人原代呼吸道上皮细胞培养及抗呼吸道合胞病毒活性 被引量：1

1

作者 丁惠如 赵敏 +5 位作者 程宁宁 付远辉 彭向雷 虞结梅 郑妍鹏 何金生 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期20-25,共6页

为建立人原代呼吸道上皮细胞(Human airway epithelial cell,hAEC)的培养方法,并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)活性及其机制,从而构建可用... 为建立人原代呼吸道上皮细胞(Human airway epithelial cell,hAEC)的培养方法,并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)活性及其机制,从而构建可用于RSV药物筛选及药效评价的细胞模型。采集人呼吸道上皮细胞样本,分离细胞后建立hAEC的培养方法,并进行细胞形态和活力鉴定;在hAEC体系上检测小分子化合物RSV-A-4和6-MMPr的抗RSV活性及其细胞毒性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)与Time-of-addition assay技术,探讨RSV-A-4和6-MMPr的抑制RSV复制的作用机制。培养的hAEC经鉴定:其体外培养存活率可达93.51%;RSV-A-4和6-MMPr的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为(207.30±4.77)μmol/L和(3191.00±6.11)μmol/L,6-MMPr的半数细胞毒性浓度(Half maximal cytotoxic concentration,CC_(50))为(95526.00±10.97)μmol/L,而RSV-A-4对hAEC未见明显细胞毒性;RSV-A-4和6-MMPr均在RSV病毒基因组复制阶段抑制RSV复制。成功建立可用于抗RSV药物筛选及体外评价的hAEC培养体系,RSV-A-4和6-MMPr在细胞水平均能有效抑制RSV复制。 展开更多

关键词 人原代呼吸道上皮细胞 呼吸道合胞病毒 抗病毒化合物 抗病毒活性 抗病毒机制

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于人呼吸道上皮细胞炎症模型的连翘提取物抗炎活性实验研究 被引量：24

2

作者 刘建洲 张立伟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1248-1253,1265,共7页

通过复制LPS诱导的BEAS-2B炎症模型，探讨连翘提取物对炎症反应中炎性因子分泌的作用。采用MTT法检测BEAS-2B细胞活力，筛选连翘乙醇提取物（FSEE）、60%连翘酯苷A（60% FTA）、90%连翘酯苷A（90% FTA）最佳给药浓度；采用倒置显微镜观... 通过复制LPS诱导的BEAS-2B炎症模型，探讨连翘提取物对炎症反应中炎性因子分泌的作用。采用MTT法检测BEAS-2B细胞活力，筛选连翘乙醇提取物（FSEE）、60%连翘酯苷A（60% FTA）、90%连翘酯苷A（90% FTA）最佳给药浓度；采用倒置显微镜观察连翘提取物对细胞作用后的细胞形态；采用Griess Reagent法检测细胞培养上清NO含量；流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的水平。毒性试验结果表明，连翘提取物浓度小于128 μg/mL时，对BEAS-2B细胞没有产生毒性；浓度在128-256 μg/mL时，60% FTA与90% FTA均表现出对细胞的毒性。抗炎结果表明，在给药浓度设置为25、50、100 μg/mL时，三种提取物均表现出减少NO分泌的效果（P〈0.01），90% FTA组存在剂量依赖关系；三种提取物可显著降低LPS诱导的BEAS-2B细胞胞内活性氧的水平（P〈0.05），且呈量效关系。另外，FSEE、60% FTA、90% FTA组间的治疗效果也逐渐增强。由此得出，90% FTA为连翘提取物抗炎作用的主要活性部位，其抗炎活性成分可能为连翘酯苷A，这将为连翘抗炎活性的进一步研究提供基础。 展开更多

关键词 连翘提取物 连翘酯苷A 呼吸道上皮细胞 炎症模型 LPS

在线阅读 下载PDF 职称材料

纳米氧化锌对人呼吸道上皮细胞白细胞介素-8表达的影响 被引量：4

3

作者 徐磊 燕贞 +4 位作者 吴卫东 张功员 张巧 姚武 吴逸明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第1期39-42,共4页

目的:探讨纳米氧化锌对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及肺泡上皮细胞(A549)内炎症相关因子白细胞介素-8(IL-8)表达的影响。方法:以BEAS-2B及A549细胞作为靶细胞,应用荧光定量PCR技术及ELISA法检测分析不同剂量纳米氧化锌(0、1、2和4μg/cm2... 目的:探讨纳米氧化锌对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)及肺泡上皮细胞(A549)内炎症相关因子白细胞介素-8(IL-8)表达的影响。方法:以BEAS-2B及A549细胞作为靶细胞,应用荧光定量PCR技术及ELISA法检测分析不同剂量纳米氧化锌(0、1、2和4μg/cm2)对细胞内IL-8mRNA和蛋白表达的影响。结果:纳米氧化锌作用2、4h,BEAS-2B细胞中IL-8mRNA及蛋白的表达随纳米氧化锌作用剂量的升高而升高(mRNA:F分别为31.985、54.648,P均<0.001;蛋白:F分别为128.686、65.486,P均<0.001);A549细胞中IL-8mRNA及蛋白的表达亦随纳米氧化锌作用剂量的升高而升高(mRNA:F分别为37.652、9.173,P均<0.01;蛋白:F分别为127.299、76.354,P均<0.001)。结论:纳米氧化锌可提高人支气管和肺泡上皮细胞内IL-8mRNA及蛋白的表达水平。 展开更多

关键词 纳米氧化锌 白细胞介素-8 呼吸道上皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的作用 被引量：1

4

作者 张志红 Henk F.Kauffman +2 位作者 Jacobien Noordhoek 赵卉 刘荣玉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第4期334-337,共4页

目的研究烟曲霉菌菌丝片段和孢子对气道上皮细胞的作用。方法烟曲霉菌菌丝片段和照射灭活的孢子分别与气道上皮细胞系A549共培养,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测A549细胞释放到培养液内的白细胞介素(IL)-6和IL-8。结果菌丝片段刺激A549细... 目的研究烟曲霉菌菌丝片段和孢子对气道上皮细胞的作用。方法烟曲霉菌菌丝片段和照射灭活的孢子分别与气道上皮细胞系A549共培养,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测A549细胞释放到培养液内的白细胞介素(IL)-6和IL-8。结果菌丝片段刺激A549细胞产生有限的IL-6、IL-8;孢子抑制A549释放IL-6。结论烟曲霉菌菌丝片段和孢子被吸入气道后,致少量细胞因子甚至抑制细胞因子产生,不能使足够的炎症细胞向局部趋化,逃避吞噬,长期存活、芽生、释放大量过敏原。 展开更多

关键词 烟曲霉菌 呼吸道上皮细胞 酶联免疫吸附实验 炎症细胞 细胞培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

丙酸氟替卡松对呼吸道上皮细胞基因表达的不同作用 被引量：2

5

作者 沙泉 Robert P.Schleimer 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期67-70,共4页

目的呼吸道上皮细胞在固有免疫和炎症反应中都扮演重要角色。本文旨在研究强效吸入型糖皮质激素丙酸氟替卡松(FP)对双链RNA(dsRNA,Toll样受体3的配体)刺激的呼吸道粘膜上皮细胞BEAS-2B产生的某些固有免疫相关蛋白和炎性细胞因子的作用... 目的呼吸道上皮细胞在固有免疫和炎症反应中都扮演重要角色。本文旨在研究强效吸入型糖皮质激素丙酸氟替卡松(FP)对双链RNA(dsRNA,Toll样受体3的配体)刺激的呼吸道粘膜上皮细胞BEAS-2B产生的某些固有免疫相关蛋白和炎性细胞因子的作用。方法FP(10-7mol.L-1)作用于BEAS-2B 2 h后,加入dsRNA 25 mg.L-1继续培养18 h,提取细胞RNA和收集细胞培养上清液。实时定量PCR测定炎性细胞因子IL-8、GM-CSF、IL-1β和固有免疫蛋白血清淀粉样蛋白(SAA)、补体B因子、分泌性白细胞蛋白酶抑制物(SLPI)的mRNA含量;ELISA分析上清液中IL-8、GM-CSF、SAA蛋白水平。结果BEAS-2B细胞在dsRNA刺激后,IL-8、GM-CSF、IL-1β、SAA、补体B因子、SLPI的mRNA均增高。FP预处理的细胞,在dsRNA刺激后,SAA、补体B因子、SLPI的mRNA水平不降低,IL-8、GM-CSF、IL-1β的mRNA水平明显降低。IL-8、GM-CSF、SAA的ELISA分析证实了mRNA的试验结果。结论FP在强效抗炎的同时,并不损伤呼吸道上皮局部的固有免疫。 展开更多

关键词 吸入型糖皮质激素 丙酸氟替卡松 固有免疫 炎性细胞因子 呼吸道上皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

呼吸道上皮细胞与致病菌相互作用——上皮细胞内吞细菌实验研究

6

作者 吴琦 周敏燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1658-1659,共2页

目的:呼吸道上皮细胞在防御这类机会致病菌感染时发挥了重要的作用.本研究旨在探讨上皮细胞能否清除胞内的绿脓杆菌,胞内模式识别受体Nods蛋白家族是否参与胞内杀菌,防御素是否能通过促经克雷伯杆菌粘附到上皮细胞而被上皮细胞内在化而... 目的:呼吸道上皮细胞在防御这类机会致病菌感染时发挥了重要的作用.本研究旨在探讨上皮细胞能否清除胞内的绿脓杆菌,胞内模式识别受体Nods蛋白家族是否参与胞内杀菌,防御素是否能通过促经克雷伯杆菌粘附到上皮细胞而被上皮细胞内在化而清除. 展开更多

关键词 呼吸道上皮细胞 细胞内吞 致病菌感染 实验研究 细菌 相互作用 TRITONX-100 平板菌落计数法 ELISA检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

维生素A对呼吸道上皮细胞线粒体功能的作用机制 被引量：1

7

作者 张轩 侯静 +4 位作者 曹海霞 黄登亮 张耀刚 袁馥梅 马艳艳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1126-1131,共6页

目的维生素A(VA)能够促进呼吸道上皮细胞增殖.分化,但作用机制尚不明确,文章旨在探索VA是否通过调控线粒体功能影响人正常主支气管上皮细胞生长代谢以及初步的作用机制。方法采用CCK-8检测VA对细胞增殖及毒性影响并结合VA缺乏的诊断标... 目的维生素A(VA)能够促进呼吸道上皮细胞增殖.分化,但作用机制尚不明确,文章旨在探索VA是否通过调控线粒体功能影响人正常主支气管上皮细胞生长代谢以及初步的作用机制。方法采用CCK-8检测VA对细胞增殖及毒性影响并结合VA缺乏的诊断标准确定VA给药量,将人主支气管上皮细胞分为4组,即对照组、VA-0.1 mg/L组、VA-0.5 mg/L组、VA-2 mg/L组,培养24.48 h。采用细胞能量代谢仪检测不同浓度VA对细胞线粒体有氧代谢的影响;qPCR分析细胞线粒体DNA拷贝数及线粒体自噬相关P62基因表达水平。结果VA处理HNTEC细胞24h后线粒体耗氧量相较于对照组增高,处理浓度为0.5mg/L时细胞线粒体耗氧量最高、ATP生成最多、最大呼吸潜能最高、质子漏增加;处理48h,0.1.0.5 mg/L处理组的结果与24h-致。VA-0.5 mg/L组、VA-2 mg/L组24 h线粒体拷贝数(328 333.00±66 583.28、3553 333.00±262 742.00)较对照组(2813 333.00±40 414.52)和VA-0.1 mg/L(2953 333.00±40 414.52)明显升高(P<0.01);VA-2 mg/L组.VA-0.5 mg/L组24 h线粒体拷贝数较VA-0.1 mg/L组明显升高(P<0.01);VA-2 mg/L组24 h线粒体拷贝数较VA-0.5 mg/L组明显升高(P<0.05)。VA-0.1 mg/L组48 h线粒体拷贝数(8475715.00+44489.78)较对照组(8331 365.00±5 435.18)明显升高(P<0.01);VA-2 mg/L组.VA-0.5 mg/L组48 h线粒体拷贝数较VA-0.1 mg/L组明显降低(P<0.01);VA-2 mg/L组48 h线粒体拷贝数较VA-0.5 mg/L组明显降低(P<0.01)。VA处理24.48 h后,P62基因的表达较对照组明显升高,且随着VA浓度的增加而增加.差异有统计学意义(P<0.01),但在48h,干预浓度为2mg/L较0.5mg/L P62基因表达稍降低(P<0.05)。结论VA可以通过降低线粒体自噬及增加线粒体DNA拷贝数影响呼吸道上皮细胞线粒体功能。 展开更多

关键词 维生素A 呼吸道上皮细胞 线粒体能量代谢 线粒体DNA拷贝数 自噬

在线阅读 下载PDF 职称材料

H5N1禽流感病毒诱导哺乳动物呼吸道上皮细胞凋亡 被引量：1

8

作者 Daidoji T 孙艳明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第3期24-24,共1页

近年来,高致病性禽流感病毒H5N1已引起了全世界范围内对全球流感大流行的高度关注,但对流感病毒H5N1的生物学发病机制的研究还存在很大空白。为了阐明禽流感病毒H5N1的发病机制,研究人员准备了12月龄猪肺泡组织上皮细胞,并测定了3株H5... 近年来,高致病性禽流感病毒H5N1已引起了全世界范围内对全球流感大流行的高度关注,但对流感病毒H5N1的生物学发病机制的研究还存在很大空白。为了阐明禽流感病毒H5N1的发病机制,研究人员准备了12月龄猪肺泡组织上皮细胞,并测定了3株H5型禽流感病毒(A/Crow/Kyoto/53/2004[H5N1],A/Duck/Hong Kong/342/78[H5N2],A/Duck/Hong Kong/820/80[H5N3])的生长动力学曲线,由此引起细胞病变,尽管所有3株病毒在鸡胚胎成纤维细胞可以引起类似细胞病变,但H5N1型病毒却可强烈诱导猪肺泡上皮细胞(pAEpC)的细胞凋亡。3株病毒在pAEpC内的增长和繁殖有相似之处。与此相反,只有在禽流感病毒H5N1感染的pAEpC细胞内才能检测到TUNEL阳性细胞,并且半光氨酸酶3、8和9的活性在禽流感病毒H5N1感染的pAEpC细胞内均显著升高,在禽流感病毒H5N2和H5N3感染的细胞内没有发现该现象。这些结果表明,只有H5N1型禽流感病毒诱导pAEpC的细胞凋亡。H5N1型禽流感病毒致病性在增加半光氨酸酶抑制剂Z-VAD-FMK后受到抑制;然而在病毒生长或释放子代病毒方面无显著差异。采用反向遗传学技术进一步研究结果表明,H5N1禽流感病毒HA蛋白在感染的pAEpC细胞中对半光氨酸酶依赖的细胞凋亡起着关键作用。H5N1病毒特异性的细胞病变在人类主要呼吸道上皮细胞中也可观察到。综上数据表明,禽流感病毒H5N1由于诱导细胞凋亡而导致哺乳动物呼吸道上皮细胞大量的细胞死亡。 展开更多

关键词 禽流感病毒H5N1 呼吸道上皮细胞 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

MBL在绵羊呼吸道上皮细胞抗肺炎支原体感染过程中的机制探讨

9

作者 袁聪 古丽汗.阿不都热木 +3 位作者 王开胜 梁艳萍 翟梦婷 赵宗胜 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第6期-,共6页

为了探究甘露糖结合凝集素(MBL)对绵羊呼吸道黏膜上皮细胞抵御绵羊肺炎支原体(MO)感染的作用,本研究从绵羊血清中提取天然MBL蛋白,将绵羊呼吸道黏膜上皮细胞分4组,分别处理为:接种MO前细胞培养基中添加MBL蛋白;接种MO后细胞培养基中添加... 为了探究甘露糖结合凝集素(MBL)对绵羊呼吸道黏膜上皮细胞抵御绵羊肺炎支原体(MO)感染的作用,本研究从绵羊血清中提取天然MBL蛋白,将绵羊呼吸道黏膜上皮细胞分4组,分别处理为:接种MO前细胞培养基中添加MBL蛋白;接种MO后细胞培养基中添加MBL蛋白;接种MO后继续细胞培养;正常培养。采用荧光定量PCR的方法,对各组细胞MBL、C3、ICAM-1、IL-6、SBD-1基因的表达量进行研究。结果显示:与对照组相比,其他组细胞密度均减少,且MBL、C3基因的表达量显著下降(P<0.05),同时ICAM-1、IL-6基因的表达量显著升高(P<0.05);接种MO前加入MBL的细胞ICAM-1基因的表达量相对其他组显著升高(P<0.05),且其SBD-1基因表达量极显著升高(P<0.01)。被MO感染的各组细胞均产生免疫应答,在感染前加入MBL组细胞的免疫应答更强烈,该过程或有ICAM-1和SBD-1参与。 展开更多

关键词 甘露聚糖结合凝集素 绵羊肺炎支原体 绵羊呼吸道黏膜上皮细胞 实时荧光定量PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

副猪格拉瑟菌5型细胞致死性膨胀毒素CdtB破坏猪呼吸道上皮屏障的机制

10

作者 陈敏 刘明星 +2 位作者 张鹏云 蔺辉星 范红结 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期304-316,共13页

旨在探究副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障引起系统性感染的机制。通过超速离心和密度梯度离心提取副猪格拉瑟菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs),OMVs经SDS-PAGE显示,蛋白质条带分布在55~100 ku,... 旨在探究副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障引起系统性感染的机制。通过超速离心和密度梯度离心提取副猪格拉瑟菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs),OMVs经SDS-PAGE显示,蛋白质条带分布在55~100 ku,经透射电子显微镜(TEM)观察,OMVs的粒径在100~200 nm,纳米粒子直径分析(NTA)结果显示,样品在100~200 nm处的粒子数目最多。进而用制备的HbpA及OmpP2多克隆抗体对OMVs及不含OMVs的细菌上清进行Western blot验证,证实所提取的样品为外膜囊泡,且进一步结果证明细胞致死性膨胀毒素(CDT)在GPS培养物中主要以OMVs的形式存在。用OMVs或CdtB处理猪气管上皮细胞(swine tracheal epithelial cells, STEC)36 h,检测STEC中cleaved-caspase3、ZO-1和Occludin的蛋白表达水平,并用FITC-葡聚糖(FD-4)检测STEC单层细胞的细胞旁通透性。结果发现,OMVs与CdtB处理后凋亡相关蛋白cleaved-caspase3表达水平升高,ZO-1和Occludin的表达水平降低,FD-4渗透率升高,同时,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试验发现,当CdtB与STEC单层细胞共孵育24 h、OMVs与STEC单层细胞共孵育36 h后,STEC存活率显著降低。而Pifithrin-α预处理STEC可抑制OMVs和CdtB引起的细胞凋亡和屏障通透性的增加。另外,用免疫磁珠捕获的方法去除OMVs中的CdtB(OMVs-ΔCdtB),OMVs-ΔCdtB处理STEC 36 h后cleaved-caspase3、ZO-1、Occludin表达水平与对照组相比无显著差异。综上,成功提取并纯化GPS OMVs,且试验证明GPS可通过OMVs转运CdtB诱导STEC凋亡和屏障损伤,为副猪格拉瑟菌突破呼吸道上皮屏障的机制提供新思路。 展开更多

关键词 副猪格拉瑟菌 外膜囊泡 细胞致死性膨胀毒素CdtB 猪呼吸道上皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛呼吸道合胞体病毒及其疫苗的研究进展 被引量：7

11

作者 常继涛 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期420-424,共5页

牛呼吸道合胞体病毒（Bovine respiratory syncytial virus,BRSV）是引起牛呼吸系统疾病的病毒性病因之一,主要引起2~6月龄犊牛的细支气管炎和间质性肺炎。虽然BRSV感染的致死率不高,但因其高发病率而导致的治疗和饲养成本的增加会给养... 牛呼吸道合胞体病毒（Bovine respiratory syncytial virus,BRSV）是引起牛呼吸系统疾病的病毒性病因之一,主要引起2~6月龄犊牛的细支气管炎和间质性肺炎。虽然BRSV感染的致死率不高,但因其高发病率而导致的治疗和饲养成本的增加会给养牛业造成严重的经济损失。 展开更多

关键词 合胞体病毒 呼吸道上皮细胞 灭活疫苗 细支气管炎 疫苗研究 间质性肺炎 syncytial 呼吸系统疾病 亚单位疫苗 遗传进化

在线阅读 下载PDF 职称材料

粘蛋白1的物理屏障作用与其抑制呼吸道合胞病毒诱导呼吸道炎症无关 被引量：1

12

作者 行李琳 倪淑媛 李煜生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期549-554,565,共7页

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染呼吸道上皮细胞后表达上调的粘蛋白1(MUC1)是否可以通过物理屏障作用阻止RSV接近并感染呼吸道上皮细胞,进而抑制炎症反应。方法我们通过向两种呼吸道上皮细胞系(A549和HEp-2)中转染MUC1真核表达载体pcDN... 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染呼吸道上皮细胞后表达上调的粘蛋白1(MUC1)是否可以通过物理屏障作用阻止RSV接近并感染呼吸道上皮细胞,进而抑制炎症反应。方法我们通过向两种呼吸道上皮细胞系(A549和HEp-2)中转染MUC1真核表达载体pcDNA3.1-MUC1的方法过表达MUC1,再应用相同感染复数的RSV分别感染过表达MUC1和转染对照质粒pcDNA3.1的呼吸道上皮细胞,最后比较感染两种细胞内RSV的滴度。结果 RSV成功感染体外培养的两种呼吸道上皮细胞,且RSV在HEp-2细胞内形成的空斑较A549细胞内形成的空斑易于计数。过表达MUC1和转染对照质粒pcDNA3.1的呼吸道上皮细胞内病毒滴度无显著差异。结论呼吸道上皮细胞过表达的MUC1不能抑制RSV接近并感染呼吸道上皮细胞,即MUC1不是通过物理屏障作用抑制RSV诱导炎症反应。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 呼吸道上皮细胞 粘蛋白1 抑制炎症 物理屏障

在线阅读 下载PDF 职称材料

晚期内体的分选转运参与Ⅱ型腺相关病毒在IB3人支气管上皮转化细胞中的转导激活过程

13

作者 闫韶飞 文朝阳 +3 位作者 高尔静 牛静 郑少鹏 丁卫 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期519-524,共6页

目的确认Ⅱ型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV2)是否能够在肺上皮细胞中经过囊泡分选过程进入晚期内体,并且进一步检测在内体中分离的腺相关病毒是否具有不同的转导活性,从而探讨内体转运系统在腺相关病毒感染动力学中的作用。... 目的确认Ⅱ型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV2)是否能够在肺上皮细胞中经过囊泡分选过程进入晚期内体,并且进一步检测在内体中分离的腺相关病毒是否具有不同的转导活性,从而探讨内体转运系统在腺相关病毒感染动力学中的作用。方法以RAB7的GFP融合蛋白作为晚期内体的特异性标记,通过对Ⅱ型腺相关病毒进行荧光标记,在人支气管上皮转化细胞IB3中进行共聚焦显微成像的共定位分析。通过密度梯度离心和内体亲和沉淀对进入细胞内体的病毒颗粒进行分离,并对细胞进行二次感染时的活性在有或无RAB7影响因素的条件下进行比较分析。结果相当部分的Ⅱ型腺相关病毒在感染IB3细胞后能够进入晚期内体且进入晚期内体的病毒比未经细胞分选的病毒表现出更好的外源基因表达活性。结论提示Ⅱ型腺相关病毒在肺支气管上皮细胞中晚期内体的转运可能促进其转导的活化过程。 展开更多

关键词 腺相关病毒 RAB蛋白 囊泡运输 呼吸道上皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

穿心莲内酯对临床铜绿假单胞菌感染人支气管上皮细胞的干预研究 被引量：6

14

作者 王静 华子瑜 +1 位作者 沈犁 张佳星 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1194-1198,共5页

目的:用铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)感染人支气管上皮细胞BEAS-2B,观察穿心莲内酯对细菌感染性肺炎及其诱发的宿主细胞炎性反应的影响。方法:PA标准株PAO1和临床分离株Cq1(exoU-)及Cq40(exoU+)感染上皮细胞BEAS-2B;体外肉... 目的:用铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)感染人支气管上皮细胞BEAS-2B,观察穿心莲内酯对细菌感染性肺炎及其诱发的宿主细胞炎性反应的影响。方法:PA标准株PAO1和临床分离株Cq1(exoU-)及Cq40(exoU+)感染上皮细胞BEAS-2B;体外肉汤培养观察穿心莲内酯(浓度300μmol/L)对细菌生长的影响。侵袭实验、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)释放实验、菌落计数法检测PA对BEAS-2B细胞的侵袭力;ELISA法检测BEAS-2B细胞炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8的表达水平。穿心莲内酯(3.0μmol/L和4.5μmol/L)用于对PA感染人BEAS-2B的干预实验。结果:同PAO1相似,PACq1及Cq40在LB培养基中的生长均不受高浓度(300μmol/L)穿心莲内酯影响。但穿心莲内酯(3.0μmol/L和4.5μmol/L)降低侵入胞内的PA数,减少细菌感染所致的上皮细胞LDH释放,也降低了细菌刺激上皮细胞IL-6及IL-8的表达水平。结论:穿心莲内酯可降低PA临床分离株对人支气管上皮细胞的侵袭力,并可降低细胞损伤及抑制细胞炎症反应。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 人呼吸道上皮细胞 穿心莲内酯 干预作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

浅谈肉鸡呼吸道综合征的成因与对策

15

作者 张双良 赵学群 +1 位作者 常火炬 郭强 《北方牧业》 2014年第18期23-23,共1页

商品肉鸡呼吸道综合征是由多种因素引起的以呼吸道症状为主的一类疾病的总称。呼吸道症状表现为甩鼻、呼噜、咳嗽、鸣叫、呼吸困难等。主要病理变化为气管弥漫性出血、支气管黏液和纤维素性栓塞、气囊炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎和肺脏... 商品肉鸡呼吸道综合征是由多种因素引起的以呼吸道症状为主的一类疾病的总称。呼吸道症状表现为甩鼻、呼噜、咳嗽、鸣叫、呼吸困难等。主要病理变化为气管弥漫性出血、支气管黏液和纤维素性栓塞、气囊炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎和肺脏坏死、肝肾肿大等。发病特点是：夏秋较轻, 展开更多

关键词 呼吸道综合征 肝肾肿大 商品肉鸡 气囊炎 呼吸道上皮细胞 主要病理变化 弥漫性出血 肝周炎 纤维素性 传支

在线阅读 下载PDF 职称材料

陈伟教授团队与娄继忠研究员团队合作成果阐明严重急性呼吸综合征冠状病毒2侵入人体细胞的分子生物学机制

16

《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期552-552,共1页

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)利用其刺突糖蛋白(spike)识别宿主细胞受体如呼吸道上皮细胞血管紧张素转换酶2(ACE2),促发刺突糖蛋白中S1和S2结构域分离,最终导致病毒与宿主细胞膜融合从而完成病毒入侵。但刺突糖蛋白结合宿... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)利用其刺突糖蛋白(spike)识别宿主细胞受体如呼吸道上皮细胞血管紧张素转换酶2(ACE2),促发刺突糖蛋白中S1和S2结构域分离,最终导致病毒与宿主细胞膜融合从而完成病毒入侵。但刺突糖蛋白结合宿主受体如何触发S1和S2结构域分离并激发S2膜融合蛋白机器是冠状病毒入侵机制未解的重要问题之一。 展开更多

关键词 血管紧张素转换酶2 分子生物学机制 呼吸道上皮细胞 病毒入侵 宿主细胞膜 ACE2 冠状病毒 入侵机制

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪支原体肺炎治疗方案的优化 被引量：1

17

作者 王佳敏 《北方牧业》 2024年第24期33-33,共1页

猪支原体肺炎(MPS)由猪肺炎支原体(Mhp)引发,患病猪表现咳嗽、呼吸困难和生长迟缓,影响生猪生产性能和养殖效益。在养猪业规模化、集约化发展趋势下,其发生率递增,由此,优化药物治疗方案意义重大。1病原特点猪肺炎支原体无细胞壁,形态多... 猪支原体肺炎(MPS)由猪肺炎支原体(Mhp)引发,患病猪表现咳嗽、呼吸困难和生长迟缓,影响生猪生产性能和养殖效益。在养猪业规模化、集约化发展趋势下,其发生率递增,由此,优化药物治疗方案意义重大。1病原特点猪肺炎支原体无细胞壁,形态多变,对环境敏感,常用消毒剂可灭除。它寄生在猪呼吸道上皮细胞表面,通过黏附、入侵并释放有害物质引发炎症,损害呼吸道黏膜和气体交换功能。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 猪支原体肺炎 患病猪 呼吸困难 猪生产性能 养猪业 病原特点 呼吸道上皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

引起肉鸡气囊炎的原因及预防措施

18

作者 苗红亮 何约白 《今日畜牧兽医》 2015年第5期43-44,共2页

1引起气囊和肺部疾病的病原及其主要症状 发病过程基本上是进雏后最晚三天就出现呼吸道症状,表现为咳嗽、甩鼻、张嘴喘气,7天免疫后病情加重、采食量不增,大群呼吸道病情加重,鸡群畏寒怕冷,随着病情的发展鸡群出现气囊炎、支气管症状。

关键词 气囊炎 黏膜免疫 呼吸道上皮细胞 气管黏膜 预防措施 大群 干酪样渗出物 支原体病 黏附素 气管损伤

在线阅读 下载PDF 职称材料

危重型COVID-19患者的临床特征、影像和支气管镜下表现 被引量：1

19

作者 范银强 张颖 +5 位作者 蔡水江 黄煌 刘莹 刘勇进 梁桐 邓西龙 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第22期2960-2962,共3页

新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)感染的靶细胞主要为呼吸道上皮细胞,其诱导免疫机体产生大量促炎性细胞因子,可引起肺炎、肺水肿甚至肺泡出血等严重病变,病变严重时发展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratorydistress... 新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)感染的靶细胞主要为呼吸道上皮细胞,其诱导免疫机体产生大量促炎性细胞因子,可引起肺炎、肺水肿甚至肺泡出血等严重病变,病变严重时发展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratorydistress syndrome,ARDS)[1]。危重型新型冠状病毒肺炎(2019 novel coronavirus disease,COVID-19)患者气管插管后,通过支气管镜查看气道通畅及各气道情况更为直观和方便,同时能进行气道分泌物充分吸引和留取检验标本。 展开更多

关键词 呼吸道上皮细胞 急性呼吸窘迫综合征 促炎性细胞因子 支气管镜 危重型 严重病变 检验标本 气道通畅

在线阅读 下载PDF 职称材料

犬瘟热的特征、流行与防治

20

作者 韩冰 张宝权 《现代畜牧科技》 2015年第2期115-115,共1页

犬瘟热是世界范围内广泛发生的一种犬急性、高接触性的病毒传染病,其病原为犬瘟热病毒,是传染性强,临床症状多样化,容易继发细菌和其他病毒的混合感染,发病率高达80%,病犬康复后易留下麻痹、抽搐、癫痫样发作等后遗症。1特征犬瘟热的最... 犬瘟热是世界范围内广泛发生的一种犬急性、高接触性的病毒传染病,其病原为犬瘟热病毒,是传染性强,临床症状多样化,容易继发细菌和其他病毒的混合感染,发病率高达80%,病犬康复后易留下麻痹、抽搐、癫痫样发作等后遗症。1特征犬瘟热的最初感染开始于病毒侵袭上呼吸道上皮细胞。病毒很快扩散至局部淋巴组织、扁桃腺和支气管淋巴结。随后病毒在感染的第一星期内会扩散至上皮组织和中央神经系统。 展开更多

关键词 瘟热 病毒传染病 犬瘟热病毒 中央神经系统 呼吸道上皮细胞 癫痫样发作 混合感染 继发细菌 体液免疫 临床症状

在线阅读 下载PDF 职称材料