用固相pH梯度等电聚焦分析Gc蛋白亚型 被引量：1

1

作者 郭尧君 郭强 +1 位作者 黄力力 喻忠义 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第4期356-359,共4页

用固相ｐＨ梯度等电聚焦技术及免疫固定技术对２０１名北京地区无关汉族群体的人血清Ｇｃ蛋白亚型进行了分型鉴定及基因频率的调查．Ｇｃ￣（ｌＦ）为０．３６９８．Ｇｃ￣（ｌｓ）为０．２８１２．Ｇｃ￣２为０．３４９０．观察值与期... 用固相ｐＨ梯度等电聚焦技术及免疫固定技术对２０１名北京地区无关汉族群体的人血清Ｇｃ蛋白亚型进行了分型鉴定及基因频率的调查．Ｇｃ￣（ｌＦ）为０．３６９８．Ｇｃ￣（ｌｓ）为０．２８１２．Ｇｃ￣２为０．３４９０．观察值与期望值吻合良好（Σｘ￣２＝１．０５７，Ｐ＞０．７０） 展开更多

关键词 固相ph梯度 等电聚焦 GC蛋白亚型

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缓冲液成分对固相pH梯度等电聚焦的影响

2

作者 吴闯 《科学技术与工程》 北大核心 2012年第33期9079-9081,9084,共4页

分别从水质、DTT(二硫苏糖醇)含量及含盐缓冲液三个方面对等电聚焦过程进行了对比。通过电学参数变化,研究了三者对聚焦进程的影响。结果表明:高质量的水、低含量的DTT和盐可以缩短聚焦时间,从而提高聚焦质量。可以把电学参数的变化作... 分别从水质、DTT(二硫苏糖醇)含量及含盐缓冲液三个方面对等电聚焦过程进行了对比。通过电学参数变化,研究了三者对聚焦进程的影响。结果表明:高质量的水、低含量的DTT和盐可以缩短聚焦时间,从而提高聚焦质量。可以把电学参数的变化作为优化和控制等电聚焦过程的指标,为正确设计合理的双向电泳实验流程提供依据。 展开更多

关键词 等电聚焦 双向电泳 固相ph梯度 蛋白质组学

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虎纹捕鸟蛛粗毒双向凝胶电泳分析及部分蛋白质点的N端序列测定 被引量：6

3

作者 曹梦林 谢锦云 +2 位作者 李小兰 黄仁槐 梁宋平 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第6期755-758,共4页

采用固相 p H梯度等电点聚焦 - SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对虎纹捕鸟蛛粗毒进行了分析 ,通过考马斯亮蓝与银染法显色 ,电脑软件识别出约 30 0个蛋白质点 .约有 35个含量较高的蛋白质点分布在分子量 1 0 k D以下区域 ,通过印迹法将凝胶... 采用固相 p H梯度等电点聚焦 - SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对虎纹捕鸟蛛粗毒进行了分析 ,通过考马斯亮蓝与银染法显色 ,电脑软件识别出约 30 0个蛋白质点 .约有 35个含量较高的蛋白质点分布在分子量 1 0 k D以下区域 ,通过印迹法将凝胶上蛋白质点转移到 PVDF膜上以后 ,对上述分子量 1 0 k D以下的组分进行了 N端序列测定 ,鉴定到了虎纹捕鸟蛛毒素 HWTX- ,HWTX- ,HWTX- 和 SHL- 1在凝胶上的位置 ,同时发现了 5种新的肽类毒素组分 . 展开更多

关键词 双向电泳 蛋白质组 固相ph梯度 蜘蛛毒 序列测定

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成年和老年小鼠脑蛋白质组双向电泳图谱比较 被引量：19

4

作者 丁勤学 阙海萍 +2 位作者 郭尧君 景书谦 刘少君 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期683-687,共5页

使用双向电泳 (2 DE)比较成年和老年小鼠脑蛋白质差异 ,从分子水平初步探索老年脑蛋白整体变化规律 .以固相 pH梯度等电聚焦为第一向 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶水平电泳 (PAGE)为第二向进行 2 DE .图象分析软件Imagemaster 2DElite分析电... 使用双向电泳 (2 DE)比较成年和老年小鼠脑蛋白质差异 ,从分子水平初步探索老年脑蛋白整体变化规律 .以固相 pH梯度等电聚焦为第一向 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶水平电泳 (PAGE)为第二向进行 2 DE .图象分析软件Imagemaster 2DElite分析电泳图谱 .重复性实验结果显示 ,同组样品在三次不同实验中所得蛋白质斑点数目的相对标准差 (变异系数 )为 4 43%± 0 2 5 % ;同一蛋白质斑点在三次实验中等电点、分子质量和蛋白质量的相对标准差分别为 8 76 %± 5 14% ,13 0 0 %± 4 2 2 %和 10 84%± 9 16 % .成年和老年小鼠脑组织 2 DE图谱分别获得 996和 12 5 6个蛋白质斑点 ,其中 8个蛋白质在老年脑组织中含量降低 ,2 0个蛋白质斑点含量增加 .另至少有 4个蛋白质斑点在老年脑组织中缺失 ,14个蛋白质点为老年脑特有 . 展开更多

关键词 老年 脑蛋白 固相ph梯度 双向电泳图谱 蛋白质组 成年 小鼠 脑老化 功能退变

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不同功能性寡糖组合对锦江黄牛瘤胃固相微生物多样性的影响 被引量：7

5

作者 闵力 瞿明仁 +2 位作者 戈婷婷 钟志勇 刘立恒 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期769-774,共6页

研究功能性寡糖组合对锦江黄牛的瘤胃固相微生物多样性的影响。选择3头健康且体重相近的安装有永久性瘤胃瘘管的锦江黄牛,采用自身对照方法,试验分3期进行,第1期:对照期,饲喂基础日粮,不添加任何寡糖;第2期:GT1添加期,饲喂基础日粮+0.8... 研究功能性寡糖组合对锦江黄牛的瘤胃固相微生物多样性的影响。选择3头健康且体重相近的安装有永久性瘤胃瘘管的锦江黄牛,采用自身对照方法,试验分3期进行,第1期:对照期,饲喂基础日粮,不添加任何寡糖;第2期:GT1添加期,饲喂基础日粮+0.8%甘露寡糖+1.0%果寡糖+0.8%大豆寡糖,第3期:GT2添加期,饲喂基础日粮+0.8%甘露寡糖+1.20%果寡糖+1.0%大豆寡糖,每期持续14 d。利用PCR-DGGE方法进行分析牛瘤胃固相微生物PCR-DGGE图谱条带数及相似性。结果发现:添加功能性寡糖组合后,对锦江黄牛瘤胃固相微生物PCR-DGGE图谱条带数影响不明显。3头牛3个试验期DGGE图谱的相似度较高。对锦江黄牛瘤胃液相微生物多样性影响有待下一步研究。 展开更多

关键词 功能性寡糖组合 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 锦江黄牛 瘤胃固相微生物 多样性

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一种新的双向电泳蛋白样品制备方法 被引量：1

6

作者 李小兰 谢大兴 +7 位作者 肖徽 吴剑宏 姚静 冯永东 陶德定 刘双又 胡俊波 龚建平 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期662-664,共3页

目的探讨双向凝胶电泳(2-DE)样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例,采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组,并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-D PAGE图谱的比较分析,发现采... 目的探讨双向凝胶电泳(2-DE)样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例,采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组,并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-D PAGE图谱的比较分析,发现采用8 mol/L Urea,2 mol/L Thiourea,4%CHAPS,1%NP-40,4%TritonX-100,65 mmol/L DTT,0.5 mmol/L PMSF,0.5%pharmalyte 3-10,能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品,从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。 展开更多

关键词 蛋白质组 双向电泳 固相ph梯度 MOLT-4细胞

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两种大肠癌转移性细胞株双向电泳图谱的初步分析 被引量：1

7

作者 梁莉 丁彦青 +3 位作者 李欣 江培洲 李雪华 张进华 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第1期18-21,共4页

目的初步分析大肠癌转移过程中差异表达的蛋白质,为阐述大肠癌转移的分子机制提供线索。方法以一对来自同一亲本、转移能力不同的人大肠癌细胞株SW620和SW480为实验对象,利用双向电泳技术(two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE),建... 目的初步分析大肠癌转移过程中差异表达的蛋白质,为阐述大肠癌转移的分子机制提供线索。方法以一对来自同一亲本、转移能力不同的人大肠癌细胞株SW620和SW480为实验对象,利用双向电泳技术(two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE),建立并优化两种细胞株的蛋白表达图谱;之后利用Melanieш软件分析与大肠癌转移相关的差异表达蛋白点。结果两种细胞株的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性;采用了非线性pH3-10及重叠窄范围的固相pH梯度胶条,提高了2-DE图谱的分辨率;初步选择11个差异表达蛋白点。结论非线性及重叠窄范围的固相pH梯度胶条可改善2-DE中蛋白分离的效果,初步分离的差异蛋白点为进一步鉴定大肠癌转移相关蛋白及建立大肠癌转移性细胞株的2-DE数据库奠定了基础。 展开更多

关键词 转移 大肠癌 双向电泳 非线性梯度 重叠窄范围的固相ph梯度胶条

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双向电泳应注意的几个关键问题 被引量：10

8

作者 王凤茹 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第6期62-64,共3页

着重介绍双向电泳的关键技术,如样品的提取,电泳条件的选择及双向电泳中应注意的关键问题等,为蛋白组学工作者提供可以借鉴的方法和经验。

关键词 蛋白组 双向电泳 固相ph梯度等电聚焦 SDS-PAGE

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好氧堆肥高温期纤维素酶活及β-glucosidase GH1家族阳性微生物群落的相关研究 被引量：2

9

作者 李洪涛 许修宏 +3 位作者 卢新颖 徐莹 吕盈 李欣 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期119-124,共6页

以固相酶活试验方法检测牛粪-稻草堆肥高温期的CMC酶活性和β-葡萄糖苷水解酶活性,分析结果表明,两种酶活变化存在相关性,并受堆肥过程中的理化因素影响。设计简并引物,应用PCR-DGGE技术对β-葡萄糖苷水解酶GH1家族阳性的微生物群落的组... 以固相酶活试验方法检测牛粪-稻草堆肥高温期的CMC酶活性和β-葡萄糖苷水解酶活性,分析结果表明,两种酶活变化存在相关性,并受堆肥过程中的理化因素影响。设计简并引物,应用PCR-DGGE技术对β-葡萄糖苷水解酶GH1家族阳性的微生物群落的组成,及其时空分布进行研究,试验结果显示β-葡萄糖苷水解酶相关的功能性微生物群落在堆肥的进程中存在演替现象。 展开更多

关键词 堆肥 固相酶活试验 变性梯度凝胶电泳(DGGE) β-葡萄糖苷水解酶

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侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的蛋白质差异表达谱的建立(英文) 被引量：4

10

作者 刘志雄 刘运生 +3 位作者 方文华 陈委 李萃 肖志强 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期569-575,共7页

目的:建立分辨率高和重复性好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出其差异表达的蛋白质。方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的总蛋白质,凝胶经银染显色后,运用ImageMaster 2D图像分... 目的:建立分辨率高和重复性好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出其差异表达的蛋白质。方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的总蛋白质,凝胶经银染显色后,运用ImageMaster 2D图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)及数据库搜索鉴定部分差异蛋白质点。结果:得到了分辨率较高、重复性较好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱,将同一侵袭性垂体腺瘤组织和非侵袭性肿瘤组织分别进行了3次双向凝胶电泳,3块凝胶的蛋白质点数分别为1080±24和1035±28,匹配点数分别为975±45和918±56,匹配率分别达90.3%和88.7%。同一组织的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦(IEF)方向的偏差是(1.563±0.259)mm,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方向上的偏差为(1.088±0.206)mm。比较分析侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤凝的双向凝胶电泳图谱,发现两者间的99个表达有明显差异的蛋白质点。初步对其中30个差异蛋白质点进行了肽质量指纹图分析,鉴定出一些与细胞周期调控、信号转导等有关的蛋白质。结论:建立了分辨率较高且重复性较好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出一些侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤之间差异表达的蛋白质,为进一步筛选侵袭性垂体腺瘤的蛋白质表达数据库提供了基础。 展开更多

关键词 垂体腺瘤 侵袭性与非侵袭性 固相ph梯度双向凝胶电泳 MALDI-TOF-MS 蛋白质组

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中药益气解毒颗粒对鼻咽癌裸鼠移植瘤蛋白质表达的影响 被引量：12

11

作者 唐发清 田道法 +5 位作者 邓富良 龚志君 周辉 梁湘辉 李茂玉 肖志强 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期577-582,共6页

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法 :将鼻咽癌细胞系HNE1接种至BABL/c裸小鼠 ,2 0只 ,每只 0 .5× 10 7个 ,待移植瘤生长至一定大小 (约 1cm× 1cm× 1cm) ,随机分为两组。中药... 目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法 :将鼻咽癌细胞系HNE1接种至BABL/c裸小鼠 ,2 0只 ,每只 0 .5× 10 7个 ,待移植瘤生长至一定大小 (约 1cm× 1cm× 1cm) ,随机分为两组。中药组灌喂益气解毒颗粒药液 ,对照组灌喂生理盐水 ,30d后处死裸鼠 ,解剖获取肿瘤组织 ,测量瘤体体积大小 ,称量瘤体重量。取 10 0mg瘤体组织 ,常规提取总蛋白质 ,用固相 pH梯度双向凝胶电泳分离移植瘤组织的总蛋白质 ,银染显色 ,ImageMaster 2DElite 4 .0 1软件分析差异蛋白质点。随机选取表达差异点共 19个 ,4个点为只在中药组表达 ,4个点仅在对照中表达 ,余下 11个为表达相差 5倍以上的点 ,进行质谱鉴定和生物信息学分析。结果 :益气解毒颗粒药液能明显抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长 ,灌喂中药组瘤体积和重量分别为 (0 .2 0 7± 0 .0 2 3)cm3和 (0 .132± 0 .0 2 1) g ,对照组为 (1.342± 0 .2 98)cm3 和 (1.0 17± 0 .0 15 ) g(P <0 .0 5 ) ;制率为 84 .5 8%。双向电泳图像分析蛋白质表达 ,益气解毒颗粒药物处理组平均蛋白质数为 5 6 7± 4 9,未处理组的平均蛋白质数为 6 79± 5 9;差异蛋白质有 2 4 3个 ,其中有 112个表达增强 ,有 131蛋白质表达下降 ;差异蛋白质的质谱鉴定和生物? 展开更多

关键词 益气 解毒 中药 瘤体 裸鼠移植瘤 药组 蛋白质表达 蛋白质 固相ph梯度 特异表达

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