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Smurf1通过抑制LKB1的多聚泛素化而调控其蛋白稳定性被引量：1: 1; 作者袁志马林强 +2 位作者程志梁森黄慧哲《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1485-1491,共7页; 目的:为了探寻肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的上游调控分子,并研究其对LKB1的影响。方法:首先,利用UbiBrowser数据库预测LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Smurf1基因。然后,构建Smurf1和LKB1相关... 展开更多; 关键词 Smurf1 LKB1 多聚泛素化稳定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

HEK 293T细胞中TRAF6多聚泛素化修饰KLF5的方式及其修饰位点的鉴定被引量：1: 2; 作者李玉应帅 +6 位作者葛文阮玉婷吴宁霞王伟民张婧邱文王迎伟《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第4期445-451,共7页; 目的:研究人胚肾293T(HEK 293T,简称293T)细胞中外源性肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor⁃associated factor 6,TRAF6)与Krüppel样因子5(Krüppel⁃like factor 5,KLF5)的结合及TRAF6多聚泛素化修饰KLF... 展开更多; 关键词肿瘤坏死因子受体相关因子6 Krüppel样因子5 K63连接的多聚泛素化修饰 HEK 293T细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

泛素化介导的非蛋白质降解功能被引量：14: 3; 作者陈季武郑丽娜 +1 位作者王帮正李晓涛《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第7期613-621,共9页; 泛素因标记被26 S蛋白酶体降解的蛋白质而著名.然而近几年发现,泛素作用远不止此,不仅具有参与蛋白质降解这一重要"传统作用",还起着比先前想象更多变的、更精美的细胞调控作用,是非常重要的细胞过程的多层面调节因子,具有许... 展开更多; 关键词泛素非蛋白质降解多聚泛素化单泛素化多泛素化; 在线阅读下载PDF 职称材料

泛素链水解酶的选择性和产生机制被引量：2: 4; 作者郑清芸王涛 +2 位作者潘漫李宜明田长麟《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第9期864-879,共16页; 底物蛋白的多聚泛素链修饰参与调节多种生命运动过程(包括蛋白质降解、自噬、DNA损伤修复、细胞周期、信号转导、基因表达、转录调节、炎症免疫等).去泛素化酶通过水解底物蛋白的单泛素和泛素链修饰,对泛素相关过程进行反向调节.人类基... 展开更多; 关键词去泛素化酶泛素链水解酶多聚泛素化修饰蛋白质泛素化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Smurf1通过抑制LKB1的多聚泛素化而调控其蛋白稳定性被引量：1: 1; 作者袁志马林强程志梁森黄慧哲; 机构重庆医科大学基础医学院发育生物学研究室重庆医科大学附属第一医院内分泌科重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1485-1491,共7页; 基金国家自然科学基金面上资助项目（编号：31171388）; 文摘目的:为了探寻肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的上游调控分子,并研究其对LKB1的影响。方法:首先,利用UbiBrowser数据库预测LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Smurf1基因。然后,构建Smurf1和LKB1相关过表达质粒,并转染HEK293T细胞,通过Western blot检测LKB1蛋白质表达的变化。最后,运用荧光定量PCR(qPCR)、免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)探索Smurf1调控LKB1可能的分子机制。结果:①成功构建LKB1和Smurf1相关过表达质粒。②在HEK293T细胞中过表达0、0.5、1、2μg的野生型Smurf1时其对应的LKB1蛋白相对表达量分别为0.0262±0.0007、0.0727±0.0003、0.1301±0.0013、0.4315±0.0010。经单因素方差分析,其结果为F=79636.433,P=0.000。与0μg对照组相比,进一步采用LSD-t法分析,0.5、1、2μg各组P值分别为0.000、0.000和0.000。③在HEK293T细胞中过表达0、0.5、1、2μg的突变型Smurf1时其对应的LKB1的蛋白相对表达量分别为0.0180±0.0001、0.0530±0.0004、0.1250±0.0010、0.2004±0.0017。经单因素方差分析,其结果为F=12887.993,P=0.000。与0μg对照组相比,进一步采用LSD-t法分析,0.5、1、2μg各组P值分别为0.000、0.000和0.000。④以GAPDH为内参,未过表达Smurf1组和过表达Smurf1组中,LKB1的相对mRNA表达水平分别为1.0851±0.4125、2.3982±1.7669。经独立样本t检验统计分析,P=0.257。⑤以β-actin为内参,未经Smurf1处理组、野生型Smurf1(WT)处理组、突变型Smurf1(C699A)处理组中LKB1的相对泛素化水平分别为1.8238±0.0278、0.0881±0.0051、0.2127±0.0062。经单因素方差分析,其结果为F=6721.953,P=0.000。与未经Smurf1处理组相比,进一步采用LSD-t法分析,野生型Smurf1组和突变型Smurf1组各组P值分别为0.000和0.000。结论:这些结果表明Smurf1通过降低LKB1的多聚泛素化从而参与其蛋白稳定性的调节。; 关键词 Smurf1 LKB1 多聚泛素化稳定性; Keywords Smurf1 LKB1 polyubiquitination stability; 分类号 R3 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HEK 293T细胞中TRAF6多聚泛素化修饰KLF5的方式及其修饰位点的鉴定被引量：1: 2; 作者李玉应帅葛文阮玉婷吴宁霞王伟民张婧邱文王迎伟; 机构南京医科大学基础医学院免疫学系; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第4期445-451,共7页; 基金国家自然科学基金(81971468,82171740)。; 文摘目的:研究人胚肾293T(HEK 293T,简称293T)细胞中外源性肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor⁃associated factor 6,TRAF6)与Krüppel样因子5(Krüppel⁃like factor 5,KLF5)的结合及TRAF6多聚泛素化修饰KLF5的方式和修饰的位点。方法:将构建的Flag⁃TRAF6、HA⁃KLF5、泛素过表达质粒、shTRAF6小干扰质粒和TRAF6 C70A位点突变质粒行不同组合转染293T细胞48 h。用免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)和免疫印迹(immunoblotting,IB)实验检查TRAF6与KLF5的结合以及KLF5 K63或K48多聚泛素化水平。此外,构建KLF5全部赖氨酸突变的质粒,分别与TRAF6质粒共转染293T细胞。用前述IP/IB检测KLF5 K63连接的多聚泛素化修饰,并确定KLF5 K63泛素化修饰的位点。结果:293T细胞中TRAF6能与KLF5结合;TRAF6过表达和基因沉默或TRA6酶活性缺失能相应上调或下调KLF5 K63的多聚泛素化;KLF5被TRAF6 K63多聚泛素化修饰的位点是其第99位和第100位的赖氨酸。结论:TRAF6能与KLF5相互作用,并对KLF5⁃K99和K100进行K63多聚泛素化修饰。; 关键词肿瘤坏死因子受体相关因子6 Krüppel样因子5 K63连接的多聚泛素化修饰 HEK 293T细胞; Keywords tumor necrosis factor receptor⁃associated factor 6 Krüppel⁃like factors 5 K63⁃linked polyubiquitination HEK 293T cell; 分类号 R393 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名泛素化介导的非蛋白质降解功能被引量：14: 3; 作者陈季武郑丽娜王帮正李晓涛; 机构华东师范大学生命科学学院; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第7期613-621,共9页; 基金国家自然科学基金资助项目(30870503 31071875 81071657)~~; 文摘泛素因标记被26 S蛋白酶体降解的蛋白质而著名.然而近几年发现,泛素作用远不止此,不仅具有参与蛋白质降解这一重要"传统作用",还起着比先前想象更多变的、更精美的细胞调控作用,是非常重要的细胞过程的多层面调节因子,具有许多重要的非蛋白质降解功能,包括DNA损伤修复、DNA复制、信号传导、转录调节、膜运输、胞吞、蛋白激酶活化、染色质重塑和病毒芽殖.这些功能涉及多聚泛素化和单泛素化及多泛素化.因此,泛素化异常可能涉及疾病的发生和发展.对这些功能的了解可以拓展人们对泛素的认识,有助于对多种细胞过程的深入理解,也有助于相关新药的研发.; 关键词泛素非蛋白质降解多聚泛素化单泛素化多泛素化; Keywords ubiqutin, nonproteolysis, polyubiquitylation, monoubiquitylation, multiubiquitylation; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名泛素链水解酶的选择性和产生机制被引量：2: 4; 作者郑清芸王涛潘漫李宜明田长麟; 机构合肥工业大学生物与医学工程学院清华大学化学系中国科学技术大学生命科学学院; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第9期864-879,共16页; 基金国家自然科学基金资助项目(21372058 21572043)~~; 文摘底物蛋白的多聚泛素链修饰参与调节多种生命运动过程(包括蛋白质降解、自噬、DNA损伤修复、细胞周期、信号转导、基因表达、转录调节、炎症免疫等).去泛素化酶通过水解底物蛋白的单泛素和泛素链修饰,对泛素相关过程进行反向调节.人类基因组中约含90余种去泛素化酶,它们通过对自身酶活性和底物识别特异性的调节,实现了对细胞内复杂泛素过程的精密且层次性的调控.本文针对去泛素化酶对不同泛素链的识别选择性,综述目前已知泛素链水解酶的选择性和产生机制.; 关键词去泛素化酶泛素链水解酶多聚泛素化修饰蛋白质泛素化; Keywords deubiquitinating enzyme polyubiquitin chain hydrolases polyubiquitylation protein ubiquitylation; 分类号 Q5 [生物学—生物化学] O6 [理学—化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Smurf1通过抑制LKB1的多聚泛素化而调控其蛋白稳定性	袁志马林强程志梁森黄慧哲	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HEK 293T细胞中TRAF6多聚泛素化修饰KLF5的方式及其修饰位点的鉴定	李玉应帅葛文阮玉婷吴宁霞王伟民张婧邱文王迎伟	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	泛素化介导的非蛋白质降解功能	陈季武郑丽娜王帮正李晓涛	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2012	14	在线阅读下载PDF 职称材料
4	泛素链水解酶的选择性和产生机制	郑清芸王涛潘漫李宜明田长麟	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料