
b
ile enterotoxin
b
su
b
unit
t ransgenic to
b
acco
plant vaccine
Agro
b
acterium tumefaciens
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
R394.33 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
LT-B转基因烟草植株的建立
刘红莉
雷霆
张铮
郑瑾
来宝长
孔令洪
王喆之
王一理
司履生
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
4
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