基因工程猪γ-干扰素对PRRSV和SIV混合感染猪的预防效果试验

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作者 赵建梅 王昕 +1 位作者 王鸿臣 蒋贻海 《中国动物检疫》 CAS 2004年第7期25-26,共2页

应用基因工程猪γ -干扰素和血清对人工感染PRRSV(繁殖与呼吸综合征病毒 )和SIV(猪流感病毒 )仔猪的预防试验 ,结果表明猪γ -干扰素预防两种病毒混合感染效果显著 ,感染前和感染后肌肉注射5万单位猪的发病率分别下降71.2 %和60%,猪γ ... 应用基因工程猪γ -干扰素和血清对人工感染PRRSV(繁殖与呼吸综合征病毒 )和SIV(猪流感病毒 )仔猪的预防试验 ,结果表明猪γ -干扰素预防两种病毒混合感染效果显著 ,感染前和感染后肌肉注射5万单位猪的发病率分别下降71.2 %和60%,猪γ -干扰素和特异性抗体联合使用效果最好 ,可100 %预防病毒感染 ,表明干扰素和抗体在抗病毒感染方面起到协同作用。本试验不仅为PRRSV和SIV混合感染提供了良好的预防方法 。 展开更多

关键词 基因工程猪γ-干扰素 繁殖呼吸综合征 流感 混合感染 发病率 预防

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广西巴马小型猪β-干扰素基因的克隆、序列分析和蛋白结构预测 被引量：5

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作者 曾芸 李军 +1 位作者 赵武 陈凤莲 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第5期105-108,共4页

从刀豆素A刺激12 h和15 h的巴马小型猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出β-干扰素(IFN-β)基因,将其克隆到PMD18-T载体上,进行序列分析和蛋白结构预测。结果表明,克隆的巴马猪IFN-β基因氨基酸序列与GenBank上登录的梅山... 从刀豆素A刺激12 h和15 h的巴马小型猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出β-干扰素(IFN-β)基因,将其克隆到PMD18-T载体上,进行序列分析和蛋白结构预测。结果表明,克隆的巴马猪IFN-β基因氨基酸序列与GenBank上登录的梅山猪和长白猪的IFN-β基因氨基酸同源性为98.4%和98.9%,与人、牛、马的IFN-β氨基酸同源性分别为65.1%,65.1%,66.1%。人和猪IFN-β基因在5个螺旋结构序列上同源性很高,而且在维持蛋白结构和生物学活性上的氨基酸位点也非常保守。 展开更多

关键词 巴马小型猪 β-干扰素基因 克隆 序列分析 结构预测

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猪α-干扰素基因的分子克隆与序列分析 被引量：9

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作者 谢海燕 郭霄峰 《动物医学进展》 CSCD 2002年第6期69-72,共4页

应用 PCR技术直接从长白猪的肝组织基因组中扩增得到了一条大小约为 50 0 bp的特异带 ,将其连接到 p MD1 8-T质粒中 ,转化感受态的 DH5α,运用蓝白斑筛选、酶切鉴定及质粒 PCR鉴定 ,筛选可疑阳性重组子。测序结果表明 ,该基因 (暂定名为... 应用 PCR技术直接从长白猪的肝组织基因组中扩增得到了一条大小约为 50 0 bp的特异带 ,将其连接到 p MD1 8-T质粒中 ,转化感受态的 DH5α,运用蓝白斑筛选、酶切鉴定及质粒 PCR鉴定 ,筛选可疑阳性重组子。测序结果表明 ,该基因 (暂定名为 p IFN-α)由 50 1个核苷酸组成 ,共编码 1 6 6个氨基酸。在核苷酸水平上 ,与 Gene Bank 上序列号为 M2 86 2 3及X571 91的同源性高达 98%和 97.8% ,但存在无义突变 ,氨基酸的同源性达 95.8%。 展开更多

关键词 猪 α-干扰素基因 分子克隆 序列分析 IFN-Α PCR

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人γ-干扰素基因工程菌培养条件的研究 被引量：4

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作者 靳挺 关怡新 姚善泾 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期724-728,共5页

对表达重组人γ-干扰素的基因工程菌的培养条件进行了较详细的研究.确定了最佳的培养及诱导时间,并利用正交试验设计,对影响工程菌生长和重组人γ-干扰素表达的条件如培养基中葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物的量及摇床转速、装液量、接种量... 对表达重组人γ-干扰素的基因工程菌的培养条件进行了较详细的研究.确定了最佳的培养及诱导时间,并利用正交试验设计,对影响工程菌生长和重组人γ-干扰素表达的条件如培养基中葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物的量及摇床转速、装液量、接种量、pH等进行了优化.结果表明,在优化条件下,表达的γ-干扰素包涵体占菌体总蛋白的60%以上,每升发酵液可获得包涵体约为1.6g. 展开更多

关键词 重组人γ-干扰素 培养条件 高效表达 基因工程菌 包涵体 发酵

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猪γ-干扰素基因的克隆 原核表达及抗病毒活性检测 被引量：1

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作者 张瑞华 刘珍 +1 位作者 刘春凌 李春红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第12期36-38,共3页

关键词 γ-干扰素基因 猪γ-干扰素 抗病毒 活性检测 原核表达 克隆 机体免疫系统 细胞因子

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血源与基因工程α-干扰素抑制贮脂细胞增殖及胶原合成的比较研究 被引量：1

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作者 顾月华 赵凌 +1 位作者 刘波 陈从新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期578-581,共4页

目的　研究血源α 干扰素与基因工程α 干扰素对大鼠肝脏贮脂细胞增殖和胶原合成的影响 ,为临床应用基因工程α 干扰素抗纤维化提供参考。方法　分离、培养大鼠贮脂细胞 ,采用MTT法和3H 脯氨酸参入法分别测定细胞增殖和胶原合成。结果... 目的　研究血源α 干扰素与基因工程α 干扰素对大鼠肝脏贮脂细胞增殖和胶原合成的影响 ,为临床应用基因工程α 干扰素抗纤维化提供参考。方法　分离、培养大鼠贮脂细胞 ,采用MTT法和3H 脯氨酸参入法分别测定细胞增殖和胶原合成。结果　血源α 干扰素与基因工程α 干扰素在1× 10 6 ～ 1× 10 7U·L-1浓度范围内均能显著抑制大鼠肝脏贮脂细胞增殖和胶原合成 ,二者间相比差异无显著性。结论　血源α 干扰素与基因工程α 干扰素均有良好的体外抗肝纤维化作用 ,且作用相似。 展开更多

关键词 血源 Α-干扰素 基因工程 细胞增殖 贮脂细胞 胶原合成 抗肝纤维化

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猪基因工程复合干扰素对仔猪病毒性疾病防治效果观察 被引量：9

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作者 熊忠良 徐涤平 +4 位作者 李勇 刘泽文 杨克礼 伍锐 梁望旺 《湖北畜牧兽医》 2008年第12期10-11,共2页

以武汉市和江汉平原2个规模猪场发生猪瘟、猪蓝耳病等病毒性传染病为对象,用猪基因工程复合干扰素配合常规药物进行了预防和治疗效果试验。结果:干扰素配合常规兽药治疗总有效率分别为87.2%、84.6%;与对照组总有效率29.1%、26.1%相比较... 以武汉市和江汉平原2个规模猪场发生猪瘟、猪蓝耳病等病毒性传染病为对象,用猪基因工程复合干扰素配合常规药物进行了预防和治疗效果试验。结果:干扰素配合常规兽药治疗总有效率分别为87.2%、84.6%;与对照组总有效率29.1%、26.1%相比较,差异极显著(P<0.01);干扰素对病毒性疾病预防试验仔猪成活率分别为95.8%、93.6%,与对照组成活率54.7%、68.1%相比较,差异极显著(P<0.01)。试验表明,猪基因工程复合干扰素对规模猪场仔猪病毒性疾病防治效果良好。 展开更多

关键词 猪基因工程复合干扰素 猪瘟 猪蓝耳病

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猪干扰素α的基因工程研究与应用 被引量：3

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作者 郭佳宏 夏叶 +1 位作者 李春华 缪德年 《上海畜牧兽医通讯》 2018年第6期10-16,共7页

我国是养猪大国，养猪业在国民经济中居于十分重要的地位。但猪圆环病毒病、猪瘟、口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎等病毒性疫病已成为当前困扰养猪业发展的重大问题，每年因病毒感染而造成的损... 我国是养猪大国，养猪业在国民经济中居于十分重要的地位。但猪圆环病毒病、猪瘟、口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎等病毒性疫病已成为当前困扰养猪业发展的重大问题，每年因病毒感染而造成的损失无法估量。对这些常见的病毒病，虽然有些可用疫苗作常规免疫，但由于免疫程序、疫苗本身和动物个体等原因，使其在实际应用中的效果并不十分理想。干扰素（interferon，INF）是由细胞产生的一类具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性的蛋白质，是目前应用前景较为广阔的生物制剂之一。 展开更多

关键词 干扰素Α 养猪业 应用 基因工程 猪繁殖与呼吸综合征 猪圆环病毒病 猪传染性胃肠炎 猪流行性腹泻

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高活性猪基因工程干扰素注射液

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作者 刘文军 《北方牧业》 2009年第4期12-12,共1页

近年来是我国兽用化学药物正处于比较迅猛的发展时期,其间国内相继有一些大型医药企业介入兽药研发,基于比较雄厚的资金支持和基础条件,以及国外一些原料药专利保护期限的结束,兽药药物的开发非常活跃,相继有一些产品完成开发或上报及... 近年来是我国兽用化学药物正处于比较迅猛的发展时期,其间国内相继有一些大型医药企业介入兽药研发,基于比较雄厚的资金支持和基础条件,以及国外一些原料药专利保护期限的结束,兽药药物的开发非常活跃,相继有一些产品完成开发或上报及批准。我们说随着兽药研发技术的进步,未来兽药开发应考虑到市场细分和动物种群细分,针对特定市场和动物种群开发的有效药物。专家都认为,保障肉类安全的最根本方法是依靠科技,研制"新型兽药"。本刊选取了几种新型兽药的介绍,以飨读者。 展开更多

关键词 基因工程干扰素 猪流感 高活性 注射液 猪轮状病毒感染 猪传染性胃肠炎 微生物研究所 动物机体

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基因工程干扰素 α-2b 加CD_3AK治疗慢性乙型肝炎 被引量：23

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作者 周岳进 许雪延 +4 位作者 胡素琴 胡操寒 孙晓彩 金伟虎 池月志 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1997年第4期198-200,共3页

４５例慢性活动性乙型病毒性肝炎随机分为三组。Ａ组用干扰素α－２ｂ（ＩｎｔｒｏｎＡ，干扰能）加经ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）；Ｂ组单用α－２ｂ；Ｃ组为对照组。结果：Ａ组ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ近期阴转率... ４５例慢性活动性乙型病毒性肝炎随机分为三组。Ａ组用干扰素α－２ｂ（ＩｎｔｒｏｎＡ，干扰能）加经ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）；Ｂ组单用α－２ｂ；Ｃ组为对照组。结果：Ａ组ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ近期阴转率为７３．３％，远期疗效为５３．３％；Ｂ组分别为４６．７％和３３．３％。两组均明显优于对照组。表明α－２ｂ可有效抑制ＨＢＶ复制，加用ＣＤ３ＡＫ可增强对乙肝病毒的抑制作用。 展开更多

关键词 基因工程α-2b 干扰素 乙型肝炎 慢性 药物疗法

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新兴猪干扰素-β基因的分子克隆与序列测定 被引量：5

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作者 温纳相 陈瑞爱 +4 位作者 裴仉福 唐满华 金晓芹 魏志清 朱文冠 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期77-79,共3页

根据NCBI GenBank 上登载的猪干扰素β基因序列(S41178),设计一对引物,直接从猪肝脏提取基因组DNA,经PCR 扩增及扩增产物的克隆、测序,获得了新兴本地猪干扰素β全基因片段,其大小为561 bp,与NCBI GenBank上登载的猪干扰素β基因序列... 根据NCBI GenBank 上登载的猪干扰素β基因序列(S41178),设计一对引物,直接从猪肝脏提取基因组DNA,经PCR 扩增及扩增产物的克隆、测序,获得了新兴本地猪干扰素β全基因片段,其大小为561 bp,与NCBI GenBank上登载的猪干扰素β基因序列完全一致,为进一步研究和开发猪基因工程干扰素制剂奠定了基础。 展开更多

关键词 猪干扰素-β 基因克隆 肝细胞

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基因工程人β干扰素的原核表达及纯化研究 被引量：3

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作者 陈国友 蒋应明 +7 位作者 张意 黄欣 厉永建 施群英 王全兴 张明徽 何龙 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第2期130-133,共4页

目的 :摸索一种适合于中试生产的点突变重组人 β干扰素 ( 17Ser IFN β)发酵与纯化工艺。 方法 :研究不同培养基和热诱导时间对17Ser IFN β表达的影响 ;观察pH、蛋白浓度和层析条件对17Ser IFN β纯化的影响。 结果 :17Ser IFN β工... 目的 :摸索一种适合于中试生产的点突变重组人 β干扰素 ( 17Ser IFN β)发酵与纯化工艺。 方法 :研究不同培养基和热诱导时间对17Ser IFN β表达的影响 ;观察pH、蛋白浓度和层析条件对17Ser IFN β纯化的影响。 结果 :17Ser IFN β工程菌在含甘油、酪蛋白水解物及微量元素的M9培养基中 ,17Ser IFN β表达量明显增加。灰度扫描显示热诱导 4h后的表达量最高 ,目的蛋白可达菌体总蛋白的 2 0 %以上。17Ser IFN β可以相对特异性地被仲丁醇抽提至有机相中 ,纯度达 80 % ,经S2 0 0凝胶过滤柱层析后纯度达 90 % ,用G2 5柱转换缓冲液 ,使缓冲液pH值 >8,同时去除缓冲液中的还原剂DTT ,将复性后的样品用C4反相柱层析进行精制 ,最终获得纯度 >98%和比活性 >3× 10 7U/mg的17Ser IFN β制品。 结论 :成功地建立了注射用新型重组人 β 干扰素的中试生产工艺 ,为随后进行的临床前研究及临床试验打下基础。 展开更多

关键词 Β-干扰素 蛋白纯化 蛋白表达 原核表达 基因工程

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重组猪γ-干扰素在毕赤酵母中的表达及其生物学活性研究 被引量：2

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作者 黄忠 黄元 +1 位作者 阮良基 曹汉威 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第9期98-102,共5页

采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明... 采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明,重组猪γ-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对猪肾传代细胞(PK-15)的攻击;而在动物试验中,重组猪γ-干扰素可明显提高猪伪狂犬疫苗的免疫效果。 展开更多

关键词 猪γ-干扰素(PoIFN-γ) 重组毕赤酵母 基因表达

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基因工程鸡α-干扰素纯化制品在鸡体内的消长规律

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作者 赵风立 刘光晓 +4 位作者 姜德仟 杨静 王俊超 于静静 林娜 《家禽科学》 2015年第5期43-45,共3页

干扰素（interferon，IFN）是一类具有广泛生物学活性的蛋白质，具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用，是机体防御系统的重要组成部分[1]。干扰素是在特定的诱导剂作用下，由细胞产生的一种具有高度生物学活性的糖蛋白，当... 干扰素（interferon，IFN）是一类具有广泛生物学活性的蛋白质，具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用，是机体防御系统的重要组成部分[1]。干扰素是在特定的诱导剂作用下，由细胞产生的一种具有高度生物学活性的糖蛋白，当它再作用于其他细胞时，使其它细胞立即获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力[2]。α-干扰素是单核细胞产生的相对分子量18000的多肽，因其蛋白质分子的变异及肽链23位和34位氨基酸序列的组分不同，又可分为α2a、α2b、α2c等[3]。干扰素的活力具有相对的种属特异性，α-干扰素具有广谱的抗病毒活性，对DNA 病毒和RNA 病毒均有抑制作用[4]。 展开更多

关键词 Α-干扰素 消长规律 基因工程 抗病毒活性 机体免疫功能 生物学活性 蛋白质分子 单核细胞

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猪γ干扰素基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量：1

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作者 刘根梅 罗满林 +2 位作者 陈瑞爱 陈矩豪 裴党帅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期18-20,共3页

干扰素-γ（INF-γ）又称Ⅱ干扰素,主要是由活化的CD4＋、CD8＋等T淋巴细胞和NK细胞产生的一种细胞因子,猪γ干扰素全基因为501个碱基,编码166个氨基酸,前23个氨基酸为信号肽,后143个氨基酸为活性成熟蛋白。

关键词 干扰素基因 猪γ干扰素 重组腺病毒 鉴定 活性状态 干扰素-Γ T淋巴细胞 氨基酸

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猪α-干扰素表达系统及其应用的研究进展 被引量：3

16

作者 张杏 李爽 +3 位作者 崔栩 刘海燕 苏敬良 金忠辉 《中国兽药杂志》 2014年第10期60-62,共3页

就猪α-干扰素的分子特征、生物学特性、表达系统和猪基因工程α-干扰素的应用进行综述,以期为猪α-干扰素在广谱抗病毒活性、抗肿瘤以及免疫调节的临床应用提供参考。

关键词 猪α-干扰素 基因工程 表达系统

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重组人干扰素-β制品的质量标准研究 被引量：8

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作者 刘长暖 张翊 +4 位作者 饶春明 林建伟 高凯 张明芳 王军志 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第3期212-215,共4页

目的 :通过对重组IFN β的质量研究和实验方法参数的选择 ,建立重组IFN β的质量控制标准。 方法 :通过采用细胞病变抑制法 ,以IFN α国家标准品、WHO的IFN β国际标准品作为参考品测定样品的含量 ,比较Lowry法、BCA法测定IFN β的蛋白... 目的 :通过对重组IFN β的质量研究和实验方法参数的选择 ,建立重组IFN β的质量控制标准。 方法 :通过采用细胞病变抑制法 ,以IFN α国家标准品、WHO的IFN β国际标准品作为参考品测定样品的含量 ,比较Lowry法、BCA法测定IFN β的蛋白浓度 ,采用鲎试剂法检测内毒素含量 ,按照《中国生物制品规程》的有关要求进行其他项目的测定。结果 :结果表明可用IFN α标准品和IFN β标准品测定IFN β的生物活性 ,用Lowry法测定的蛋白浓度与实际值基本一致 ,鲎试剂法可用于制品细菌内毒素含量的测定。国内生产的重组IFN β制品达到了国家有关规定的要求。 结论 :建立了重组IFN β的质量标准 ,并可以有效地控制制品的质量 ,为我国重组IFN 展开更多

关键词 重组人β-干扰素 质量标准 基因工程 IFN-Β

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鸡α-干扰素研究进展 被引量：7

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作者 岳道友 索勋 +1 位作者 汪明 张龙现 《中国家禽》 北大核心 2010年第17期45-47,共3页

自人类发现干扰素以来,研究者对于人类、哺乳动物及啮齿类动物干扰素进行了大量研究,取得了突破性进展。但是,以鸡干扰素为代表的禽类干扰素研究相对滞后。本文对鸡α-干扰素的结构、鸡α-干扰素的抗病毒作用以及基因工程鸡α-干扰素的... 自人类发现干扰素以来,研究者对于人类、哺乳动物及啮齿类动物干扰素进行了大量研究,取得了突破性进展。但是,以鸡干扰素为代表的禽类干扰素研究相对滞后。本文对鸡α-干扰素的结构、鸡α-干扰素的抗病毒作用以及基因工程鸡α-干扰素的应用等方面对鸡α-干扰素的研究现状作一综述。 展开更多

关键词 鸡α-干扰素 结构 抗病毒作用 基因工程 应用

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大肠杆菌生产重组人干扰素-γ培养基的研究 被引量：2

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作者 王海波 申烨华 +4 位作者 秦芳玲 刘江峰 耿信笃 张智清 侯云德 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期174-178,共5页

在M9培养基的基础上,优选出重组大肠杆菌生产人干扰素-γ(rhIFN-γ)的优化培养基配方。结果表明:优化的碳源为含量2%的葡萄糖,氮源为蛋白胨和少量的(NH4)2SO4;优化培养基有利于菌体的生长和目标蛋白的表达,使rhIFN-γ的生产能力达0.64g... 在M9培养基的基础上,优选出重组大肠杆菌生产人干扰素-γ(rhIFN-γ)的优化培养基配方。结果表明:优化的碳源为含量2%的葡萄糖,氮源为蛋白胨和少量的(NH4)2SO4;优化培养基有利于菌体的生长和目标蛋白的表达,使rhIFN-γ的生产能力达0.64g/L,比优化前提高了190.9%。 展开更多

关键词 重组人干扰素-γ 重组大肠杆菌 发酵培养基 碳源 氮源 基因工程药物 药物开发

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贵州白香猪γ干扰素基因的克隆与序列分析

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作者 曾智勇 周莉 +1 位作者 刘志杰 梁海英 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第8期151-153,共3页

为获得贵州白香猪γ干扰素基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪γ干扰素基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序分析。结果表明,pIFN-γ基因全长501bp,可编码166个氨基酸,其中前23位氨... 为获得贵州白香猪γ干扰素基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪γ干扰素基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序分析。结果表明,pIFN-γ基因全长501bp,可编码166个氨基酸,其中前23位氨基酸为信号肽序列;pIFN-γ含有2个潜在N-糖基化位点;贵州白香猪与国内地方猪种之间pIFN-γ基因差异不大,具有很近的亲缘关系,其中与藏猪、成华猪、枫径猪、梅山猪的同源性达100%,而与内江猪的亲缘关系相对较远,与荣昌猪(DQ902588)亲缘最远。 展开更多

关键词 贵州白香猪 干扰素-γ 基因克隆 序列分析

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