A549/CDDP多药耐药细胞系的建立 被引量：17

1

作者 陈杰 白春学 +1 位作者 钱桂生 黄桂君 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第2期186-187,共2页

关键词 A549 CDDP 多药耐药细胞系 建立 肺癌 化疗

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低表达MICA/MICB导致NK细胞对人鼻咽癌多药耐药细胞(CNE2/DDP)杀伤活性下降 被引量：8

2

作者 梅家转 周健 +1 位作者 郭坤元 魏红梅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第5期349-352,共4页

目的探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLAⅠ类分子和MICA/MICB的表达情况;LDH释放法测定3例... 目的探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLAⅠ类分子和MICA/MICB的表达情况;LDH释放法测定3例健康者的NK细胞在不同效靶比时对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性;效靶比10∶1时,用抗HLAⅠ类分子单抗(W6/32)和抗MICA/MICB单抗(BAMO-1)分别封闭HLAⅠ类分子和MICA/MICB,观察NK细胞杀伤CNE2、CNE2/DDP细胞活性的变化。结果CNE2/DDP细胞表面HLAⅠ类分子和MICA/MICB的表达均较CNE2细胞明显减少(P<0.01)。NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性在效靶比5∶1时分别是(9.37±2.14)%、(4.37±0·63)%;效靶比10∶1时分别是(27.14±1.82)%、(15.79±2.87)%;效靶比20∶1时分别是(36.40±4.28)%、(26.20±4·18)%;效靶比301时分别是(54.67±2.80)%、(40.29±2.73)%。各效靶比时NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性与HLAⅠ类分子和MICA/MICB相关,NK细胞对CNE2/DDP细胞的杀伤活性明显低于CNE2细胞(P<0.01)。效靶比10∶1时,W6/32明显增强NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(P<0.01),BAMO-1明显抑制NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(P<0.01)。结论HLAⅠ类分子和MICA/MICB在CNE2、CNE2/DDP的表达差异影响着NK细胞的杀伤活性,MICA/MICB在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降。 展开更多

关键词 鼻咽癌细胞 多药耐药细胞株 自然杀伤细胞 MHC Ⅰ类链相关分子A/B HLA Ⅰ类分子

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人小细胞肺癌SH77多药耐药细胞系的建立及其生物学特征分析 被引量：6

3

作者 周向东 钱桂生 刘凌志 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第16期1405-1407,共3页

目的　建立人小细胞肺癌SH77/CDDPMDR细胞株并检测其生物学特性。方法　应用肺癌化疗的一线药物顺铂采用逐步增加剂量的方法诱导人SCLC细胞系SH77,建立MDR细胞系SH77/CDDP ;检测耐药细胞及其亲代细胞对 7种化疗药物的敏感性 ;观察细胞... 目的　建立人小细胞肺癌SH77/CDDPMDR细胞株并检测其生物学特性。方法　应用肺癌化疗的一线药物顺铂采用逐步增加剂量的方法诱导人SCLC细胞系SH77,建立MDR细胞系SH77/CDDP ;检测耐药细胞及其亲代细胞对 7种化疗药物的敏感性 ;观察细胞形态和超微结构 ;测定细胞生长曲线和细胞周期。结果　在国内首次成功建立了SCLCMDR细胞系SH77/CDDP ,药敏结果显示该细胞对 7种化疗药物有不同程度的抗药性 ;耐药细胞较其亲代略增大 ,核浆比例减小 ,线粒体、高尔基体、粗面内质网和游离核糖体增多 ,细胞表面指状突起明显 ;耐药细胞与其亲代细胞增殖速度接近 ;其S期细胞增多 (P <0 .0 5 ) ,提示耐药细胞DNA合成增加。结论　SH77/CDDP是可靠的人SCLCMDR细胞模型 ,SH77/CD 展开更多

关键词 肺肿瘤 顺铂 人 小细胞肺癌 生物学特性 多药耐药细胞系

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赛庚啶对K562/A02多药耐药细胞系细胞增殖的影响

4

作者 祁明芳 汪明春 +2 位作者 魏素芳 许敏华 杨纯正 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 1997年第2期43-45,共3页

赛庚啶对Ｋ５６２／Ａ０２多药耐药细胞系细胞增殖的影响祁明芳１）汪明春魏素芳许敏华杨纯正（暨南大学医学院第一附属医院内科）（中国医学科学院血液学研究所）关键词：赛庚啶；多药耐药细胞系；细胞增殖中图分类号：Ｒ７３３由ｍｄ... 赛庚啶对Ｋ５６２／Ａ０２多药耐药细胞系细胞增殖的影响祁明芳１）汪明春魏素芳许敏华杨纯正（暨南大学医学院第一附属医院内科）（中国医学科学院血液学研究所）关键词：赛庚啶；多药耐药细胞系；细胞增殖中图分类号：Ｒ７３３由ｍｄｒ－１基因偏码膜糖蛋白Ｐ－１７０介... 展开更多

关键词 赛庚啶 多药耐药细胞系 细胞增殖 肿瘤药

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胃癌多药耐药细胞株的建立及其生物学特征

5

《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1994年第S1期131-131,共1页

关键词 胆囊癌 免疫病理 多药耐药细胞株 生物学特征

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逆转录病毒转染法建立耐药性大鼠CRBH-7919细胞系 被引量：7

6

作者 樊爱琳 王执民 +6 位作者 刘国鹏 郭卫平 张洪新 王义清 曹伟 李文献 倪代会 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期555-558,共4页

目的 :建立高效、稳定的大鼠 CRBH- 7919多药耐药细胞系。 方法 :利用逆转录病毒转染法将带有 mdr1c DNA全序列的逆转录病毒载体 p Ha MDR转入到大鼠 CRBH- 7919细胞中 ,MTT法检测细胞系在不同化疗药物作用下的存活率 ;免疫组化检测细胞... 目的 :建立高效、稳定的大鼠 CRBH- 7919多药耐药细胞系。 方法 :利用逆转录病毒转染法将带有 mdr1c DNA全序列的逆转录病毒载体 p Ha MDR转入到大鼠 CRBH- 7919细胞中 ,MTT法检测细胞系在不同化疗药物作用下的存活率 ;免疫组化检测细胞的 P-糖蛋白 (P- GP)表达 ,RT- PCR检测细胞内 mdr1m RNA的表达量 ,PCR检测 mdr1基因转移到细胞内的基因片段。 结果 :转基因的细胞系对阿霉素、丝裂霉素的耐药性分别提高 9和 7.9倍 ,免疫组化见转基因细胞系 P- GP表达增加 ,RT- PCR示细胞内 mdr1m RNA的表达量增加 ,PCR表明转基因细胞内扩增出 m dr1片段。结论 :利用逆转录病毒转染法成功建立了大鼠 CRBH - 7919多药耐药细胞系 ,该细胞系具有耐药强度高。 展开更多

关键词 肿瘤化疗 动物模型 CRBH-7919多药耐药细胞系 大鼠 逆转录病毒转法

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慢病毒介导BC047440基因沉默逆转HepG2/ADM细胞化疗耐药性机制的探讨 被引量：2

7

作者 王峥 郑璐 +3 位作者 黄小兵 杨彤翰 李靖 梁平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期705-709,共5页

目的利用siRNA方法沉默HepG2/ADM细胞系中BC047440基因,观察其受抑制后对细胞多药耐药性的影响及其分子机制。方法建立BC047440蛋白在HepG2/ADM细胞系siRNA干扰模型,采用Western blot检测BC047440蛋白的表达;实验分3组:BC047440-shRNA组... 目的利用siRNA方法沉默HepG2/ADM细胞系中BC047440基因,观察其受抑制后对细胞多药耐药性的影响及其分子机制。方法建立BC047440蛋白在HepG2/ADM细胞系siRNA干扰模型,采用Western blot检测BC047440蛋白的表达;实验分3组:BC047440-shRNA组、control-shRNA组和HepG2/ADM组。CCK-8法分析阿霉素对细胞生长抑制率的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布;Western blot检测BC047440沉默后NF-κB蛋白表达的变化;Real-time PCR检测Survivin、CCNL1基因mRNA水平的变化。结果成功建立BC047440蛋白siRNA干扰模型;NF-κB蛋白表达BC047440-shRNA组约为HepG2/ADM组67.69%,约为control-shRNA组67.39%;细胞毒性实验中24、48 h阿霉素对BC047440-shRNA组细胞毒性作用明显增强;流式细胞仪检测结果显示BC047440-shRNA组细胞凋亡明显增多,细胞周期分布多停留于G1/G0期,S期细胞明显减少。Real-time PCR检测BC047440-shRNA组Survivin基因mRNA表达约为con-trol-shRNA组37%,约为HepG2/ADM组42%;检测BC047440-shRNA组CCNL1基因mRNA表达约为control-shRNA组3.5倍,约为HepG2/ADM组2.4倍。结论沉默BC047440基因可通过NF-κB信号通路及其下游Survivin、CCNL1信号逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性,提示BC047440基因可能是形成肝癌多药耐药的重要分子之一。 展开更多

关键词 BC047440 人多药耐药细胞系HepG2/ADM 核转录因子-ΚB Survivin CCNL1

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裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系的建立及其生物学特性研究 被引量：9

8

作者 陈莉 许小平 +4 位作者 王健民 吕书晴 居小萍 周虹 黄正霞 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期507-511,共5页

目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性。方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K56g-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内... 目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性。方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K56g-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内接种等方法研究其生物学特性。结果:建立1株裸鼠高成瘤性人白血病多药耐药细胞系K562-n／VCR。与K562-n细胞比较,K562-n／VCR细胞对VCR耐药为其297.38倍,对蒽环类、鬼臼类等多种化疗药物具有交叉耐药性,bcr-abl融合基因仍为阳性,裸鼠体内成瘤性不变,但成瘤潜伏期缩短,成瘤体积明显增大。结论:裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系K562-n／VCR具有其独特的生物学特性。 展开更多

关键词 裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系 建立 生物学特性 长春新碱 致癌性试验

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热疗促进HSP70表达对免疫效应细胞杀伤肿瘤的影响 被引量：16

9

作者 石永进 虞积仁 +2 位作者 岑溪南 朱强 任汉云 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期175-178,共4页

目的: 探讨热疗通过促进乳腺癌药物敏感细胞株与多药耐药细胞株表达热休克蛋白 (HSP)70,提高免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。为开展基于热疗的细胞免疫治疗提供实验依据。方法: 采用IFNγ、CD3单抗、IL 1和IL 2等细胞因子诱导并扩增... 目的: 探讨热疗通过促进乳腺癌药物敏感细胞株与多药耐药细胞株表达热休克蛋白 (HSP)70,提高免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。为开展基于热疗的细胞免疫治疗提供实验依据。方法: 采用IFNγ、CD3单抗、IL 1和IL 2等细胞因子诱导并扩增免疫效应细胞。分别给予乳腺癌药物敏感株MCF7和耐受株MCF7 /ADR非致死温度热冲击 42℃ 1h,继续培养 4h, 24h, 48h后收获细胞,用流式细胞术检测靶细胞上HSP70的表达。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定靶细胞增殖活性以及免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。结果: HSP70在两种靶细胞上的表达有差异,加热前MCF7 /ADR细胞HSP70表达明显高于MCF7,加热后 4h,HSP70在MCF7 /ADR表达提高了 6倍,在MCF7表达提高了 22倍,超过了耐药株。药物敏感株MCF7增殖的热抑制率低于耐药株MCF7 /ADR。热冲击前免疫效应细胞对MCF7细胞的杀伤活性低于MCF7 /ADR细胞。热冲击后免疫效应细胞对MCF7的杀伤活性提高了 86. 23%,超过了对MCF7 /ADR的杀伤活性 (提高了 30. 32% )。结论: 热疗明显提高HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的表达,增加了免疫效应细胞对这两种靶细胞的杀伤活性。HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的差异性表达对免疫效应细胞的杀伤活性有影响。 展开更多

关键词 免疫效应细胞 HSP70表达 MCF7/ADR细胞 热疗 杀伤肿瘤 多药耐药细胞株 流式细胞术检测 四甲基偶氮唑蓝 杀伤活性 药物敏感 细胞免疫治疗 细胞因子诱导 细胞增殖活性 MCF7增殖 MCF7细胞 热休克蛋白 靶细胞 CD3单抗 差异性表达

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Bcl-xL和Caspase3在人卵巢癌细胞株凋亡过程中的调节作用 被引量：4

10

作者 于利利 王泽华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期205-208,共4页

目的　探讨 Bcl- x L和 Caspase3基因在顺铂诱导人卵巢癌细胞株凋亡过程中的表达及其在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法　应用流式细胞术 ,RT- PCR技术和原位杂交技术 ,分别对顺铂诱导人卵巢癌敏感细胞株 (COC1)及卵巢癌耐药细胞株 (COC1/ D... 目的　探讨 Bcl- x L和 Caspase3基因在顺铂诱导人卵巢癌细胞株凋亡过程中的表达及其在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法　应用流式细胞术 ,RT- PCR技术和原位杂交技术 ,分别对顺铂诱导人卵巢癌敏感细胞株 (COC1)及卵巢癌耐药细胞株 (COC1/ DDP)的细胞凋亡及其 Bcl- x L和 Caspase3表达进行研究。结果　 1不同顺铂浓度 (3、 6、 9.9μg/m l)作用下 COC1和 COC1/ DDP细胞凋亡率不同 ,COC1/ DDP细胞明显低于 COC1(P<0 .0 5 )。 2 COC1和 COC1/ DDP细胞株中均有 Bcl- x L基因表达 ,但 COC1/ DDP表达明显强于 COC1。在 6μg/ m l顺铂作用下 COC1和 COC1/ DDP细胞株中 Bcl- x L基因表达下调 ,以 COC1下降更明显。3原位杂交结果 ,6μg/ m l顺铂作用后 COC1和 COC1/ DDP细胞 Cas-pase3呈阳性 ,可见到凋亡细胞特征性形态学变化。结论　凋亡抑制基因 Bcl- x L在人卵巢癌多药耐药细胞株 (COC1/DDP)中高表达 ,是导致其细胞凋亡受抑制和对药物敏感性降低的重要原因 ,Caspase3在顺铂诱导凋亡的过程中被激活 。 展开更多

关键词 卵巢癌 细胞凋亡 BCL-XL基因 Caspase3基因 多药耐药细胞株

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非小细胞性肺癌中P-gp表达与CD147、MMPs表达的关系 被引量：2

11

作者 董敏 周仲文 +2 位作者 赵仲华 张秀荣 许祖德 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期379-382,F002,共5页

目的研究肿瘤细胞自然状态下耐药时,肿瘤细胞多药耐药与转移的关系。方法选取112例未经化疗的非小细胞性肺癌手术切除标本,用免疫组织化学染色观察P-gp、CD147、MMP-1、MT1-MMP的蛋白表达,分析各指标之间的关系。结果人肺癌组织中P-gp... 目的研究肿瘤细胞自然状态下耐药时,肿瘤细胞多药耐药与转移的关系。方法选取112例未经化疗的非小细胞性肺癌手术切除标本,用免疫组织化学染色观察P-gp、CD147、MMP-1、MT1-MMP的蛋白表达,分析各指标之间的关系。结果人肺癌组织中P-gp的表达与CD147、MMP-1、MT1-MMP具有明显的一致性,CD147、MMP-1、MT1-MMP在腺癌中表达高于鳞癌,且与淋巴结转移相关。结论非小细胞性肺癌自然状态下耐药时,P-gp与CD147、MMPs等肿瘤浸润、转移相关蛋白的表达之间可能存在着共同的调节机制。CD147对MMPs的调节,可能与多药耐药肿瘤的浸润、转移特性有关。 展开更多

关键词 非小细胞性肺癌 CD147 P-GP表达 MMPS表达 MT1-MMP MMP-1 细胞多药耐药 手术切除标本 免疫组织化学 转移相关蛋白 自然状态 淋巴结转移 肿瘤细胞 染色观察 蛋白表达 肺癌组织 肿瘤浸润 调节机制 转移特性 一致性

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天然紫草萘醌类化合物及其衍生物的抗瘤作用研究 被引量：12

12

作者 谢冰芬 冯公侃 +7 位作者 黄河 朱孝峰 周军民 王一 刘宗潮 吴海强 黄志纾 古练权 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期505-507,共3页

关键词 紫草萘醌类衍生物 人癌细胞 多药耐药细胞 细胞毒作用 抗瘤作用

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