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CYLD信号通路与肿瘤 被引量：5
1
作者 吴俊杰 李强 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第2期152-155,共4页
圆柱瘤基因CYLD编码的蛋白是一种去泛素酶,在人体内广泛分布,可去泛素化TRAFs、NEMO、Bcl-3及p53等信号分子,调控细胞NF-κB和JNK等信号途径,在细胞周期的调控、介导细胞凋亡、抑制肿瘤发生等分子事件中有着重要的调控作用。CYLD基因缺... 圆柱瘤基因CYLD编码的蛋白是一种去泛素酶,在人体内广泛分布,可去泛素化TRAFs、NEMO、Bcl-3及p53等信号分子,调控细胞NF-κB和JNK等信号途径,在细胞周期的调控、介导细胞凋亡、抑制肿瘤发生等分子事件中有着重要的调控作用。CYLD基因缺陷或缺失主要导致头部或面部的皮肤肿瘤,如多发性家族性毛发上皮瘤(MFT),家族性圆柱瘤(FC)和Brooke-Spiegler综合症(BSS),此外,CYLD在宫颈癌、肾癌、结肠癌、肝癌形成的信号途径中也均表现为下游调控。 展开更多
关键词 cyld 圆柱瘤 NF-ΚB C-JUN氨基末端激酶 Bcl-3
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人去泛素化酶圆柱瘤蛋白截短体质粒的构建及其对胃癌细胞表型的调控研究
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作者 那迪娜·帕尔哈提 张鹏善 +2 位作者 徐亦天 陈赟琪 黄陈 《上海交通大学学报(医学版)》 2025年第9期1149-1160,共12页
目的·构建去泛素化酶圆柱瘤蛋白(cylindromatosis,CYLD)截短体质粒,初步分析CYLD对胃癌细胞增殖的影响。方法·收集癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因型-组织表达数据库(Genotype-Tissue Expression,G... 目的·构建去泛素化酶圆柱瘤蛋白(cylindromatosis,CYLD)截短体质粒,初步分析CYLD对胃癌细胞增殖的影响。方法·收集癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因型-组织表达数据库(Genotype-Tissue Expression,GTEx)及Kaplan-Meier Plotter数据库中CYLD在胃癌组织与正常组织中表达数据,以及与胃癌患者总生存期的相关性数据;免疫组织化学和Western blotting法检测胃癌组织与癌旁组织中CYLD的表达情况;Western blotting法和荧光实时定量PCR检测正常胃黏膜上皮细胞与胃癌细胞系中CYLD蛋白和mRNA表达情况。根据CYLD基因序列及结构特点,设计引物,构建其截短体真核表达质粒,琼脂糖凝胶电泳和Western blotting法检测及鉴定其表达情况,免疫荧光(immunofluorescence,IF)观察定位。在AGS细胞中敲低CYLD并且在敲低后分别回补CYLD野生型、酶失活突变型及截短体,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和平板克隆实验检测CYLD野生型、酶失活突变型及截短体对细胞增殖的影响。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)、去泛素化实验、Western blotting法检测CYLD野生型、酶失活突变型及截短体与钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα亚基(calcium/calmodulin dependent protein kinaseⅡα,CAMK2A)的相互结合能力、CAMK2A去泛素化修饰水平及STAT3、p-STAT3蛋白表达情况。结果·胃正常组织中CYLD含量显著高于胃癌组织,正常胃黏膜上皮细胞中CYLD含量显著高于胃癌细胞系,高表达CYLD的胃癌患者预后较好。人CYLD截短体质粒构建成功,CYLD野生型、酶失活突变型以及3个截短体主要定位在细胞质的细胞中。敲低CYLD,AGS细胞增殖能力得到显著增强。而在敲低后分别回补CYLD野生型、酶失活突变型及截短体的细胞中,敲低CYLD后过表达CYLD野生型以及CAP3和USP区段能够显著抑制胃癌细胞的增殖。此外,CYLD能够与蛋白激酶CAMK2A相互结合并介导CAMK2A的K63去泛素化修饰,并且抑制CAMK2A对STAT3蛋白的磷酸化修饰。结论·成功构建人CYLD截短体真核表达质粒,CYLD野生型以及CAP3和USP区段显著抑制胃癌细胞增殖能力。 展开更多
关键词 去泛素化酶 胃癌 圆柱瘤蛋白(cyld) 截短体 增殖 CAMK2A STAT3
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藤黄酸通过CYLD/NF-κB信号通路抑制高糖环境下RPE细胞上皮-间充质转化的作用 被引量：2
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作者 陈晶 庞东渤 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第12期937-941,共5页
目的基于去泛素化酶圆柱瘤蛋白/核因子κB(CYLD/NF-κB)通路,研究藤黄酸(GA)对高糖环境下视网膜色素上皮(RPE)细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用。方法体外培养ARPE-19细胞,高糖诱导,实验分为NC组(含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖),HG组(含3... 目的基于去泛素化酶圆柱瘤蛋白/核因子κB(CYLD/NF-κB)通路,研究藤黄酸(GA)对高糖环境下视网膜色素上皮(RPE)细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用。方法体外培养ARPE-19细胞,高糖诱导,实验分为NC组(含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖),HG组(含30 mmol·L^(-1)葡萄糖),HG+不同剂量GA组(2μmol·L^(-1)、4μmol·L^(-1)、8μmol·L^(-1) GA分别预处理RPE细胞1 h,加30 mmol·L^(-1)葡萄糖)。CCK-8检测各组RPE细胞增殖活力,免疫荧光染色检测RPE细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、去泛素化酶圆柱瘤蛋白(CYLD)表达;Western blot检测RPE细胞中α-SMA、CYLD、磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果与NC组相比,HG组RPE细胞出现明显增殖,RPE细胞中α-SMA、p-NF-κB蛋白表达均增加,CYLD蛋白表达减少(均为P<0.01);与HG组相比,HG+不同剂量GA组RPE细胞增殖均明显受到抑制,RPE细胞中α-SMA、p-NF-κB蛋白表达均减少,CYLD表达均增加(均为P<0.01),且均呈剂量依赖性。结论GA可抑制高糖环境下RPE细胞EMT,其抑制作用与上调CYLD,抑制NF-κB活化有关。 展开更多
关键词 藤黄酸 上皮-间充质转化 高糖 视网膜色素上皮细胞 去泛素化酶圆柱瘤蛋白
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