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复制缺陷型慢病毒载体法高效制作转基因家禽被引量：2: 1; 作者徐世永刘红林《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期F0003-F0003,共1页; 关键词慢病毒载体转基因家禽载体法缺陷型制作复制分化细胞绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

负载肝素酶复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定被引量：2: 2; 作者陈陵蔡永国 +4 位作者郑兴春杨仕明房殿春罗元辉王东旭《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期38-41,共4页; 目的包装负载人肝素酶(hpa)全长cDNA的复制缺陷型腺病毒载体(Adhpa)。方法将肝素酶正义腺病毒穿梭质粒pDC315hpa与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装Adhpa,并大量扩增,收集纯化。对纯化后的Adhpa进行... 展开更多; 关键词肝素酶腺病毒科复制缺陷型腺病毒载体转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

体内复制缺陷型腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶基因转染胶质瘤细胞对5-氟胞嘧啶敏感: 3; 作者吕彦恩《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第2期129-129,共1页; 病毒介导的化学敏感基因的转染,为肿瘤的治疗提供了一条有希望的新途径,目前脑肿瘤的基因治疗集中在将包装携带TK基因的逆转录病毒的细胞系植入肿瘤,其主要局限性是逆转录病毒在体内的转染几乎无效,即只有和包装细胞非常接近的胶质瘤细... 展开更多; 关键词体内复制缺陷型腺病毒载体胞嘧啶脱氨酶基因转染胶质瘤细胞 5-氟胞嘧啶敏感性脑肿瘤基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

复制缺陷型BmNPV载体的构建及初步应用被引量：4: 4; 作者费伟强陈琴 +7 位作者陈倩梅文枫边腾飞吕正兵于威陈健张耀洲吴祥甫《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期514-521,共8页; 家蚕核型多角体病毒(BmNPV)表达载体系统可以利用线性化技术或通过Bac-to-Bac系统构建重组病毒。为了解决采用这些方法构建重组病毒需要多步克隆和筛选,无法满足实验室水平快速和高通量表达目的蛋白质需求的问题,建立了一种快速便捷的... 展开更多; 关键词家蚕杆状病毒穿梭载体 RED重组复制缺陷型转染正筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

逆转录病毒载体介导的转基因鸡研究进展被引量：3: 5; 作者王令张涛尹亚军《中国家禽》北大核心 2015年第14期44-48,共5页; 转基因鸡作为重要的经济动物和理想的生物反应器,具有广阔的应用前景。鸡基因组测序的完成加快了转基因鸡的研究和发展。病毒载体法是转基因鸡制备的主导方法之一,具有效率高和遗传稳定性良好的优势。本文对逆转录病毒载体特征、复制缺... 展开更多; 关键词转基因鸡逆转录病毒载体复制整合双缺陷型病毒载体人工核酸酶技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒载体介导人KDR胞外段诱导抗小鼠肝癌的免疫效应被引量：1: 6; 作者谭晓华吴彬 +2 位作者王芳刘兵王友臣《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第4期312-316,共5页; 目的:探讨复制缺陷型腺病毒载体(Ad)介导人血管内皮细胞生长因子受体-2(hVEGFR-2或hKDR)胞外段诱导抗小鼠肝癌血管免疫及打破免疫耐受的效果。方法:构建Ad hKDRE,用Ad hKDRE皮内免疫C57BL/6小鼠,7d后取脾细胞作为效应细胞(E),Hepa1-6/m... 展开更多; 关键词复制缺陷型腺病毒载体原发性肝癌血管内皮细胞生长因子受体-2 异种抗原; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组腺病毒介导绿色荧光蛋白基因对小鼠眼组织的转染和表达被引量：2: 7; 作者于慧吴继红 +4 位作者张圣海刘新建张巨峰易苗英黄倩《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第12期904-907,共4页; 目的研究不同剂量Ad5-EGFP前房注射后,报告基因在小鼠眼部组织的表达情况及分布特点。方法24只BALB/c小鼠随机分组。实验组以不同浓度梯度前房注射Ad5-EGFP。对照组前房分别注射PBS和不给予任何注射。观察活体眼部组织EGFP表达情况及阳... 展开更多; 关键词复制缺陷型腺病毒载体基因治疗角膜内皮细胞报告基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

携TGFβ1正、反义基因载体对膀胱癌细胞体外生长的作用: 8; 作者李文录赵秀英 +2 位作者朱锡真牛瑞芳姚欣《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第6期527-530,共4页; 目的 :探讨表达TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体 ,对人膀胱癌细胞生长及细胞周期调控的作用。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,构建表达TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ AS ;分别转... 展开更多; 关键词 TGFΒ1 复制缺陷型逆转录病毒载体反义RNA 膀胱癌培养的肿瘤细胞细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

Stanford基因治疗学家首次活体改变了神经元生理: 9; 作者孙雷心《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第1期23-23,共1页; Stanford大学(Stanford,CA)的三名科学家利用一种缺陷性疱疹病毒载体活体向大鼠脑中导入了葡萄糖转运(GT)基因。并且在这些动物的注射部位GT活性提高了10％。当人们用缺陷性单纯疱疹病毒(HSV)向脑细胞中活体导入标记基因,如lac Z基因时,... 展开更多; 关键词 STANFORD 缺陷性中枢神经系统疱疹病毒逆转录病毒载体复制型葡萄糖转运基因治疗脑细胞鼠脑; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名复制缺陷型慢病毒载体法高效制作转基因家禽被引量：2: 1; 作者徐世永刘红林; 机构南京农业大学动物遗传育种实验室; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期F0003-F0003,共1页; 关键词慢病毒载体转基因家禽载体法缺陷型制作复制分化细胞绿色荧光蛋白; 分类号 S814.8 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名负载肝素酶复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定被引量：2: 2; 作者陈陵蔡永国郑兴春杨仕明房殿春罗元辉王东旭; 机构第三军医大学西南医院全军消化中心; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期38-41,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30200123); 文摘目的包装负载人肝素酶(hpa)全长cDNA的复制缺陷型腺病毒载体(Adhpa)。方法将肝素酶正义腺病毒穿梭质粒pDC315hpa与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装Adhpa,并大量扩增,收集纯化。对纯化后的Adhpa进行滴度测定、感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定。结果包装成功的腺病毒载体具有良好的感染性,纯化浓缩后的病毒滴度可达5×1010pfu/ml。电镜证实病毒浓缩液中存在病毒颗粒,并可见病毒在HEK293细胞中复制。PCR双引物鉴定Adhpa可扩增出Ad及hpa特异片段,而对照则不能扩增出hpa片段。结论成功包装了负盘。; 关键词肝素酶腺病毒科复制缺陷型腺病毒载体转染; Keywords heparanase adenoviridae replication-deficient adenoviral vector, transfection; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名体内复制缺陷型腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶基因转染胶质瘤细胞对5-氟胞嘧啶敏感: 3; 作者吕彦恩; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第2期129-129,共1页; 文摘病毒介导的化学敏感基因的转染,为肿瘤的治疗提供了一条有希望的新途径,目前脑肿瘤的基因治疗集中在将包装携带TK基因的逆转录病毒的细胞系植入肿瘤,其主要局限性是逆转录病毒在体内的转染几乎无效,即只有和包装细胞非常接近的胶质瘤细胞才易被转染,且TK基因疗法所产生的旁观者效应需依赖细胞间的直接接触。本文介绍通过复制缺陷的腺病毒载体介导将细菌胞嘧啶脱氨酶(cd)基因转染至大鼠9L胶质瘤细胞,使其对在正常细胞没有毒性的核苷-5-氟胞嘧啶(5-Fc)敏感。; 关键词体内复制缺陷型腺病毒载体胞嘧啶脱氨酶基因转染胶质瘤细胞 5-氟胞嘧啶敏感性脑肿瘤基因治疗; 分类号 R739.41 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名复制缺陷型BmNPV载体的构建及初步应用被引量：4: 4; 作者费伟强陈琴陈倩梅文枫边腾飞吕正兵于威陈健张耀洲吴祥甫; 机构浙江理工大学生物化学研究所浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室浙江中烟工业有限责任公司; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期514-521,共8页; 基金国家高技术研究发展计划"863"项目(No.2011AA100603) 浙江省科技厅公益项目(No.2011C33033) 浙江省自然科学基金项目(No.Y3090228); 文摘家蚕核型多角体病毒(BmNPV)表达载体系统可以利用线性化技术或通过Bac-to-Bac系统构建重组病毒。为了解决采用这些方法构建重组病毒需要多步克隆和筛选,无法满足实验室水平快速和高通量表达目的蛋白质需求的问题,建立了一种快速便捷的重组病毒构建方法。首先以BmNPV基因组为基础构建家蚕杆状病毒穿梭载体BmBacmid,进而利用Red重组技术敲除病毒复制必需基因orf1629的部分序列,构建了一种复制缺陷型BmNPV穿梭载体RD-BmBacmid。利用RD-BmBac-mid单独转染或者与pBacPAK8-AcGFP共转染BmN细胞,证实了该载体的复制缺陷性,即需经同源重组修复orf1629基因后方可产生重组病毒。利用复制缺陷型BmNPV载体正筛选可以快速构建重组病毒表达目的蛋白质。; 关键词家蚕杆状病毒穿梭载体 RED重组复制缺陷型转染正筛选; Keywords BmBacmid Red recombination Replication-defective Transfection Positive screening; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名逆转录病毒载体介导的转基因鸡研究进展被引量：3: 5; 作者王令张涛尹亚军; 机构陕西理工学院生物科学与工程学院; 出处《中国家禽》北大核心 2015年第14期44-48,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31402071) 陕西理工学院人才启动项目(SLGQD14-02); 文摘转基因鸡作为重要的经济动物和理想的生物反应器,具有广阔的应用前景。鸡基因组测序的完成加快了转基因鸡的研究和发展。病毒载体法是转基因鸡制备的主导方法之一,具有效率高和遗传稳定性良好的优势。本文对逆转录病毒载体特征、复制缺陷型病毒载体和复制整合双缺陷型病毒载体的优缺点及其介导的转基因鸡研究进行综述,展望人工核酸酶技术结合复制整合双缺陷型逆转录病毒载体在转基因鸡研究领域的应用前景。; 关键词转基因鸡逆转录病毒载体复制整合双缺陷型病毒载体人工核酸酶技术; Keywords transgenic chicken retroviral vector replication-integration double defective retroviral vector artificial nucleases; 分类号 S831.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒载体介导人KDR胞外段诱导抗小鼠肝癌的免疫效应被引量：1: 6; 作者谭晓华吴彬王芳刘兵王友臣; 机构北京军区总医院血液科解放军军事医学科学院放射与辐射研究所; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第4期312-316,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No30371627)~~; 文摘目的:探讨复制缺陷型腺病毒载体(Ad)介导人血管内皮细胞生长因子受体-2(hVEGFR-2或hKDR)胞外段诱导抗小鼠肝癌血管免疫及打破免疫耐受的效果。方法:构建Ad hKDRE,用Ad hKDRE皮内免疫C57BL/6小鼠,7d后取脾细胞作为效应细胞(E),Hepa1-6/mKDR作为靶细胞(T),行乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测特异性CTL杀伤活性;给免疫小鼠接种肝癌细胞Hepa1-6,观察荷瘤小鼠成活情况。结果:Ad hKDRE免疫小鼠1周后,在E∶T为100∶1、50∶1和25∶1时,Ad hKDRE诱导的6hCTL杀伤率分别为(81.5±5.6)%、(68.4±5.5)%和(39.6±3.9)%。Ad hKDRE免疫小鼠1周后接种2×106 Hepa1-6肝癌细胞,观察2个月无小鼠成瘤;接种5×106 Hepa1-6细胞,小鼠无瘤成活率为60%。上述CTL效应和抗成瘤作用在清除CD8+和CD4+ T淋巴细胞后消失。结论:Ad介导异种(人)KDR胞外段能有效地打破小鼠肝癌的免疫耐受,诱发强烈的抗原特异性细胞免疫反应,这种特异性细胞免疫反应是CD4+和CD8+ T细胞依赖性的。; 关键词复制缺陷型腺病毒载体原发性肝癌血管内皮细胞生长因子受体-2 异种抗原; Keywords replication-defective adenovirus vector primary hepatocellular carcinomas extracellular domain of vascu- lar endothelial growth factor receptor-2 xenogeneic antigen; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组腺病毒介导绿色荧光蛋白基因对小鼠眼组织的转染和表达被引量：2: 7; 作者于慧吴继红张圣海刘新建张巨峰易苗英黄倩; 机构上海交通大学附属第一人民医院中心实验室; 出处《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第12期904-907,共4页; 基金国家自然科学基金"杰出青年项目"(30325043) 上海市卫生局医学领军人才基金项目(LJ06036) 上海市科学技术委员会"登山计划项目"(064119539)资助; 文摘目的研究不同剂量Ad5-EGFP前房注射后,报告基因在小鼠眼部组织的表达情况及分布特点。方法24只BALB/c小鼠随机分组。实验组以不同浓度梯度前房注射Ad5-EGFP。对照组前房分别注射PBS和不给予任何注射。观察活体眼部组织EGFP表达情况及阳性细胞的类型。结果低浓度注射组在各个时间点眼表均未观察到EGFP荧光表达。高浓度注射组在注射病毒第1d即可以观察EGFP的表达,在第10d时眼表EGFP荧光亮度、范围增加最为明显。EGFP在角膜内皮细胞、虹膜色素上皮细胞及小梁网阳性表达。结论Ad5型腺病毒载体定向携带报告基因在眼前节表达,为眼前节疾病的基因治疗提供了实验依据。; 关键词复制缺陷型腺病毒载体基因治疗角膜内皮细胞报告基因; Keywords replication-defective adenoviral vector gene therapy corneal endothelial cells report gene; 分类号 R77 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名携TGFβ1正、反义基因载体对膀胱癌细胞体外生长的作用: 8; 作者李文录赵秀英朱锡真牛瑞芳姚欣; 机构天津医科大学附属肿瘤医院盆腔泌尿科保定市第三医院; 出处《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第6期527-530,共4页; 文摘目的 :探讨表达TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体 ,对人膀胱癌细胞生长及细胞周期调控的作用。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,构建表达TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ AS ;分别转染膀胱癌细胞株EJ ,观察不同载体对膀胱癌细胞体外增殖、克隆形成和细胞周期时相的影响。结果 :pRevTβ、pRevTβ AS载体病毒滴度分别为 0 84、0 88× 10 5CFU/ml,对EJ细胞的整合率为10 0 % ,并有效表达 ;抑制TGFβ1表达可以降低靶细胞的生长速度和克隆形成率 ,同时出现G0 /G1期细胞比例增高和S期细胞比例降低。结论 :携TGFβ1反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体可以下调EJ细胞内源性TGFβ1表达 ,诱导肿瘤细胞G1期阻滞 ,抑制肿瘤细胞体外生长增殖。; 关键词 TGFΒ1 复制缺陷型逆转录病毒载体反义RNA 膀胱癌培养的肿瘤细胞细胞周期; Keywords TGFβ1 replication defective retroviral vector antisense RNA bladder cancer cultured tumor cells cell cycle; 分类号 R737.14 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Stanford基因治疗学家首次活体改变了神经元生理: 9; 作者孙雷心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第1期23-23,共1页; 文摘 Stanford大学(Stanford,CA)的三名科学家利用一种缺陷性疱疹病毒载体活体向大鼠脑中导入了葡萄糖转运(GT)基因。并且在这些动物的注射部位GT活性提高了10％。当人们用缺陷性单纯疱疹病毒(HSV)向脑细胞中活体导入标记基因,如lac Z基因时,Stanford研究小组则声明首次用HSV载体改变了成熟动物中枢神经系统(CNS)的生理学状况。疱疹病毒被认为是一种向神经元中传送基因的理想载体。; 关键词 STANFORD 缺陷性中枢神经系统疱疹病毒逆转录病毒载体复制型葡萄糖转运基因治疗脑细胞鼠脑; 分类号 R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	复制缺陷型慢病毒载体法高效制作转基因家禽	徐世永刘红林	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	负载肝素酶复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定	陈陵蔡永国郑兴春杨仕明房殿春罗元辉王东旭	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	体内复制缺陷型腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶基因转染胶质瘤细胞对5-氟胞嘧啶敏感	吕彦恩	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	1996	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	复制缺陷型BmNPV载体的构建及初步应用	费伟强陈琴陈倩梅文枫边腾飞吕正兵于威陈健张耀洲吴祥甫	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2013	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	逆转录病毒载体介导的转基因鸡研究进展	王令张涛尹亚军	《中国家禽》北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	腺病毒载体介导人KDR胞外段诱导抗小鼠肝癌的免疫效应	谭晓华吴彬王芳刘兵王友臣	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	重组腺病毒介导绿色荧光蛋白基因对小鼠眼组织的转染和表达	于慧吴继红张圣海刘新建张巨峰易苗英黄倩	《眼科研究》 CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	携TGFβ1正、反义基因载体对膀胱癌细胞体外生长的作用	李文录赵秀英朱锡真牛瑞芳姚欣	《中国癌症杂志》 CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	Stanford基因治疗学家首次活体改变了神经元生理	孙雷心	《生物技术通报》 CAS CSCD	1994	0	在线阅读下载PDF 职称材料