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一种均相时间分辨荧光免疫分析中间体、螯合剂及制备方法
1
《化学分析计量》 CAS 2017年第6期59-59,共1页
摘要本发明提供了一种均相时间分辨荧光免疫分析中间体、螯合剂及制备方法,属于荧光免疫分析、有机合成技术领域.该结构利用含氮杂冠醚具有良好的水溶性,且能与联吡啶经过取代反应形成穴状化合物,所述的穴状结构的化合物既能吸收激发光... 摘要本发明提供了一种均相时间分辨荧光免疫分析中间体、螯合剂及制备方法,属于荧光免疫分析、有机合成技术领域.该结构利用含氮杂冠醚具有良好的水溶性,且能与联吡啶经过取代反应形成穴状化合物,所述的穴状结构的化合物既能吸收激发光并传递能量给Eu3＋,又能对Eu3＋有较强的螯合作用;既可增加螯合剂的稳定性和抗干扰性,又可提高螯合剂的水溶性;本发明还提供了一种时间分辨荧光免疫分析螯合剂及其制备方法,螯合剂的激发光谱波长范围较宽为200~380nm,最大的激发光波长为363nm,有效地扩展了其激发范围,并且获得了在不同溶剂中的荧光光谱和荧光寿命. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 制备方法 螯合剂 中间体 均相 有机合成技术 激发光谱 氮杂冠醚
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时间分辨荧光免疫分析仪的校准方法研究
2
作者 周瑾艳 武利庆 +6 位作者 黄彦捷 王晶 黄哲峰 李志雄 孙雅玲 许俊斌 陈玲 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第S01期305-310,共6页
研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准... 研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准项目与技术指标,确定了校准用的仪器设备,设计了完备的校准方案,使时间分辨荧光免疫分析仪的量值准确、可靠、可溯源,为统一相关量值发挥重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光 免疫分析 铕
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纳米均相时间分辨荧光免疫法检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇方法的建立 被引量：10
3
作者 周彬 高雷 +3 位作者 金坚 陈蕴 黄飚 赵卫国 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期338-342,共5页
目的:利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)多克隆抗体,采用纳米均相时间分辨荧光免疫法测定技术(AlphaLISA)建立间接竞争DON定量检测方法。方法:DON-BSA包被发光微粒,生物素化羊抗兔抗体与包被有链霉素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测... 目的:利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)多克隆抗体,采用纳米均相时间分辨荧光免疫法测定技术(AlphaLISA)建立间接竞争DON定量检测方法。方法:DON-BSA包被发光微粒,生物素化羊抗兔抗体与包被有链霉素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果:该方法的灵敏度为0.007ng/mL,检测范围为0.007～100ng/mL,批内批间变异系数均<5%。不同样品添加回收实验:玉米、小麦、啤酒回收率分别为84%～110%、67%～100%、74%～100%。结论:DON-AlphaLISA是目前DON检测中最灵敏的方法之一,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀烯醇 生物毒素 纳米均相时间分辨荧光免疫法(AlphaLISA)
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B型钠尿肽固相时间分辨免疫荧光分析法的建立及其临床应用 被引量：1
4
作者 童华诚 潘世扬 童明庆 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期358-360,共3页
目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立B型钠尿肽(BNP)固相时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA).方法使用2株匹配的单克隆抗体,其中1株可以识别BNP分子C-端区,另1株生物素化单抗能识别分子内环结构,分别作为捕获抗体和... 目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立B型钠尿肽(BNP)固相时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA).方法使用2株匹配的单克隆抗体,其中1株可以识别BNP分子C-端区,另1株生物素化单抗能识别分子内环结构,分别作为捕获抗体和检测抗体,并利用制备的SA-BHHCT-Eu3+作为示踪物,建立双抗体夹心法,检测正常对照组和心功能Ⅰ～Ⅳ级心力衰竭患者组血液BNP含量.结果本法测定BNP的灵敏度为12 pg/ml,批内和批间CV分别为3.9%和5.2%,平均回收率为97.3%,线性范围为20～4 000 pg/ml.对照组(n=110)、心功能Ⅰ级(n=31)、Ⅱ级(n=30)、Ⅲ～Ⅳ级(n=25)各组血浆BNP浓度分别为(69±37)、(84±46)、(346±134)和(932±326)pg/ml;心衰各组BNP水平显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.001).以BNP 100pg/ml为cut off值,诊断心力衰竭(HF)的特异性为82.4%,敏感性为91.6%.结论应用铕螯合物BHHCT建立的固相TrFIA法测定BNP,是一个很好的诊断心衰和监测其严重程度的实验诊断指标. 展开更多
关键词 B型钠尿肽 时间分辨荧光免疫分析 铕螯合物 心力衰竭
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时间分辨荧光免疫分析技术与牦牛肉兽药残留检测研究进展
5
作者 赵维章 黄文颖 +1 位作者 张正英 陈成 《现代畜牧科技》 2024年第11期141-144,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本... 时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本低,检测速度快等诸多优势,因此TRFIA技术为牦牛肉质安全检测开辟一条崭新的检测途径。该文就TRFIA技术及其在牦牛肉质安全检测应用进展做一简要综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 牦牛肉 安全检测 兽药残留
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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用 被引量：12
6
作者 李丽华 白瑞樱 +6 位作者 孙远明 沈玉栋 徐振林 雷红涛 张挺 王弘 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期216-220,共5页
建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。 展开更多
关键词 环丙沙星 时间分辨荧光免疫分析 抗体 添加回收
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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量：13
7
作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页
以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多
关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析法 铕 测定 血清 临床分析 CTTA SAM
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抗HBc时间分辨荧光免疫分析法的建立 被引量：13
8
作者 陈永伟 黄飙 +2 位作者 肖华龙 谭成 朱利国 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期291-292,共2页
目的　用竞争法建立抗HBc时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA)方法。方法　以基因重组HBcAg包被板 ,Eu3 + -异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 (Eu3 + DTTA)标记抗HBc IgG单克隆抗体 ,建立抗HBcTRFIA方法。数据采用Log Logit函数和四参数Logistic... 目的　用竞争法建立抗HBc时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA)方法。方法　以基因重组HBcAg包被板 ,Eu3 + -异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 (Eu3 + DTTA)标记抗HBc IgG单克隆抗体 ,建立抗HBcTRFIA方法。数据采用Log Logit函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。结果　方法的批内和批间变异系数分别为 2 30 %和 6 30 % ,回收率为 96 72 % ,灵敏度为 0 2NCU/ml。本方法与抗HBs和抗HBe无交叉反应 ,Eu3 + 标记物稳定 6个月以上。结论　TRFIA是一种新的抗HBc免疫检测技术 ,具有灵敏度高和稳定性好等优点 ,能够用于定量测定抗HBc 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 抗HBC 测定方法
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时间分辨荧光免疫分析的新进展 被引量：17
9
作者 辛甜甜 郭松林 +2 位作者 王艺磊 冯建军 林鹏 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-118,共7页
对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TR... 对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TRFIA的发展前景进行了展望(引用文献82篇)。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 荧光共振能量转移-TRFIA 酶放大-TRFIA 纳米颗粒-TRFIA
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P-选择素时间分辨荧光免疫分析法的建立及临床应用 被引量：6
10
作者 何杨 赵益明 +2 位作者 沈文红 金坚 阮长耿 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期269-271,共3页
目的　建立时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)用于检测血栓形成相关疾病患者的血浆P 选择素的含量 ,并探讨其临床意义。方法　用抗人血小板单抗SZ 5 1 IgG包被 ,将Eu3+ N (对 异硫氰酸苄基 ) 二乙烯四乙酸与另一个血小板单抗S12连接以... 目的　建立时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)用于检测血栓形成相关疾病患者的血浆P 选择素的含量 ,并探讨其临床意义。方法　用抗人血小板单抗SZ 5 1 IgG包被 ,将Eu3+ N (对 异硫氰酸苄基 ) 二乙烯四乙酸与另一个血小板单抗S12连接以制备Eu3+ S12示踪剂 ,β 二酮为发光增强剂 ,采用平衡饱和法建立时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA)用于分析糖尿病、高血脂、脑梗塞患者及正常人血浆中P 选择素含量的变化 ,并与流式细胞术 (FCM)和酶标记免疫吸附分析法 (ELISA)作比较。结果　方法灵敏度为 0 98ng/ml,批内和批间CV分别为 4 2 3 %和 6 6 7% ,平均回收率为 97 2 4% ,可测范围为 4 1～ 80ng/ml。应用TRFIA测定 2 2例高血脂、18例脑梗塞患者和 2 0例正常人血浆中P 选择素含量 ,分别为 8 0 8± 1 4ng/ml,12 5 1± 3 6ng/ml和19 0 4± 7 9ng/ml,显著高于正常人 (3 0 7± 1 6 4ng/ml) (P <0 0 1)。同时与ELISA和FCM方法检测血浆内P 选择素和血小板膜表面表达情况作比较 ,结果一致。结论　TRFIA检测血浆P 选择素的方法可靠、灵敏、方便 。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 P-选择素 糖尿病 脑梗塞 血栓形成 TRFIA
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T-2毒素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量：9
11
作者 杨润琳 计融 +4 位作者 江涛 汤鲁宏 朱海 李文新 黄飚 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2010年第1期74-76,85,共4页
以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析... 以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立T-2-TRFIA。同时对这一方法的稳定性、灵敏度、回收率和特异性进行考核。此方法灵敏度为0.2μg/L,测量范围0.2～500μg/L,批内变异为7.5%,批间变异为12.7%,平均回收率为89.6%。与赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白无交叉反应。10条不同时间进行的间接竞争T-2-TRFIA的效应点均值ED80、ED50和ED20分别为2.66,6.97,29.11μg/L。同时,用TRFIA和ELISA试剂盒同时检测T-2毒素,在ELISA和TRFIA产品的共同可测范围之内,两者的相关系数为0.926。 展开更多
关键词 T-2毒素(T-2 toxin) 时间分辨荧光免疫分析(TRFIA) 单克隆抗体
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时间分辨荧光免疫分析和放射免疫分析测量精度的比较 被引量：11
12
作者 秦卫仕 田蓉 匡安仁 《同位素》 CAS 2002年第2期115-117,共3页
采用时间分辨荧光免疫分析和放射免疫分析法对血清样品进行分析,对其加样精度、测定精度和系统精度进行了比较。结果表明:①血清加样时,手动加样CV>3.4％,自动加样CV<O.7％,P<0.001;试剂加样时,手动加样CV>1.3％,自动加样CV... 采用时间分辨荧光免疫分析和放射免疫分析法对血清样品进行分析,对其加样精度、测定精度和系统精度进行了比较。结果表明:①血清加样时,手动加样CV>3.4％,自动加样CV<O.7％,P<0.001;试剂加样时,手动加样CV>1.3％,自动加样CV<0.3％,P<0.001。②测量精度,放免法CV=2.4％,时间分辨法CV=0.8％,P<0.001。③系统精度,放免法CV=3.6％,时间分辨法CV=1.3％,P<0.001。以上结果提示:时间分辨荧光免疫分析在加样精度、测定精度和系统精度上都显著优于放射免疫分析。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 放射免疫分析 测量精度 误差
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稀土螯合物探针及其在时间分辨荧光免疫分析中的应用 被引量：15
13
作者 常文保 王敏灿 +1 位作者 张柏林 慈云祥 《大学化学》 CAS 1997年第1期1-6,共6页
本文总结了近年来所用的稀土螯合物探针及其在时间分辨荧光免疫分析中的应用，着重介绍了稀土螯合物探针标记的原理和特点，评述了ＬＫＢ体系和ＣｙｂｅｒＦｌｕｏｒ体系的相对优缺点。
关键词 TRFIA 稀土螯合物 时间分辨 荧光免疫分析 探针
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时间分辨荧光免疫分析技术的研究进展 被引量：17
14
作者 解肖鹏 张雷 《食品与药品》 CAS 2012年第5期203-206,共4页
时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术是新型的以镧系元素螯合物为标记物,测量其发射荧光强度的体外超微量分析技术。因TRFIA法比其他放射免疫分析法具有更高的灵敏度和准确度,近年该技术的应用越来越广泛... 时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术是新型的以镧系元素螯合物为标记物,测量其发射荧光强度的体外超微量分析技术。因TRFIA法比其他放射免疫分析法具有更高的灵敏度和准确度,近年该技术的应用越来越广泛。现从TRFIA的技术原理、反应模式、分析系统等方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 研究进展
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用国产时间分辨荧光免疫分析仪建立检测抗CCP抗体的TrFIA法 被引量：2
15
作者 吴俊渊 谢玮 +3 位作者 朱易华 赵枰 陈彤 曹兴建 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期503-504,共2页
目的用国产时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)仪建立TrFIA法检测IgG类抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP-IgG抗体)。方法以人工合成的环瓜氨酸肽作为抗原包被微孔板,异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合铕(Eu3+-DTTA)标记鼠抗人IgG单克隆抗体,建立TrFIA法,... 目的用国产时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)仪建立TrFIA法检测IgG类抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP-IgG抗体)。方法以人工合成的环瓜氨酸肽作为抗原包被微孔板,异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合铕(Eu3+-DTTA)标记鼠抗人IgG单克隆抗体,建立TrFIA法,分析CCP抗原包被浓度和Eu3+标记抗体最适用量,测定Eu3+标记抗体的标记率,用国产TrFIA仪进行检测,绘制标准曲线并分析本法的线性范围、精密度、特异性,计算回收率。对比分析建立的TrFIA法和欧蒙公司的ELISA法结果的一致率。结果本法CCP抗原的最适包被浓度为5μg/mL,最适Eu3+标记抗体稀释度为1∶1 000;平均每个鼠抗人IgG分子上连接10.27个Eu3+;标准曲线为Y=1.162X+2.819,相关系数(r2)=0.998;批内和批间CV分别为4.8%～5.6%和5.9%～7.6%;平均回收率为97.4%(96.5%～98.6%);用本法检测抗核抗体和抗CCP抗体无交叉反应;与ELISA比对试验结果,两法一致率为96.8%(90/93),Kappa值=0.95。结论建立的TrFIA法敏感性高、特异性好,可为抗CCP抗体的检测提供一种新的选择。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析法 抗环瓜氨酸肽-IgG抗体 类风湿关节炎
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时间分辨荧光免疫分析法测定乙肝HBsAg的临床意义 被引量：8
16
作者 蔡军 刘晓丽 《山西医科大学学报》 CAS 2011年第5期406-408,共3页
目的探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的临床意义。方法分别用TRFIA和ELISA法测定206例我院消化科和感染科病人血清标本的HBsAg的定量及定性结果,并对其中的高、中、低HBsAg浓度标本各20例重新进行两种方... 目的探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的临床意义。方法分别用TRFIA和ELISA法测定206例我院消化科和感染科病人血清标本的HBsAg的定量及定性结果,并对其中的高、中、低HBsAg浓度标本各20例重新进行两种方法的测定并进行比较。结果①206例标本中,血清HBsAg阳性TRFIA法98例,ELISA法85例,两方法差异有统计学意义(χ2=11.08,P<0.01)。两法符合率为93.69%。②高、中浓度标本两法测定HBsAg阳性均为20例,两方法阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。而在低浓度标本中HBsAg阳性TRFIA法20例,ELISA法14例,两方法差异有统计学意义(χ2=4.17,P<0.05),TRFIA法阳性检出率要高于ELISA法。结论采用TRFIA法定量检测HBsAg灵敏度更高,线性范围更宽,在低浓度标本检测中更具优势,更具有临床意义。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 酶联免疫吸附试验 乙肝表面抗原
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时间分辨免疫荧光法分析CEA的条件研究 被引量：1
17
作者 赵启仁 张福华 +5 位作者 刘洁 林汉 李美佳 庄湘莲 陈艾 胡壁 《同位素》 CAS 北大核心 1995年第3期143-147,共5页
报道了应用时间分辨免疫荧光氏分析血清中ＣＥＡ的条件研究。用我们研制的Ｎ￣１－（对－异硫氰基苄基）－二乙三胺－Ｎ￣１，Ｎ￣２，Ｎ￣３，Ｎ￣３－四乙酸铕为螯合剂，用Ｅｕ标记了抗ＣＥＡ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）Ｃ＿（１７）。在... 报道了应用时间分辨免疫荧光氏分析血清中ＣＥＡ的条件研究。用我们研制的Ｎ￣１－（对－异硫氰基苄基）－二乙三胺－Ｎ￣１，Ｎ￣２，Ｎ￣３，Ｎ￣３－四乙酸铕为螯合剂，用Ｅｕ标记了抗ＣＥＡ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）Ｃ＿（１７）。在免疫分析程序中，对包被的ＭｃＡｂ的种类、浓度和封闭时间、第一和第二次反应的温育时间、标记Ｃ＿（１７）的浓度、分析缓冲液等主要实验条件，进行了实验最佳化选择。分析方法的灵敏度为１ｎｇ／ｍｌ。 展开更多
关键词 时间分辨 免疫荧光分析 癌胚抗原 CEA
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甲胎蛋白与CA19-9双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立 被引量：1
18
作者 温柏平 庄宇 代宏剑 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期978-980,共3页
目的建立钐(Sm3+)标记抗甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(单抗)和铕(Eu3+)标记抗糖类抗原19-9(CA19-9)单抗的双标记时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)法。方法将抗AFP单抗与抗CA19-9单抗混合包被96孔板作为捕获抗体,用Sm3+标记抗AFP单抗、Eu3+标记抗... 目的建立钐(Sm3+)标记抗甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(单抗)和铕(Eu3+)标记抗糖类抗原19-9(CA19-9)单抗的双标记时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)法。方法将抗AFP单抗与抗CA19-9单抗混合包被96孔板作为捕获抗体,用Sm3+标记抗AFP单抗、Eu3+标记抗CA19-9单抗作为检测抗体,建立同步检测AFP/CA19-9的TrFIA法。结果建立的TrFIA法检测AFP/CA19-9的灵敏度分别为0.3 ng/mL和2.5 U/mL。AFP分析内和分析间变异系数(CV)分别为2.6%～5.9%和4.3%～8.1%,CA19-9分析内和分析间CV分别为4.9%～5.6%和5.0%～6.3%。分别用建立的TrFIA法与Perkin-Elmer公司解离增强镧系荧光免疫分析(DELFIA)法同时测定血清样本,两法AFP与CA19-9的相关系数分别为0.99与0.98。结论建立的同步检测AFP与CA19-9的TrFIA法灵敏、简便、准确,有助于消化道肿瘤和睾丸癌等的辅助诊断。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 糖类抗原19-9 双标记 时间分辨荧光免疫分析
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总甲状腺素时间分辨荧光免疫分析方法的建立 被引量：4
19
作者 谭玉华 何海荣 +1 位作者 卢顺舵 沈健 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期33-35,共3页
目的建立总甲状腺素（TT4）时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）竞争检测法。方法用羊抗鼠IgG包板，对应的抗T4抗体（Anti-T4）为竞争抑制抗体，用Eu^3＋标记T4-BSA做标记物，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，竞争法TrFIA检测人血清... 目的建立总甲状腺素（TT4）时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）竞争检测法。方法用羊抗鼠IgG包板，对应的抗T4抗体（Anti-T4）为竞争抑制抗体，用Eu^3＋标记T4-BSA做标记物，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，竞争法TrFIA检测人血清中的TT4。结果TT4-TrFIA的灵敏度达6．895nmol／L（1．000nmol／L=0．7778ng／ml）；批内CV为4．12％～5．62％。批间CV为5．58％～8．61％；特异性好；平均回收率为99．16％；线性范围在11．0～300．0nmol／L之间；热稳定性好；与TT4微粒子酶免疫分析技术（MEIA）比对，相关系数达0．9544。结论建立的TT4-TrFIA法具有灵敏度高，特异性强，稳定性好，测定范围宽，检测时间短和非放射性等优点，具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 甲状腺素 时间分辨荧光免疫分析 竞争法
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沙丁胺醇铕标记时间分辨荧光免疫分析方法的建立 被引量：4
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作者 侯文慧 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2016年第7期154-160,共7页
基于抗沙丁胺醇(SAL)的单克隆抗体,初步建立了检测SAL的高灵敏度的时间分辨直接竞争免疫分析法(CDTRFIA)。采用辛酸-硫酸铵纯化抗SAL杂交瘤细胞株腹水单克隆抗体,用稀土离子Eu3+偶联物进行标记,制备铕标抗体;通过合成SAL-SUC半抗原并与... 基于抗沙丁胺醇(SAL)的单克隆抗体,初步建立了检测SAL的高灵敏度的时间分辨直接竞争免疫分析法(CDTRFIA)。采用辛酸-硫酸铵纯化抗SAL杂交瘤细胞株腹水单克隆抗体,用稀土离子Eu3+偶联物进行标记,制备铕标抗体;通过合成SAL-SUC半抗原并与卵清蛋白偶联获得SAL-OVA包被抗原:采用直接竞争的方式,游离SAL和固相SAL-OVA包被原共同竞争有限的铕标SAL单抗,初步建立SAL时间分辨免疫分析方法。研究发现,优化的TRFIA半抑制量IC_(50)为1.6 ng/mL,检测范围为0.39 ng/m L^12.77 ng/mL,最低检测限为0.136 ng/mL。通过对其他常用β-兴奋剂进行交叉反应分析,研究发现建立的TRFIA方法特异选择性高,与克伦特罗的交叉率较小(2.29%),而与莱克多巴胺没有交叉。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 铕标单克隆抗体 时间分辨荧光免疫分析
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