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嗜盐芽孢杆菌果胶裂解酶的重组表达、性质表征及在低次烟叶提质中的应用
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作者 汪季涛 王浩军 +5 位作者 边文杰 张福建 董洪旭 高丽伟 张鹏 沈忱 《中国烟草学报》 北大核心 2025年第4期90-100,共11页
为获得能够降低烟叶杂气、提升烟叶品质的微生物酶资源,以烟叶为材料筛选具有果胶裂解功能的细菌,使用毕赤酵母异源表达了该细菌的果胶裂解酶基因,研究了其酶学性质和对烟叶品质的影响。结果表明:筛选到一株产果胶裂解酶的细菌,经鉴定... 为获得能够降低烟叶杂气、提升烟叶品质的微生物酶资源,以烟叶为材料筛选具有果胶裂解功能的细菌,使用毕赤酵母异源表达了该细菌的果胶裂解酶基因,研究了其酶学性质和对烟叶品质的影响。结果表明:筛选到一株产果胶裂解酶的细菌,经鉴定为嗜盐芽孢杆菌(Bacillus halotolerans),将其果胶裂解酶PelHA重组于毕赤酵母细胞中进行表达;PelHA的最适反应温度为50℃,最适反应pH为10.0,在30℃~40℃、pH 9.0~11.5的范围内稳定性良好,1 mM Ca^(2+)可以显著激发PelHA的酶活力,而Cu^(2+)、Co^(2+)、Fe^(3+)、Mn^(2+)4种金属离子以及EDTA、SDS和β-巯基乙醇等化学试剂对PelHA有明显抑制作用;PelHA的Km和Vm分别为85.25 mg/mL、0.47μmol/mL/min;经PelHA处理的烟叶中酸类、醇类、酯类等香气总体含量上升,酚类物质和含氮杂环类物质总体含量减少。经PelHA处理烟叶的卷烟制品香气质量更为优越,杂气、刺激性减少,香气浓度、劲头增加。为实现烟叶用果胶裂解酶自主化打下基础。 展开更多
关键词 果胶裂解酶 嗜盐芽孢杆菌 重组表达 稳定性 香气
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海洋来源嗜盐芽孢杆菌B7抗菌肽的分离及性质研究
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作者 严鹤松 李婵娟 徐钊 《饲料研究》 2025年第14期113-118,共6页
试验旨在分离海洋来源嗜盐芽孢杆菌B7的抗菌肽,并探究其理化性质。通过硫酸铵盐析、凝胶过滤层析纯化获得目标抗菌肽,分析其理化性质、抗菌谱及作用机制。结果显示,嗜盐芽孢杆菌B7抗菌肽具有广泛的抗菌活性,对多种动物病原菌具有显著的... 试验旨在分离海洋来源嗜盐芽孢杆菌B7的抗菌肽,并探究其理化性质。通过硫酸铵盐析、凝胶过滤层析纯化获得目标抗菌肽,分析其理化性质、抗菌谱及作用机制。结果显示,嗜盐芽孢杆菌B7抗菌肽具有广泛的抗菌活性,对多种动物病原菌具有显著的抑制作用。嗜盐芽孢杆菌B7抗菌肽在pH值4.5~10.5内表现出较强的抑菌活性,100℃加热处理20 min后仍保留25%的活性;对胰蛋白酶和胃蛋白酶具有较高的耐受性,但对蛋白酶K较为敏感;对恶臭假单胞菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为12.89和206.14 mg/L。透射电镜结果显示,嗜盐芽孢杆菌B7抗菌肽可破坏细菌的细胞壁和细胞膜的完整性,导致内容物泄漏。研究表明,海洋来源嗜盐芽孢杆菌B7抗菌肽的广谱性、pH值适应性、耐热性和蛋白酶耐受性符合饲料工业的需求。 展开更多
关键词 嗜盐芽孢杆菌 抗菌肽 分离纯化 理化性质
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蓝色温和凝胶双向电泳用于分析嗜盐菌质膜蛋白复合物 被引量:1
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作者 刘晓宇 李亮 +2 位作者 赵昕 程彦伟 张炜 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第5期558-567,共10页
为了揭示细胞对盐胁迫渗透适应的分子机制,以新鉴定的中度嗜盐芽孢杆菌Bacillussp.I121为实验材料,分析了该嗜盐菌质膜上的盐胁迫响应蛋白.为此,通过蓝色温和凝胶双向电泳(BN/SDS-PAGE)对纯化的质膜组分进行了差异蛋白质组学研究.经MALD... 为了揭示细胞对盐胁迫渗透适应的分子机制,以新鉴定的中度嗜盐芽孢杆菌Bacillussp.I121为实验材料,分析了该嗜盐菌质膜上的盐胁迫响应蛋白.为此,通过蓝色温和凝胶双向电泳(BN/SDS-PAGE)对纯化的质膜组分进行了差异蛋白质组学研究.经MALDI-TOF/TOF质谱分析,鉴定了8个盐胁迫响应蛋白.盐胁迫诱导上调表达的蛋白质包括ABC型转运蛋白、3-磷酸甘油透性酶、嘧啶核苷转运蛋白和甲酸脱氢酶,下调表达的蛋白质包括琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)铁硫亚基、黄素蛋白亚基、细胞色素b556亚基以及分子伴侣DnaJ的同源蛋白;酶活力测定结果表明胁迫条件下上述蛋白质的活性变化与表达量变化相一致.这些蛋白质中绝大多数属于高度疏水的跨膜蛋白,主要负责物质跨膜运输及能量代谢.上述结果表明,中度嗜盐菌Bacillus sp.I121可通过加快跨膜物质运输,同时抑制TCA循环完成盐胁迫条件下相容性溶质脯氨酸和四氢嘧啶的合成与积累.也进一步证明,蓝色温和凝胶双向电泳不仅可用于线粒体、叶绿体中蛋白质复合物的分析,也同样适用于细胞质膜上高度疏水蛋白复合物的比较研究. 展开更多
关键词 嗜盐芽孢杆菌 相容性溶质 质膜 蛋白质复合物 蓝色温和凝胶电泳
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