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在基因序列中高效引入多位点突变的方法被引量：1: 1; 作者孟凡荣陈琛 +2 位作者李永文万海粟周清华《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期469-473,共5页; 背景与目的在基因序列中引入点突变是研究基因结构和功能及其相关性的重要手段。目前已有多种对基因序列进行突变的方法,然而,这些方法大多对单一位置的基因突变有效,而对在基因序列中引入多位点突变,还有待方法的进一步改进。为适应这... 展开更多; 关键词多位点突变突变引物 Typells类的限制性内切酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

ABCB11基因多位点突变致进行性家族性肝内胆汁淤积症2型1例病例报告被引量：5: 2; 作者丘燕燕熊小丽 +5 位作者汤建桥吴云涛郑文彬王蔚华易巍鄢素琪《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期467-468,共2页; 1病例资料男,2月15 d,因“发现皮肤巩膜黄染70+d”入住武汉儿童医院(我院)中西医结合科。患儿生后第2 d出现皮肤、巩膜黄染,后黄疸逐渐加重,粪便为黄色或浅黄色;尿液色清,时而深黄。住院5 d前在我院中西医结合科门诊行体格检查,发现全... 展开更多; 关键词枯草杆菌二联活菌颗粒巩膜黄染中西医结合科茵栀黄颗粒病例报告多位点突变病例资料儿童医院; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种快速构建基因多个点突变体方法的建立被引量：1: 3; 作者陈立涵李玮妮 +2 位作者张浩程龙叶棋浓《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第7期678-685,共8页; 蛋白质内部多个位点的翻译后修饰在基因的功能调节过程中发挥重要作用,基因的点突变体在其结构和功能研究中发挥非常关键的作用,因此,高效、快速构建基因的多个点突变体在基因的功能研究中意义重大.本研究在建立了对目的基因进行高效准... 展开更多; 关键词反向PCR SRrp53 多位点突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

Bloom解旋酶突变体的克隆与表达: 4; 作者张金彪许厚强 +3 位作者骆衡许庆贺陈祥李坤《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期123-128,共6页; blm基因的突变可导致Bloom综合症(BS),Bloom综合症是一种罕见隐性常染色体遗传疾病,患者遗传不稳定并易患多种类型癌症。临床发现BS患者细胞中的BLM的RecQ-Ct区域的1 036位半胱氨酸残基发生突变。运用生物信息学及分子生物学技术,通过... 展开更多; 关键词 BLM解旋酶重组PCR 多位点突变基因克隆表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名在基因序列中高效引入多位点突变的方法被引量：1: 1; 作者孟凡荣陈琛李永文万海粟周清华; 机构天津医科大学总医院、天津市肺癌研究所、天津市肺癌转移与肿瘤微环境实验室; 出处《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期469-473,共5页; 基金天津市高等学校科技发展基金计划项目(No.2006ZD10) 四川省重大科研项目(No.06SG005-002-2)资助~~; 文摘背景与目的在基因序列中引入点突变是研究基因结构和功能及其相关性的重要手段。目前已有多种对基因序列进行突变的方法,然而,这些方法大多对单一位置的基因突变有效,而对在基因序列中引入多位点突变,还有待方法的进一步改进。为适应这一需要,本研究提供了一种高效的可在基因序列的多个位点引入突变的方法。方法该方法依赖于一种Type IIs类的限制性内切酶,例如Esp 3I等。本研究所提供的方法中,针对每一个突变位点,合成一对含有突变点和所选择的Type IIs类的限制性内切酶位点的引物,当需要引入多位点突变时,则利用邻近的两个突变位点的引物做PCR反应,多个位点的突变,就可以得到多个扩增片段,将这些片段用和引物上的限制性内切酶位点对应的酶进行反应,然后用连接反应将片段连接形成突变基因。结果本研究所提供的方法非常简便,主要实验步骤可以在一天之内完成。我们已经利用这种方法,在绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein,EGFP)和nm23基因中,引入3个或4个突变,突变效率几乎为100%。结论本研究所提供的方法可以成为研究基因功能的有用工具。; 关键词多位点突变突变引物 Typells类的限制性内切酶; Keywords Multiple-site mutagenesis Mutagenic primers Type IIs restriction enzyme; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ABCB11基因多位点突变致进行性家族性肝内胆汁淤积症2型1例病例报告被引量：5: 2; 作者丘燕燕熊小丽汤建桥吴云涛郑文彬王蔚华易巍鄢素琪; 机构湖北中医药大学华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院; 出处《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期467-468,共2页; 基金国家自然科学基金面上项目:81574024 武汉市卫生与计划生育委员会临床医学科研项目:WZ17A07 湖北省卫计委2016-2017年度中医药中西医结合科研项目:2017HZ-Y35。; 文摘 1病例资料男,2月15 d,因“发现皮肤巩膜黄染70+d”入住武汉儿童医院(我院)中西医结合科。患儿生后第2 d出现皮肤、巩膜黄染,后黄疸逐渐加重,粪便为黄色或浅黄色;尿液色清,时而深黄。住院5 d前在我院中西医结合科门诊行体格检查,发现全身皮肤、巩膜黄染,肝脏右肋下2.5 cm、质软,脾脏未及;查TBIL 148.3μmol·L^-1、DBIL 91.9μmol·L^-1、ALT 495 U·L^-1、AST 649 U·L^-1、ALP 384 U·L^-1、GGT 44 U·L^-1,建议进一步诊治,家属拒绝。现因黄疸症状较前加重就诊。发病以来,精神反应尚可,吃奶可。入院前自行口服茵栀黄颗粒及枯草杆菌二联活菌颗粒10 d。; 关键词枯草杆菌二联活菌颗粒巩膜黄染中西医结合科茵栀黄颗粒病例报告多位点突变病例资料儿童医院; 分类号 R725.7 [医药卫生—儿科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种快速构建基因多个点突变体方法的建立被引量：1: 3; 作者陈立涵李玮妮张浩程龙叶棋浓; 机构军事医学科学院生物工程研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第7期678-685,共8页; 基金北京市自然科学基金(7112101) 国家重点基础研究发展计划(973)(2011CB504200)资助项目~~; 文摘蛋白质内部多个位点的翻译后修饰在基因的功能调节过程中发挥重要作用,基因的点突变体在其结构和功能研究中发挥非常关键的作用,因此,高效、快速构建基因的多个点突变体在基因的功能研究中意义重大.本研究在建立了对目的基因进行高效准确的单点突变方法的基础上,以SRrp53点突变体的构建为例,设计了新型的以反向PCR为基础的多个点突变的实验流程,获得的多位点突变体质粒经测序后均与预期相符,将测序正确的多位点突变体质粒转染293T细胞后,均表达了分子质量正确的蛋白质.以上结果表明,该实验设计方案能够高效、方便地用于基因多个点突变体的构建,为进一步研究它们的分子功能打下了基础.; 关键词反向PCR SRrp53 多位点突变; Keywords inverse PCR, SRrp53, multiple-site mutations; 分类号 Q52 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Bloom解旋酶突变体的克隆与表达: 4; 作者张金彪许厚强骆衡许庆贺陈祥李坤; 机构贵州大学生命科学学院贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室动物科学学院贵州大学贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室动物科学学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期123-128,共6页; 基金国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2010CB534912) 教育部博士点基金资助项目(200806570003) +1 种基金贵州省优秀人才省长资金资助项目(200822); 文摘 blm基因的突变可导致Bloom综合症(BS),Bloom综合症是一种罕见隐性常染色体遗传疾病,患者遗传不稳定并易患多种类型癌症。临床发现BS患者细胞中的BLM的RecQ-Ct区域的1 036位半胱氨酸残基发生突变。运用生物信息学及分子生物学技术,通过两轮重组PCR,构建985位和1 036位氨基酸突变的BLM解旋酶多点突变基因,克隆到载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。分离纯化获得了高纯度(>95%)的双突变型BLM解旋酶,并对其进行了Western blotting鉴定。这些结果可为进一步研究BS的致病机制奠定基础。; 关键词 BLM解旋酶重组PCR 多位点突变基因克隆表达; Keywords BLM helicase Recombinant PCR Multisite mutation Gene cloning and expressing; 分类号 R596 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	在基因序列中高效引入多位点突变的方法	孟凡荣陈琛李永文万海粟周清华	《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	ABCB11基因多位点突变致进行性家族性肝内胆汁淤积症2型1例病例报告	丘燕燕熊小丽汤建桥吴云涛郑文彬王蔚华易巍鄢素琪	《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心	2020	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	一种快速构建基因多个点突变体方法的建立	陈立涵李玮妮张浩程龙叶棋浓	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Bloom解旋酶突变体的克隆与表达	张金彪许厚强骆衡许庆贺陈祥李坤	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料