肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌SiHa细胞凋亡的作用 被引量：11

1

作者 张巍 金瑛 +5 位作者 朱文赫 李妍 罗军 芦晓静 陈默然 姜艳霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期543-546,共4页

目的:探讨肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌Si Ha细胞增殖和凋亡的影响及其促凋亡的机制。方法:选取处于对数生长期的Si Ha细胞,将其分为空白对照组和不同剂量(10、20、50、80及100μmol/L)胡桃醌给药组,共6组。采用MTT法观... 目的:探讨肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌Si Ha细胞增殖和凋亡的影响及其促凋亡的机制。方法:选取处于对数生长期的Si Ha细胞,将其分为空白对照组和不同剂量(10、20、50、80及100μmol/L)胡桃醌给药组,共6组。采用MTT法观察胡桃醌对Si Ha细胞的抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50=20.4μmol/L),依据IC50确定胡桃醌的有效浓度;选取与IC50接近的浓度(20μmol/L)通过Hoechst 33258及流式细胞术测定胡桃醌对Si Ha细胞凋亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、8、9以及抑癌基因PTEN的蛋白水平。结果:MTT实验结果显示,与对照组比较,各给药组对细胞活力的抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.05);Hoechst 33258检测表明,20μmol/L胡桃醌处理细胞12 h后可出现明显的细胞核典型凋亡细胞形态,流式细胞术检测结果说明胡桃醌可诱导Si Ha细胞出现早期凋亡;Western blot检测显示与正常对照组相比,20μmol/L胡桃醌处理细胞12 h后,cleaved caspase-3、8、9及PTEN的蛋白水平明显增加。结论:胡桃醌可以抑制Si Ha细胞的活力,并诱导细胞凋亡,其机制主要是通过抑制caspase途径并增加抑癌基因的表达。 展开更多

关键词 胡桃醌 肽基脯氨酰顺反异构酶 细胞凋亡 SI Ha细胞

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脊椎动物Cyclophilin A肽基脯氨酰顺反异构酶活性及遗传变异分析 被引量：3

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作者 任丽倩 刘薇 +2 位作者 李文博 刘文军 孙蕾 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期736-745,共10页

Cyclophilin A(简称CypA)由PPIA(Peptidylprolyl isomerase A)基因编码,是典型的Cyclophilin家族蛋白,具有肽基脯氨酰顺反异构酶活性,在蛋白质的折叠和转运、信号转导、炎症、免疫调节、细胞凋亡及病毒复制等生物学过程中发挥着重要作... Cyclophilin A(简称CypA)由PPIA(Peptidylprolyl isomerase A)基因编码,是典型的Cyclophilin家族蛋白,具有肽基脯氨酰顺反异构酶活性,在蛋白质的折叠和转运、信号转导、炎症、免疫调节、细胞凋亡及病毒复制等生物学过程中发挥着重要作用。本研究重点探讨了不同脊椎动物CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性及其遗传变异。根据Gen Bank数据库PPIA基因的序列信息,克隆了脊椎动物的PPIA基因并构建其原核表达载体,其中鼠耳蝠(Myotis davidi)和绿头鸭(Anas platyrhynchos)的PPIA基因序列为首次报道。利用大肠杆菌表达GST-Cyp A融合蛋白并进行亲和层析,切除GST标签后再进行分子筛层析,获得纯化的CypA蛋白。利用胰糜蛋白酶偶联法测定CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性,发现12种脊椎动物CypA的肽基脯氨酰顺反异构酶活性无显著差异。同时,通过一系列遗传变异和分子进化分析,发现12种脊椎动物CypA的酶活位点、CsA结合位点等重要功能域的氨基酸序列完全一致,而且其结构和在染色体中的基因定位也非常保守。研究结果表明,脊椎动物CypA的关键功能域高度保守,这是CypA维持其酶活及生物学功能的有力保障。 展开更多

关键词 脊椎动物 CYCLOPHILIN A 肽基脯氨酰顺反异构酶 分子进化

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大肠杆菌肽基脯氨酰顺反异构酶slyD基因缺失株的构建及生物学特性研究 被引量：2

3

作者 周薇 刘松艳 +5 位作者 王曼宇 衣菲 田秋丰 陈志宝 刘思国 于申业 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期6-10,共5页

肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIases)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是专一性催化已磷酸化的丝/苏-脯氨酞顺/反异构。为研究大肠杆菌PPIases sly D基因缺失对其生物学特性的影响,本研究利用改进的Red重组方法构建大肠杆菌BL21株的sly D... 肽基脯氨酰顺反异构酶(PPIases)广泛存在于原核生物中,主要生物功能是专一性催化已磷酸化的丝/苏-脯氨酞顺/反异构。为研究大肠杆菌PPIases sly D基因缺失对其生物学特性的影响,本研究利用改进的Red重组方法构建大肠杆菌BL21株的sly D缺失株,命名为BL21Δsly D;并通过突变株的形态学变化、生长特性、生化代谢特性、耐酸性、耐渗透压能力、耐温度缺氧能力对其进行鉴定。结果表明,缺失株生长速率、耐高温缺氧能力与亲本株相比差异不显著,然而突变株的耐酸性与耐渗透压能力则显著低于亲本株(p<0.01),表明大肠杆菌PPIases sly D基因可能影响双组份调控系统的调节作用。本研究构建的大肠杆菌sly D基因缺失株BL21Δsly D为进一步研究大肠杆菌sly D基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌 肽基脯氨酰顺反异构酶 生物学特性 环境压力

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肽基脯氨酰顺反异构酶在子宫内膜癌组织中的表达及与PR蛋白的关系 被引量：1

4

作者 田焱 张怡 +1 位作者 禹晶晶 张瑜 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1403-1406,共4页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶（peptidyl prolyl cis-trans isomerase，Pin1）蛋白在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理特征的关系，及其与病程相关蛋白的（PR）表达的相关性。方法回顾性分析湘雅医院 2010年2月~2012年10月收治50例子... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶（peptidyl prolyl cis-trans isomerase，Pin1）蛋白在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理特征的关系，及其与病程相关蛋白的（PR）表达的相关性。方法回顾性分析湘雅医院 2010年2月~2012年10月收治50例子宫内膜癌临床病理资料，采用免疫组织化学方法对子宫内膜癌组织中pin1及PR蛋白的表达进行检测，结果采用卡方检验及Spearman相关系数法进行统计学分析。结果 pin1蛋白在子宫内膜癌中的阳性表达率为66%（33/50），其表达阳性率随着病理分化程度由高到低依次递减（高分化组93.3%，中分化组 84.6%，低分化组36.4%），浅肌层浸润组pin1阳性表达率（77.4%）显著高于深肌层浸润组（47.4%），淋巴结转移组pin1阳性表达率（28.6%）显著低于淋巴结未转移组（72.1%）。pin1与PR阳性表达呈现正相关（P〈0.05）。结论 pin1蛋白表达增高可能与子宫内膜癌的病理分化程度、肌层浸润深度及淋巴结转移有关，有望与PR一起成为预测子宫内膜癌患者治疗效果的一个重要的指标。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 肽基脯氨酰顺反异构酶 PR

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紫花苜蓿肽基脯氨酰顺反异构酶基因全长cDNA的电子克隆及同源建模 被引量：1

5

作者 王海波 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第8期3925-3927,共3页

[目的]研究对紫花苜蓿肽基脯氨酰顺反异构酶基因全长cDNA进行电子克隆及同源建模的方法。[方法]根据物种间同源基因相对保守的特点,利用NCBI数据库,对公共EST数据库进行同源检索筛选和重叠群装配,获得拼接cDNA序列,经过ORFFinder分析后... [目的]研究对紫花苜蓿肽基脯氨酰顺反异构酶基因全长cDNA进行电子克隆及同源建模的方法。[方法]根据物种间同源基因相对保守的特点,利用NCBI数据库,对公共EST数据库进行同源检索筛选和重叠群装配,获得拼接cDNA序列,经过ORFFinder分析后获得相应蛋白质的全长序列,并利用Swiss-Mode服务器预测各原子坐标,进而利用Swiss-PdbViewer生成三维空间模型。[结果]采用该方法成功获得紫花苜蓿肽基脯氨酰顺反异构酶基因的完整cDNA序列,全长为1880bp,mPPI蛋白质编码68AA,分子量约为7829.9Da,理论等电点pI=8.99,原子组成为C338H547N103O103S4,摩尔消光系数280nm处为4595,不稳定系数为42.16,脂肪系数为83.24,总平均亲水性为-0.456。[结论]根据物种间同源基因序列对跨物种间EST数据库进行同源检索筛选和拼接,是基因克隆的一条有效途径。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI) 电子克隆 聚类分析

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微小隐孢子虫亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因克隆与分析

6

作者 付芹芹 杨光 +6 位作者 王穗湘 孙小会 郭志云 张丽菊 陈川 刘国宁 荆春霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期885-889,共5页

目的克隆微小隐孢子虫(C.parvum)南京株(NJ)亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因,测序并分析C.parvumNJ株与其他隐孢子虫分离株CyP-type PPIase基因序列的差异以及亲缘关系。方法根据GenBank上C.parvumIowa II株CyP-type PPIase基因序列,设... 目的克隆微小隐孢子虫(C.parvum)南京株(NJ)亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因,测序并分析C.parvumNJ株与其他隐孢子虫分离株CyP-type PPIase基因序列的差异以及亲缘关系。方法根据GenBank上C.parvumIowa II株CyP-type PPIase基因序列,设计2对引物,应用巢式PCR扩增目的基因,并将其克隆入pMD18-T载体,对重组子进行双酶切和菌落PCR鉴定并测序,应用生物信息学方法分析C.parvum NJ株CyP-type PPIase基因与其它隐孢子虫株的核苷酸和氨基酸序列差异。结果巢式PCR扩增获得特异的目的基因,双酶切和菌落PCR鉴定获得正确的重组子,测序表明,扩增基因组DNA序列为746bp,含有目的基因ORF全长570bp,编码190个氨基酸。序列分析表明,我国C.parvum NJ株与国外分离的Iowa II株CyP-type PPIase基因的氨基酸序列具有99%的同源性。进化树分析表明,C.parvumNJ株与Iowa II株CyP-type PPIase基因之间的亲缘关系最近,与脑膜炎双球菌的亲缘关系最远。结论成功克隆C.parvumCyP-type PPIase基因,C.parvumCyP-type PPIase基因在氨基酸水平高度保守。 展开更多

关键词 微小隐孢子虫 亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因 克隆

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肽基脯氨酰顺反异构酶1对喉癌细胞系Hep-2细胞生物学行为的影响 被引量：2

7

作者 王辉 李章富 +2 位作者 温行 刘剑利 李福才 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期681-689,共9页

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响。方法培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组。Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pc... 目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响。方法培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组。Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pcDNA3.1-Pin1后加核转录因子(NF-κB/p65)抑制剂(BAY11-7082)组(Pin1+7082组)。Pin1干扰分为转染阴性对照组(NC组)、转染siRNA组(Si-Pin1组)、转染siRNA后加NF-κB/p65激活剂(IL-1β)组(Si-Pin1+IL-1β组)。Western blotting检测Pin1、CDK2及NF-κB/p65蛋白表达,实时PCR检测Pin1及CDK2基因表达,免疫荧光实验检测细胞中心体扩增及NF-κB/p65核转位,流式细胞仪检测Hep-2细胞周期、凋亡、克隆形成,CCK-8实验检测Hep-2细胞增殖能力,Transwell及划痕实验检测Hep-2细胞的迁移能力。结果Pin1过表达促进中心体复制异常、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S转化,NF-κB/p65核转位以及CDK2的表达;NF-κB/p65抑制剂能够减弱这些效应。下调Pin1表达能够抑制中心体异常复制、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S的转化,NF-κB/p65入核以及CDK2的表达;NF-κB/p65激活剂能够逆转这些作用。结论Pin1可能经NF-κB通路上调CDK2的表达来影响Hep-2细胞的生物学行为。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1 喉癌细胞系 生物学行为

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miR-200c调控肽基脯氨酰顺反异构酶对喉癌Hep-2细胞生物学行为的影响 被引量：4

8

作者 温行 李章富 +3 位作者 王辉 孙绍华 郭星 李福才 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期17-22,28,共7页

目的探究miR-200c对喉癌Hep-2细胞生物学行为的影响以及miR-200c是否通过肽基脯氨酰顺反异构酶(PIN1)在喉癌中发挥其生物学功能。方法实时PCR检测喉癌组织中miR-200c的表达水平;miR-200c相关小RNAs瞬时转染喉癌Hep-2细胞,Transwell实验... 目的探究miR-200c对喉癌Hep-2细胞生物学行为的影响以及miR-200c是否通过肽基脯氨酰顺反异构酶(PIN1)在喉癌中发挥其生物学功能。方法实时PCR检测喉癌组织中miR-200c的表达水平;miR-200c相关小RNAs瞬时转染喉癌Hep-2细胞,Transwell实验检测细胞的迁移能力,免疫荧光实验检测细胞中心体的异常扩增;双荧光素酶报告基因系统检测miR-200c与PIN1的结合;Western blotting检测PIN1蛋白的表达水平。结果 miR-200c在喉癌组织中的表达水平显著增高;Transwell结果显示,miR-200c能够抑制Hep-2细胞的迁移,免疫荧光实验显示,miR-200c能够减弱细胞中心体的异常扩增;双荧光素酶报告基因结果证实,PIN1是miR-200c的靶基因之一;Western blotting结果显示,miR-200c可在翻译水平抑制PIN1的表达;miR-200c能够通过调控PIN1PIN1抑制喉癌细胞的迁移能力和减弱细胞中心体的异常扩增。结论 miR-200c通过调控PIN1抑制喉癌细胞的迁移能力,并减弱中心体异常扩增。 展开更多

关键词 喉癌 MIR-200C 肽基脯氨酰顺反异构酶 迁移 中心体

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脯氨酰顺－反异构酶的纯化及对重组蛋白质折叠反应的催化性能 被引量：2

9

作者 徐明波 孟文华 马贤凯 《生物化学与生物物理进展》 CSCD 北大核心 1994年第3期247-251,共5页

脯氨酰异构是蛋白质折叠反应的限速步骤之一，体内被脯氨酰顺－反异构酶（ＰＰＩ）所催化．为了研究ＰＰＩ在重组蛋白体外折叠复性中的作用，我们自猪肾脏中纯化了ＰＰＩ，并对重组蛋白的酶促折叠过程进行了探讨．结果表明，ＰＰＩ催化... 脯氨酰异构是蛋白质折叠反应的限速步骤之一，体内被脯氨酰顺－反异构酶（ＰＰＩ）所催化．为了研究ＰＰＩ在重组蛋白体外折叠复性中的作用，我们自猪肾脏中纯化了ＰＰＩ，并对重组蛋白的酶促折叠过程进行了探讨．结果表明，ＰＰＩ催化的重组蛋白的折叠反应主要是提高了它们的折叠速率，而不增加正确折叠率和比活性，ＰＰＩ在很低的浓度下即有很高的催化活性． 展开更多

关键词 重组蛋白 折叠 脯氨酰 顺反异构酶

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人亲环素18抑制肌酸激酶的去折叠 被引量：1

10

作者 刘照蓬 李森 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期653-658,共6页

新生肽链折叠过程中容易出现错误折叠与聚沉,从而导致折叠病等病理现象.分子伴侣具有辅助其他蛋白质正确折叠,保护蛋白质分子结构的功能.本文选用人肌肌酸激酶为靶蛋白,研究了肽基脯氨酰顺反异构酶人亲环素18(human cyclophilin 18,hCyp... 新生肽链折叠过程中容易出现错误折叠与聚沉,从而导致折叠病等病理现象.分子伴侣具有辅助其他蛋白质正确折叠,保护蛋白质分子结构的功能.本文选用人肌肌酸激酶为靶蛋白,研究了肽基脯氨酰顺反异构酶人亲环素18(human cyclophilin 18,hCyp18)对人肌肌酸激酶去折叠的作用,发现hCyp18能够抑制人肌肌酸激酶在热变性与化学变性过程中的失活与构象变化,并抑制人肌肌酸激酶在化学变性过程中的聚沉,因此推断hCyp18具有针对人肌肌酸激酶的分子伴侣功能.本文同时研究了hCyp18与人肌肌酸激酶的结合作用,对hCyp18的作用机制进行了初步探讨. 展开更多

关键词 人亲环素18 肽基脯氨酰顺反异构酶 肌酸激酶 分子伴侣 蛋白质去折叠

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小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析 被引量：1

11

作者 廖栩 何明良 +4 位作者 张素艳 马海燕 王旭辉 罗秋香 管清杰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期722-729,共8页

在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsC... 在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsCyp1A原核蛋白表达载体,经IPTG诱导它的E.coli M15菌株表达融合蛋白,Nitra-柱纯化后获得纯化的30 kDa左右的His-CsCyp1A融合蛋白质,Western杂交检测到His CsCyp1A蛋白的杂交信号。酶活性分析显示,HisCsCyp1A融合蛋白中生色基团的产生速度明显快于对照,表明CsCyp1A蛋白可以催化底物N-succinyl-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide中Xaa-Pro肽键的顺反折叠,说明纯化的CsCyp1A蛋白具有PPIase活性。典型的亲环蛋白家族成员具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性,参与折叠和转运、信号转导、免疫调节、细胞凋亡等生物学过程。真空渗入法侵染转化的拟南芥在35S启动子驱动下超表达CsCyp1A基因,耐盐性研究表明它提高了过表达株系对NaCl胁迫的耐性,揭示小球藻CsCyp1A基因的抗盐性功能,它将成为抗逆育种的基因资源。本研究也为探索小球藻亲环蛋白A的抗盐碱胁迫生物学作用和分子育种奠定了基础。 展开更多

关键词 噬碳酸盐小球藻 盐碱地 亲环蛋白A 肽脯氨酰顺反异构酶 原核表达蛋白

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木薯MeHsfB3b转录因子与MeFKBP20蛋白互作关系验证

12

作者 王超群 李琳琳 +3 位作者 陈银华 张肖飞 姚远 耿梦婷 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期450-458,共9页

热激转录因子MeHsfB3b是调控木薯抗细菌性枯萎病的重要节点,前期通过酵母双杂交技术获得MeHsfB3b的候选互作蛋白MeFKBP20,该蛋白属于FKBP型肽脯氨酰顺反异构酶基因家族。本研究克隆获得MeFKBP20基因全长为561 bp,编码186个氨基酸,蛋白... 热激转录因子MeHsfB3b是调控木薯抗细菌性枯萎病的重要节点,前期通过酵母双杂交技术获得MeHsfB3b的候选互作蛋白MeFKBP20,该蛋白属于FKBP型肽脯氨酰顺反异构酶基因家族。本研究克隆获得MeFKBP20基因全长为561 bp,编码186个氨基酸,蛋白质分子质量为19.99 kDa,具有FKPB_C结构域。表达模式分析发现:MeFKBP20基因在木薯成熟叶片及根部高表达,在幼叶和叶柄的表达量较低;并能够迅速响应病原菌XpmCHN11诱导,持续保持较高的表达丰度,推测其参与了木薯响应病原菌侵染的过程。利用酵母双杂交点对点、双分子荧光互补实验证明MeHsfB3b蛋白通过在201~241 aa区域与MeFKBP20蛋白作用。本研究结果有助于进一步解析MeHsfB3b基因调控木薯对细菌性枯萎病的抗病机理。 展开更多

关键词 热激转录因子 FKBP型肽脯氨酰顺反异构酶 酵母双杂交 双分子荧光互补

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化浊润燥降气方调控增殖和分化相关因子抑制食管癌前病变的研究

13

作者 李秀娟 范焕芳 +4 位作者 韩长辉 王骁 范向荣 赵行 武洪杨 《世界中医药》 北大核心 2024年第20期3098-3102,共5页

目的:观察化浊润燥降气方对小鼠食管癌前病变组织增殖和分化相关因子肽基脯氨酰顺反异构酶(Pin1)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白及基因表达的影响,明确化浊润燥降气方的作用机制。方法:将130只小鼠分为正常对照组、病变模型组、西... 目的:观察化浊润燥降气方对小鼠食管癌前病变组织增殖和分化相关因子肽基脯氨酰顺反异构酶(Pin1)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白及基因表达的影响,明确化浊润燥降气方的作用机制。方法:将130只小鼠分为正常对照组、病变模型组、西药观察组、中药预防组、中药观察组,采用4-硝基喹啉-氧化物(4-NQO)制备小鼠食管癌前病变模型,采用免疫组织化学法、反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测中药化浊润燥降气方对食管组织中Pin1、mTOR蛋白及基因表达的影响。结果:14周末食管癌前病变模型成功,病变模型组小鼠Pin1、mTOR蛋白及基因表达水平与正常对照组比较明显升高(P<0.05);西药观察组、中药预防组、中药观察组分别与病变模型组比较,表达明显降低(均P<0.05);中药预防组与中药观察组比较,其蛋白及基因表达有降低趋势。结论:4-NQO是制备小鼠食管癌前病变模型的有效药物。化浊润燥降气方能通过抑制食管癌前病变小鼠Pin1、mTOR蛋白及基因的表达,抑制食管癌前病变增殖、分化,中药早期预防有一定优势。 展开更多

关键词 食管癌前病变 化浊润燥降气方 4-硝基喹啉-氧化物 增殖 分化 肽基脯氨酰顺反异构酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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亲环素A抑制剂研究进展 被引量：8

14

作者 李剑 陈玲 +2 位作者 柳红 沈旭 蒋华良 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期195-200,共6页

亲环素A是亲环素家族重要成员,是重要的免疫抑制药物环孢素A的体内结合蛋白,除了具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲环素A在一系列生物途径中发挥作用,如蛋白折叠、装配、转运、神经生长调节和HIV病毒复制。总结了天然产物抑制剂、肽类抑制... 亲环素A是亲环素家族重要成员,是重要的免疫抑制药物环孢素A的体内结合蛋白,除了具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲环素A在一系列生物途径中发挥作用,如蛋白折叠、装配、转运、神经生长调节和HIV病毒复制。总结了天然产物抑制剂、肽类抑制剂和有机合成分子等亲环素A抑制剂的发现和发展历程,对亲环素A抑制剂的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 亲环素A 肽脯氨酰顺反异构酶 抑制剂

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Pin1在宫颈癌中过表达及其与Ki67关系的研究 被引量：7

15

作者 李红雨 石小燕 +4 位作者 徐茜 邓东锐 王世宣 卢运萍 马丁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期181-185,共5页

目的:探讨宫颈癌中肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1表达、与Ki67的相关性及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术检测宫颈癌组织中Pin1mRNA和蛋白表达水平及其与Ki67蛋白表达的相关性。结果:1)宫颈癌组织中Pin1mRNA表达明显高于正常宫... 目的:探讨宫颈癌中肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1表达、与Ki67的相关性及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术检测宫颈癌组织中Pin1mRNA和蛋白表达水平及其与Ki67蛋白表达的相关性。结果:1)宫颈癌组织中Pin1mRNA表达明显高于正常宫颈组织(P<0.05);2)从正常宫颈到CIN再到浸润癌Pin1蛋白表达逐渐增强(P<0.05);3)Pin1蛋白过表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移无明显相关(P>0.05);但宫颈腺癌Pin1表达明显高于宫颈鳞癌(P<0.05);4)Pin1过表达与Ki67表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:1)Pin1过表达与宫颈癌细胞增殖有关,参与宫颈癌发生发展;2)Pin1过表达可作为宫颈癌诊断的辅助指标。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 子宫颈癌 KI67

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益智健脑颗粒对快速老化小鼠SAMP8海马Pin1和HMGB1 mRNA表达的影响 被引量：7

16

作者 王慧玲 董克礼 +2 位作者 李广诚 彭贤文 朱宏 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期63-66,共4页

目的:研究益智健脑颗粒对快速老化小鼠SAMP8海马肽基脯氨酰顺反异构酶(peptidylprolyl-cis-trans isomerase A,Pin1)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)mRNA表达的影响。方法:6月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为中药治疗... 目的:研究益智健脑颗粒对快速老化小鼠SAMP8海马肽基脯氨酰顺反异构酶(peptidylprolyl-cis-trans isomerase A,Pin1)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)mRNA表达的影响。方法:6月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为中药治疗组和模型组,6月龄正常老化小鼠SAMR1为正常对照组。中药组以益智健脑颗粒浓缩液灌胃;正常对照组和模型组以双蒸水灌胃。8周后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测海马组织中Pin1和HMGB1 mRNA的表达。结果:与模型组比较,中药治疗组Pin1 mRNA相对表达量上调(P<0.05);HMGB1mRNA相对表达量下调(P<0.05)。结论:益智健脑颗粒可能通过上调Pin1 mRNA表达,下调HMGB1 mRNA表达,来达到防治阿尔茨海默病的作用。 展开更多

关键词 益智健脑颗粒/中药 阿尔茨海默病 肽基脯氨酰顺反异构酶 高迁移率族蛋白B1

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慢病毒介导的shRNA对A549细胞Pin1表达的干扰作用 被引量：3

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作者 赵帅 董文斌 +5 位作者 张婵 李清平 康兰 雷小平 郭琳 翟雪松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期245-249,共5页

目的构建Pin shRNA慢病毒载体,建立稳定抑制肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)表达的A549细胞系。方法根据查阅文献获得Pin1shRNA干扰靶点序列并插入pLenR-GPH载体,构建pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体,随后转入人胚肾HEK293T细胞中,收集其上... 目的构建Pin shRNA慢病毒载体,建立稳定抑制肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)表达的A549细胞系。方法根据查阅文献获得Pin1shRNA干扰靶点序列并插入pLenR-GPH载体,构建pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体,随后转入人胚肾HEK293T细胞中,收集其上清进行病毒滴度测定,再行慢病毒的包装,将获得的慢病毒毒液感染A549细胞。通过实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测Pin1在不同组的表达抑制情况。结果经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体质粒,包装并得到高滴度的病毒颗粒。通过qRT-PCR和Western blot法检测显示,与对照组相比,pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体感染的A549细胞中Pin1的表达在mRNA和蛋白水平均有所下降。结论慢病毒介导的shRNA能够有效下调A549细胞中Pin 1的表达。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1) 慢病毒载体 A549细胞 基因表达

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食管鳞状细胞癌组织中Pin1和mTOR蛋白的表达 被引量：3

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作者 谷博 吉庆春 +2 位作者 赵富周 陈占军 葛晓晴 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第2期150-152,共3页

目的:了解食管鳞状细胞癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶(Pin1)与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达情况。方法:采用免疫组化SP法检测食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常食管黏膜组织中Pin1和mTOR的表达,分析食管鳞状细胞癌组织中二者的表达... 目的:了解食管鳞状细胞癌组织中肽基脯氨酰顺反异构酶(Pin1)与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达情况。方法:采用免疫组化SP法检测食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常食管黏膜组织中Pin1和mTOR的表达,分析食管鳞状细胞癌组织中二者的表达与临床病理特征的关系以及二者的关联性。结果:食管鳞状细胞癌组织中Pin1蛋白、mTOR蛋白的阳性表达率(60.0%、62.5%)均高于癌旁正常食管黏膜组织(32.5%、27.5%),差异有统计学意义(χ2Pin1=4.762,P=0.027;χ2mTOR=6.036,P=0.014)。Pin1蛋白阳性表达与淋巴结转移有关(P<0.05),与分化程度、年龄、性别及TNM分期等病理学参数无关;mTOR与其他病理参数无关。食管鳞状细胞癌组织中Pin1与mTOR的蛋白表达呈正关联(rP=0.389,P=0.008)。结论:Pin1和mTOR在食管鳞状细胞癌中的表达明显增高,Pin1可能与mTOR相互作用调节细胞周期,从而在食管鳞状细胞癌的发生过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 食管鳞状细胞癌

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Pin1:肿瘤形成的催化分子和潜在的治疗靶点 被引量：1

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作者 曹启军 陶振 陈元 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第2期201-204,共4页

肽基脯氨酰异构酶1(peptidyl-prolyl isomerase1,Pin1)能特异性地催化磷酸化的丝/苏-脯氨酸基序发生异构,改变底物蛋白的构象,调节底物蛋白的功能。Pin1含有两个结构功能域:一个是N端的色氨酸-色氨酸中心区WW,另一个是C端的肽基脯氨酰... 肽基脯氨酰异构酶1(peptidyl-prolyl isomerase1,Pin1)能特异性地催化磷酸化的丝/苏-脯氨酸基序发生异构,改变底物蛋白的构象,调节底物蛋白的功能。Pin1含有两个结构功能域:一个是N端的色氨酸-色氨酸中心区WW,另一个是C端的肽基脯氨酰异构酶PPlase活性区。Pin1在非肿瘤组织中呈低表达或无表达,但在多种肿瘤组织中呈过表达,并受到以E2F(腺病毒E2启动子相关细胞转录因子)为主的转录水平的调节。Pin1作用于多种底物如p53、c-Jun、cyclinD1等,通过催化异构改变底物的结构和功能,促进细胞增殖和肿瘤形成,阻断它的表达可以抑制肿瘤细胞的增殖,促进调亡。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶 PIN1 肿瘤

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Pin1基因真核表达载体的构建及在宫颈癌HeLa细胞中的表达

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作者 李红雨 朱涛 +6 位作者 周金华 徐茜 胡春霞 邓东锐 王世宣 卢运萍 马丁 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期633-636,共4页

目的构建一种含人肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在宫颈癌HeLa细胞中的表达。方法从人宫颈癌HeLa细胞中,以RT-PCR方法扩增出人Pin1基因全长cDNA序列(CDS),插入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,脂... 目的构建一种含人肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在宫颈癌HeLa细胞中的表达。方法从人宫颈癌HeLa细胞中,以RT-PCR方法扩增出人Pin1基因全长cDNA序列(CDS),插入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,脂质体法转染HeLa细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达,免疫印迹法检测GFP-Pin1蛋白的表达。结果RT-PCR扩增出人Pin1基因;构建pEGFP-C1-Pin1重组质粒,体外成功转染入宫颈癌HeLa细胞,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,免疫印迹法证实存在GFP-Pin1蛋白高表达;经G418筛选获得单细胞克隆。结论重组质粒pEGFP-Pin1体外转染HeLa细胞后,目的基因能够在细胞内有效表达,检测方法简便可靠,为利用转染该目的基因的细胞进行下一步研究提供了实验基础。 展开更多

关键词 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 质粒构建 基因转染

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